• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    阿魏酸雙芐酯的合成及生物活性研究

    2012-05-07 03:47:58孟繁龍張慶一張宇超楊云彩孫學(xué)軍
    化學(xué)與生物工程 2012年3期
    關(guān)鍵詞:肉桂酸衍生物常數(shù)

    孟繁龍,李 碩,張慶一,張宇超,楊云彩,孫學(xué)軍

    (曲阜師范大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院 山東省生命有機(jī)分析重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東 曲阜 273165)

    阿魏酸,化學(xué)名為4-羥基-3-甲氧基苯丙烯酸,是植物界普遍存在的一種酚酸,也是當(dāng)歸、川芎、阿魏等中藥的有效成分之一[1],作為國(guó)際公認(rèn)的天然抗氧化劑和防癌物質(zhì)引起世人關(guān)注[2]。研究發(fā)現(xiàn),阿魏酸具有抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗血小板凝集和血栓、清除亞硝酸鹽和氧自由基、抗菌消炎、抗腫瘤、抗突變和增強(qiáng)免疫力等功能[3]。目前,一些國(guó)家已批準(zhǔn)阿魏酸用于食品、化妝品及藥品[4]。

    阿魏酸分子中的烷烴較短且含有雙鍵,親水性較強(qiáng),難以深入生物膜脂質(zhì)雙分子層中發(fā)揮其藥理作用[5]。研究表明,阿魏酸衍生物比阿魏酸具有更強(qiáng)的藥理活性和較低的毒性[6]。目前,已成功合成了阿魏酸酯類衍生物、阿魏酸酰胺類衍生物、阿魏酸醚類衍生物、阿魏酸酮類衍生物、芳環(huán)有取代基的阿魏酸衍生物[5],其中以阿魏酸鈉鹽、阿魏酸哌嗪、阿魏酸的高分子載體衍生物等為代表的部分化合物已經(jīng)用于臨床或具有臨床應(yīng)用的潛力[7]。然而,有關(guān)阿魏酸雙芐酯的合成、抑菌活性及與DNA相互作用的研究報(bào)道仍不多見(jiàn)[8~15]。

    作者在此以二甲基亞砜(DMSO)為溶劑,以阿魏酸與氯化芐在堿性條件下反應(yīng),成功合成了阿魏酸雙芐酯,對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征,并研究了其生物活性。擬為進(jìn)一步研究阿魏酸雙芐酯及其水解產(chǎn)物的抑菌活性和抗癌作用提供參考。反應(yīng)方程式為:

    1 實(shí)驗(yàn)

    1.1 試劑、材料與儀器

    阿魏酸(純度>98.5%),曲阜弘利化工有限公司;大腸桿菌,山東省衛(wèi)生防疫站;小牛胸腺DNA(ct-DNA,A260/A280>1.8,未做提純處理)、吖啶橙(Acridine orange,AO),Sigma公司;三羥甲基氨基甲烷(Tris,分析純),上海展云化工有限公司;其它試劑均為分析純;實(shí)驗(yàn)用水為二次蒸餾水。

    牛肉浸膏液體培養(yǎng)基:取200 mL水、2 g蛋白胨、1 g牛肉浸膏、1 g氯化鈉,加熱煮沸,冷卻至室溫后,調(diào)pH值至7.2~7.4,121 ℃蒸汽滅菌30 min,冷卻至室溫后,置于冰箱中備用。

    WRS-1A型數(shù)字熔點(diǎn)儀,上海精賢光電科技有限公司;655A型高效液相色譜儀、F-4600型熒光分光光度計(jì),日本日立;CARY300型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),美國(guó)瓦里安;NEXUS-470型傅立葉變換紅外光譜儀,美國(guó)Nicolet;AVANCE 300型核磁共振儀,德國(guó)Bruker公司;7.0T型傅立葉變換離子回旋共振質(zhì)譜儀,美國(guó)IonSpec;SMART APEX CCD型X-射線單晶衍射儀,美國(guó)Bruker AXS Inc;3114/3236 TAM Air型八通道微量熱活性檢測(cè)儀,瑞典Thermal Metric AB公司;烏貝路德粘度計(jì),上?;瘜W(xué)試劑公司。

    1.2 阿魏酸雙芐酯的合成

    將0.01 mol阿魏酸、0.025 mol NaHCO3和15 mL DMSO加入到帶有攪拌的三頸燒瓶中,加熱溶解后滴入0.022 mol氯化芐和5 mL DMSO的混合溶液,控溫110~120 ℃,控制pH=8~9,反應(yīng)1.5 h,用TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)程[展開劑為V(乙酸乙酯)∶V(石油醚)=1∶3的混合溶液]。反應(yīng)完成后稍加冷卻,倒入100 mL冰水中,即有白色固體析出。靜置,抽濾,濾餅用25 mL無(wú)水乙醇重結(jié)晶,得到白色針狀晶體,即阿魏酸雙芐酯,產(chǎn)率為94.32%。

    1.3 大腸桿菌抑菌活性實(shí)驗(yàn)

