淫羊藿多糖的研究進(jìn)展及開(kāi)發(fā)前景

付 亮，袁璟亞，周永紅，丁春邦,*

(1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與理學(xué)院，四川 雅安 625014；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 作物基因資源與遺傳改良教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 611130)

淫羊藿多糖的研究進(jìn)展及開(kāi)發(fā)前景

付 亮1，袁璟亞2，周永紅2，丁春邦1,*

(1.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與理學(xué)院，四川 雅安 625014；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 作物基因資源與遺傳改良教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 611130)

淫羊藿多糖是淫羊藿的主要有效成分之一，具有調(diào)節(jié)免疫、抗病毒、抗氧化等功能，且安全無(wú)毒，具有良好的開(kāi)發(fā)前景?，F(xiàn)從化學(xué)組成及含量、生物活性、安全性、炮制方法對(duì)含量的影響以及提取5個(gè)方面，對(duì)淫羊藿多糖的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，探討淫羊藿多糖的開(kāi)發(fā)前景，為淫羊藿多糖的合理開(kāi)發(fā)利用提供參考。

淫羊藿；多糖；研究進(jìn)展；開(kāi)發(fā)前景

淫羊藿又名仙靈脾，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，是小檗科(Berberidacea)淫羊藿屬(Epimedium)多年生草本植物，為我國(guó)傳統(tǒng)補(bǔ)益中藥?！侗静菥V目》記載：莖、葉入藥，辛溫?zé)o毒，有堅(jiān)筋骨、益精氣、補(bǔ)腰膝、強(qiáng)心力等作用。目前全世界約有55個(gè)種[1]，中國(guó)有48個(gè)種[2]。在日本、韓國(guó)、東南亞和地中海等地區(qū)，淫羊藿也被作為藥用植物[3]。近年來(lái)關(guān)于淫羊藿的藥理研究表明，淫羊藿對(duì)心腦血管系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)、骨髓系統(tǒng)等有一定的保健作用[4]，具有調(diào)節(jié)雄性發(fā)育、調(diào)節(jié)免疫、抑制腫瘤、改善心血管系統(tǒng)功能、緩解婦女更年期癥狀、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、抗骨質(zhì)疏松、抗肝毒素、抗氧化、抗衰老等多種生理活性[5-8]。

多糖是生物有機(jī)體內(nèi)普遍存在的一類生物大分子物質(zhì)，由10個(gè)以上的單糖分子聚合而成(通常由幾百甚至幾千個(gè)單糖分子組成)，它不僅參與細(xì)胞骨架的構(gòu)成，而且是多種內(nèi)源性生物活性分子的重要組成部分[9-10]。研究發(fā)現(xiàn)，多糖能控制細(xì)胞分裂和分化，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)與衰老，尤其在抗腫瘤、抗病毒、降血脂、增強(qiáng)免疫功能等方面作用更為明顯[11-12]，如香菇多糖、豬苓多糖和靈芝多糖等的抗腫瘤活性，黃芪多糖、人參多糖的免疫增強(qiáng)活性等。到目前為止，已有300多種多糖類化合物從天然產(chǎn)物中被提取出來(lái)，其中從中藥中提取的水溶性多糖更是引起中醫(yī)藥和食品工業(yè)研究人員的重視[13]。

淫羊藿的主要成分是黃酮類和多糖，此外還含有生物堿、木脂素類、蒽醌類、花青素、植物甾醇、萜類化合物、綠原酸、必需脂肪酸、微量元素等營(yíng)養(yǎng)成分或生物活性成分[9]。目前對(duì)淫羊藿屬植物的化學(xué)研究多集中于黃酮類成分，也有對(duì)含量較少的揮發(fā)油、棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞麻酸的報(bào)道，但對(duì)淫羊藿多糖的報(bào)道相對(duì)較少。近年來(lái)，由于生物學(xué)、化學(xué)等學(xué)科的飛速發(fā)展，人們對(duì)多糖及其復(fù)合物的活性作用有了越來(lái)越深入的認(rèn)識(shí)，使得多糖的研究已成為目前生命科學(xué)中最活躍的研究領(lǐng)域之一[14]。藥理學(xué)研究顯示，淫羊藿多糖具有抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、延緩衰老等多種活性[8,15-16]。現(xiàn)從淫羊藿多糖的化學(xué)組成及含量、生物活性、安全性、提取方法、炮制方法對(duì)其含量的影響以及開(kāi)發(fā)前景等方面將淫羊藿多糖近十幾年的研究進(jìn)展綜述如下。

