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    散結(jié)化瘀膠囊提取工藝研究

    2012-04-08 11:53:00張小莉廉援朝
    中國藥業(yè) 2012年18期
    關(guān)鍵詞:化瘀酚酸提取液

    張小莉,葛 莉,廉援朝

    (1.陜西省咸陽市藥品檢驗所,陜西 咸陽 712000;2.陜西中醫(yī)學(xué)院2010級研究生,陜西 咸陽 712046;

    3.長慶興隆園醫(yī)院,陜西 西安 710002)

    1 儀器與試藥

    散結(jié)化瘀膠囊(陜西省中醫(yī)藥研究院研制,批號為20110301)由丹參、紅曲、赤芍、丹皮、炙黃芪、法半夏、瓜蔞皮、水蛭粉、葛根、銀杏葉、三七粉、黃連、薤白13味藥組方,用于胸痹心痛病的預(yù)防和治療。為了研究其水提工藝的最佳條件,參照文獻(xiàn)[1-3],筆者采用正交試驗法,以丹酚酸B為考察指標(biāo),對水提工藝條件進(jìn)行優(yōu)選,為進(jìn)一步的新藥研究奠定基礎(chǔ)。

    高效液相色譜儀(Waters966型恒流泵;Waters966二極管陣列檢測器,活德國際貿(mào)易<上海>有限公司;Millennium 32色譜工作站);Kromasil C18柱(250mm×4.6mm,5μm);H66025T型超聲波清洗機(jī);TGL-16G型離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);HCTP11B10型托盤藥物天平(北京市宣武區(qū)天平廠);四孔水浴鍋(北京科偉永興儀器有限公司)。丹酚酸B對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號為110722-200309);液相用試劑為色譜純(美國Fisher scintific)、水為超純水;其他試劑均為分析純。丹參、炙黃芪、法半夏、瓜蔞皮、葛根、銀杏葉、薤白等中藥均購自陜西省藥材公司,經(jīng)陜西省中醫(yī)藥研究院副主任藥師王衛(wèi)鋒鑒定為真品。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 工藝設(shè)計

    采取加熱回流提取法,提取時選擇了加水量(因素A)、提取時間(因素B)及提取次數(shù)(因素C)3個因素,每個因素選取3個水平設(shè)計了正交試驗方案,按L9(34)正交表安排試驗,平行操作,以丹酚酸B的含量和出膏量作為考察指標(biāo)對工藝進(jìn)行優(yōu)選。試驗因素水平見表1。

    表1 提取試驗水平因素

    2.2 溶液制備

    按處方比例量稱取水提工藝部分的藥材,共9份,按正交試驗表下設(shè)計的試驗條件以加熱回流方式進(jìn)行提取,合并提取液。將上述提取液濃縮,定容至一定體積,制得樣品溶液。

    2.3 收膏率測定

    取各正交試驗號濾液50mL,于干燥蒸發(fā)皿中水浴蒸干,80℃烘箱干燥至干,取出,迅速置干燥器中放冷,稱重,計算。

    2.4 丹酚酸B含量測定

    色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)為流動相;檢測波長為286 nm。

    溶液制備:取丹酚酸B對照品適量,精密稱定,加甲醇制成每1mL含0.45mg的溶液,搖勻,即得對照品溶液。分別精密吸取各提取液5mL,置10mL容量瓶中,加甲醇定容至刻度,搖勻,離心,取上清液,即得供試品溶液。

    測定方法:分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μL,注入液相色譜儀,測定,即得。

    2.5 正交試驗

    結(jié)果見表2。

    將表2的正交試驗結(jié)果進(jìn)行方差分析,結(jié)果見表3。

    試驗結(jié)果表明,煎煮次數(shù)對丹酚酸B的提取量影響較大。由正交試驗及方差分析結(jié)果得知,最佳工藝為A2B3C3。即加12倍量水煎煮提取3次,每次1.5 h。

    2.6 驗證試驗

    按1.5倍處方量稱取各藥材,共3份,按照所選提取條件試驗,分別精密吸取藥液5mL,按擬訂方法測定含量;再分別量取各溶液50mL,按照正交試驗出膏量測定方法測定出膏率。含量測定及出膏量結(jié)果見表4。3次驗證試驗折算成處方量結(jié)果后,檢測指標(biāo)接近或高于正交表中最優(yōu)值,說明優(yōu)選的提取條件基本可行。

    表2 水提工藝 L9(34)正交試驗表

    表3 丹酚酸B含量(Ⅰ)和出膏量(Ⅱ)方差分析表

    3 討論

    通過本研究設(shè)計的提取工藝,優(yōu)化了散結(jié)化瘀膠囊水煎提取工藝,其最佳提取工藝為:加12倍量水煮3次,每次1.5 h。根據(jù)本試驗優(yōu)選的最佳工藝,經(jīng)驗證性試驗表明,此法穩(wěn)定,質(zhì)量可控。在丹酚酸B含量測定過程中,考慮到本品是由多種藥味組方的復(fù)方制劑,有很多干擾成分,經(jīng)多次摸索,選擇甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)為流動相,目標(biāo)成分達(dá)到了很好的分離效果。

    表4 驗證試驗結(jié)果

    [1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:230.

    [2]商麗華,龍海東,方樂堯,等.骨仙片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高研究[J].中成藥,2010,32(2):335-337.

    [3]朱 軍,陳富超,李 鵬,等.正交實驗優(yōu)選補虛顆粒水提工藝[J].醫(yī)藥導(dǎo)報,2010,29(2):231-233.

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