    用微量量熱法測(cè)定不同濃度的阿魏酸雙芐酯溶液對(duì)大腸桿菌代謝作用的熱功率-時(shí)間曲線。

    (1)用N,N-二甲基甲酰胺(DMF)準(zhǔn)確配制濃度為0.25 mg·mL-1的阿魏酸雙芐酯溶液,置于冰箱中備用。

    (2)在紫外燈下,用酒精燈灼燒過(guò)的取菌器轉(zhuǎn)移大腸桿菌到牛肉浸膏液體培養(yǎng)基中,反復(fù)3次,在恒溫下密封培養(yǎng)。

    (3)將安瓶放在滅菌臺(tái)上消毒15 min,然后裝入培養(yǎng)基并接菌,移入一定量的阿魏酸雙芐酯溶液,封口,放入基線穩(wěn)定且溫度恒定在37 ℃的微量熱活性檢測(cè)儀中,開始記錄數(shù)據(jù),當(dāng)細(xì)菌代謝的熱功率—時(shí)間曲線返回到基線時(shí)即可認(rèn)為實(shí)驗(yàn)結(jié)束。

    1.4 與DNA相互作用的研究

    1.4.1 試劑的配制

    ct-DNA:配成濃度為2.3×10-4mol·L-1的水溶液,其濃度據(jù)260 nm處的吸光度確定(按ε=6600 L·mol-1·cm-1),置于冰箱中備用。

    吖啶橙:配成濃度為1×10-4mol·L-1的水溶液,置于冰箱中備用。

    三羥甲基氨基甲烷:用其配制Tris-HCl(pH=7.4)緩沖溶液,內(nèi)含0.1 mol·L-1NaCl。

    阿魏酸雙芐酯:用無(wú)水乙醇配成濃度(用[D]表示)為1×10-3mol·L-1的溶液,避光保存。

    1.4.2 與DNA相互作用的紫外光譜測(cè)定

    在1 cm比色皿中加入2 mL Tris-HCl緩沖溶液、0.2 mL阿魏酸雙芐酯溶液,搖勻,用ct-DNA溶液進(jìn)行滴定,掃描紫外吸收光譜,每次進(jìn)樣50 μL。

    1.4.3 與DNA相互作用的熒光光譜測(cè)定

    在1 cm比色皿中加入2 mL Tris-HCl緩沖溶液、0.1 mL吖啶橙溶液、0.3 mL ct-DNA溶液,搖勻,放置5 min,用阿魏酸雙芐酯溶液滴定,掃描熒光光譜,每次進(jìn)樣20 μL。熒光條件為:激發(fā)和發(fā)射狹縫均為5 nm,λex=480 nm,電壓700 V,掃描速率1200 nm·s-1。

    1.4.4 粘度測(cè)定

    固定ct-DNA濃度,改變阿魏酸雙芐酯濃度,以Tris-HCl緩沖溶液配制溶液,在25 ℃恒溫水浴槽中用烏氏粘度計(jì)測(cè)定其粘度。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 產(chǎn)品表征

    產(chǎn)品為白色針狀晶體,熔點(diǎn)為86~87 ℃,高效液相色譜儀測(cè)得純度為98.5%。

    紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)得最大吸收波長(zhǎng)為204 nm、236 nm、325 nm。

    IR(KBr),ν:3133 cm-1處為苯環(huán)C-H伸縮振動(dòng)特征吸收峰,1510 cm-1處為苯環(huán)骨架伸縮振動(dòng)特征吸收峰,1696 cm-1處為羰基伸縮振動(dòng)特征吸收峰,1400 cm-1處為CH2中C-H變形振動(dòng)特征吸收峰,1247 cm-1處為芳醚中C-O-C伸縮振動(dòng)特征吸收峰,999 cm-1處為E型碳碳雙鍵中C-H變形振動(dòng)特征吸收峰。

    1HNMR(CDCl3),δ,ppm:3.90(s,3H,CH3),5.18(s,2H,CH2),5.24(s,2H,CH2),6.35(m,1H,C=CH),6.86(m,1H,C=CH),7.01~7.68(m,13H,3C6H6)。

    質(zhì)譜儀測(cè)得其相對(duì)分子質(zhì)量為374.4291 g·mol-1。

    X-射線單晶衍射儀測(cè)得其分子結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。

    圖1 阿魏酸雙芐酯的分子結(jié)構(gòu)

    綜合分析,確定合成產(chǎn)物為阿魏酸雙芐酯。

    2.2 對(duì)大腸桿菌的抑菌活性

    根據(jù)大腸桿菌在一定濃度的阿魏酸雙芐酯溶液中代謝作用的熱功率-時(shí)間曲線數(shù)據(jù),用Logistic方程處理細(xì)菌的指數(shù)生長(zhǎng)期,計(jì)算出該濃度下的細(xì)菌生長(zhǎng)速率常數(shù)μ[16]。大腸桿菌在不同濃度的阿魏酸雙芐酯溶液中的生長(zhǎng)速率常數(shù)見(jiàn)表1。

    表1 大腸桿菌在不同濃度的阿魏酸雙芐酯溶液中的生長(zhǎng)速率常數(shù)