1 淫羊藿多糖的化學(xué)研究

1.1 化學(xué)組成

淫羊藿經(jīng)水提醇沉后得到粗多糖，再經(jīng)Sevag法除蛋白，透析、冷凍干燥得到精制的淫羊藿多糖，含量為88.84%[17]。蘇瑛等[18]將淫羊藿粗多糖經(jīng)DEAE-52和葡聚糖凝膠柱層析分離純化得到一具有多糖典型結(jié)構(gòu)的組分，HPLC分析發(fā)現(xiàn)，此組分是由鼠李糖、果糖、葡萄糖和2個(gè)不確定的單糖組分組成的雜多糖。饒金華等[19]采用柱前衍生化高效液相色譜法分析其單糖組成及比例，結(jié)果為甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖，物質(zhì)的量之比為0.60:0.74:1.00:0.29: 2.29:1.43。而李德耀等[20]將淫羊藿多糖分離純化后得到l0種組分，相對(duì)分子質(zhì)量在122～656679，其中純度最高(97.97%)的組分相對(duì)分子質(zhì)量為70374。

1.2 含量測(cè)定

目前淫羊藿多糖的含量測(cè)定方法主要是苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法，多糖含量因藥材品種、產(chǎn)地、藥用部位不同而存在一定的差異。

采用苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法測(cè)定朝鮮淫羊藿的多糖含量，結(jié)果分別為31.11%、25.06%，說(shuō)明兩種測(cè)定方法存在一定的差異，可能是因?yàn)橐蜣蕉嗵菫殡s多糖，用葡萄糖做對(duì)照品造成了一定的誤差[21]。

采用苯酚-硫酸法測(cè)定朝鮮淫羊藿、箭葉淫羊藿、柔毛淫羊藿的多糖含量，結(jié)果朝鮮淫羊藿的含量最高[22]。對(duì)來(lái)自不同產(chǎn)地和不同品種淫羊藿的多糖含量檢測(cè)結(jié)果表明，不同產(chǎn)地同一品種間的含量相差不大，而不同產(chǎn)地且不同品種的含量差異較大，在10%左右[22-23]。

對(duì)貴州不同淫羊藿屬植物不同部位的多糖進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果表明：除1個(gè)居群為葉＞根＞莖和葉柄外，其他9種的趨勢(shì)為根＞葉＞莖和葉柄[23]，即淫羊藿不同部位的多糖含量存在差異。

2 淫羊藿多糖的生物活性

2.1 免疫作用

觀察淫羊藿多糖對(duì)荷瘤以及環(huán)磷酰胺處理所致免疫功能低下小鼠的效應(yīng)，結(jié)果淫羊藿多糖可增大荷瘤小鼠縮小的免疫器官，提高脾指數(shù)、血清溶血水平以及空斑形成細(xì)胞的溶血能力，對(duì)小鼠的遲發(fā)性超敏反應(yīng)也產(chǎn)生顯著影響，但對(duì)其瘤質(zhì)量影響不明顯。表明淫羊藿多糖能提高機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫功能，刺激細(xì)胞免疫應(yīng)答，但又不能直接抑制、殺傷腫瘤細(xì)胞[15,24-26]。

