常見(jiàn)重金屬和農(nóng)藥對(duì)Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ ＷＰ８促生能力的影響

沈敏，康貽軍，王歡莉，趙慶新

摘要：采用平板發(fā)芽生長(zhǎng)方法，研究Ｃｕ、Ｐｂ、Ｚｎ、農(nóng)用硫酸鏈霉素和乙草胺在各自建議濃度（Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ， ＲＣ）和２×ＲＣ下，Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ ＷＰ８對(duì)辣椒發(fā)芽生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明，Ｃｕ和乙草胺在試驗(yàn)濃度下，辣椒均不發(fā)芽，ＷＰ８的存在未能緩解脅迫作用； Ｐｂ、Ｚｎ和農(nóng)用硫酸鏈霉素在ＲＣ下，對(duì)ＷＰ８的促生能力，特別是根的伸長(zhǎng)影響很?。唬病粒遥孟?，Ｐｂ處理對(duì)ＷＰ８促生能力的影響依然較小，但Ｚｎ和農(nóng)用硫酸鏈霉素處理對(duì)ＷＰ８促生能力的影響較大，但根的指標(biāo)仍能達(dá)ＣＫ水平；ＷＰ８的生長(zhǎng)狀況和促生表現(xiàn)之間沒(méi)有明顯的相關(guān)性。

關(guān)鍵詞：重金屬；農(nóng)藥；Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ ＷＰ８；促生能力

中圖分類(lèi)號(hào)：Ｑ９３５文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ文章編號(hào)：0439－８114（２０12）14－2988-04

Effect of Common Heavy Metals and Agricultural Agents on Plant Growth Promotion Ability of Bacillus pumilus WP8

ＳＨＥＮ Ｍｉｎ，ＫＡＮＧ Ｙｉ－ｊｕｎ，ＷＡＮＧ Ｈｕａｎ－ｌｉ，ＺＨＡＯ Ｑｉｎｇ－ｘｉｎ

（Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｙａｎｃｈｅｎｇ Ｔｅａｃｈｅｒｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｙａｎｃｈｅｎｇ ２２４００２，Jiangsu，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ａ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｕｓｉｎｇ ｆｉｌｔｅｒ ｐａｐｅｒ ｗａｓ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｃｕ， Ｐｂ， Ｚｎ， ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ （ＳＴＭ） ａｎｄ ａｃｅｔｏｃｈｌｏｒ （ＡＣＴ） ａｔ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅ ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ （ＲＣ） ａｎｄ ２×ＲＣ ｏｎ ｔｈｅ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｅｐｐｅｒ ｓｅｅｄｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ ＷＰ８． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｎｏ ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ ｓｅｅｄｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｓｔｒｅｓｓ ｏｆ Ｃｕ ａｎｄ ＡＣＴ， ａｎｄ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ａｌｌｅｖｉａｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｗｈｅｎ ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＷＰ８． Ｓｌｉｇｈｔ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｐｂ， Ｚｎ ａｎｄ ＳＴＭ ｓｔｒｅｓｓ ａｔ ＲＣ， ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ Ｐｂ ｓｔｒｅｓｓ ａｔ ２×ＲＣ ｏｎ ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ ｇｒｏｗｔｈ ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ ｏｎ ｒｏｏｔ ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ， ａｎｄ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｚｎ ａｎｄ ＳＴＭ ｓｔｒｅｓｓ ａｔ ２×ＲＣ ｏｎ ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ ｇｒｏｗｔｈ ｗｅｒｅ ｄｉｓｔｉｎｃｔ． Ｈｏｗｅｖｅｒ， ｔｈｅ ｒｏｏｔ ｌｅｎｇｔｈ ｉｎｄｅｘ ｓｔｉｌｌ ｃｏｍｅ ｕｐ ｔｏ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ ｃｈｅｃｋ （ＣＫ）． Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｃｌｅａｒ ｄｅｆｉｎｉｔｉｖｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ＷＰ８ ａｎｄ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔｓ． Ｔｈｅｓｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｐｒｏｖｉｄｅｄ ｓｏｍｅ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｆｕｒｔｈｅｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ＷＰ８．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｈｅａｖｙ ｍｅｔａｌ； ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｇｅｎｔ； Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ ＷＰ８； ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｐｒｏｍｏｔｉon ability

植物根際促生菌（Ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ－ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｒｈｉｚｏｂａｃｔｅｒｉａ，ＰＧＰＲ）是指生存于植物根際、根表，并能直接或間接地促進(jìn)或調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)的微生物［１］。利用ＰＧＰＲ及其制劑部分替代化肥、農(nóng)藥已成為解決農(nóng)業(yè)環(huán)境污染的重要途徑。在前期的工作中，從小麥根際篩選出1株高效廣適的ＰＧＰＲ菌株Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ ＷＰ８［２］，并已在水稻、豇豆和番茄等植物的促生／生防試驗(yàn)中獲得成功，ＷＰ８的良好表現(xiàn)說(shuō)明其具有較強(qiáng)的應(yīng)用潛力。

ＰＧＰＲ菌株實(shí)際應(yīng)用時(shí)發(fā)揮促生／生防作用的前提是在土壤中能表現(xiàn)出充分的競(jìng)爭(zhēng)力［３］。土壤中生物和非生物因素都影響著ＰＧＰＲ的生存和定殖能力，其中非生物因素主要是土壤中對(duì)微生物生長(zhǎng)不利的重金屬、農(nóng)藥殘留［４］。雖然人們已認(rèn)識(shí)到重金屬、農(nóng)藥殘留對(duì)食物和環(huán)境安全已經(jīng)或?qū)⒁斐傻奈：?，但事?shí)上，目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中仍不能完全避免這種危害。因此，研究ＷＰ８在常見(jiàn)重金屬和農(nóng)藥脅迫下的實(shí)際促生表現(xiàn)更具現(xiàn)實(shí)意義，也是進(jìn)一步評(píng)價(jià)其應(yīng)用潛力的重要依據(jù)。Ａｈｅｍａｄ等［４］研究發(fā)現(xiàn)幾種常見(jiàn)殺蟲(chóng)劑對(duì)Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｓｐ． ｓｔｒａｉｎ ＰＳ１９促生指標(biāo)都產(chǎn)生了影響，且環(huán)境中農(nóng)藥劑量越大，影響越顯著。這可能是迄今檢索到僅有的相關(guān)報(bào)道，然而該研究?jī)H測(cè)定了相關(guān)促生指標(biāo)，未能通過(guò)具體植物進(jìn)行驗(yàn)證，而且缺乏重金屬等土壤中常見(jiàn)脅迫因素的影響。鑒于此，以ＷＰ８為材料，以土壤中常見(jiàn)重金屬Ｃｕ、Ｐｂ、Ｚｎ和常用農(nóng)藥乙草胺、農(nóng)用硫酸鏈霉素等為脅迫因子，以辣椒種子為試驗(yàn)對(duì)象，通過(guò)平板發(fā)芽方法研究ＷＰ８在重金屬、農(nóng)藥脅迫下對(duì)辣椒種子發(fā)芽率及幼苗生長(zhǎng)的影響。

１材料與方法

１．１供試材料及處理方法

接種適量Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ ＷＰ８細(xì)胞于ＮＢ液體培養(yǎng)基（Ｎｕｔｒｉｅｎｔ ｂｒｏｔｈ），（２８±２） ℃、１８０ ｒ／ｍｉｎ搖床培養(yǎng)４８ ｈ后，轉(zhuǎn)至無(wú)菌５０ ｍＬ離心管中，５ ０００ ｒ／ｍｉｎ離心１０ ｍｉｎ，棄去上清液，細(xì)胞重懸于無(wú)菌去離子水中，混勻，調(diào)至１０８ＣＦＵ／ｍＬ，置于４ ℃冰箱保存３ ｄ備用。

供試?yán)苯菲贩N為美國(guó)大牛角（河北青縣王鎮(zhèn)店種子繁育站）。取辣椒種子若干，用７０％乙醇和１％次氯酸鈉溶液分別處理５和１ ｍｉｎ，無(wú)菌去離子水沖洗３遍，風(fēng)干備用。