    以生長(zhǎng)速率常數(shù)μ對(duì)濃度c作圖,所得μ-c曲線見(jiàn)圖2。擬合線性回歸方程為:μ=0.08793-0.00295c。

    圖2 阿魏酸雙芐酯對(duì)大腸桿菌抑菌活性的μ-c曲線

    μ=0 min-1時(shí)所對(duì)應(yīng)的c值,即為阿魏酸雙芐酯對(duì)大腸桿菌的最小抑菌濃度(MIC)。

    測(cè)得37 ℃下阿魏酸雙芐酯對(duì)大腸桿菌的最小抑菌濃度為29.81 μg·mL-1,說(shuō)明阿魏酸雙芐酯對(duì)大腸桿菌具有一定的抑制作用。

    王利萍[11]研究表明,以阿魏酸乙酯為代表的阿魏酸鏈狀酯對(duì)大腸桿菌沒(méi)有抑菌活性;梁盛年等[12]、張春樂(lè)等[13]研究表明,只有肉桂酸和少數(shù)肉桂酸衍生物對(duì)大腸桿菌有抑制作用,例如:肉桂酸和對(duì)羥基肉桂酸對(duì)大腸桿菌有一定的抑菌活性,其MIC值分別為1 mg·mL-1和0.75 mg·mL-1。該值遠(yuǎn)大于阿魏酸雙芐酯對(duì)大腸桿菌的最小抑菌濃度,說(shuō)明后者對(duì)大腸桿菌有更好的抑制作用。這為進(jìn)一步研究阿魏酸雙芐酯及其水解產(chǎn)物的抑菌活性提供了參考。

    2.3 與DNA的相互作用

    2.3.1 紫外光譜分析

    在pH=7.4的Tris-HCl緩沖溶液中,阿魏酸雙芐酯與ct-DNA系列溶液的紫外吸收光譜見(jiàn)圖3。

    [D]=1×10-3 mol·L-1;[ct-DNA]=2.3×10-4 mol·L-1;ct-DNA用量(μL),1~13:0,50,100,150,200,250,300,350,400,450,500,550,600

    由圖3可以看出,ct-DNA使阿魏酸雙芐酯原本在236 nm、325 nm兩處的最大吸收波長(zhǎng)發(fā)生了紅移,對(duì)前者的吸收具有明顯的增色效應(yīng),對(duì)后者的吸收具有一定的減色效應(yīng),并且在295 nm附近形成一個(gè)等色吸收點(diǎn),這說(shuō)明阿魏酸雙芐酯與ct-DNA發(fā)生了相互作用。Long等認(rèn)為,當(dāng)小分子與DNA發(fā)生嵌插作用時(shí),小分子的π軌道和DNA堿基π軌道相互耦合,最大吸收峰發(fā)生紅移或藍(lán)移,且存在減色或增色效應(yīng);當(dāng)小分子與DNA發(fā)生靜電作用時(shí),峰位置不變,只有強(qiáng)度改變[15]。據(jù)此初步判斷阿魏酸雙芐酯是以經(jīng)典插入方式與ct-DNA鍵合的。

    2.3.2 熒光光譜分析

    吖啶橙(AO) 可以插入到DNA雙鏈的堿基對(duì)之間,因此AO-DNA復(fù)合物中AO的熒光強(qiáng)度比游離AO的熒光強(qiáng)度強(qiáng)得多。然而當(dāng)其它也能與DNA發(fā)生插入作用的化合物存在時(shí),會(huì)將AO從AO-DNA復(fù)合物中擠出,使得熒光強(qiáng)度降低發(fā)生熒光猝滅,因此AO可作為化合物與DNA作用模式的結(jié)構(gòu)探針[17]。

    固定AO、ct-DNA濃度,考察阿魏酸雙芐酯濃度對(duì)AO-DNA體系熒光光譜的影響,結(jié)果如圖4所示。

    [ct-DNA]=2.3×10-4mol·L-1;[AO]=1×10-4mol·L-1;[D]=1×10-3mol·L-1;阿魏酸雙芐酯用量(μL),1~11:0,20,40,60,80,100,120,140,160,180,200

    由圖4可以看出,AO-DNA熒光特征峰的強(qiáng)度隨阿魏酸雙芐酯用量(即濃度)的增加而下降,說(shuō)明阿魏酸雙芐酯對(duì)AO-DNA的熒光具有猝滅作用。這可能是阿魏酸雙芐酯同AO競(jìng)爭(zhēng)與DNA的結(jié)合位點(diǎn),將AO從雙螺旋中擠出,從而減弱了AO-DNA體系的熒光強(qiáng)度。

    熒光猝滅作用因猝滅機(jī)制不同分為動(dòng)態(tài)猝滅和靜態(tài)猝滅。動(dòng)態(tài)猝滅是猝滅劑和熒光物質(zhì)的激發(fā)態(tài)分子之間的相互作用,其作用過(guò)程遵循Stern-Volmer方程[18]:

    F0/F=1+Kqτ0[D]=1+KSV[D]

    式中:F0和F為未加入和加入阿魏酸雙芐酯時(shí)熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度;Kq為雙分子猝滅過(guò)程的速率常數(shù);τ0為沒(méi)有阿魏酸雙芐酯存在下熒光分子的平均壽命,約10-8s;KSV為Stern-Volmer猝滅常數(shù)。