羅燕等[27]研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿多糖可明顯升高雛雞淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、外周血中性粒細(xì)胞吞噬率和吞噬指數(shù)以及禽流感病毒和雞新城疫病毒抗體效價(jià)和紅細(xì)胞C3b花環(huán)率，并降低紅細(xì)胞IC花環(huán)率，且以中劑量效果較佳。孟憲麗等[28]研究了淫羊藿多糖對(duì)老年大鼠神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)老年性變化的影響，結(jié)果表明淫羊藿多糖能明顯提高老年大鼠下丘腦和皮質(zhì)中皮質(zhì)β-內(nèi)啡肽含量，并使老年大鼠白細(xì)胞介素-2、自然殺傷細(xì)胞活性明顯增強(qiáng)。提示淫羊藿多糖能明顯提高老年機(jī)體免疫功能和神經(jīng)肽含量，從而延緩衰老。對(duì)此，分子水平的研究發(fā)現(xiàn)，含淫羊藿多糖的中藥成分可以促進(jìn)細(xì)胞白介素-2、 T淋巴細(xì)胞IL-2和γ-干擾素相關(guān)mRNA的表達(dá)，進(jìn)而誘導(dǎo)產(chǎn)生相應(yīng)的產(chǎn)物[8,29]。

2.2 抗病毒作用

任宇皓等[30]將淫羊藿多糖與新城疫病毒系加入到培養(yǎng)24h的雞胚成纖維細(xì)胞中，評(píng)價(jià)其對(duì)新城疫病毒感染細(xì)胞的影響。結(jié)果表明，淫羊藿多糖在先于病毒加入時(shí)對(duì)其有抑制作用，提示它有一定的抗病毒作用，且與其濃度有相關(guān)性。Lu Yu等[8]還研究發(fā)現(xiàn)，傳染性法氏囊病毒的活性可被淫羊藿多糖成分抑制。呂岫華等[31]采用免疫酶的方法，研究淫羊藿多糖對(duì)人類皰疹病毒早期抗原激活的抑制作用，結(jié)果表明淫羊藿多糖在一定的劑量范圍內(nèi)有抑制作用且呈明顯的量效關(guān)系。

2.3 抗衰老作用

如上所述，孟憲麗等[28]研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿多糖能明顯增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能和神經(jīng)肽含量，從而延緩衰老。然而，邊曉麗等[32]采用鄰苯三酚自氧化法，對(duì)淫羊藿葉中多糖及水提液對(duì)O2ˉ·的清除作用進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明水提液對(duì)O2ˉ·有明顯清除作用，而多糖無(wú)清除能力。胡元亮等[33]研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿多糖能促進(jìn)細(xì)胞增殖和延緩細(xì)胞衰老，且具有一定的量效、時(shí)效關(guān)系。徐小芳等[34]則探討淫羊藿多糖在不同濃度、不同時(shí)間時(shí)對(duì)雞的抗氧化作用的影響，結(jié)果表明：淫羊藿多糖能明顯提高雞血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性，并能明顯降低雞血清中丙二醛含量，表明淫羊藿多糖具有抗氧化活性。衰老是一個(gè)十分復(fù)雜的過(guò)程，其機(jī)理尚未完全揭示，一般認(rèn)為，衰老可能與自由基4積累、免疫功能下降有關(guān)。淫羊藿多糖具有很強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)活性，但是未發(fā)現(xiàn)具有自由基清除活性，據(jù)此推斷，淫羊藿多糖的抗衰老作用主要是通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體免疫功能來(lái)實(shí)現(xiàn)的[35]。

2.4 促進(jìn)骨髓DNA 合成的作用

劉福春等[36]在研究淫羊藿多糖對(duì)羥基脲所致“陽(yáng)虛”小鼠的骨髓細(xì)胞增殖和DNA 合成率的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，1×106個(gè)細(xì)胞經(jīng)100μg淫羊藿多糖處理后，細(xì)胞增殖率提高72%，DNA合成率提高68%，而對(duì)正常的小鼠細(xì)胞作用不顯著，與淫羊藿煎劑的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。

