百里香組織培養(yǎng)技術(shù)的研究

徐榮 馬玉 魏進(jìn)莉

摘要：本研究以帶腋芽的莖段為外植體，比較了不同濃度的6-BA 和IAA組合對(duì)不定芽的誘導(dǎo)和增殖的效果，以及不同濃度的lBA對(duì)生根的影響。提出了百里香叢芽誘導(dǎo)和快速增殖適宜培養(yǎng)基及百里香生根培養(yǎng)的適宜培養(yǎng)基及移栽基質(zhì)。針對(duì)野生蒙古百里香在城鎮(zhèn)園林中開發(fā)利用亟待解決的快速繁殖問題開展研究，對(duì)豐富城鎮(zhèn)園林綠化植物種類具有重要的理論和實(shí)踐指導(dǎo)意義。

關(guān)鍵詞：百里香；組織培養(yǎng)；

隨著全球?qū)Νh(huán)境的重視和花卉產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，不斷有新的種類得到開發(fā)和利用，百里香（Thymus mongolicus Ronn.）就是眾多的在開發(fā)或待開發(fā)的多功能新花卉之一[1]。全世界百里香屬植物約有300—400種，分布在非洲北部、歐洲及亞洲溫帶。中國(guó)有11種，2變種[2]。自然分布于西北 華北和東北地區(qū),如內(nèi)蒙、甘肅、陜西，青海、寧夏、新疆、山西、河北、北京，東北等地都有天然分布[3-4]。目前中國(guó)的百里香屬植物多處在野生狀態(tài)，只在個(gè)別地方有引種栽培。百里香屬植物的開發(fā)利用研究才剛剛起步[5-8]。與國(guó)外進(jìn)行的百里香開發(fā)研究相比，差距還很大。在英國(guó)，已收集了250多個(gè)百里香屬植物的野生種和栽培品種，進(jìn)行了苗木生產(chǎn)、園林應(yīng)用等研究。百里香是多年生矮小半灌木，百里香的株型奇特低矮，花型小，花色艷麗，且全株芳香?；ㄆ陂L(zhǎng)、植株成簇狀匍匐生長(zhǎng)，耐干旱、耐瘠薄、耐寒，是不可多得的優(yōu)良地被植物，可作為優(yōu)良的節(jié)水型園林綠化材料在城市園林綠地中應(yīng)用。目前百里香的開發(fā)利用亟待解決快速繁殖問題。因此，研究建立百里香快速繁殖技術(shù)體系，對(duì)豐富城鎮(zhèn)園林綠化植物種類具有重要的理論和實(shí)踐指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料：陜西吳起野生百里香

1.2方法

1.2.1無菌材料的獲得：選取生長(zhǎng)健壯、無病蟲害的野生蒙古百里香植株，剪取帶腋芽的莖段，對(duì)帶腋芽的莖段沖洗表面，然后用洗滌靈溶液浸泡10min，流水沖洗30min后，在超凈工作臺(tái)上，用75%酒精浸泡30s消毒，無菌水沖洗3遍，再用0.1%升汞浸泡8 min，用無菌水沖洗5次，切掉與藥液接觸部位，制成無菌莖段。

項(xiàng)目來源：

作者介紹：徐榮 女，1963年6月生，研究員,博士，從事園林植物繁育技術(shù)研究。

1.2.2 不定芽的分化：將上述處理好的外植體材料，在超凈工作臺(tái)上剪切成2~3cm長(zhǎng)帶

有2~3個(gè)腋芽的莖段，每瓶接種1個(gè)莖段，每個(gè)處理個(gè)30瓶，接種到叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)溫度24±2℃，光照度3000 Lux，光質(zhì)為熒光燈，光照12h.d-1。

叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為：

（1）MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L +6-BA 0.5mg/L +IAA0.1mg/L，pH5.8-6.0；

（2）MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L +6-BA 0.5mg/L +IAA0.5mg/L，pH5.8-6.0

（3）MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L +6-BA 0.5mg/L，pH5.8-6.0

（4）MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L +6-BA 1mg/L，pH5.8-6.0

1.2.3 叢生芽快速增殖：當(dāng)分化出的叢生芽長(zhǎng)到1-1.5cm以上，將叢生芽剪切為每叢2至3個(gè)芽，轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度24±2℃，光照度3000 Lux，光質(zhì)為熒光燈，光照12h.d-1。

增殖培養(yǎng)基的配方為：

（1）MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L +6-BA 1mg/L +IAA0.1mg/L，pH5.8-6.0

（2）MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L +6-BA 1mg/L +IAA0.5mg/L，pH5.8-6.0

（3）MS +蔗糖30g/L +瓊脂7g/L 6-BA0.5 mg/L +IAA0.2 mg/L，pH5.8-6.0

1.2.4 生根培養(yǎng)：將叢生芽小苗接種到膜封口的瓶裝生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根；每個(gè)濃度培養(yǎng)基接9瓶，每瓶5株。培養(yǎng)30天統(tǒng)計(jì)植株長(zhǎng)出的主根數(shù)。培養(yǎng)溫度24±2℃，光照度3000 Lux，光質(zhì)為熒光燈，光照12h.d-1。