供試農(nóng)藥：乙草胺（遼寧營(yíng)口三征農(nóng)用化工有限公司）；農(nóng)用硫酸鏈霉素（鄭州方正化工有限公司）。

１．２試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)共設(shè)以下２２個(gè)處理：①ＣＫ（空白對(duì)照）；②ＣＫ＋ＷＰ８；③０．１％農(nóng)用硫酸鏈霉素（記作“鏈０．１”）；④０．１％農(nóng)用硫酸鏈霉素＋ＷＰ８（記作“鏈０．１＋ＷＰ８”）；⑤０．２％農(nóng)用硫酸鏈霉素（記作“鏈０．２”）；⑥０．２％農(nóng)用硫酸鏈霉素＋ＷＰ８（記作“鏈０．２＋ＷＰ８”）；⑦０．３％乙草胺（記作“乙０．３”）；⑧０．３％乙草胺＋ＷＰ８（記作“乙０．３＋ＷＰ８”）；⑨０．６％乙草胺（記作“乙０．６”）；⑩０．６％乙草胺＋ＷＰ８（記作“乙０．６＋ＷＰ８”）；11 １００ ｍｇ／Ｌ Ｃｕ（記作“Ｃｕ １００”）；12 １００ ｍｇ／Ｌ Ｃｕ＋ＷＰ８（記作“Ｃｕ １００＋ＷＰ８”）；13 ２００ ｍｇ／Ｌ Ｃｕ（記作“Ｃｕ ２００”）；14 ２００ ｍｇ／Ｌ Ｃｕ＋ＷＰ８（記作“Ｃｕ ２００＋ＷＰ８”）；15 ５０ ｍｇ／Ｌ Ｐｂ（記作“Ｐｂ ５０”）；16 ５０ ｍｇ／Ｌ Ｐｂ＋ＷＰ８（記作“Ｐｂ ５０＋ＷＰ８”）；17 １００ ｍｇ／Ｌ Ｐｂ（記作“Ｐｂ １００”）；18 １００ ｍｇ／Ｌ Ｐｂ＋ＷＰ８（記作“Ｐｂ １００＋ＷＰ８”）；19 ５０ ｍｇ／Ｌ Ｚｎ（記作“Ｚｎ ５０”）；20 ５０ ｍｇ／Ｌ Ｚｎ＋ＷＰ８（記作“Ｚｎ ５０＋ＷＰ８”）；21 １００ ｍｇ／Ｌ Ｚｎ（記作“Ｚｎ １００”）；22 １００ ｍｇ／Ｌ Ｚｎ＋ＷＰ８（記作“Ｚｎ １００＋ＷＰ８”）。上述處理均設(shè)３次重復(fù)。

１．３接種及平板發(fā)芽方法

取若干消毒過(guò)的辣椒種子浸泡于ＷＰ８細(xì)胞液內(nèi)，２８ ℃、１４０ ｒ／ｍｉｎ搖床中充分接觸２０ ｍｉｎ后取出，于無(wú)菌工作臺(tái)上風(fēng)干。另取若干種子浸泡于無(wú)菌去離子水中，進(jìn)行上述相同處理作為對(duì)照（ＣＫ）。

平板發(fā)芽方法：按上述試驗(yàn)設(shè)計(jì)，向鋪有無(wú)菌濾紙、相應(yīng)處理的培養(yǎng)皿內(nèi)分別移入４ ｍＬ無(wú)菌去離子水、１００ ｍｇ／Ｌ（元素的量，下同）的Ｃｕ溶液、２００ ｍｇ／Ｌ的Ｃｕ溶液、５０ ｍｇ／Ｌ的Ｐｂ溶液、１００ ｍｇ／Ｌ的Ｐｂ溶液、５０ ｍｇ／Ｌ的Ｚｎ溶液、１００ ｍｇ／Ｌ的Ｚｎ溶液、０．３％（Ｖ／Ｖ）乙草胺溶液、０．６％（Ｖ／Ｖ）乙草胺溶液、０．１％（Ｗ／Ｖ）農(nóng)用硫酸鏈霉素溶液和０．２％ （Ｗ／Ｖ） 農(nóng)用硫酸鏈霉素溶液。在不同處理的培養(yǎng)皿內(nèi)放入２０粒辣椒種子，２８ ℃下避光發(fā)芽生長(zhǎng)１５ ｄ后取出。

