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    現(xiàn)場(chǎng)DNA物證證據(jù)的提取、保存及檢驗(yàn)應(yīng)用進(jìn)展

    2012-04-12 07:07:23王基鋒楊衛(wèi)紅
    食管疾病 2012年4期
    關(guān)鍵詞:檢材物證法醫(yī)

    王基鋒,楊衛(wèi)紅

    現(xiàn)場(chǎng)DNA物證證據(jù)的提取、保存及檢驗(yàn)應(yīng)用進(jìn)展

    Advances on App lication of Abstraction,Storage and Test from Scene DNA Evidences

    王基鋒1,楊衛(wèi)紅2

    目的為了給刑事案件訴訟提供準(zhǔn)確可靠的證據(jù),在辦理兇殺、強(qiáng)奸等多種刑事案件時(shí),經(jīng)常需要對(duì)各種來(lái)源于人體的生物檢材進(jìn)行個(gè)人同一認(rèn)定檢驗(yàn)。方法 利用法醫(yī)DNA技術(shù)對(duì)現(xiàn)場(chǎng)提取的血液(斑)、精液(斑)、唾液(斑)、人體組織、骨骼等檢材進(jìn)行檢驗(yàn),為案件偵破提供科學(xué)依據(jù)或線索;利用DNA數(shù)據(jù)庫(kù)技術(shù)更大的發(fā)揮法醫(yī)DNA技術(shù)在許多案件偵破中的應(yīng)用,還可以利用法醫(yī)DNA技術(shù)對(duì)災(zāi)難性事件(案件)中確定死亡人數(shù)、對(duì)受害者的身源進(jìn)行鑒別。結(jié)果結(jié)論 利用DNA物證可以為案件偵查和訴訟提供更多證據(jù)

    DNA物證;DNA提??;DNA保存;DNA檢驗(yàn)

    為了給刑事案件訴訟提供準(zhǔn)確可靠的證據(jù),在辦理兇殺、強(qiáng)奸等多種刑事案件時(shí),經(jīng)常需要對(duì)各種來(lái)源于人體的生物檢材進(jìn)行個(gè)人同一認(rèn)定檢驗(yàn)?,F(xiàn)在把與案件有關(guān)并能為偵查提供線索、為審判提供證據(jù),并可進(jìn)行法醫(yī)遺傳學(xué)檢驗(yàn)的生物樣品,或含有、承載可進(jìn)行法醫(yī)遺傳學(xué)檢驗(yàn)的生物樣品的物品都稱(chēng)為生物物證檢材(以下簡(jiǎn)稱(chēng)檢材)。利用法醫(yī)DNA技術(shù)對(duì)現(xiàn)場(chǎng)提取的血液(斑)、精液(斑)、唾液(斑)、人體組織、骨骼等檢材進(jìn)行檢驗(yàn),為案件偵破提供科學(xué)依據(jù)或線索;利用DNA數(shù)據(jù)庫(kù)技術(shù)更大的發(fā)揮法醫(yī)DNA技術(shù)在許多案件偵破中的應(yīng)用,還可以利用法醫(yī)DNA技術(shù)對(duì)災(zāi)難性事件(案件)中確定死亡人數(shù)、對(duì)受害者的身源進(jìn)行鑒別。

    1 DNA技術(shù)的提取

    (1)現(xiàn)場(chǎng)檢材提取。及時(shí)、正確提取和保存;新鮮尸體可提取血、肌肉、腦組織、心臟等;腐敗尸體可依次提取深層肌肉組織、肋軟骨、指(趾)甲、長(zhǎng)骨等;對(duì)于特殊的現(xiàn)場(chǎng),為確定死亡人數(shù),需檢驗(yàn)所有提取的尸塊。

    (2)親屬樣品提取,如果要通過(guò)親子鑒定確定身源的案件,優(yōu)先提取直系親屬的樣品,如父母、配偶和子女;根據(jù)具體情況選擇其他親屬。

    (3)生前樣品提取,如果要通過(guò)同一比對(duì)確定身源,可以提取死者生前的牙刷、剃須刀、口紅、所穿的衣物(未洗過(guò))、使用過(guò)的物品等。

