2006年至2010年麗水地區(qū)腸球菌耐藥性分析

余王景璐，朱延焱，江麗莉，劉素霞

(浙江省麗水市中心醫(yī)院檢驗科，浙江 麗水 323000)

腸球菌(enterococcus)為圓形或橢圓形、呈鏈狀排列的革蘭陽性球菌，是臨床感染常見菌株，常引起呼吸道、泌尿生殖道、腹腔等部位的感染[1]。近年來，隨著臨床上廣譜抗生素、免疫抑制劑的廣泛應(yīng)用，以及各種侵入性治療機(jī)會的增加，腸球菌耐藥率逐漸升高，已成為在需氧革蘭陽性球菌中僅次于葡萄球菌的重要院內(nèi)感染致病菌[2]。尤其是耐萬古霉素腸球菌菌株的增多，給臨床治療帶來極大困難。為了解醫(yī)院常見腸球菌分布特征及耐藥特點，筆者對2006年1月至2010年12月從住院及門診送檢標(biāo)本中分離到的腸球菌株973株進(jìn)行菌種鑒定及藥物敏感性試驗，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1．1 儀器、試劑和菌株來源

采用VITEK－COMPACT2全自動微生物分析儀。標(biāo)準(zhǔn)抗菌藥物紙片氨芐西林(10 μg)、奎奴普丁達(dá)福普丁(15 μg)、利奈唑胺(30 μg)、鏈霉素(300 μg)、青霉素 G(10 U)、慶大霉素(120 μg)、四環(huán)素(30 μg)、萬古霉素(30 μg)、左氧氟沙星(5 μg)均為英國Oxoid公司產(chǎn)品。M－H瓊脂粉為英國Oxoid公司產(chǎn)品。菌株來自2006年1月至2010年12月麗水市中心醫(yī)院門診及住院各類臨床標(biāo)本分離到的腸球菌973株(同一患者無重復(fù)株)。

1．2 藥敏培養(yǎng)基的制備

將M－H瓊脂粉19 g用500 mL蒸餾水溶解后，115℃高壓蒸汽滅菌15 min。瓊脂冷卻至約55℃后，在半封閉式工作臺上定量傾倒至直徑為90 mm的平皿，4℃保存。

1．3 細(xì)菌鑒定及藥物敏感性試驗

K－B法細(xì)菌的接種量根據(jù)VITEK比濁儀調(diào)整至0．5麥?zhǔn)蠞岫龋辜?xì)菌的濃度達(dá)108cfu/mL后，將無菌棉簽蘸濕，擠出多余水分后向3個方向均勻涂布于M－H瓊脂平皿上，貼上抗菌藥物紙片，置35℃的孵箱孵育18～20 h，根據(jù)美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會2007年指南M100－S17判讀結(jié)果。糞腸球菌的質(zhì)控菌株為ATCC29212。

2 結(jié)果

各臨床科室菌株分離率最高為泌尿科(35．3%)，其次為監(jiān)護(hù)室(19．4%)和呼吸科(12．2%)。具體統(tǒng)計結(jié)果見表 1至表4。

3 討論

腸球菌屬是人類和哺乳動物腸道的正常菌群，雖為低毒的革蘭陽性球菌，但多數(shù)學(xué)者認(rèn)為它是造成嚴(yán)重感染的重要病原菌[3]。醫(yī)院從2006年至2010年送檢標(biāo)本中共分離出腸球菌973株，以注:“－”表示無，下表同。糞腸球菌和屎腸球菌為主。各類感染性標(biāo)本分離的腸球菌中以尿液標(biāo)本最多，其次為痰液標(biāo)本。由于生殖道和泌尿道與腸道的生理位置比較接近，因此腸球菌的感染可能以易位感染為主。另外，腸球菌的感染分布范圍已擴(kuò)大，其原本不是引起呼吸道感染的主要致病菌，但此次有38．95%的標(biāo)本來源于呼吸道痰液標(biāo)本，說明腸球菌已逐漸成為了呼吸道感染的主要致病菌，使臨床治療難度加大，必須引起重視[4]。

表1 各年度臨床標(biāo)本分離菌株統(tǒng)計[株(%)]

表2 973株腸球菌在臨床標(biāo)本中的分布

表3 2006年至2010年醫(yī)院糞腸球菌的耐藥率(%)