１．４供試重金屬和農(nóng)藥對(duì)ＷＰ８生長(zhǎng)的影響

為研究ＷＰ８在重金屬、農(nóng)藥脅迫下與無(wú)脅迫時(shí)促生效果的差異，試驗(yàn)測(cè)定了ＷＰ８在重金屬和農(nóng)藥脅迫下的生長(zhǎng)情況。各處理配制２００ ｍＬ １／１０濃度的ＮＢ液體培養(yǎng)基（盡量接近土壤養(yǎng)分狀況），按上述試驗(yàn)設(shè)計(jì)分別加入相應(yīng)量的重金屬和農(nóng)藥，接入等量ＷＰ８細(xì)胞，（２８±2） ℃、１８０ ｒ／ｍｉｎ搖床培養(yǎng)４８ ｈ后測(cè)定三角瓶?jī)?nèi)WP8細(xì)胞的量。采用了兩種測(cè)定方法：①針對(duì)液體外觀無(wú)混濁的重金屬溶液和農(nóng)用硫酸鏈霉素溶液，用可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定吸光度（Ａ５５０ ｎｍ），以未接入ＷＰ８的重金屬溶液作為參比溶液；②針對(duì)乳濁液狀態(tài)的乙草胺溶液，用稀釋平板培養(yǎng)法進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

１．５測(cè)定項(xiàng)目及統(tǒng)計(jì)方法

統(tǒng)計(jì)并計(jì)算各處理發(fā)芽率；量取辣椒幼苗根長(zhǎng)和莖長(zhǎng)。所獲數(shù)據(jù)用ＳＰＳＳ １５．０軟件作方差分析。

２結(jié)果與分析

２．１３種重金屬對(duì)ＷＰ８促生效果的影響

由圖１可知，ＷＰ８浸種處理的辣椒幼苗的莖長(zhǎng)和根長(zhǎng)均顯著長(zhǎng)于ＣＫ，說(shuō)明ＷＰ８對(duì)辣椒的促生效果較好。Ｃｕ、Ｐｂ、Ｚｎ脅迫下，辣椒種子的發(fā)芽及幼苗的生長(zhǎng)均受到不同程度的影響，其中，Ｃｕ對(duì)其的影響最大，在土壤污染臨界值（１００ ｍｇ／Ｌ）時(shí)，辣椒種子已不能發(fā)芽，這意味著國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的有關(guān)Ｃｕ的污染臨界值應(yīng)因不同植物而異，像辣椒這類(lèi)植物，顯然對(duì)Ｃｕ更為敏感。同時(shí)也表明ＷＰ８的促生作用也受到不同程度的影響。

在Ｐｂ５０和Ｐｂ１００條件下，辣椒的根、莖長(zhǎng)度均比ＣＫ顯著縮短，雖然Ｐｂ１００處理的根、莖長(zhǎng)度均小于Ｐｂ５０處理，但它們之間卻無(wú)顯著差異。Ｐｂ５０＋ＷＰ８處理的莖長(zhǎng)和ＣＫ＋ＷＰ８無(wú)顯著差異，根長(zhǎng)增加，達(dá)３０．９０ ｍｍ，顯著長(zhǎng)于ＣＫ＋ＷＰ８處理。Ｐｂ１００＋ＷＰ８處理的莖長(zhǎng)和ＣＫ間無(wú)顯著差異，但卻顯著低于ＣＫ＋ＷＰ８處理；根長(zhǎng)卻也和Ｐｂ５０＋ＷＰ８處理相似，比CK+WP8顯著增加。另外，Ｐｂ５０＋ＷＰ８和Ｐｂ１００＋ＷＰ８兩處理的根長(zhǎng)都長(zhǎng)于莖長(zhǎng)，說(shuō)明在Ｐｂ脅迫下，ＷＰ８極大地促進(jìn)了根的伸長(zhǎng)。

在Ｚｎ５０和Ｚｎ１００條件下，辣椒的根、莖長(zhǎng)度均比ＣＫ顯著縮短，雖然Ｚｎ１００處理的根、莖長(zhǎng)度均小于Ｚｎ５０處理，但它們之間卻無(wú)顯著差異，這點(diǎn)和Ｐｂ處理相似。Ｚｎ５０＋ＷＰ８處理的莖長(zhǎng)和ＣＫ無(wú)顯著差異，根長(zhǎng)卻比ＣＫ增長(zhǎng)１１５．１５％，達(dá)ＣＫ＋ＷＰ８處理的水平。Ｚｎ１００＋ＷＰ８處理的莖長(zhǎng)和根長(zhǎng)分別比Ｚｎ１００處理增長(zhǎng)４８．７２％和４９４．７４％，差異均達(dá)顯著水平。