    2 現(xiàn)場(chǎng)檢材的提取和保存

    2.1 一些基本原則

    2.1.1 基本規(guī)則 ①檢材均應(yīng)直接提取,易攜帶物品整體提??;不易攜帶物品提取附著檢材的部位;②根據(jù)檢材附著的不同載體,應(yīng)采取擦拭、剪切、刮削、吸附、浸泡、鑿鋸、挖取等方法提??;③在提取檢材前后應(yīng)進(jìn)行照相或錄像;④不同部位的檢材應(yīng)分別提取,單獨(dú)包裝;⑤提取用具要潔凈;⑥使用適當(dāng)?shù)姆庋b材料,做好檢材提取記錄;⑦提取檢材時(shí),注意要提取對(duì)照樣品;⑧提取的各種新鮮液體物證應(yīng)盡快檢驗(yàn),剩余部分應(yīng)制成紗布斑跡干燥保存;人體組織應(yīng)冷凍保存;⑨提取的各種體液性的檢材應(yīng)在陰涼通風(fēng)、可防止污染處自然干燥成紗布斑跡,禁止暴曬或加熱烘干;⑩提取的檢材在包裝和攜帶運(yùn)送過(guò)程中應(yīng)避免互相摩擦、沖撞以及失落,易碎檢材防止擠壓和震動(dòng),易散失檢材嚴(yán)密包裝,易腐敗檢材低溫保存送檢。

    2.1.2 防止污染原則 ①提取檢材時(shí)必須使用一次性用具,每提取完一份檢材應(yīng)及時(shí)更換,禁止重復(fù)使用和赤手觸摸檢材;②提取檢材時(shí)必須使用無(wú)菌的提取試劑和轉(zhuǎn)移用載體;③提取檢材時(shí)不得說(shuō)話、打噴嚏等,以免造成污染;④提取檢材時(shí)一次只能提取一件檢材;⑤禁止多件檢材混合包裝,禁止重復(fù)使用封裝材料。

    2.1.3 個(gè)人防護(hù)原則 ①所有的檢材應(yīng)都視同為可能的傳染源,提取檢材時(shí)應(yīng)穿戴好防護(hù)用品;②檢材提取人員手上的任何切口和擦傷都要用防水織物包扎;③在提取開(kāi)始和結(jié)束后對(duì)手部進(jìn)行消毒。

    2.2 檢材的提取和保存

    2.2.1 常見(jiàn)檢材 常見(jiàn)的檢材一般包括血液(斑)、唾液(斑)、精液(斑)、毛發(fā)、骨骼、陰道分泌物(斑)、各種組織、分泌物、排泄物,以及煙頭、果核、口杯、口香糖等。①法醫(yī)物證檢材包括血液(痕)、精液(斑)、唾液(斑)、毛發(fā)、組織、骨骼等各種含有人體細(xì)胞的生物檢材。由于載體的不同,現(xiàn)場(chǎng)提取時(shí)需注意去發(fā)現(xiàn)和提取各種形式的生物物證檢材。②提取檢材前注意記錄檢材的大小、形態(tài)等特征提取的檢材必須分別包裝,在包裝袋上注明檢材名稱(chēng)、來(lái)源、數(shù)量、采集日期等,并有采集人及采集見(jiàn)證人的簽名。

