豬用疫苗質(zhì)量把控及免疫效果評價

向丕元，李中銀

(1.四川省華派生物制藥有限公司，四川簡陽641401；2.四川伊禾動物藥品有限公司，四川成都610066)

隨著養(yǎng)豬規(guī)?；彤a(chǎn)業(yè)化的發(fā)展，我國豬病流行日趨復(fù)雜，臨床表現(xiàn)主要為多病原混合感染和繼發(fā)感染。豬病防控的好壞直接影響豬群的生產(chǎn)成績和養(yǎng)豬經(jīng)濟效益。豬病防控仍然要堅持預(yù)防為主的方針。預(yù)防是一種主動的、積極的、節(jié)約性手段，而治療則是一種被動的、消極的、消耗性補救措施，此外，有些疫病也是無法治好的。疫苗接種則是預(yù)防和控制豬病最經(jīng)濟、最有效的手段，而疫苗接種的整體效果與疫苗質(zhì)量密切相關(guān)。嚴格把控疫苗質(zhì)量無疑成為豬病防控工作的重要環(huán)節(jié)，科學(xué)、客觀、公正評價疫苗的免疫效果更是生產(chǎn)實際中不可回避的問題。

一、疫苗廠家的選擇

1.疫苗廠家必須是經(jīng)農(nóng)業(yè)部獸藥GMP(獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范)認證通過的正規(guī)生產(chǎn)廠家，豬場業(yè)主可通過《中國獸藥信息網(wǎng)》的國家獸藥基礎(chǔ)信息查詢系統(tǒng)進行查詢，核對農(nóng)業(yè)部官方網(wǎng)站公布的獸藥生產(chǎn)GMP證書號。

2.疫苗產(chǎn)品必須是經(jīng)農(nóng)業(yè)部審批并下達有批準文號的正規(guī)產(chǎn)品，豬場業(yè)主可通過《中國獸藥信息網(wǎng)》的國家獸藥基礎(chǔ)信息查詢系統(tǒng)進行查詢，核對農(nóng)業(yè)部官方網(wǎng)站公布的獸藥產(chǎn)品批準文號。

3.豬場業(yè)主必須深入了解、明白和比較疫苗廠家的產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)控體系和技術(shù)服務(wù)體系，必要時可親臨疫苗廠家考察和交流。

4.產(chǎn)品價格也是豬場業(yè)主疫苗取舍關(guān)注的焦點，只有綜合性價比高的產(chǎn)品才能進入豬場業(yè)主的視野。

二、疫苗產(chǎn)品的質(zhì)量評價

(一)任何一個正規(guī)的疫苗生產(chǎn)廠家，每一個疫苗產(chǎn)品生產(chǎn)前必須通過農(nóng)業(yè)部嚴格審批，獲得獸藥產(chǎn)品批準文號 批準文號格式為(獸藥生字)+(xxxx批準年號)+(xx生產(chǎn)廠家所在省、自治區(qū)、直轄市序號)+(xxx企業(yè)序號)+(xxxx產(chǎn)品編號)，如批準文號是獸藥生字(2009)221011004的產(chǎn)品，2009是指農(nóng)業(yè)部2009年批準或復(fù)核審批的，22代表四川省，101是代表四川省華派生物制藥有限公司，1004是指細胞源的豬瘟活疫苗的產(chǎn)品編號，同類產(chǎn)品生產(chǎn)毒株不同或生產(chǎn)工藝不同，產(chǎn)品編號也不一樣，如批準文號后4位是1001的產(chǎn)品是指用兔源脾淋組織生產(chǎn)的豬瘟活疫苗的產(chǎn)品編號。這一階段的評價可稱為疫苗產(chǎn)品的研究評價或注冊前評價，包括實驗室產(chǎn)品評價、中試產(chǎn)品評價和臨床試驗評價，由國家行業(yè)主管部門嚴格按法定程序進行。

(二)疫苗廠家生產(chǎn)的每一個批號的產(chǎn)品，必須嚴格執(zhí)行農(nóng)業(yè)部要求的“批檢制”和“批簽發(fā)制” 按照部頒規(guī)程要求，對產(chǎn)品進行安檢和效檢，并報中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所審核簽發(fā)。這一階段的評價可稱為疫苗產(chǎn)品的生產(chǎn)評價或產(chǎn)品評價，由疫苗生產(chǎn)廠家嚴格按規(guī)程進行。