試驗(yàn)說(shuō)明，ＷＰ８有助于緩解重金屬對(duì)辣椒幼苗的脅迫，主要體現(xiàn)在促進(jìn)其根的伸長(zhǎng)；重金屬對(duì)ＷＰ８的促生作用有一定的影響，以Ｃｕ的影響尤為明顯。

２．２兩種常見(jiàn)農(nóng)藥對(duì)ＷＰ８促生效果的影響

農(nóng)用硫酸鏈霉素和乙草胺對(duì)辣椒種子發(fā)芽、幼苗生長(zhǎng)以及對(duì)ＷＰ８促生效果的影響各不相同。對(duì)農(nóng)用硫酸鏈霉素而言，鏈０．１處理（建議濃度）和ＣＫ相比，莖長(zhǎng)并未顯著縮短，根長(zhǎng)反比ＣＫ顯著增加，而鏈０．２處理的根、莖長(zhǎng)度均比ＣＫ顯著縮短。鏈０．１＋ＷＰ８處理的根長(zhǎng)和ＣＫ＋ＷＰ８處理相比無(wú)顯著差異，但莖長(zhǎng)卻短４２．７７％，差異達(dá)顯著水平；鏈０．２＋ＷＰ８處理的莖長(zhǎng)、根長(zhǎng)分別比ＣＫ＋ＷＰ８處理短６５．２４％和４９．９７％，差異均達(dá)顯著水平，但其根長(zhǎng)和ＣＫ保持同一水平。說(shuō)明ＷＰ８有助于緩解農(nóng)用硫酸鏈霉素對(duì)辣椒幼苗生長(zhǎng)的影響，主要體現(xiàn)在促進(jìn)根的伸長(zhǎng)。

乙草胺對(duì)辣椒發(fā)芽、生長(zhǎng)及ＷＰ８的促生效果的影響較農(nóng)用硫酸鏈霉素大。在建議濃度（乙０．３處理）和２倍建議濃度（乙０．６處理）下，辣椒均不發(fā)芽，只是乙０．３＋ＷＰ８處理的辣椒根有所生長(zhǎng)。說(shuō)明乙草胺對(duì)辣椒發(fā)芽、生長(zhǎng)影響很大，ＷＰ８的緩解作用也相對(duì)較小。

２．３常見(jiàn)重金屬和農(nóng)藥對(duì)ＷＰ８生長(zhǎng)的影響

由圖３可知，不同重金屬和農(nóng)藥對(duì)ＷＰ８的生長(zhǎng)有不同程度的抑制作用。各處理和ＣＫ之間均存在顯著差異；除Ｃｕ１００和Ｃｕ２００處理之間差異不顯著外，其余各處理建議濃度和２倍建議濃度之間的差異均達(dá)顯著水平。建議濃度下，各重金屬對(duì)ＷＰ８生長(zhǎng)的影響為Ｃｕ＞Ｚｎ＞Ｐｂ，說(shuō)明ＷＰ８對(duì)Ｃｕ相對(duì)敏感；２倍建議濃度下，各重金屬對(duì)ＷＰ８生長(zhǎng)的影響為Ｐｂ＞Ｃｕ＞Ｚｎ。

３討論

ＰＧＰＲ的促生機(jī)制具有多樣性，可歸納為誘導(dǎo)體系抗性和誘導(dǎo)體系忍耐力兩類(lèi)［５］，其中誘導(dǎo)體系忍耐力包括ＰＧＰＲ誘導(dǎo)植物耐重金屬生長(zhǎng)或協(xié)助植物進(jìn)行重金屬超積累等，例如，一些耐鋅根際菌增強(qiáng)二月蘭（Ｏｒｙｃｈｏｐｈｒａｇｍｕｓ ｖｉｏｌａｃｅｕｓ）對(duì)Ｚｎ的富集以及增加植物生物量［６］；耐鎘根際菌可在鎘脅迫下促進(jìn)甘藍(lán)型油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ）的生長(zhǎng)［７］；耐鎳根際菌可提高芥菜型油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｊｕｎｃｅａ）和油菜野生種（Ｂ． ｏｘｙｒｒｈｉｎａ）對(duì)鎳的富集［８］等。此次研究的重點(diǎn)并非證明ＷＰ８是否可幫助辣椒忍耐重金屬脅迫，而是研究ＷＰ８在常見(jiàn)重金屬和農(nóng)藥脅迫下的實(shí)際促生能力。這主要出于前期對(duì)ＷＰ８的促生能力已有較好的認(rèn)識(shí)，認(rèn)為ＷＰ８具有很好的應(yīng)用潛力，因此需要進(jìn)一步探究其在環(huán)境脅迫下的實(shí)際促生表現(xiàn)。但ＷＰ８在重金屬和農(nóng)藥特別是Ｐｂ、Ｚｎ和農(nóng)用硫酸鏈霉素脅迫下，仍能促進(jìn)辣椒生長(zhǎng)，這個(gè)結(jié)果對(duì)豐富ＷＰ８的應(yīng)用范圍和領(lǐng)域仍具有指導(dǎo)意義。