    以阿魏酸雙芐酯最大發(fā)射波長(zhǎng)525 nm處的熒光強(qiáng)度按Stern-Volmer方程作線性回歸,得到阿魏酸雙芐酯對(duì)ct-DNA的Stern-Volmer猝滅常數(shù)KSV為3.26×103L·mol-1,進(jìn)一步求得其雙分子猝滅過(guò)程的速率常數(shù)Kq為3.26×1011L·mol-1·s-1,遠(yuǎn)大于猝滅劑對(duì)生物大分子最大擴(kuò)散控制的碰撞猝滅常數(shù)2.0×1010L·mol-1·s-1,由此確定阿魏酸雙芐酯對(duì)ct-DNA的猝滅并非分子間動(dòng)態(tài)碰撞所致,而是由于形成復(fù)合物所引起的靜態(tài)猝滅。

    靜態(tài)猝滅可用Lineweaver-Burk雙倒數(shù)方程進(jìn)行描述[19],即:

    式中:KD為阿魏酸雙芐酯與ct-DNA的結(jié)合常數(shù)。

    圖5 阿魏酸雙芐酯對(duì)AO-DNA體系作用的Lineweaver-Burk雙倒數(shù)曲線

    由圖5中直線的斜率求得阿魏酸雙芐酯與ct-DNA的結(jié)合常數(shù)KD=1.58×103L·mol-1。

    2.3.3 粘度測(cè)定分析

    在缺乏晶體數(shù)據(jù)的情況下,粘度測(cè)定被認(rèn)為是確定鍵合模式最可靠的方法之一。配合物以部分插入的方式與DNA結(jié)合時(shí),DNA溶液的粘度隨配合物含量的增加而減?。灰造o電或溝面方式結(jié)合時(shí),DNA溶液的粘度變化不大;而通過(guò)經(jīng)典插入方式與DNA作用時(shí),DNA溶液的粘度隨配合物含量的增加而增大[20]。

    25 ℃下,阿魏酸雙芐酯用量對(duì)ct-DNA相對(duì)比粘度的影響見(jiàn)圖6。

    圖6 阿魏酸雙芐酯用量對(duì)ct-DNA相對(duì)比粘度的影響

    由圖6可以看出,隨著ct-DNA中阿魏酸雙芐酯濃度的增大,其相對(duì)比粘度逐漸增大,由此可進(jìn)一步判斷阿魏酸雙芐酯與DNA的作用方式為經(jīng)典插入方式。

    項(xiàng)朋志等[14]用電化學(xué)方法研究發(fā)現(xiàn),阿魏酸與DNA的相互作用以嵌插作用為主,結(jié)合常數(shù)為1.01×104L·mol-1。于婷婷等[15]用紫外光譜法研究發(fā)現(xiàn),阿魏酸乙酯與DNA結(jié)合生成了一種非電活性的超分子化合物,結(jié)合常數(shù)為6.0×106L·mol-1。而本研究發(fā)現(xiàn)阿魏酸雙芐酯與ct-DNA的作用方式為經(jīng)典插入方式,結(jié)合常數(shù)為1.58×103L·mol-1。由此表明,阿魏酸及其不同衍生物與DNA的作用方式和結(jié)合強(qiáng)度差別較大。

    3 結(jié)論

    以DMSO為溶劑,以阿魏酸與氯化芐在堿性條件下反應(yīng)合成了阿魏酸雙芐酯,產(chǎn)率為94.32%,純度為98.5%。通過(guò)紫外光譜、紅外光譜、核磁共振氫譜、質(zhì)譜及X-單晶衍射對(duì)產(chǎn)物結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。用微量量熱法測(cè)得阿魏酸雙芐酯對(duì)大腸桿菌的MIC值為29.81 μg·mL-1,說(shuō)明阿魏酸雙芐酯對(duì)大腸桿菌具有一定的抑制作用。通過(guò)紫外光譜、熒光光譜和粘度測(cè)定證實(shí)阿魏酸雙芐酯與ct-DNA之間存在相互作用,其作用方式為經(jīng)典插入方式,對(duì)ct-DNA的猝滅是由于形成復(fù)合物所引起的靜態(tài)猝滅,與ct-DNA的結(jié)合常數(shù)為1.58×103L·mol-1。為進(jìn)一步研究阿魏酸雙芐酯及其水解產(chǎn)物的抑菌活性和抗癌作用提供了具有參考價(jià)值的信息。

    參考文獻(xiàn):

    [1] 方文賢.醫(yī)用中藥藥理學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1998.

    [2] Willis W M,Lencki R W,Marangoni A G.Lipid modification strategies in the production of nutritionally functional fats and oils[J].Critical Reviews in Food Science and Nutrition,1998,38(8):639-674.

    [3] 歐仕益,包慧燕,藍(lán)志東.阿魏酸及其衍生物的藥理作用研究進(jìn)展[J].中藥材,2001,24(3):220-221.

    [4] 張娟.阿魏酸單甘油酯的合成及功能性研究[D].無(wú)錫:江南大學(xué),2007.

