麻瘋樹枝干潰瘍病的病原鑒定

吳躍開 歐國騰 孫建昌

摘要：麻瘋樹（Ｊａｔｒｏｐｈａ ｃｕｒｃａｓ Ｌ．）枝干潰瘍病是麻瘋樹主要病害種類之一，常引起幼苗、枝干枯死，甚至全株死亡。對該病的危害特點、病癥特征進行了介紹，并根據(jù)形態(tài)學(xué)特征觀測及致病性接種試驗的結(jié)果，將其病原鑒定為Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ ｄｏｔｈｉｄｅａ，其無性型為Ｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍ ａｅｓｃｕｌｉ。

關(guān)鍵詞：麻瘋樹（Ｊａｔｒｏｐｈａ ｃｕｒｃａｓ Ｌ．）；枝干潰瘍病；病原；Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ ｄｏｔｈｉｄｅａ； Ｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍ ａｅｓｃｕｌｉ

中圖分類號：Ｓ４３５．６５９文獻標(biāo)識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０12）03－0518-03

Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｃａｕｓａｌ Ａｇｅｎｔ ｏｆ Ｓｔｅｍ ａｎｄ Ｂｒａｎｃｈ Ｃａｎｋｅｒ Ｄｉｓｅａｓｅ ｏｆ

Ｊａｔｒｏｐｈａ ｃｕｒｃａｓ Ｌ．

ＷＵ Ｙｕｅ－ｋａｉ１，ＯＵ Ｇｕｏ－ｔｅｎｇ２，ＳＵＮ Ｊｉａｎ－ｃｈａｎｇ１

（１．Ｇｕｉｚｈｏｕ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ， Ｇｕｉｙａｎｇ ５５００11，Ｃｈｉｎａ； ２． Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｂｕｒｅａｕ ｏｆ Ｌｕｏｄｉａｎ Ｃｏｕｎｔｙ， Ｌｕｏｄｉａｎ ５５０１００，Ｇｕｉｚｈｏｕ，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｓｔｅｍ ａｎｄ ｂｒａｎｃｈ ｃａｎｋｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｓ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｅｒｉｏｕｓ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｃｃｕｒｒｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｂｉｏｆｕｅｌ ｐｌａｎｔａｔｉｏｎ （Ｊａｔｒｏｐｈａ ｃｕｒｃａｓ Ｌ．） ｉｎ Ｌｕｏｄｉａｎ Ｃｏｕｎｔｙ ｏｆ Ｇｕｉｚｈｏｕ pｒｏｖｉｎｃｅ， ｕｓｕａｌｌｙ ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅａｔｈ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ， ｂｒａｎｃｈｅｓ， ｓｔｅｍｓ ｏｒ ｅｖｅｎ ｔｈｅ ｗｈｏｌｅ ｂｉｇ ｔｒｅｅｓ． Tｈｅ ｄａｍａｇｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｓｙｐｏｔｏｍｓ ｏｆ ｔｈｅ ｄｉｓｅａｓｅ were introduced； ａｎｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｕｄｙ ａｎｄ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ inoculation ｔｅｓｔ， ｔｈｅ ｃａｕｓａｌ ａｇｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｃａｎｋｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｗａｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｓ Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ．ｄｏｔｈｉｄｅａ（ａｎａｍｏｒｐｈ：Ｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍ ａｅｓｃｕｌｉ）．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｊａｔｒｏｐｈａ ｃｕｒｃａｓ Ｌ．； ｃａｎｋｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ； ｐａｔｈｏｇｅｎ； Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ ｄｏｔｈｉｄｅａ； Ｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍ ａｅｓｃｕｌｉ