生根培養(yǎng)基的配方為：

（1）MS +蔗糖30g/L +瓊脂6g/L +IBA 0. 2mg/L，pH5.8-6.0

（2）MS +蔗糖30g/L +瓊脂6g/L +IBA 0. 5mg/L，pH5.8-6.0

（3）MS +蔗糖30g/L +瓊脂6g/L +IBA 0.7 mg/L，pH5.8-6.0

（4）MS +蔗糖30g/L +瓊脂6g/L +IBA 1 mg/L，pH5.8-6.0

1.2.5 煉苗與移栽：在生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)26-27天，且長(zhǎng)到3cm以上，除去封口膜敞瓶煉苗3-4天，取出組培苗，以每叢5-7株為單位，洗凈根上培養(yǎng)基，在0.5%高錳酸鉀溶液中浸蘸5-10s；進(jìn)行消毒后，移栽到盛有用0.5%高錳酸鉀溶液消毒的營(yíng)養(yǎng)土的營(yíng)養(yǎng)缽中栽培。栽培條件為：保持溫度25±2℃左右，空氣濕度80±2%左右，每天噴水3-4次，13至15天成活。營(yíng)養(yǎng)土的配方為：草炭：珍珠巖：蛭石=2：1：1。

1.2.6 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1叢芽的誘導(dǎo)

在叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基接種后4d時(shí)，腋芽明顯膨大，培養(yǎng)15d時(shí)，腋芽處長(zhǎng)出小芽，培養(yǎng)21天統(tǒng)計(jì)，結(jié)果見表1。6-BA0.5 mg/L +IAA0.1 mg/L培養(yǎng)基的誘導(dǎo)數(shù)26個(gè)，誘導(dǎo)率87.5%，均高于其它培養(yǎng)基。表明：激素濃度6-BA0.5 mg/L +IAA0.1 mg/L培養(yǎng)基對(duì)百里香叢芽誘導(dǎo)效果較好。

2.2叢生芽快速增殖

增殖培養(yǎng)基上繼代培養(yǎng)，30d統(tǒng)計(jì)增值率。由表2可見，百里香在激素濃度6-BA1 mg/L +IAA0.5 mg/L培養(yǎng)基中的增值率明顯高于6-BA1 mg/L +IAA0.1 mg/L和6-BA0.5+IAA0.2培養(yǎng)基中的增值率。

2.3 生根與移栽

生根培養(yǎng)25天統(tǒng)計(jì)生根結(jié)果（見表3 ），激素濃度IBA 0.7 mg/L生根培養(yǎng)基第5天開始生根，25天平均生根數(shù)為6.9個(gè)，顯著高于其它培養(yǎng)基的平均根數(shù)，平均根長(zhǎng)3.91 cm。生根率為100%。移栽到盛有草炭：珍珠巖：蛭石（2：1：1）營(yíng)養(yǎng)土的營(yíng)養(yǎng)缽中栽培，移栽成活率極顯著的高于其它生根培養(yǎng)基（p<0.01）。

大寫字母表示差異到達(dá)極顯著水平（p<0.01），小寫字母表示差異到達(dá)顯著水平（p<0.05）

3 討論

3.1激素濃度6-BA0.5 mg/L +IAA0.1 mg/L培養(yǎng)基對(duì)百里香叢芽誘導(dǎo)效果較好。

3.2 激素濃度6-BA1 mg/L +IAA0.5 mg/L培養(yǎng)基中的增值率高于其它培養(yǎng)基，是百里香叢

生芽快速增殖適宜的培養(yǎng)基。

3.3激素濃度IBA 0.7 mg/L生根培養(yǎng)基對(duì)百里香生根培養(yǎng)的效果極顯著地高于其它激素濃度

的培養(yǎng)基，移栽到盛有草炭：珍珠巖：蛭石（2：1：1）營(yíng)養(yǎng)土的營(yíng)養(yǎng)缽中栽培，移栽成

活率極顯著的高于其它生根培養(yǎng)基（p<0.01）。

是百里香生根培養(yǎng)的適宜的培養(yǎng)基。

3.4 本研究成功建立了百里香（Thymus mongolicus Ronn.）快速繁殖的方法和條件，創(chuàng)立了百里香快速繁殖技術(shù)體系。

參考文獻(xiàn)

[1] 周秀梅，李保印. 抗寒耐旱的百里香屬植物資源及其開發(fā)利用[J].干旱區(qū)資源與環(huán)境，2008，vol.22(7).

[2] 中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編寫委員會(huì)．中國(guó)植物志[M]．第 六 十 六 卷.北京：科學(xué)出版社，1977,58- 59.

[3] 內(nèi)蒙古植物志編輯委員會(huì). 內(nèi)蒙古植物志 M . 第五卷.呼和浩特,內(nèi)蒙古人民出版社: 1980. 14- 16.

[4] 劉云斌．百里香天然資源及其園林應(yīng)用[J]．林業(yè)實(shí)用技術(shù)，2005，(2)：43-44．

[5] 李曉東等.普通百里香的組織培養(yǎng)和快速繁殖[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，vol.48(6)1295-1297.

[6]王玲，蘇含英.黑龍江省4種百里香屬植物嫩枝的扦插繁殖[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，vol.36(1).12-13.

[7] 楊莉等.百里香不定芽的增殖研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，vol.49(8)1807-1809.

[8] 高潤(rùn)宏等.地被植物百里香在干旱區(qū)綠化資源利用的評(píng)價(jià)[J].中國(guó)草地，2005，vol.,27 (3)57-60.

“十一五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題《城鎮(zhèn)綠地生態(tài)建設(shè)綜合技術(shù)示范研究》

課題號(hào)2008BAJ10B06

注：文章內(nèi)所有公式及圖表請(qǐng)以PDF形式查看。