不少學(xué)者認(rèn)為ＰＧＰＲ發(fā)揮作用的前提是能競(jìng)爭(zhēng)存活［３，９，１０］，但ＰＧＰＲ存活并不一定就有促生作用。研究中，Ｃｕ處理的辣椒種子不能發(fā)芽，但同樣的Ｃｕ濃度脅迫下，ＷＰ８也有少量生長(zhǎng)，而且其生長(zhǎng)量比Ｐｂ１００多，然而Ｃｕ１００＋ＷＰ８和Ｃｕ2００＋ＷＰ８處理辣椒的發(fā)芽和生長(zhǎng)情況卻遠(yuǎn)不如Ｐｂ１００＋ＷＰ８處理好，乙草胺處理也有相似情況，這說(shuō)明ＷＰ８是否存活與最終的促生表現(xiàn)似乎并無(wú)決定關(guān)系?？梢钥隙ǖ氖牵茫鹾鸵也莅访{迫環(huán)境對(duì)辣椒發(fā)芽和生長(zhǎng)的影響最大，即使有ＷＰ８存在也很難緩解，這既說(shuō)明ＰＧＰＲ促生機(jī)制的復(fù)雜性，也對(duì)辣椒種植過(guò)程中除草劑的使用及土壤污染標(biāo)準(zhǔn)的制定起指導(dǎo)作用。

試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，ＷＰ８在重金屬和農(nóng)藥脅迫下，對(duì)辣椒根的促生作用比對(duì)莖的促生作用明顯。Ｂｅｌｉｍｏｖ等［１１］研究發(fā)現(xiàn)Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｒｕｍ ｓｔｒａｉｎ Ａｍ３能在濾紙培養(yǎng)皿環(huán)境中促進(jìn)番茄幼苗根的伸長(zhǎng)，并在土壤試驗(yàn)中能提高植物生物量，但Ｐ． ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｒｕｍ ｓｔｒａｉｎｓ ５２０－１和Ｔ８－１并不能促進(jìn)幼苗根的伸長(zhǎng)，通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)，Ａｍ３能同時(shí)在濾紙培養(yǎng)皿和土壤環(huán)境中定殖，而５２０－１和Ｔ８－１卻并不能定殖。因此認(rèn)為ＷＰ８之所以能大幅度促進(jìn)辣椒根的伸長(zhǎng)，是因?yàn)槠湟呀?jīng)成功定殖于辣椒根際了，而且可以推想，ＷＰ８在土壤環(huán)境中應(yīng)該有較好的促生表現(xiàn)。

前期測(cè)定ＷＰ８的一些促生指標(biāo)，只有產(chǎn)嗜鐵素這一項(xiàng)［２］。試驗(yàn)中，為探究ＷＰ８耐眾多重金屬和農(nóng)藥而進(jìn)行生長(zhǎng)和促生的表現(xiàn)，定性測(cè)定了其產(chǎn)ＡＣＣ（１－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－１－ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ，１－氨基環(huán)丙烷－１－羧酸）脫氨酶的能力，發(fā)現(xiàn)其能在以ＡＣＣ為惟一碳源的培養(yǎng)基上進(jìn)行生長(zhǎng)。這說(shuō)明該菌株極有可能通過(guò)產(chǎn)ＡＣＣ脫氨酶抗重金屬和農(nóng)藥而進(jìn)行生長(zhǎng)并促進(jìn)辣椒發(fā)芽和生長(zhǎng)。