表4 2006年至2010年醫(yī)院屎腸球菌的耐藥率(%)

腸球菌的感染以糞腸球菌所占比例最高，其次為屎腸球菌。通過對這兩種腸球菌耐藥現(xiàn)狀的分析，基本上可以反映腸球菌的整體耐藥情況[5]。腸球菌屬細(xì)胞壁堅厚，對許多抗菌藥物表現(xiàn)為固有耐藥，如對頭孢菌素天然耐藥。本次研究顯示，腸球菌屬對青霉素的耐藥率最高，2006年至2010年均達(dá)85%以上。目前，腸球菌引起的醫(yī)院感染最嚴(yán)重的為耐萬古霉素腸球菌。由于臨床醫(yī)師經(jīng)常采用協(xié)同用藥來加強(qiáng)治療效果，如青霉素或萬古霉素與氨基苷類藥物進(jìn)行聯(lián)合治療。高濃度氨基苷類藥物與青霉素或萬古霉素有協(xié)同作用，聯(lián)合用藥可加強(qiáng)對腸球菌屬的抗菌活性。同時要看腸球菌屬對高濃度慶大霉素是否敏感，若敏感則說明可發(fā)生協(xié)同作用[6]。因此實驗室對腸球菌屬應(yīng)同時用高濃度慶大霉素和高濃度鏈霉素檢測耐氨基苷類腸球菌。我院藥物敏感性試驗結(jié)果顯示，糞腸球菌和屎腸球菌對高濃度慶大霉素的耐藥率較高，因此臨床上應(yīng)根據(jù)藥物敏感性試驗結(jié)果選擇敏感的抗菌藥物進(jìn)行治療，這對于控制耐氨基苷類腸球菌的產(chǎn)生非常重要。從2006年至2010年，檢出4株耐萬古霉素的屎腸球菌、3株耐萬古霉素的糞腸球菌。目前認(rèn)為對萬古霉素耐藥的腸球菌是由質(zhì)粒介導(dǎo)，并且傳導(dǎo)到其他細(xì)菌，引起耐藥性增多[7]。屎腸球菌的耐藥性普遍高于糞腸球菌[8]，對高濃度的慶大霉素也是一樣。

總之，近來不斷出現(xiàn)耐萬古霉素的腸球菌，給臨床用藥帶來了極大的困難。應(yīng)加強(qiáng)對萬古霉素的用藥監(jiān)測，避免造成耐藥菌株的廣泛傳播;加強(qiáng)院內(nèi)感染控制，減少耐藥菌株引起的醫(yī)院環(huán)境污染;合理使用抗生素，嚴(yán)格使用原則，避免濫用，減少多重耐藥菌的產(chǎn)生。

[1]羅燕萍，白立彥，李俊玲，等．211株腸球菌屬細(xì)菌對18種抗生素的耐藥性特征[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2004，14(1):80－82．

[2]童照威，李曉峰，宋 群，等．常見革蘭陽性球菌分布特征及藥敏分析[J]．中國衛(wèi)生檢驗雜志，2011，21(2):401 －403．

[3]劉淑梅，許淑珍，高向遠(yuǎn)，等．1 000株腸球菌耐藥性分析[J]．中國抗生素雜志，2003，28(11):673 －675．

[4]郭衛(wèi)真，劉 妮，盧東榮，等．457株腸球菌的分布及其耐藥性分析[J]．當(dāng)代醫(yī)學(xué)雜志，2011，17(3):42 －43．

[5]楊其軍．腸球菌屬細(xì)菌對抗菌藥物的耐藥性分析[J]．中國藥業(yè)，2010，19(17):9 －10．

[6]姜梅杰，孫啟英，劉廣麗，等．2007－2009年屎腸球菌及糞腸球菌的耐藥性分析[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21(9):1 889－1 891．

[7]郭玲嬌，狄云香，李秀麗．耐萬古霉素屎腸球菌耐藥基因的研究[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21(9):1 747－1 748．

[8]ELsner HA，Sobottka I，F(xiàn)eucht HH，et al．In vitro susceptibilities of enterococcal blood culture isolates from the Hamburgarea to ten antibiotics[J]．Chemotherapy，2000，46(2):104．