飼料中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇毒素含量及其對畜禽的影響

蔣竹英，李麗立

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所，長沙 410128；2.中國科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，長沙 410125）

近年來，隨著生活水平的不斷提高，人們開始意識到食品安全問題的重要性，飼料中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）的毒性作用不容忽視。雖然DON毒性作用較其他真菌毒素小，但因其對谷物、飼料及飼料原料的污染居鐮刀菌毒素之首，同時DON常與其他真菌毒素共存，由于不同毒素間具有協(xié)同作用，將加劇毒素的毒性作用和中毒癥狀的嚴(yán)重程度。人和動物在誤食該毒素污染的糧食谷物和飼料后常引起嘔吐、頭痛、發(fā)熱和惡心、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)和反應(yīng)遲鈍等中毒癥狀，嚴(yán)重時損害造血系統(tǒng)造成死亡。

1 常用飼料中DON毒素含量情況

我國國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，在食用小麥、面粉中DON含量應(yīng)≤1000 μg·kg-1。王曉云等通過氣相色譜方法對河北、湖南等6省糧食中DON含量進行檢測，結(jié)果顯示，DON污染率為66.46%，玉米為25.88 μg·kg-1，小麥為50.04 μg·kg-1[1]。Tutelyan等采用TLC和HPLC法對蘇聯(lián)1989—2002年的5652份小麥、黑麥、大麥和玉米樣品中的DON和ZEN含量進行了檢測，從Krasnodar地區(qū)采集的2166份樣品中的1498份檢出了DON的污染，樣品中DON污染量為0.1～8.6 ppm[2]。

1.1 玉米

我國部分地區(qū)小麥、玉米被多組分真菌毒素污染，以DON檢出率最高，玉米受DON、DON-3-G、3-A-DON、15-A-DON和ZEN的污染比小麥重[3]。呂明斌等檢測了北方地區(qū)飼料和飼料原料中幾種霉菌毒素含量，結(jié)果顯示，71份玉米中DON含量最高達 8.60mg·kg-1，平均為 3.47mg·kg-1，其中含量＞1mg·kg-1的高達92%，玉米副產(chǎn)品中更是高達 17.47mg·kg-1，平均為 3.38mg·kg-1，而小麥及其他副產(chǎn)品含量卻相對較低，最高為2.69mg·kg-1，平均含量僅為0.65mg·kg-1[4]。

1.2 小麥

我國國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定小麥、面粉、玉米及玉米面中DON限量標(biāo)準(zhǔn)為1mg·kg-1。加拿大市場上的小麥?zhǔn)称访姘蠨ON毒素在樣品中的檢出率為43%，毒素含量9～4060 μg·kg-1。美國市場上小麥、燕麥等面包中DON毒素含量為1600～5400 μg·kg-1[5]。美國印地安那州檢測到 88%的小麥中含有DON，蘇聯(lián)檢測到81.3%的小麥中含有DON，在所有糧谷及糧谷食品中，小麥及其制品受DON污染最為嚴(yán)重。

1.3 谷物

Tanaka等報道，在29份谷物樣品中DON和雪腐鐮刀菌烯醇的檢出率分別是90%和79%，其中76%的樣品同時污染這兩種毒素[6]。劉陽等最先分離、檢測出結(jié)合態(tài)DON，證實谷物中結(jié)合態(tài)DON的存在，并檢測出小麥中結(jié)合態(tài)DON含量最高是游離態(tài)DON含量的270%[7]。

2 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇對畜禽的影響

2.1 對豬的影響

DON對家禽免疫功能的影響很小，只有在高劑量的條件下才引起家禽免疫功能障礙，反芻動物瘤胃微生物具有解毒作用，因而很少出現(xiàn)嘔吐等癥狀，豬對DON最為敏感。Drochne等在斷奶仔豬飼料中分別添加DON 0、300、600、1200 μg·kg-1，連續(xù)飼喂8周，結(jié)果發(fā)現(xiàn)DON添加量為60 μg·kg-1，血清IgA含量顯著增加（P＜0.05）[8]。給豬飼喂自然產(chǎn)生的DON 0.6～2mg·kg-1飼糧可導(dǎo)致其采食量和體增重下降[9]。Mikami等給體外培養(yǎng)的豬肝細胞進行DON處理，6 h后100、10 μg·mL-1組和24 h 后100、10、1、0.1 μg·mL-1組出現(xiàn)細胞凋亡，并表現(xiàn)為劑量依賴性，Cas?pase-3表達上調(diào)，培養(yǎng)基中白蛋白含量在DON 100、10 μg·mL-1組顯著降低（P＜0.05），結(jié)果表明，通過激話Caspase-3誘導(dǎo)豬肝細胞凋亡并且降低白蛋白的分泌[10]。