    [5] 張?jiān)懒?,韋長(zhǎng)梅,王錦堂.阿魏酸的合成及其分子改造研究進(jìn)展[J].淮陰師范學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2003,2(1):50-53.

    [6] 馬逢時(shí),李家明.阿魏酸及其衍生物的合成及藥效研究進(jìn)展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2008,4(5):55-56.

    [7] 王汝濤.阿魏酸乙酯的合成及其藥理活性研究[D].重慶:第四軍醫(yī)大學(xué),2002.

    [8] Saibal Kumar Das,Anantha Reddya K,Mukkanti K.Total synthesis of phenylpropanoid glycosides,grayanoside A and syringalide B,through a common intermediate[J].Carbohydrate Research,2007,324(15):2309-2315.

    [9] Andrés Leschot,Tapia Ricardo A,Eyzaguirre Jaime.Efficient synthesis of 4-methylumbelliferyl dihydroferulate[J].Synthetic Communications,2002,32(20):3219-3223.

    [10] Anuradha V,Srinivas Pullela V,Rao R Ranga,et al.Isolation and synthesis of analgesic and anti-inflammatory compounds fromOchnasquarrosaL.[J].Bioorganic & Medicinal Chemistry,2006,14(20):6820-6826.

    [11] 王利萍.酚酸酯類化合物的合成及抑菌活性研究[D].西安:西北大學(xué),2009.

    [12] 梁盛年,段志芳,付莉,等.幾種肉桂酸衍生物與肉桂酸的抑菌作用比較研究[J].食品科技,2005,(9):71-73.

    [13] 張春樂(lè),宋康康,陳祥仁,等.肉桂酸及其衍生物的抑菌活性研究[J].廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2006,45(Z1):16-18.

    [14] 項(xiàng)朋志,劉麗梅,郭英,等.阿魏酸與DNA相互作用的光譜電化學(xué)研究[J].化學(xué)與生物工程,2010,27(9):53-56.

    [15] 于婷婷,何平,梁艷,等.阿魏酸乙酯與DNA相互作用的電化學(xué)及紫外光譜研究[J].化學(xué)傳感器,2009,29(1):49-55.

    [16] 王建濤,孔哲,閆詠梅,等.微量量熱法研究異喹啉類生物堿的抑菌活性[J].化學(xué)世界,2008,48(8):460-463.

    [17] 古琴,任祥祥,樂(lè)學(xué)義,等.TATP-銅(Ⅱ)-L-絲氨酸(L-精氨酸)配合物與DNA的相互作用[J].物理化學(xué)學(xué)報(bào),2008,24(6):1068-1072.

    [18] 童裳倫,張曉翔.氧氟沙星和左氧氟沙星與DNA的相互作用研究[J].光譜學(xué)與光譜分析,2010,30(2):481-485.

    [19] 盧奎,成紅麗,馬麗,等.L-半胱氨酸二肽與DNA的相互作用研究[J].光譜學(xué)與光譜分析,2010,30(1):146-149.

    [20] 任祥祥,盧艷梅,樂(lè)學(xué)義.諾氟沙星-銅(Ⅱ)-TBZ/HPB配合物的合成、抗菌活性及與DNA作用[J].化學(xué)通報(bào),2010,(6):551-555.