丁雁等[37]在劉福春研究的基礎(chǔ)上，探討淫羊藿多糖抵抗治療艾滋病(AIDS)當(dāng)時(shí)唯一治療藥物——疊氮胸苷(AZT)的毒副作用的效果時(shí)發(fā)現(xiàn)，注射了AZT 80mg/ (kg·d) 8d后的小鼠在給予淫羊藿多糖10、20mg/(kg·d) 3d后，其外周血白細(xì)胞數(shù)目、骨髓造血干細(xì)胞和粒單系祖細(xì)胞數(shù)量、脾淋巴細(xì)胞增殖和產(chǎn)生T淋巴細(xì)胞IL-2能力顯著降低的毒副作用可部分或全部消失，提示淫羊藿多糖可以減輕AZT 的毒副作用，有助于提高AZT的用藥劑量和AIDS 病的控制和治療。

2.5 促進(jìn)肝臟干細(xì)胞增殖的作用

余文景等[13]在光鏡下觀察不同濃度淫羊藿多糖對(duì)肝臟干細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化、生長(zhǎng)、增殖及其凋亡情況，通過(guò)MTT比色法監(jiān)測(cè)肝臟干細(xì)胞的生長(zhǎng)活性。結(jié)果顯示淫羊藿多糖500μg/mL對(duì)肝臟干細(xì)胞的生長(zhǎng)有明顯的促進(jìn)作用，肝臟干細(xì)胞增殖加快，活性增強(qiáng)。

2.6 血小板凝集作用

李銳松等[38]比較了淫羊藿煎劑、多糖和粗黃酮對(duì)大鼠血小板聚集性的影響，體外實(shí)驗(yàn)表明，淫羊藿煎劑和多糖都能增加其血小板的聚集率。從體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的強(qiáng)度看，多糖是促進(jìn)大鼠血小板經(jīng)二磷酸腺苷(ADP)誘導(dǎo)聚集作用的主要成分，多糖多次灌胃后，循環(huán)中血小板數(shù)量增多，表示促進(jìn)血小板生成，同時(shí)增強(qiáng)血小板聚集作用。

3 安全性

劉愛(ài)恒等[39]以Ames實(shí)驗(yàn)，體外培養(yǎng)細(xì)胞株(CHL)染色體畸變分析及小鼠骨髓微核實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)淫羊藿多糖的致突變性，結(jié)果顯示體內(nèi)外各項(xiàng)指標(biāo)未見(jiàn)淫羊藿多糖具有誘變性。宋宏良等[40]進(jìn)一步研究其對(duì)大鼠胚胎及致畸的影響，結(jié)果淫羊藿多糖對(duì)妊娠大鼠體質(zhì)量、黃體形成與胚胎著床、活胎總數(shù)、平均數(shù)、胎仔質(zhì)量、性比例及死胎率、胎仔明顯變異(外觀及內(nèi)臟)及骨化不全沒(méi)有明顯影響，提示淫羊藿多糖沒(méi)有明顯的胚胎毒性和致畸性。這些研究表明，淫羊藿多糖安全可靠，可作為植物藥或食品添加劑來(lái)源[35]。

4 炮制對(duì)多糖含量的影響

鄒桂欣等[41]采用蒽酮-硫酸法對(duì)淫羊藿生品及羊脂炒制品中的多糖成分進(jìn)行了定性定量比較。結(jié)果表明：炮制后淫羊藿中的多糖含量(13.72%)明顯低于炮制前(18.54%)，降低率為26%(P＜0.05)，這可能是因?yàn)榕谥七^(guò)程中的高溫等造成了多糖的分解；而楊武德等[42]研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿炮制品中多糖的含量高于生品：生品(2.043%)＜鹽炒(2.101%)＜酒炙(2.124%)＜酥油制(2.128%)＜炒制(2.432%)＜羊脂炙(2.459%)，這可能是因?yàn)橐蜣浇?jīng)炮制后，其細(xì)胞大量破壁，促進(jìn)了多糖的溶出。對(duì)此，有待于進(jìn)一步研究；此外，至今未見(jiàn)炮制方式對(duì)多糖藥理影響的報(bào)道。

