免疫組化在病理診斷中的應(yīng)用

趙爾曼 盧 虹

(內(nèi)蒙古自治區(qū)巴彥淖爾市醫(yī)院病理科 內(nèi)蒙古巴彥淖爾 015000)

醫(yī)學(xué)的目的是解除人體的病痛，其核心是疾病的診斷和治療兩個環(huán)節(jié)，而這兩個環(huán)節(jié)的關(guān)系可以明確為任何疾病的有效治療均來源于正確的診斷。在當(dāng)今醫(yī)學(xué)發(fā)展的現(xiàn)況下，雖然疾病的診斷手段有幾十種之多，但就其準(zhǔn)確性來說，首推病理診斷，即病理組織學(xué)診斷要比化驗、放射、核素等任何一種診斷方法更準(zhǔn)確、更可信、更有權(quán)威性。而在病理診斷的大家庭中，免疫組織化學(xué)(以下簡稱免疫組化)已成為其中的一種常用手段。

1 提高病理診斷準(zhǔn)確性

在臨床醫(yī)師來看，病理診斷是毋須置疑的，癌就是癌，結(jié)核就是結(jié)核，是不可能有誤的，國外對病理診斷報告的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)是:石蠟切片要100%正確，術(shù)中快速診斷要98%正確，但在實際工作中要做到100%正確是不可能的，一是因為技術(shù)水平問題而誤診，二是因為目前認(rèn)識水平有限，鑒別診斷的手段不夠而做不出診斷。在免疫組化應(yīng)用前，約有10%腫瘤診斷是困難的，對這些病例進(jìn)行免疫組化檢查后，依據(jù)抗體的種類數(shù)量及檢驗員經(jīng)驗的不同，最后獲得正確診斷的數(shù)目達(dá)疑難病例總數(shù)的50%～80%不等，也就是說有半數(shù)以上疑難病例通過免疫組化檢查獲得了正確診斷。比如來源不明的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性腫瘤，用角蛋白抗體獲陽性就支持癌的診斷，用波形蛋白抗體獲陽性則支持肉瘤的診斷，用s－100蛋白抗體獲陽性就支持黑色素的診斷．這樣就為臨床處理提供了可靠的依據(jù)，而不僅僅診斷為一個來源不明的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移瘤。由此可見應(yīng)在所有的病理科普遍使用免疫組化的方法，以利于腫瘤的臨床診治。

2 激素受體及生長因子的檢測對預(yù)后和治療的意義

激素受體和各種生長因子對正常組織的功能調(diào)節(jié)是必不可少的，同時也影響著腫瘤的生物學(xué)行為，應(yīng)用免疫組化可對腫瘤的各種激素受體與生長因子進(jìn)行定位定量分析，目前這一方法正廣泛應(yīng)用于腫瘤臨床工作，對乳腺癌與激素受體關(guān)系的研究已有了較明確的結(jié)論即:雌激素受體陽性的乳腺癌預(yù)后優(yōu)于陰性者，而且陽性者對內(nèi)分泌治療反應(yīng)好，無瘤生存期延長。相似的結(jié)果也見于子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌。目前已有針對癌細(xì)胞核內(nèi)的激素受體可作為乳腺癌對激素反應(yīng)性的更重要的預(yù)測指標(biāo)。

3 癌基因的臨床應(yīng)用

對癌基因在腫瘤生物學(xué)中的價值已有大量的研究，在瘤細(xì)胞內(nèi)常表現(xiàn)為癌基因的擴增、突變、移位等，其活性的異常則通過MRNA瘤蛋白的水平增加表達(dá)出來，用免疫組化的方法可對這些蛋白進(jìn)行定位和定量的檢測以探討其臨床意義，雖然瘤基因的種類繁多，但目前已有腫瘤臨床意義的卻十分有限，主要是c－erbB －2、C －MYC、RAS和 P53。

在乳腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)表達(dá)c－er bB－2的浸潤性乳腺癌者預(yù)后差，惡性度高者陽性率高，導(dǎo)管內(nèi)癌中粉刺樣癌為陽性，篩狀癌則為陰性。在卵巢癌中陽性率為30%，而且提示陽性表達(dá)的卵巢癌者預(yù)后要差。C－myc是作用于核內(nèi)DNA的瘤基因，可刺激DNA的合成。C－myc的過度表達(dá)促進(jìn)腫瘤的生長和發(fā)展，因而腫瘤的侵襲性增加，對宮頸癌、小細(xì)胞肺癌的研究以證實，表達(dá)C－myc增加者存活期縮短。p53蛋白結(jié)合在特定的DNA特定片段上，在癌細(xì)胞內(nèi)可較多積聚。故易于用免疫組化方法測出。目前發(fā)現(xiàn)p53基因突變是人體癌癥中最常見的，可見于70%的大腸癌，30% ～50%的乳腺癌，50%的肺癌，其中小細(xì)胞癌100%。