    猜你喜歡
    肉桂酸衍生物常數(shù)
    關(guān)于Landau常數(shù)和Euler-Mascheroni常數(shù)的漸近展開式以及Stirling級(jí)數(shù)的系數(shù)
    肉桂酸對(duì)db/db小鼠肝臟PI3K/AKT/FoxO1信號(hào)通路的影響
    基于配體鄰菲啰啉和肉桂酸構(gòu)筑的銅配合物的合成、電化學(xué)性質(zhì)及與DNA的相互作用
    烴的含氧衍生物知識(shí)鏈接
    幾個(gè)常數(shù)項(xiàng)級(jí)數(shù)的和
    萬(wàn)有引力常數(shù)的測(cè)量
    新型螺雙二氫茚二酚衍生物的合成
    Xanomeline新型衍生物SBG-PK-014促進(jìn)APPsw的α-剪切
    基于B-H鍵的活化對(duì)含B-C、B-Cl、B-P鍵的碳硼烷硼端衍生物的合成與表征
    合成鄰甲氧基肉桂酸的兩步法新工藝
    草草在线视频免费看| 欧美3d第一页| 国产激情偷乱视频一区二区| 日本黄色片子视频| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 日韩欧美在线二视频| 尾随美女入室| 日韩欧美国产一区二区入口| 丰满乱子伦码专区| 美女 人体艺术 gogo| 精品一区二区三区av网在线观看| 黄色日韩在线| 一级a爱片免费观看的视频| 有码 亚洲区| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲经典国产精华液单| 精品一区二区免费观看| 色播亚洲综合网| 久久久国产成人精品二区| 人人妻人人看人人澡| 国产午夜福利久久久久久| 丰满的人妻完整版| 69av精品久久久久久| 亚洲人成伊人成综合网2020| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产男靠女视频免费网站| 九九热线精品视视频播放| 99精品久久久久人妻精品| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲自拍偷在线| 综合色av麻豆| 桃色一区二区三区在线观看| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 午夜a级毛片| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 免费看av在线观看网站| 欧美精品啪啪一区二区三区| 国产不卡一卡二| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲人与动物交配视频| 韩国av一区二区三区四区| 欧美+亚洲+日韩+国产| 少妇的逼好多水| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 国产老妇女一区| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲中文字幕日韩| 欧美+亚洲+日韩+国产| 丰满的人妻完整版| 偷拍熟女少妇极品色| 欧美激情在线99| 久久午夜福利片| 午夜免费激情av| 国产成人aa在线观看| 久久草成人影院| 老女人水多毛片| 成人一区二区视频在线观看| 国产精品亚洲美女久久久| 黄色日韩在线| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产一区二区三区av在线 | 国产伦一二天堂av在线观看| 日韩欧美 国产精品| 国产精品人妻久久久影院| 国产亚洲av嫩草精品影院| 男女那种视频在线观看| 国内精品美女久久久久久| 亚洲自偷自拍三级| 成年人黄色毛片网站| 亚洲在线自拍视频| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 色吧在线观看| 1024手机看黄色片| 九九爱精品视频在线观看| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 欧美黑人欧美精品刺激| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产在线男女| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲av第一区精品v没综合| 精品午夜福利视频在线观看一区| 亚洲专区国产一区二区| 久久精品影院6| 国产人妻一区二区三区在| 国产精品电影一区二区三区| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲精品国产成人久久av| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产午夜精品论理片| 深夜a级毛片| 69av精品久久久久久| 久久久久久久久久久丰满 | 日本a在线网址| 一级av片app| 少妇高潮的动态图| 亚洲av免费在线观看| 国产淫片久久久久久久久| 欧美最黄视频在线播放免费| 午夜免费成人在线视频| 日韩av在线大香蕉| 日韩大尺度精品在线看网址| 亚洲真实伦在线观看| 观看美女的网站| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产精品三级大全| 亚洲精品456在线播放app | 99在线视频只有这里精品首页| 国产探花在线观看一区二区| 久久欧美精品欧美久久欧美| 丝袜美腿在线中文| 久久久精品大字幕| 国产一区二区三区av在线 | 黄色视频,在线免费观看| 日本黄色片子视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 精品午夜福利在线看| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 色噜噜av男人的天堂激情| 欧美黑人巨大hd| 老女人水多毛片| 老熟妇仑乱视频hdxx| 夜夜夜夜夜久久久久| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 日本精品一区二区三区蜜桃| 美女高潮的动态| 国内精品一区二区在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产| 亚洲国产色片| 免费看光身美女| 他把我摸到了高潮在线观看| 国产亚洲精品久久久com| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 嫩草影视91久久| 国产精品女同一区二区软件 | 波多野结衣高清作品| 简卡轻食公司| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产亚洲91精品色在线| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 国产精品乱码一区二三区的特点| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 久久久国产成人免费| 亚洲成av人片在线播放无| 91av网一区二区| 亚洲五月天丁香| 天堂网av新在线| av天堂在线播放| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产在视频线在精品| 成人av一区二区三区在线看| 欧美在线一区亚洲| 99热精品在线国产| 午夜福利欧美成人| 国产淫片久久久久久久久| 韩国av一区二区三区四区| 成人国产麻豆网| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲性久久影院| 精品一区二区免费观看| 国产中年淑女户外野战色| 国产免费男女视频| 亚洲av成人av| 如何舔出高潮| 日韩一本色道免费dvd| 校园人妻丝袜中文字幕| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 精华霜和精华液先用哪个| 高清毛片免费观看视频网站| 久久久久久久久久成人| 香蕉av资源在线| 久99久视频精品免费| 久久久久久久久久成人| 亚洲熟妇熟女久久| 九九爱精品视频在线观看| 免费在线观看影片大全网站| 欧美在线一区亚洲| 免费av观看视频| 午夜a级毛片| 