DON可顯著抑制豬卵母細胞的成熟，使培養(yǎng)的豬子宮內(nèi)膜細胞減少，細胞出現(xiàn)線粒體腫脹、細胞膜破裂和細胞質(zhì)空泡化等表現(xiàn)，流式細胞術(shù)（FCM）檢測表明，DON影響細胞周期的分布，抑制細胞進入S期，使細胞停滯在G0/G1期，具有抗增殖作用[11]。劉秀芳等采用不同濃度DON（0.25～1010 μg·mL-1）作用于豬髖動脈內(nèi)皮細胞（PIEC）和人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）24 h，結(jié)果顯示，高濃度DON可改變細胞的形態(tài)；不同濃度的DON均可抑制細胞的增殖；TUNEL凋亡檢測結(jié)果顯示，不同濃度的DON對這兩種細胞均有誘導(dǎo)凋亡的作用；對于PIEC細胞，在DON濃度為0.5 μg·mL-1，凋亡率達到最高（71.74%）；HUVEC細胞則在DON濃度為5 μg·mL-1時，凋亡率達到最高（26.61%）[12]。DON可在豬體內(nèi)吸收迅速，給藥后30 min內(nèi)就能達到血藥峰濃度,口服DON的吸收率為0.82，其在豬體內(nèi)的分布過程短暫，消除半衰期為3.9 h，而且很少在組織中蓄積，在豬飼料中添加DON 2.5mg·kg-1，連續(xù)飼喂2.5 d，檢測發(fā)現(xiàn)DON主要從尿中以原型或結(jié)合態(tài)排泄，少量以原型或脫環(huán)氧形式從糞便中排泄，喂后20 min內(nèi)血漿中即可發(fā)現(xiàn)DON，大部分與葡萄糖醛酸結(jié)合[13]。錢慧慧等選用健康閹公豬10頭，隨機分為兩組，一組經(jīng)乳靜脈注射DON，注射劑量為75 μg·kg-1體重，另一組經(jīng)乳靜脈注射生理鹽水，研究結(jié)果顯示，染毒劑量75 μg·kg-1體重組靜注后約5～10 min開始出現(xiàn)異常反應(yīng)，免疫組化法定位結(jié)果顯示，在腎小囊的壁層發(fā)現(xiàn)有DON的分布[14]。盧培成等研究結(jié)果顯示，在75 μg·kg-1體重給藥組中，脾組織中的血管壁周圍見有DON陽性反應(yīng)顆粒，而對照組未見陽性反應(yīng)顆粒[15]。牛更智等研究表明，免疫組織化學(xué)染色法可以成功應(yīng)用于定位豬全身組織中DON的分布情況[16]。

2.2 對家禽的影響

與豬相比，家禽對DON的耐受性較強。當(dāng)飼料中DON含量達到16～20mg·kg-1時才出現(xiàn)拒食和體重降低的現(xiàn)象。禽類對DON較為耐受可能是由于對DON的少量吸收（約為1%）和迅速消除?；痣u口服DON時的吸收率只有0.96%。雞食入這種毒素后,只有很少量的DON以原型排出。雞飼用添加DON 18mg·kg-1的飼料后無顯著影響，嘔吐的機理可能是毒素刺激了延髓化學(xué)感受器的觸發(fā)區(qū)所造成的[17]。

2.3 對反芻動物的影響

通常DON對反芻動物不會造成危害，因此，國內(nèi)外反芻動物飼料中DON的最低限量沒有要求。當(dāng)飼料中DON含量＜12mg·kg-1時，對奶牛不會產(chǎn)生影響[18]。奶牛對DON吸收率＜1%，而牛乳中以原型或結(jié)合物形式存在的DON濃度＜4 g·mL-1。

3 小結(jié)

DON是廣泛存在于谷物和飼料中的一種霉菌毒素，其不僅影響動物的采食量，而且降低動物的生長性能。因此，谷物和飼料在田間、收獲及在儲存過程中一旦被DON污染，會給人類和養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的危害。盡管人們開始意識到食品安全問題的重要性，并且對DON做了大量的研究，但是目前有關(guān)脫氧雪腐鐮刀菌烯醇在體內(nèi)的殘留規(guī)律尚不清楚，需要更加系統(tǒng)化、更加全面的研究。

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