4 對腫瘤細(xì)胞增生程度的評價

腫瘤細(xì)胞增生是否活躍直接影響者臨床治療與預(yù)后，傳統(tǒng)上判斷一個腫瘤是否生長活躍，是靠病理組織學(xué)觀察細(xì)胞核分裂象的多少來決定的，但由于計數(shù)不準(zhǔn)確以及影響因素太多，而臨床應(yīng)用價值有限。免疫組化對瘤細(xì)胞增生抗原進(jìn)行定位定量最為簡便、可靠，主要是通過ki－67和增殖細(xì)胞抗原(PCNA)的單克隆抗體來實現(xiàn)的，這些腫瘤增生抗原以證明與許多腫瘤的預(yù)后有關(guān)，即ki－67或PCNA陽性細(xì)胞多者，其惡性度增高，預(yù)后不良，其中以惡性淋巴瘤、乳腺癌較為明顯，而且在乳腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)ki－67陽性者，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高，并與激素受體的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。

5 發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶

用常規(guī)病理組織學(xué)方法在一個組織中認(rèn)出單個轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞或幾個細(xì)胞是不可能的，而采用免疫組化的方法則十分有助于微小灶是發(fā)現(xiàn)，如對一組常規(guī)病理切片證實為陰性的乳腺癌淋巴結(jié)，經(jīng)免疫組化檢查后，其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率可達(dá)23% ～26%，既有1/4的以往認(rèn)為無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者已具有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。這對于進(jìn)一步治療和預(yù)后都十分有意義。同樣在對骨髓的免疫組化檢查中發(fā)現(xiàn)用常規(guī)方法認(rèn)為無骨髓受累的乳腺癌患者中有21%發(fā)展了骨髓中轉(zhuǎn)移灶，這種微小轉(zhuǎn)移灶的發(fā)現(xiàn)為臨床治療提供了可靠依據(jù)。

6 在治療分期的上的意義

腫瘤是原位還是有浸潤發(fā)生以及有無血管淋巴管的侵襲，是與腫瘤分期密切相關(guān)的，常規(guī)病理組織學(xué)的方法對于上述問題判斷有時是十分困難的，但用免疫組化方法檢查可獲得明確的結(jié)果。如采用層粘連蛋白和IV型膠原的單克隆抗體可以清楚的顯示基底膜的主要成分，一旦證實上皮性癌突破基底膜就不是原位癌，而是浸潤性癌了，其預(yù)后的意義是不同的。采用第vIII因子相關(guān)蛋白、UEA凝集素等顯示血管和淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的免疫組化方法則可清楚地顯示腫瘤對血管和淋巴管的浸潤情況，對許多腫瘤的良惡性鑒別以及有無血管和淋巴管的浸潤，這是主要的鑒別依據(jù)，同時也有治療及預(yù)后意義。

7 指導(dǎo)腫瘤的治療

應(yīng)用免疫組化的檢查結(jié)果不僅對腫瘤的診斷和鑒別診斷起到必不可少的作用，進(jìn)來發(fā)現(xiàn)在腫瘤的治療上也有應(yīng)用前景。如許多腫瘤對化療不敏感，是由于瘤細(xì)胞內(nèi)多藥耐藥基因編碼的酶的活性增加所致。如二氫葉酸還原酶以及p－糖蛋白增加，用免疫組化方法可以檢查細(xì)胞內(nèi)的這些酶和糖蛋白，以了解腫瘤是否有耐藥性，通過這些免疫組化的方法得到定位定量檢查探討腫瘤有效治療途徑。

8 免疫性疾病的輔助診斷

人體的免疫性疾病是自身免疫性疾病，如腎小球腎炎，皮膚自身免疫性疾病等，用免疫組化方法對組織細(xì)胞內(nèi)的免疫蛋白、補體、免疫復(fù)合物進(jìn)行檢測。

9 病原微生物的檢查

人體疾病的致病微生物中有的在常規(guī)病理檢查中不易發(fā)現(xiàn)，尤其是病毒性致病微生物，由于其分子水平結(jié)構(gòu)在細(xì)胞水平上難以發(fā)現(xiàn)，通過免疫組化方法可以明確發(fā)現(xiàn)病原體抗原的部位以及定量。

由于腫瘤生物學(xué)領(lǐng)域的研究近年來有了一系列重要進(jìn)展，使許多腫瘤臨床醫(yī)師感到不知從何入手來拓展其新知識的臨床應(yīng)用。從病理組織學(xué)角度來說當(dāng)務(wù)之急是病理與臨床密切配合，先將已經(jīng)成熟的基礎(chǔ)研究結(jié)果應(yīng)用于腫瘤的診斷和治療，其中免疫組化方法獲得的參考價值尤其直接明了，應(yīng)及早應(yīng)用，讓患者收益。