午夜精品久久久久久毛片777| 欧美日韩国产亚洲二区| 波多野结衣高清作品| 成年免费大片在线观看| 日本-黄色视频高清免费观看| a级毛片a级免费在线| 免费黄网站久久成人精品| 999久久久精品免费观看国产| 欧美性感艳星| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 日本与韩国留学比较| 中国美女看黄片| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产精品一及| 精品日产1卡2卡| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 亚洲七黄色美女视频| 国产色爽女视频免费观看| av中文乱码字幕在线| 欧美成人一区二区免费高清观看| 人人妻人人看人人澡| 久久亚洲精品不卡| 色视频www国产| 欧美最新免费一区二区三区| 国产精品一及| 日本 欧美在线| 99热6这里只有精品| 日韩欧美国产在线观看| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国产真实伦视频高清在线观看 | 久久国产精品人妻蜜桃| 国产探花极品一区二区| 97碰自拍视频| 欧美精品国产亚洲| 一本久久中文字幕| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 99热只有精品国产| a级毛片a级免费在线| 99在线视频只有这里精品首页| 黄色欧美视频在线观看| 全区人妻精品视频| 久久中文看片网| 一进一出好大好爽视频| 全区人妻精品视频| 我的女老师完整版在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 午夜福利高清视频| 天美传媒精品一区二区| av在线老鸭窝| 两个人的视频大全免费| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲五月天丁香| 人妻久久中文字幕网| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 精华霜和精华液先用哪个| 99国产精品一区二区蜜桃av| 成年女人毛片免费观看观看9| 欧美激情国产日韩精品一区| 亚洲成人精品中文字幕电影| 日韩欧美免费精品| 啦啦啦啦在线视频资源| 伦精品一区二区三区| 国产 一区精品| 国产高清有码在线观看视频| 婷婷丁香在线五月| 白带黄色成豆腐渣| 国产高清激情床上av| 亚洲国产精品成人综合色| 九九爱精品视频在线观看| 国产精品98久久久久久宅男小说| 久久久久久久久大av| 美女cb高潮喷水在线观看| 欧美潮喷喷水| 亚洲精品色激情综合| 校园春色视频在线观看| 精品人妻视频免费看| 午夜精品久久久久久毛片777| 黄色日韩在线| 日韩精品有码人妻一区| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 身体一侧抽搐| 亚洲欧美清纯卡通| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 九九爱精品视频在线观看| 亚洲精品一区av在线观看| 99久久精品国产国产毛片| 欧美激情久久久久久爽电影| 国产精品女同一区二区软件 | 他把我摸到了高潮在线观看| 成人二区视频| 22中文网久久字幕| 毛片女人毛片| 九九在线视频观看精品| 男女之事视频高清在线观看| 欧美日本视频| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 又爽又黄无遮挡网站| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 午夜福利在线观看吧| 少妇的逼水好多| 国产高清视频在线观看网站| 男女那种视频在线观看| 久久中文看片网| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 久久久久久久久久久丰满 | 国内精品久久久久久久电影| 一区二区三区高清视频在线| 成年人黄色毛片网站| 亚洲av五月六月丁香网| 免费观看人在逋| 亚洲在线自拍视频| 亚洲真实伦在线观看| 日本精品一区二区三区蜜桃| 身体一侧抽搐| 99热只有精品国产| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 久久久午夜欧美精品| 18禁在线播放成人免费| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 欧美三级亚洲精品| 高清日韩中文字幕在线| 亚洲欧美日韩高清专用| 午夜日韩欧美国产| 亚洲真实伦在线观看| 两个人视频免费观看高清| 久久人妻av系列| 色哟哟哟哟哟哟| a级毛片免费高清观看在线播放| 最新在线观看一区二区三区| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 又爽又黄无遮挡网站| 精品福利观看| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 白带黄色成豆腐渣| 欧美在线一区亚洲| 白带黄色成豆腐渣| 嫩草影院入口| 国产高清不卡午夜福利| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲最大成人中文| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产精品国产高清国产av| 天美传媒精品一区二区| 亚洲欧美日韩东京热| 一级毛片久久久久久久久女| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲国产欧美人成| 中文字幕av在线有码专区| 床上黄色一级片| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产精品免费一区二区三区在线| 日韩欧美国产在线观看| 精品乱码久久久久久99久播| 国产 一区 欧美 日韩| 国产精品av视频在线免费观看| 免费看日本二区| 无遮挡黄片免费观看| 色视频www国产| av中文乱码字幕在线| 久久精品国产亚洲网站| 村上凉子中文字幕在线| 国产v大片淫在线免费观看| 无遮挡黄片免费观看| 成年免费大片在线观看| 深夜a级毛片| 又爽又黄无遮挡网站| 久久人人精品亚洲av| 一级黄片播放器| 97碰自拍视频| 成年免费大片在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 干丝袜人妻中文字幕| 欧美+亚洲+日韩+国产| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 老熟妇仑乱视频hdxx| 午夜精品久久久久久毛片777| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 日韩欧美精品免费久久| 国产精品久久久久久久电影| 久久午夜亚洲精品久久| 午夜福利高清视频| 在线看三级毛片| 免费看a级黄色片| 99热这里只有是精品在线观看| 免费看a级黄色片| 成年免费大片在线观看| 午夜福利18| 亚洲精品456在线播放app | 男女那种视频在线观看| 99在线人妻在线中文字幕| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲最大成人av| 91在线观看av| 69人妻影院| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产精品日韩av在线免费观看| 欧美丝袜亚洲另类 | 国内精品久久久久精免费| 免费观看在线日韩| 免费看美女性在线毛片视频| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 丰满的人妻完整版| 极品教师在线视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产黄色小视频在线观看| 99精品在免费线老司机午夜| 88av欧美| 精品久久久久久久久久久久久| 成人三级黄色视频| 久久久色成人| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 欧美一区二区亚洲| 