5 淫羊藿多糖的提取

天然多糖的提取主要有以下幾種方法[35]：1)熱水浸提法、2)水提醇沉法、3)堿提取法、4)酸提取法、5)微波輔助提取法、6)超聲波輔助提取法、7)酶提取法。

目前提取淫羊藿多糖最普遍的方法是水提醇沉法。許多研究只是將干燥淫羊藿全草于蒸餾水中浸泡過(guò)夜，然后在固定水溫下提取若干時(shí)間，再用無(wú)水或95%乙醇沉淀，這種方法操作簡(jiǎn)單，但費(fèi)時(shí)費(fèi)力費(fèi)料，而且提取的多糖含雜質(zhì)較多，不易達(dá)到到商品要求。如劉寶巖[43]用此方法考查了淫羊藿粗多糖最優(yōu)提取方法，得出最合理的提取分離條件為：沸水提取，料液比1:15，提取時(shí)間1.5h，重復(fù)提取3次，提取液與95%乙醇體積比為1:3，并經(jīng)考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定所得粗多糖中的蛋白含量約為1.33%。劉迎等[44]用蒽酮-硫酸法測(cè)定了淫羊藿普通粉和超微粉對(duì)其多糖溶出量的影響。結(jié)果表明，在相同的條件下，超微粉中淫羊藿多糖提取量較普通粗粉提高了315.15%。這可能是因?yàn)槌⒎鬯楹笏幉募?xì)粉粒的相對(duì)表面積增大，從而提高了有效成分的溶出速率；由于細(xì)胞壁在粉碎時(shí)大部分被破壞，有效成分不需要通過(guò)細(xì)胞壁和細(xì)胞膜就能釋放出來(lái)，這樣就提高了藥物的釋放速度和釋放量。

柳鳳祥等[45]采用超聲波輔助提取法，按正交設(shè)計(jì)研究了樣水比例、超聲時(shí)間和溫度對(duì)淫羊藿多糖提取率的影響。結(jié)果顯示，3種因素對(duì)多糖提取的影響程度依次為超聲時(shí)間、溫度和樣水比例，材料在10倍量水、60℃水浴條件下超聲40min時(shí)所得產(chǎn)品中淫羊藿多糖的含量最高且耗能最低。而羅燕等[46]研究表明影響多糖提取含量的主次因素為超聲次數(shù)＞超聲時(shí)間＞料液比＞浸泡溫度，其最優(yōu)水平組合為50℃浸泡溫度、30倍的料液比、30min超聲時(shí)間、3次超聲次數(shù)。超聲波的作用是在溶劑和樣品之間產(chǎn)生聲波空化作用，導(dǎo)致溶液內(nèi)氣泡的形成、增長(zhǎng)和爆破壓縮，從而使固體樣品分散，增大樣品與萃取溶劑之間的接觸面積，提高目標(biāo)物從固相轉(zhuǎn)移到液相的傳質(zhì)速率。蘇瑛等[47]采用酶提取法，以淫羊藿干粉為材料，分別考察了料液比、酶加入量及酶作用時(shí)間對(duì)淫羊藿多糖提取率的影響。結(jié)果顯示，在3 個(gè)因素中，提取時(shí)間為主要因素，其次是酶的加入量，而料液比影響不大。最佳工藝條件為：淫羊藿干粉加25倍的水浸泡30min，加入1.6%的纖維素酶于50℃，pH 5.0 的條件下反應(yīng)1.5h。酶促反應(yīng)特點(diǎn)在于催化效率高，具有專一性，反應(yīng)條件溫和，所以此提取過(guò)程只破壞細(xì)胞壁，且條件穩(wěn)定不影響其他成分，還大大縮短了提取時(shí)間 。