以上兩項評價的重點在于疫苗本身質(zhì)量的穩(wěn)定性、安全性、有效性和可控性。要對疫苗的種毒、工藝、產(chǎn)品、抗體陽性率、抗體平均滴度、抗體持續(xù)時間、疫苗保護率等因素予以考慮。

(三)豬場業(yè)主如何評價出廠的疫苗

1.污染指標的檢測。病毒性活疫苗作為一個生物體，攜帶外源病毒的情況已不是新鮮事。有關(guān)豬場或機構(gòu)在普通藍耳病活疫苗中檢測出了高致病性豬藍耳病病毒，在高致病性豬藍耳病活疫苗中檢測出了普通藍耳病病毒，在豬瘟疫苗中檢測出了牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)和豬圓環(huán)病毒(PCV)。對疫苗中外源病毒的污染檢測已日益受到業(yè)內(nèi)有關(guān)專家和行業(yè)主管部門的廣泛關(guān)注，因為含有外源病毒污染的疫苗，不僅影響疫苗免疫效果的表達，而且免疫接種過程就悄然成為了疫病傳播的推手。近年來我國新發(fā)的外來動物疫病除進口動物引種檢疫把關(guān)不嚴外，進口動物疫苗(特別是活疫苗)無疑也成了“進口”外來疫病并使之傳播的“幫兇”。我國已有疫苗生產(chǎn)企業(yè)提出：豬瘟疫苗要確保支原體和牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、豬圓環(huán)病毒(PCV)、偽狂犬病毒(PRV)、豬藍耳病病毒(PRRSV)、豬細小病毒(PPV)、藍舌病病毒(BTV)、輪狀病毒(RV)等外源病毒零污染；偽狂犬疫苗要確保支原體和牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、豬圓環(huán)病毒(PCV)、豬瘟病毒(CSFV)、豬藍耳病病毒(PRRSV)等外源病毒零污染；普通藍耳活疫苗要確保支原體和牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、豬圓環(huán)病毒(PCV)、豬瘟病毒(CSFV)、偽狂犬病毒(PRV)、高致病性豬藍耳病病毒(HP-PRRSV)等外源病毒零污染。據(jù)調(diào)查，具有相關(guān)機構(gòu)、設(shè)備和人員等技術(shù)支撐的成都正大農(nóng)牧食品有限公司和四川鐵騎力士集團目前已開展了豬用疫苗部分污染指標的檢測，對疫苗質(zhì)量的要求比較嚴格。

2.抗原含量的檢測。在確保疫苗安全性高的前提下，抗原含量與免疫抗體水平成正相關(guān)。大多數(shù)病毒性活疫苗的效力是通過測定其每頭份細胞半數(shù)感染量(TCID50)高低來評判，如偽狂犬活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗等；豬瘟活疫苗的效力檢驗則通過測定其每頭份兔體感染量(RID)的高低來評判；豬乙型腦炎活疫苗是通過活病毒數(shù)量(蝕斑形成單位，PFU)來評判，有些細菌性活疫苗是以活菌計數(shù)(菌落形成單位，CFU)來評判，如仔豬副傷寒活疫苗。目前，成都正大農(nóng)牧食品有限公司和四川鐵騎力士集團開展了豬用疫苗抗原含量的檢測，而且對所用疫苗實行“批檢制”，確保所用疫苗抗原含量的相對穩(wěn)定。

三、疫苗免疫效果的評價

免疫效果評價可稱為疫苗產(chǎn)品的應(yīng)用評價或使用評價，包括疫苗質(zhì)量、影響因素、免疫學(xué)反應(yīng)(體液免疫和細胞免疫)、流行病學(xué)調(diào)查、免疫效率、經(jīng)濟效益等綜合評價。此評價的重點在于疫苗免疫后，其免疫措施的影響、安全、效力和效果。要對疫苗質(zhì)量、豬只健康、衛(wèi)生狀況、生態(tài)環(huán)境、流行病學(xué)狀況、免疫程序和飼養(yǎng)管理等因素予以考慮。豬場業(yè)主往往對疫苗評價，只關(guān)注疫苗免疫后某一特定時點的抗體水平，有技術(shù)支撐的豬場自行檢測，沒有技術(shù)支撐的豬場則委托相關(guān)機構(gòu)檢測。