麻瘋樹（Ｊａｔｒｏｐｈａ ｃｕｒｃａｓ Ｌ．）是新興的重要能源植物種類之一，目前在世界各地均大面積推廣種植。傳統(tǒng)上認(rèn)為該樹種具有抗旱、耐貧瘠、病蟲害少等優(yōu)點，然而事實證明并非如此。近幾年來，我們在貴州羅甸縣境內(nèi)調(diào)查到麻瘋樹的大量病蟲害種類，其中，枝干潰瘍病是其最常見、最嚴(yán)重的病害種類之一，往往造成幼苗死亡、枝干枯死，甚至整株大樹死亡，導(dǎo)致重大的經(jīng)濟損失。為了掌握該病的確切病因，從而采取有針對性的防治措施，我們對該病害的病原學(xué)進行了研究，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

１材料與方法

１．１病害調(diào)查

在貴州麻瘋樹主要種植地羅甸縣境內(nèi)選取幾個典型的麻瘋樹種植點進行調(diào)查，掌握潰瘍病的表現(xiàn)癥狀、主要發(fā)生時間、受害株率、為害后果等。

１．２病原檢測

主要包括受害枝干病理切片、自然病菌子實體切片以及人工分離培養(yǎng)物的特征觀測。

１．３致病性測試

對病枝潰瘍處進行消毒、無菌水沖洗，然后用無菌刀片將病部子實體切下并搗爛，最后加無菌水?dāng)噭蛑瞥涉咦討腋∫?。供試麻瘋樹苗選用健康無病的２年生容器苗，一共１５株，分成３組，分別進行不同處理：①在接種前用刀片輕輕刮傷莖皮，然后噴施菌液；②不作刮傷處理，直接噴菌液；③不作刮傷處理，噴施無菌水作對照。試驗苗置于人工溫棚中，各處理間相隔一段距離。試驗期間棚內(nèi)溫度為２０～３２ ℃，相對濕度＞９０％。１個月后觀察發(fā)病情況。

１．４病原鑒定

根據(jù)致病性測試以及顯微特征觀測結(jié)果，參考相關(guān)文獻資料，對導(dǎo)致麻瘋樹潰瘍病的病原菌進行分類鑒定。

２結(jié)果與分析

２．１危害情況

該病在羅甸各個麻瘋樹種植點都普遍發(fā)生，包括造林地和苗圃。主要為害幼苗、新移栽苗木及衰弱樹，感病株率１５％～９５％。由于受干旱或土壤不宜等原因致使苗木生長不良時，或苗木遭受凍害或蟲害出現(xiàn)傷（裂）口時極易發(fā)生此病。從幾年的調(diào)查結(jié)果看，該病在羅甸地區(qū)的發(fā)病高峰期為４～５月。２００９年３～４月該病在高蘭種植點的幼苗上普遍大發(fā)生，局部感病株率９５％，其原因可能在于該時期是本地區(qū)主要干旱季節(jié)，而該種植點人工澆水管理工作無法到位；２０１１年３月調(diào)查，各種植點苗木潰瘍病嚴(yán)重發(fā)生，而且多為莖干水皰型潰瘍病，局部感病株率９２％。這可能是因為２０１１年初長時間的凍害天氣導(dǎo)致枝干受傷而誘發(fā)了潰瘍病的大發(fā)生。

2．２病癥特征

該病可從頂芽、葉芽、枝瘤、皮孔、傷口等薄弱處侵入。初期病狀表現(xiàn)為侵入點流出大量樹液，遇空氣后很快變紫紅色、棕紅色或血色，最后呈深褐色至黑色（圖１－１、１－３）。隨著病程的發(fā)展，病部組織發(fā)生變褐腐爛、縊縮，最后病部及以上部位枯死。由于初侵染部位的不同，田間癥狀往往呈現(xiàn)不同的幾種類型：①梢枯型（病菌由梢頂部開始侵染并向下發(fā)展，導(dǎo)致梢部枯死）（圖１－１）；②縊縮潰瘍斑型（病菌從莖干中部葉芽處侵入并擴展，在病部形成縊縮性潰瘍斑（圖１－２）；③爛脖子型（病菌從分枝處入侵，往往同時引起幾個枝條最后枯死）（圖１－３）；④水皰型（病菌從凍傷或是機械損傷的莖干表皮侵入，導(dǎo)致莖干表皮出現(xiàn)水皰狀腫起，導(dǎo)致整個莖干發(fā)生腐爛，后期生長出許多突起的黑色條狀或塊狀隆起，此即為病菌的子座）（圖１－４）。不同癥狀類型的存在往往導(dǎo)致誤診，但根據(jù)分離培養(yǎng)甚至直接鏡檢，發(fā)現(xiàn)其病菌形態(tài)基本一致，乃是同一種病菌所致。