以上研究歸根結(jié)底只限于藥材顆粒與溶劑的接觸及溶質(zhì)的滲出，只是縮短了提取時(shí)間和提高了提取率而并沒(méi)有解決提取的粗多糖中雜質(zhì)較多的問(wèn)題。為了獲得高純度的淫羊藿多糖，需要除去淫羊藿粗多糖中的蛋白質(zhì)、脂類、色素等雜質(zhì)。在淫羊藿精制過(guò)程中，一般采用Sevag法除去蛋白質(zhì)，用石油醚或乙醚除去脂質(zhì)，采用透析法除去小分子雜質(zhì)，用活性炭除去色素[35]。陳建芬[17]、陳鴻英[21]和朱永智[22]等采用水提醇沉法獲得淫羊藿粗多糖，然后采用Sevag法重復(fù)多次除去蛋白質(zhì)，透析后獲得淺棕色淫羊藿多糖粉末。嚴(yán)贊開(kāi)等[48]在用水提醇沉法得到淫羊藿粗多糖后，將其溶于水，用石油醚除色素，Sevag法除去蛋白后得淫羊藿多糖，收率為17.6%；而楊武德等[42]先將淫羊藿粉末用80%乙醇回流除去單糖、多聚糖及其他醇溶性雜質(zhì)，然后再用水提醇沉法提取獲得粗多糖，再用活性炭脫色，Sevag法除去蛋白，最后經(jīng)透析、干燥等步驟獲得精制淫羊藿粉末，得多糖含量為2.043%。鄭曉翠等[49]以蛋白質(zhì)脫除率和多糖損失率為考察指標(biāo)，比較Sevag法、氯化鈉法、氯化鈣法、鞣酸法及鹽酸法的脫蛋白效果。結(jié)果Sevag法脫蛋白效果較好且多糖損失率最低。盡管如此，此法還是效率較低、污染高，操作繁瑣且成本較高，對(duì)此李瑞軍等[50]用4種大孔吸附樹(shù)脂考察了其對(duì)淫羊藿多糖中蛋白的去除作用， 討論了pH值、鞣酸、上樣量等對(duì)樹(shù)脂去蛋白效率的影響，結(jié)果表明，該方法對(duì)淫羊藿粗多糖中的蛋白具有較高的去除效率，淫羊藿粗多糖中的蛋白含量由1.2%下降到0.035%。Lu Yu等[8]用水提醇沉法得淫羊藿粗多糖后，用三氯乙酸除蛋白，而后用大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)一步去除蛋白質(zhì)和色素，用DEAE離子交換樹(shù)脂除去其他糖類，再經(jīng)超濾和冷凍干燥后得含量20.59%的精制多糖。

6 淫羊藿多糖的開(kāi)發(fā)前景

如上所述，淫羊藿多糖的生物活性及安全性，表明其在制藥、保健品和食品工業(yè)中具有光明的開(kāi)發(fā)前景。我國(guó)淫羊藿資源種類豐富，多糖含量較高，從中提取多糖并應(yīng)用于生產(chǎn)具有較高的可行性。當(dāng)前，已有多種生物多糖，如靈芝多糖、云芝多糖、黃芪多糖、蘆薈多糖、枸杞多糖、海洋多糖等實(shí)現(xiàn)商品化生產(chǎn)，因此，我們有理由相信，淫羊藿多糖的商品化生產(chǎn)也將會(huì)帶來(lái)良好的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。