    ③對(duì)于活體檢材,一般用醫(yī)用消毒紗布或中速濾紙采集指血或耳垂血(2cm2以上),自然晾干??梢杂每谇皇米犹崛】谇火つぜ?xì)胞,提取前須清水漱口,檢材自然晾干;或取毛發(fā)3根~5根。以上檢材均用紙袋包裝后常溫保存。④對(duì)于血痕,類(lèi)似衣褲、地毯、床單上的血痕,可以剪下一部分紙袋包裝后常溫保存;類(lèi)似衣柜、墻壁、地面、刀、斧上的血跡可以刮取,或用生理鹽水浸濕的紗線提取,自然晾干后紙袋包裝常溫保存。⑤涉嫌性侵害的,應(yīng)用棉簽分別提取陰道外端、中部和后穹窿部,必要時(shí)還應(yīng)注意會(huì)陰、下腹、口腔、肛門(mén)等部位有無(wú)精液(斑),以及現(xiàn)場(chǎng)懷疑有精斑的其他檢材,如床單、被褥、衛(wèi)生紙、避孕套、內(nèi)褲、衣物等。所有檢材應(yīng)該分別提取、標(biāo)明記號(hào)、自然晾干、紙袋包裝后常溫保存。⑥現(xiàn)場(chǎng)的可疑毛發(fā)用鑷子提取,用紙折疊后置紙袋內(nèi)常溫保存。⑦含有唾液斑的檢材如煙頭、果核、香口膠等用鑷子提取,紙袋包裝后常溫保存。⑧人流刮宮組織,取5g以上確認(rèn)為絨毛的組織;引產(chǎn)胎兒,取5g以上的組織;羊水,取2m l以上的液體。提取的檢材潔凈容器包裝、冰凍保存、冷藏送檢。⑨新鮮尸體,可用醫(yī)用消毒紗布或中速濾紙?zhí)崛⊙海?cm2以上),自然晾干,紙袋包裝后常溫保存。新鮮尸體也可取肌肉組織(50g以上);腐敗尸體,盡量提取相對(duì)新鮮的組織,包括指甲(2枚以上)、肋軟骨(5cm以上)或者其他軟骨(5g以上)、深部肌肉組織(5g以上)、毛發(fā)(10根以上);白骨化的尸體盡可能提取指甲、長(zhǎng)骨、牙齒、毛發(fā)。以上檢材潔凈容器包裝、冰凍保存、冷藏送檢。⑩根據(jù)案件情況,注意提取對(duì)照樣本。

    2.2.2 容易忽略的生物物證 目前,STR復(fù)合擴(kuò)增技術(shù)已成為各個(gè)DNA檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的主要手段,提高了對(duì)微量DNA進(jìn)行檢驗(yàn)的能力,拓寬了DNA檢驗(yàn)的范圍,使得許多潛在的DNA檢材在偵查破案中能夠發(fā)揮應(yīng)有的價(jià)值。它可以是面罩、果核等上遺留的唾液中口腔脫落細(xì)胞DNA,也可以是通過(guò)皮膚接觸遺留的上皮細(xì)胞DNA。所有這些都是潛在的DNA證據(jù)來(lái)源,能夠?yàn)閭刹槠瓢柑峁┛茖W(xué)依據(jù)。微量DNA的檢驗(yàn)是法醫(yī)DNA檢驗(yàn)的難點(diǎn)之一。對(duì)于以上提到的各種潛在生物物證,進(jìn)行DNA檢驗(yàn)時(shí)不能保證其成功率,但是,一旦成功地獲得了現(xiàn)場(chǎng)物證的DNA分型,就能夠成為破案的直接證據(jù)。

    對(duì)于潛在的DNA物證,檢材的提取往往是關(guān)鍵。只要現(xiàn)場(chǎng)勘查人員掌握各種檢材存在的形式,強(qiáng)化物證提取的意識(shí),發(fā)現(xiàn)這些物證并不難。在提取過(guò)程中,首要的問(wèn)題是注意防止污染,必須戴口罩和手套操作;由于這類(lèi)檢材中DNA含量少,細(xì)胞與載體表面結(jié)合松散,即使戴著手套,也要盡量少處理和觸摸所要擦拭的區(qū)域。對(duì)于現(xiàn)場(chǎng)物證,不同的區(qū)域可能有不同的接觸者,為了最大程度地獲得現(xiàn)場(chǎng)物證的證據(jù)價(jià)值,還需要分區(qū)域進(jìn)行檢材的提取。