２．３致病性測定結(jié)果

致病性測試結(jié)果如表１。從表１可以看出，測試菌株可以引起典型的潰瘍斑癥狀，但其主要侵染受傷植株，并從傷口處侵入發(fā)展；健康植株噴菌處理感染率較低，且主要從芽眼處侵染，形成的潰瘍斑也較傷皮接種處理產(chǎn)生的潰瘍斑小。試驗中還發(fā)現(xiàn)，無論是刮傷苗接種還是健康苗接種，溫棚幼苗人工接種導(dǎo)致的潰瘍病和田間潰瘍病比較，病程發(fā)展較慢。可能是因為溫棚內(nèi)人工管理條件良好，苗木個體生長健壯、抗性較強。對人工接種導(dǎo)致的潰瘍病斑進行再次分離，其培養(yǎng)物與原菌株培養(yǎng)物特征一致。測試結(jié)果證明了該病菌是麻瘋樹潰瘍病的致病菌。

２．４病原特征

子實體（子座）在寄主皮下形成，黑色，后期突破寄主表皮而暴露。不同感病部位、不同的病菌發(fā)展階段、不同的病狀類型等條件下，子實體的外觀有所不同，有的呈密集的細(xì)小黑色顆粒狀物，有的呈密集的細(xì)小皰狀突起（尚未突破寄主表皮），有的呈現(xiàn)粗糙的黑色條狀或塊狀隆起，等等。子實體成熟時在其中生成多個腔室，形成子囊腔或分生孢子器，有時可見子囊腔與分生孢子器同時生于同一個子座中（圖１－５）。子囊腔近球形，頂端具孔口（圖１－６）；子囊棍棒形，具雙層壁，無色，子囊間有假側(cè)絲，每個子囊含８個子囊孢子；子囊孢子單胞，無色，長卵圓形至短梭形，兩端圓鈍，大?。罚罚薄保保梗?μｍ×１６．６５～２５．７５ μｍ（圖１－７）；分生孢子器近球形；分生孢子長梭形或長橢圓形，單胞無色，大小為４．８～８．１ μｍ×１５．８～２９．７ μｍ（圖１－８、１－９、１－１０）。較老的標(biāo)本上偶爾還會發(fā)現(xiàn)有精子器（ｓｐｅｒｍｏｇｏｎｉａ） 形成于同一子座上；精子（ｓｐｅｒｍａｔｉａ）無色，短桿狀，大小為１．２５～１．７８ μｍ×２．５４～５．１７ μｍ（圖１－１１、１－１２）。

對具有不同典型病癥特征的病莖進行分離培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)人工培養(yǎng)物形態(tài)特征基本一致。菌落初期白色，濃密，后期變?yōu)樯罨疑?，背面黑色；后期菌落菌絲層上生長著許多黑色的球形或不規(guī)則形的突起物，即為病菌的子座（圖１－１３）。

２．５病原鑒定結(jié)果

Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ屬真菌是引起多種樹木枝干潰瘍病的重要病原菌之一。從分類學(xué)上看，它是在子座或假囊殼型囊實體中產(chǎn)生雙囊壁子囊的真菌的總稱［１］。根據(jù)病狀特點及形態(tài)學(xué)特征，引起麻瘋樹潰瘍病的病原菌明顯屬于Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ。

Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ屬中各個種類的有性型形態(tài)特征十分接近，難以區(qū)別，但在無性型上各個種類的形態(tài)特征區(qū)別較大，因而可以用來作為分種的重要依據(jù)。目前，在分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)上，一個基于無性型特征的Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ屬真菌的分類體系已基本形成［１－３］。本研究依據(jù)這些分類標(biāo)準(zhǔn)，將麻瘋樹潰瘍病的病原菌鑒定為Ｂｄｏｔｈｉｄｅａ， 其無性型為Ｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍ ａｅｓｃｕｌｉ。

分子生物學(xué)研究結(jié)果表明，與Ｂ． ｄｏｔｈｉｄｅａ比較相近的種類為Ｂ． ｃｏｒｔｉｃｅｓ，Ｂ． ｍａｍａｎｅ，Ｆ． ｄｉｍｉｄｉａｔｕｍ［４－６］。從無性型特征上看，它們和Ｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍ ａｅｓｃｕｌｉ的區(qū)別在于：Ｂ． ｃｏｒｔｉｃｅｓ的子囊孢子及分生孢子均比Ｂ． ｄｏｔｈｉｄｅａ大，且主要寄生于越橘屬植物（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ）上［６］； Ｂ． ｍａｍａｎｅ的分生孢子長度大于３０ μｍ［１］。相對來說Ｆ． ｄｉｍｉｄｉａｔｕｍ與Ｂ． ｄｏｔｈｉｄｅａ之間的區(qū)別特征最為顯著，因為前者的分生孢子常常出現(xiàn)２個分隔，中間細(xì)胞深色；目前該種已劃歸新的屬Ｎｅｏｓｃｙｔａｌｉｄｉｕｍ，其新種名為Ｎ． ｄｉｍｉｄｉａｔｕｍ［２］。

３結(jié)論與討論

１）麻瘋樹枝干潰瘍病的病原菌經(jīng)鑒定初步確認(rèn)為Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ ｄｏｔｈｉｄｅａ。標(biāo)本檢測中還常發(fā)現(xiàn)有其他的真菌（包括葡萄座腔菌）種類，但它們的出現(xiàn)頻率較低，因而不是潰瘍病的主要病原，其中有些可能是次生的腐生菌。根據(jù)我們掌握的資料，Ｂ． ｄｏｔｈｉｄｅａ引起麻瘋樹的枝干部潰瘍病，在國內(nèi)尚屬首次報道。

２）資料表明，Ｂ． ｄｏｔｈｉｄｅａ能侵染為害多種寄主植物，但同時也是一種寄生性較弱的病原菌，只有在環(huán)境條件比較惡劣、植物生長不良時該病才容易流行。在羅甸，每年３～４月是該病的主要發(fā)生時期，其原因之一在于該段時間在本地區(qū)屬干旱期，而干旱條件容易引起病害發(fā)生；另外一個原因在于該段時間也往往是凍害發(fā)生期結(jié)束不久，樹木還未完全恢復(fù)長勢，受凍枝干十分容易遭受病菌的侵染。

３）根據(jù)該病的發(fā)生特點，對該病的防治應(yīng)該以預(yù)防為主，即加強林分的水肥管理，提高樹木生長勢，必要時輔以預(yù)防性噴藥處理。發(fā)病初期及早噴藥處理也可以獲得一定的療效；發(fā)病晚期應(yīng)該將感病枝、梢修剪掉，連同病死株集中銷毀，最大可能地剔除傳染源。

參考文獻：

［１］ 趙嘉平．樹木潰瘍病菌——葡萄座腔菌屬及相關(guān)真菌系統(tǒng)分類研究［Ｄ］． 北京：中國林業(yè)科學(xué)研究院，２００７．

［２］ ＣＲＯＵＳ Ｐ Ｗ． Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ｌｉｎｅａｇｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｃｅａｅ［Ｊ］． Ｓｔｕｄｉｅｓ ｉｎ Ｍｙｃｏｌｏｇｙ， ２００６，５５：２３５－２５３．