国产精品永久免费网站| 色哟哟哟哟哟哟| 丝袜美腿在线中文| 亚洲中文日韩欧美视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 在线免费十八禁| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲av不卡在线观看| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲精华国产精华精| 亚洲成av人片在线播放无| 深夜精品福利| 内地一区二区视频在线| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲欧美清纯卡通| 看免费成人av毛片| 成人特级av手机在线观看| 精品久久久久久久久久久久久| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国内精品宾馆在线| 伦理电影大哥的女人| 国产精品久久久久久av不卡| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 精品久久久久久久久亚洲 | 搡老妇女老女人老熟妇| 日韩欧美在线乱码| 狠狠狠狠99中文字幕| h日本视频在线播放| 一区二区三区免费毛片| 悠悠久久av| 免费在线观看成人毛片| 国产真实伦视频高清在线观看 | 亚洲av美国av| 精品国内亚洲2022精品成人| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产探花极品一区二区| 最后的刺客免费高清国语| 国产精品一区二区性色av| 国产成人av教育| 精品久久久久久,| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 国产精品电影一区二区三区| 18禁在线播放成人免费| 亚洲av二区三区四区| 国产精华一区二区三区| 欧美+亚洲+日韩+国产| 欧美中文日本在线观看视频| 国产伦精品一区二区三区视频9| 男女那种视频在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 少妇熟女aⅴ在线视频| 日韩欧美精品免费久久| 久久热精品热| 欧美成人免费av一区二区三区| www.色视频.com| 午夜精品一区二区三区免费看| 亚洲精品国产成人久久av| 国产精品乱码一区二三区的特点| 嫁个100分男人电影在线观看| 日韩欧美 国产精品| 国产69精品久久久久777片| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产乱人伦免费视频| 亚洲最大成人手机在线| 国产av在哪里看| 九九爱精品视频在线观看| 深夜精品福利| 亚洲无线观看免费| 男女视频在线观看网站免费| 国产高潮美女av| 啦啦啦啦在线视频资源| 精品人妻视频免费看| 美女高潮的动态| 一级黄色大片毛片| 日韩一本色道免费dvd| 真人一进一出gif抽搐免费| 亚洲国产高清在线一区二区三| 中国美女看黄片| 婷婷精品国产亚洲av| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国产免费男女视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 美女大奶头视频| 欧美丝袜亚洲另类 | 99在线人妻在线中文字幕| 国产高清三级在线| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲久久久久久中文字幕| 3wmmmm亚洲av在线观看| 欧美3d第一页| 色在线成人网| 夜夜夜夜夜久久久久| 免费看a级黄色片| 欧美色欧美亚洲另类二区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 在线免费观看不下载黄p国产 | 精品人妻熟女av久视频| 成人av一区二区三区在线看| 亚洲国产色片| 国产爱豆传媒在线观看| 午夜爱爱视频在线播放| 欧美一区二区精品小视频在线| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国内精品美女久久久久久| 成年人黄色毛片网站| 999久久久精品免费观看国产| 日本欧美国产在线视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 亚洲电影在线观看av| 久久精品国产亚洲网站| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 免费观看人在逋| 国产熟女欧美一区二区| 韩国av在线不卡| 久久久成人免费电影| 少妇的逼水好多| 欧美黑人巨大hd| 日本免费一区二区三区高清不卡| 欧美极品一区二区三区四区| 波多野结衣高清作品| 内射极品少妇av片p| 国产亚洲av嫩草精品影院| 日本与韩国留学比较| 国产综合懂色| 极品教师在线免费播放| 99视频精品全部免费 在线| 国产日本99.免费观看| 久久久久久伊人网av| 在线国产一区二区在线| 国产精品久久视频播放| 久久热精品热| 日韩欧美在线二视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 亚洲av五月六月丁香网| 国产美女午夜福利| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 欧美潮喷喷水| 亚洲黑人精品在线| 免费在线观看影片大全网站| 精品日产1卡2卡| 国产一区二区在线av高清观看| 伦理电影大哥的女人| 亚洲成人久久爱视频| 国产男靠女视频免费网站| 亚洲精品456在线播放app | 99久久精品一区二区三区| 我要搜黄色片| 少妇高潮的动态图| 日韩欧美精品免费久久| 久久欧美精品欧美久久欧美| 级片在线观看| av在线天堂中文字幕| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 成年免费大片在线观看| 深夜精品福利| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 最近在线观看免费完整版| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产精品电影一区二区三区| 久久亚洲真实| 久久久午夜欧美精品| 国产 一区 欧美 日韩| 欧美日韩乱码在线| 1000部很黄的大片| 亚洲久久久久久中文字幕| a级毛片a级免费在线| 熟女电影av网| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产成人福利小说| 精品福利观看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 99热只有精品国产| 亚洲欧美日韩东京热| 久99久视频精品免费| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 尾随美女入室| 日韩亚洲欧美综合| 精华霜和精华液先用哪个| 免费人成在线观看视频色| 嫩草影院入口| 久久人人精品亚洲av| 久久久精品大字幕| 亚洲黑人精品在线| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产久久久一区二区三区| 亚洲最大成人av| 国产熟女欧美一区二区| 91麻豆av在线| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 很黄的视频免费| 久久久成人免费电影| 尾随美女入室| 亚洲av免费高清在线观看| 成人国产麻豆网| 国产综合懂色| 一区二区三区四区激情视频 | 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 精品午夜福利视频在线观看一区| 欧美性猛交黑人性爽| 成年女人看的毛片在线观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 最新在线观看一区二区三区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产精品伦人一区二区| 国产精品三级大全| 日韩中文字幕欧美一区二区| 老司机福利观看| 黄色视频,在线免费观看|