6.1 淫羊藿多糖開(kāi)發(fā)過(guò)程中存在的問(wèn)題及困難

當(dāng)前，淫羊藿多糖開(kāi)發(fā)過(guò)程中仍然存在許多問(wèn)題，制約了其商品化生產(chǎn)，主要表現(xiàn)在：1) 淫羊藿多糖的組成成分不夠明確；2) 淫羊藿多糖的藥理活性與毒性研究不夠深入；3) 淫羊藿多糖產(chǎn)品中雜質(zhì)含量較高，其提取和純化工藝亟待改進(jìn)；4) 缺乏對(duì)淫羊藿多糖提取和純化中試放大工藝及其經(jīng)濟(jì)效益的研究；5) 缺乏針對(duì)多糖的淫羊藿野生資源質(zhì)量的系統(tǒng)研究；6) 淫羊藿野生資源有限，亂采濫挖現(xiàn)象嚴(yán)重。

6.2 淫羊藿多糖的開(kāi)發(fā)策略

為了充分開(kāi)發(fā)我國(guó)的淫羊藿多糖資源，實(shí)現(xiàn)其產(chǎn)業(yè)化，筆者建議，在開(kāi)發(fā)過(guò)程中注重以下策略：

1)系統(tǒng)研究淫羊藿中多糖的藥理活性與毒性，如其刺激骨髓DNA合成、血小板凝集作用及毒性的研究止于上世紀(jì)90年代，至今未有更深入的研究報(bào)道。建議在前人研究基礎(chǔ)上，采用活性導(dǎo)向分離(bioactivity guided isolation) 靶標(biāo)技術(shù)等方法篩選、發(fā)現(xiàn)淫羊藿多糖活性成分并進(jìn)一步深入、拓寬其藥理及毒性研究，拓展藥物和食品的來(lái)源，增加淫羊藿產(chǎn)品的科技含量、推進(jìn)淫羊藿藥材的現(xiàn)代化和國(guó)際化進(jìn)程[51]。

2)提高淫羊藿多糖的提取效率，完善其精制工藝，降低其提取成本。超聲波提取法是目前公認(rèn)的最簡(jiǎn)單有效的提取方法，本實(shí)驗(yàn)室也正在開(kāi)展淫羊藿總黃酮和多糖的超聲波-索氏分步提取，如此既可提高提取效率，實(shí)現(xiàn)資源的合理充分利用，又可大大降低提取成本。此外，雜蛋白的去除一直是淫羊藿多糖分離、純化的瓶頸，為了克服Sevag法的缺點(diǎn)，今后應(yīng)加強(qiáng)離子交換技術(shù)、膜技術(shù)和分子篩技術(shù)等在淫羊藿多糖雜蛋白去除過(guò)程中的應(yīng)用研究[35]。

3)在實(shí)驗(yàn)室提取及分離純化結(jié)論的基礎(chǔ)上，對(duì)淫羊藿多糖的中試放大工藝及經(jīng)濟(jì)效益進(jìn)行研究。中試放大驗(yàn)證是中藥制藥工程技術(shù)的四要素之一，其目的是驗(yàn)證、復(fù)審和完善實(shí)驗(yàn)室工藝所確定的反應(yīng)條件，為正式工業(yè)化生產(chǎn)選定設(shè)備結(jié)構(gòu)、材質(zhì)、安裝條件和車間布置以及計(jì)算物質(zhì)量和能量消耗等以權(quán)衡其經(jīng)濟(jì)效益。實(shí)驗(yàn)室研究轉(zhuǎn)化為大規(guī)模生產(chǎn)的過(guò)程中一般都將發(fā)生質(zhì)的變化，許多重大工程技術(shù)問(wèn)題也往往出現(xiàn)在這一階段[52]，因此中試放大驗(yàn)證至關(guān)重要，是中藥現(xiàn)代化的關(guān)鍵，在食品添加劑的制備等方面上也具有重要意義。

4)系統(tǒng)考察淫羊藿不同種、生境、采摘時(shí)期、藥用部位、貯藏方式和炮制方法等對(duì)淫羊藿多糖的影響，總結(jié)淫羊藿多糖的分布規(guī)律：大量研究表明，淫羊藿多糖的種類與含量不僅受到遺傳因子和環(huán)境因子的影響，還可能受到加工技術(shù)和栽培技術(shù)的制約[53]。研究淫羊藿多糖的分布和變異規(guī)律，有助于其提取和制備，并為藥材道地性機(jī)制的闡明提供科學(xué)依據(jù)[51]。