    建議現(xiàn)場(chǎng)勘查人員采用兩步擦拭法對(duì)檢材進(jìn)行提取,即先用浸濕的棉簽反復(fù)擦拭后,再用干棉簽擦拭至載體表面干燥。擦拭時(shí)盡量使用棉簽底部,所用區(qū)域越集中越好。所有棉簽干燥后保存?zhèn)溆谩?/p>

    3 DNA檢驗(yàn)結(jié)論的應(yīng)用

    3.1 技術(shù)方法的選擇

    目前,利用法醫(yī)DNA技術(shù)對(duì)生物物證進(jìn)行檢驗(yàn)主要采用兩種方法:STR分析和線粒體DNA測(cè)序,其中STR分析中包括常染色體的STR分析和Y染色體的STR分析。

    常染色體的STR分析檢驗(yàn)對(duì)象一般包括血液(痕)、唾液(斑)、精液(斑)、毛發(fā)(有毛根)、骨骼、陰道分泌物(斑)、器官、肌肉、分泌物、排泄物等生物樣品,以及含有或承載上述生物樣品的各種物品,如煙頭、果核、口杯、口香糖等。該方法個(gè)體識(shí)別率較高,能夠達(dá)到同一認(rèn)定的水平,但該方法對(duì)一些特殊的生物檢材,如陳舊骨骼、毛發(fā)、牙齒等角質(zhì)化或含有DNA量極少或降解的樣品,往往無(wú)能為力,只能利用線粒體DNA測(cè)序技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)。

    線粒體DNA測(cè)序方法的個(gè)體識(shí)別率較低,不能達(dá)到同一認(rèn)定水平,一般作為STR分型技術(shù)的補(bǔ)充手段,當(dāng)利用STR分型技術(shù)無(wú)能為力時(shí),才采用線粒體DNA測(cè)序技術(shù)。由于缺乏詳細(xì)的統(tǒng)計(jì)學(xué)資料,目前還不能給出一個(gè)確切的統(tǒng)計(jì)學(xué)概率;另外線粒體DNA測(cè)序檢驗(yàn)無(wú)法應(yīng)用于父系遺傳關(guān)系的檢驗(yàn)。

    對(duì)于一些特殊的案件,可以應(yīng)用Y-STR分析,確定男性的單倍型。

    3.2 DNA檢驗(yàn)的局限

    DNA檢驗(yàn)技術(shù)并不是萬(wàn)能的,有時(shí)對(duì)某些檢材的檢驗(yàn)無(wú)能為力,有時(shí)對(duì)某些案件的檢驗(yàn)達(dá)不到同一認(rèn)定的水平,一定要認(rèn)識(shí)到這些情況的存在,才不至于錯(cuò)誤的理解和應(yīng)用DNA檢驗(yàn)結(jié)論。一般地,DNA檢驗(yàn)結(jié)果做出排除的結(jié)論,能夠說(shuō)明所檢驗(yàn)的檢材與要比對(duì)的樣本來(lái)源于不同的個(gè)體,但當(dāng)DNA檢驗(yàn),分型一致時(shí),不一定能夠達(dá)到同一認(rèn)定的水平。例如,線粒體DNA測(cè)序檢驗(yàn)的結(jié)果,Y染色體STR檢驗(yàn)結(jié)果,混合樣品的檢驗(yàn)結(jié)果,親子鑒定時(shí)遇到變異的情況,單親親子鑒定,微量DNA的核DNA檢驗(yàn)獲得的STR分型不完全等情況下,DNA檢驗(yàn)往往達(dá)不到認(rèn)定的水平,必須與其他相關(guān)的證據(jù)一起綜合考慮。

    DF795.2

    B

    1672-688X(2012)04-0305-03

    2012-09-28

    1.河南省公安廳刑科所,河南鄭州450003

    2.鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)教研室,河南鄭州450007

    王基鋒(1976-),男,河南扶溝人,主檢法醫(yī)師,從事法醫(yī)現(xiàn)場(chǎng)斟查實(shí)務(wù)及法醫(yī)病理學(xué)的研究。

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