(一)影響免疫效果的因素 豬群接種疫苗后，仍然出現(xiàn)相應(yīng)疫病的臨床表現(xiàn)、亞臨床感染或持續(xù)感染等免疫失敗現(xiàn)象，一些中、小規(guī)模豬場業(yè)主常常簡單地把免疫失敗歸咎于疫苗質(zhì)量，而忽略了造成免疫失敗的其他因素。在排除疫苗質(zhì)量本身的原因外，應(yīng)從以下諸多因素予以分析。

1.疫苗的儲存及運輸、免疫方法等都會影響到疫苗的質(zhì)量和免疫效果?；钜呙鐟?yīng)在冷鏈條件下儲存，儲存溫度越低，保存期越長，運輸應(yīng)有冷藏包裝，疫苗稀釋后應(yīng)在3小時內(nèi)用完；滅活疫苗應(yīng)在2-8℃儲存，切忌凍結(jié)。大多數(shù)疫苗是采用肌肉注射方法免疫，有些疫苗可采用口服，口服免疫應(yīng)增加劑量(2～4倍)，如仔豬副傷寒活疫苗、敗血鏈球菌活疫苗等，喘氣病活疫苗應(yīng)采取胸腔或肺內(nèi)注射免疫，胃腹輪三聯(lián)活疫苗應(yīng)于后海穴注射免疫。

2.母源抗體的干擾。首免時沒有檢測母源抗體水平(本底抗體)，免疫程序不盡科學(xué)、合理。

3.疫苗間的相互干擾和影響。有些疫苗(特別是活疫苗)是不能2種以上同時免疫接種的，藍耳病活疫苗免疫接種后需間隔10天以上才能接種豬瘟活疫苗。

4.免疫抑制病的影響。豬瘟、藍耳病、圓環(huán)病毒病、附紅細胞體等病都會損害豬的免疫系統(tǒng)。特別是豬瘟、藍耳病、圓環(huán)病毒病對豬免疫系統(tǒng)的損害最為嚴重，它們可破壞豬只淋巴細胞，使抗體產(chǎn)生受阻。

5.操作不規(guī)范。針頭選擇不當(dāng)，注射接種不到位。

6.不同公司提供的試劑盒，其檢測結(jié)果也有較大差異。如美國IDEXX公司、法國LSI公司、韓國JBT公司提供的豬瘟抗體監(jiān)測試劑盒(阻斷ELISA)，其特異性、敏感性和符合率都不盡相同。而國產(chǎn)豬瘟正向間接血凝(IHA)監(jiān)測試劑盒的符合率最低，規(guī)模豬場豬瘟免疫抗體監(jiān)測幾乎不使用此方法。

7.其他因素。豬群應(yīng)急反應(yīng)大，飼料發(fā)霉變質(zhì)、霉菌毒素含量過高導(dǎo)致豬只出現(xiàn)免疫抑制；豬只飲用水質(zhì)差、豬舍布局不合理、豬只密度太大、空氣流通狀況不好、仔豬保暖措施不到位、環(huán)境衛(wèi)生狀況差等因素，都可能引起豬群免疫功能下降；免疫接種前后5～7 d內(nèi)使用抗菌、抗病毒藥物也會影響豬的免疫應(yīng)答。

(二)科學(xué)評價疫苗免疫效果 疫苗出廠前的質(zhì)量把控由生產(chǎn)企業(yè)本身和其行業(yè)主管部門嚴格監(jiān)管。有條件的規(guī)模豬場要把疫苗的污染指標、抗原含量指標的檢測工作列入議事日程，最好能推行疫苗產(chǎn)品污染指標和抗原含量指標的“批檢制”。對疫苗免疫效果評價的理解不能過于狹義，不能只注意對疫苗本身的質(zhì)量評價，而忽略了疫苗免疫效果與多種影響因素相關(guān)性的綜合評價，更不能簡單地將免疫后某一特定時點的靜態(tài)抗體水平和抗體陽性率的檢測標準作為唯一的評價指標。因為在諸多因素的影響下，抗體水平和抗體陽性率會發(fā)生變化，它們是一個綜合效應(yīng)的動態(tài)過程。因此，疫苗免疫效果評價方法和指標應(yīng)充分關(guān)注多因素相互影響的動態(tài)趨勢。