［３］ ＤＥＮＭＡＮ Ｓ，ＣＲＯＵＳ Ｐ Ｗ， ＴＡＹＬＯＲ Ｊ Ｅ， ｅｔ ａｌ． Ａｎ ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ｈｉｓｔｏｒｙ ｏｆ Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ，ａｎｄ ａ ｒｅ－ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｔｓ ａｎａｍｏｒｐｈｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ ＩＴＳ ｒＤＮＡ ｐｈｙｌｏｇｅｎｙ［Ｊ］．Ｓｔｕｄｉｅｓ ｉｎ Ｍｙｃｏｌｏｇｙ，２０００，４５：１２９－１４０．

［４］ ＡＬＶＥＳ Ａ， ＣＯＲＲＥＩＡ Ａ， ＬＵＱＵＥ Ｊ，ｅｔ ａｌ． Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ ｃｏｒｔｉｃｏｌａ，ｓｐ．ｎｏｖ． ｏｎ Ｑｕｅｒｃｕｓ ｓｐｅｃｉｅｓ，ｗｉｔｈ ｎｏｔｅｓ ａｎｄ ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ ｓｔｅｖｅｎｓｉｉ ａｎｄ ｉｔｓ ａｎａｍｏｒｐｈ，Ｄｉｐｌｏｄｉａ ｍｕｔｉｌａ［Ｊ］． Ｍｙｃｏｌｏｇｉａ， ２００４，９６（３）：５９８－６１３．

［５］ ＦＡＲＲ Ｄ Ｆ， ＥＬＬＩＯＴＴ Ｍ， ＲＯＳＳＭＡＮ Ａ Ｙ， ｅｔ ａｌ． Ｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍ ａｒｂｕｔｉ ｓｐ． ｎｏｖ． ｃａｕｓｉｎｇ ｃａｎｋｅｒｓ ｏｎ Ｐａｃｉｆｉｃ ｍａｄｒｏｎｅ ｉｎ ｗｅｓｔｅｒｎ Ｎｏｒｔｈ Ａｍｅｒｉｃａ ｗｉｔｈ ｎｏｔｅｓ ｏｎ Ｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍ ｄｉｍｉｄｉａｔｕｍ，ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｃｔ ｎａｍｅ ｆｏｒ Ｓｃｙｔａｌｉｄｉｕｍ ｄｉｍｉｄｉａｔｕｍ ａｎｄ Ｎａｔｔｒａｓｓｉａ ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ［Ｊ］． Ｍｙｃｏｌｏｇｉａ，２００５，９７（３）：７３０－７４１．

［６］ ＰＨＩＬＬＩＰＳ Ａ Ｊ Ｌ， ＯＵＤＥＭＡＮＳ Ｐ Ｖ， ＣＯＲＲＥＩＡ Ａ， ｅｔ ａｌ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｐｉｔｙｐｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ ｃｏｒｔｉｃｅｓ，ｔｈｅ ｃａｕｓｅ ｏｆ ｂｌｕｅｂｅｒｒｙ ｃａｎｅ ｃａｎｋｅｒ［Ｊ］． Ｆｕｎｇａｌ Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ， ２００６，２１：１４１－１５５．

收稿日期：２０１１－０７－１３

基金項目：貴州省年度攻關(guān)項目（黔科合ＮＹ（２００９）３０６５）

作者簡介：吳躍開（１９７２－），男，貴州黎平人，副研究員，碩士，主要從事植物病蟲害防治、有益昆蟲及微生物的應(yīng)用開發(fā)研究工作，（電話）

１３５９５１３５１３６（電子信箱）ｗｕｙａｏｋａｉ＠１６３．ｃｏｍ。