5)實(shí)現(xiàn)淫羊藿野生資源的保護(hù)與撫育及人工栽培。在淫羊藿自然分布的群落類型中實(shí)施野生撫育或者人工半撫育，對(duì)于保護(hù)淫羊藿野生資源、擴(kuò)大種群數(shù)量和生存地域、突出物種生物學(xué)特性與產(chǎn)地生態(tài)適宜性、彌補(bǔ)人工栽培的局限性以及保證道地藥材供應(yīng)等都具有一定的現(xiàn)實(shí)意義；用標(biāo)準(zhǔn)化農(nóng)業(yè)規(guī)范(GAP)人工栽培的淫羊藿代替或部分代替野生藥材是淫羊藿野生藥材保護(hù)與可持續(xù)利用的重要途徑，不僅具有可觀的經(jīng)濟(jì)效益，而且具有巨大的社會(huì)效益[54]。

7 結(jié) 語(yǔ)

隨著社會(huì)進(jìn)步和知識(shí)水平的提高，人們?cè)絹?lái)越深刻地認(rèn)識(shí)到化學(xué)合成藥物、保健品及食品添加劑的缺陷，也將目光越來(lái)越多地投入到以植物內(nèi)含物為代表的天然活性產(chǎn)物中；從藥用植物中提取、分離和純化天然藥物成分，特別是對(duì)防治癌癥、心腦血管疾病等重大疾病的生物活性成分的研究，一直是國(guó)際醫(yī)藥學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一[55]。淫羊藿多糖作為中藥淫羊藿的主要成分有著不容忽視的地位，在癌癥、心腦血管疾病等重大疾病的防治方面具有廣闊的開(kāi)發(fā)前景，在許多藥理指標(biāo)上，其效果優(yōu)于或作用特點(diǎn)不同于淫羊藿苷或總黃酮，但多糖的研究與黃酮類相比尚不夠深入，所以筆者建議對(duì)淫羊藿多糖的研究投入更多的精力，從化學(xué)、藥學(xué)、生物學(xué)、農(nóng)學(xué)等角度加大其研究力度，推動(dòng)我國(guó)醫(yī)藥工業(yè)和食品工業(yè)的發(fā)展。

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Research Progress and Development Prospects of Epimedium Polysaccharides

FU Liang1，YUAN Jing-ya2，ZHOU Yong-hong2，DING Chun-bang1,*
(1. College of Life and Basic Sciences, Sichuan Agricultural University, Ya，an 625014, China； 2. Key Laboratory of Crop Germplasm Resources and Gene Improvement, Ministry of Education, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China)

Epimedium polysaccharides are one of the major groups of active ingredients in Epimedium with immunoregulatory, anti-virus and anti-oxidant functions. The polysaccharides are safe and non-poisonous and have excellent development prospects. Here we review recent research progress in the chemical composition and contents, bioactivity, safety and extraction of Epimedium polysaccharides and the effect of traditional Chinese medicine processing on polysaccharide content in Epimedium. Besides, further prospects for exploitation of Epimedium polysaccharides are probed.

Epimedium；polysaccharide；research progress；prospects

R284

A

1002-6630(2012)03-0261-06

2011-03-19

教育部長(zhǎng)江學(xué)者和創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(IRT0453)；四川省科技廳應(yīng)用基礎(chǔ)項(xiàng)目(2008JY0094-2)

付亮(1984—)，男，碩士研究生，主要從事藥用植物資源研究。E-mail：fuliangrain@126.com

*通信作者：丁春邦(1966—)，女，教授，博士，主要從事植物學(xué)研究。E-mail：dcb@sicau.edu.cn