參考文獻(xiàn)：

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［３］ ＣＡＴＴＥＬＡＮ Ａ Ｊ， ＨＡＲＴＥＬ Ｐ Ｇ，ＦＵＨＲＭＡＮＮ Ｊ Ｊ． Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｆｏｒ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ－ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｒｈｉｚｏｂａｃｔｅｒｉａ ｔｏ ｐｒｏｍｏｔｅ ｅａｒｌｙ ｓｏｙｂｅａｎ ｇｒｏｗｔｈ［Ｊ］． Ｓｏｉｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ Ｊｏｕｒｎａｌ，１９９９，６３（６）：１６７０－１６８０．

［４］ ＡＨＥＭＡＤ Ｍ，ＫＨＡＮ Ｍ Ｓ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄｅｓ ｏｎ ｐｌａｎｔ－ｇｒｏｗｔｈ－ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ ｒｈｉｚｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｓｐ． ｓｔｒａｉｎ ＰＳ１９ ［Ｊ］． Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０１１，１００：５１－５６．

［５］ 康貽軍，程潔，梅麗娟，等． 植物根際促生菌作用機(jī)制研究進(jìn)展［Ｊ］． 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，２０１０，２１（１）：２３２－２３８．

［６］ ＨＥ Ｃ Ｑ， ＴＡＮ Ｇ Ｅ， ＬＩＡＮＧ Ｘ，ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｚｎ－ｔｏｌｅｒａｎｔ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｎ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ Ｚｎ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ Ｏｒｙｃｈｏｐｈｒａｇｍｕｓ ｖｉｏｌａｃｅｕｓ［Ｊ］． Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｏｉｌ Ｅｃｏｌｏｇｙ，２０１０，４４（１）：１－５．

［７］ ＤＥＬＬ＇ＡＭＩＣＯ Ｅ， ＣＡＶＡＬＣＡ Ｌ，ＡＮＤＲＥＯＮＩ Ｖ． Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ ｇｒｏｗｔｈ ｕｎｄｅｒ ｃａｄｍｉｕｍ ｓｔｒｅｓｓ ｂｙ ｃａｄｍｉｕｍ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｒｈｉｚｏｂａｃｔｅｒｉａ ［Ｊ］． Ｓｏｉｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ２００８，４０（１）：７４－８４．

［８］ ＭＡ Ｙ， ＲＡＪＫＵＭＡＲ Ｍ，ＦＲＥＩＴＡＳ Ｈ． Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｎｉｃｋｅｌ ｕｐｔａｋｅ ｂｙ ｎｉｃｋｅｌ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ－ｐｌａｎｔ－ｇｒｏｗｔｈ ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈａｚａｒｄｏｕｓ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ， ２００９， １６６（２－３）：１１５４－１１６１．

［９］ ＲＡＡＩＪＭＡＫＥＲＳ Ｊ Ｍ，ＷＥＬＬＥＲ Ｄ Ｍ． Ｅｘｐｌｏｉｔｉｎｇ ｇｅｎｏｔｙｐｉｃ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ２，４－Ｄｉａｃｅｔｙｌｐｈｌｏｒｏｇｌｕｃｉｎｏｌ－pｒｏｄｕｃｉｎｇ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．： ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｐｅｒｉｏｒ ｒｏｏｔ－ｃｏｌｏｎｉｚｉｎｇ Ｐ． ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ ｓｔｒａｉｎ Ｑ８ｒ１－９６［Ｊ］． Ａｐｐｌｉｅｄ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００１，６７（６）：２５４５－２５５４．

［１０］ ＬＡＮＤＡ Ｂ Ｂ， ＭＡＶＲＯＤＩ Ｄ Ｍ， ＴＨＯＭＡＳＨＯＷ Ｌ Ｓ， ｅｔ ａｌ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ ２，４－Ｄｉａｃｅｔｙｌｐｈｌｏｒｏｇｌｕｃｉｎｏｌ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｅ ｏｆ ｗｈｅａｔ ［Ｊ］． Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２００３，９３（８）：９８２－９９４．

［１１］ ＢＥＬＩＭＯＶ Ａ Ａ， ＤＯＤＤ Ｉ Ｃ， ＳＡＦＲＯＮＯＶＡ Ｖ Ｉ， ｅｔ ａｌ． Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｒｕｍ ｓｔｒａｉｎ Ａｍ３ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ １－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－１－ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ ｄｅａｍｉｎａｓｅ ｃａｎ ｓｈｏｗ ｂｏｔｈ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ－ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｉｎ ｉｔｓ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｏｍａｔｏ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｂｏｔａｎｙ，２００７，５８（６）：１４８５－１４９５．