• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    有機(jī)污染物的微生物修復(fù)研究進(jìn)展

    2012-03-28 16:47:12王文飛劉銘瑤李德山
    關(guān)鍵詞:加氧酶芳香烴氯乙烯

    王文飛,劉銘瑤,李德山

    (東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,哈爾濱 150030)

    有機(jī)物污染由于其殘留期長(zhǎng)、生物蓄積度高及對(duì)生物體危害性大而備受關(guān)注[1]。目前對(duì)有機(jī)污染物的處理方法主要有填埋法、工程治理法和生物處理法。其中,填埋法由于難以阻止有機(jī)污染物在土壤環(huán)境中的遷移擴(kuò)散以及對(duì)地下水的進(jìn)一步污染,目前已經(jīng)被摒棄;工程治理法由于其投資大、占地多又需特殊設(shè)備,同時(shí)會(huì)產(chǎn)生二級(jí)垃圾,也不是最佳的處理方法。與上兩種方法相比,生物處理法主要利用天然生物(以微生物為主),利用生物體本身作為催化劑來降解環(huán)境中有機(jī)污染物。目前生物處理主要利用從被污染場(chǎng)地中篩選出可利用的菌株對(duì)污染物進(jìn)行處理,由于菌株活力不夠,該方法存在其降解效果不佳,出水COD濃度偏高,難以達(dá)到國(guó)家排放標(biāo)準(zhǔn)等問題,不能完全取代填埋及工程治理法。隨著近幾年分子生物學(xué)及微生物學(xué)的發(fā)展,科研人員通過基因組學(xué)、酶學(xué)等手段對(duì)降解微生物代謝有機(jī)污染物的機(jī)制有了更深的了解,本文總結(jié)了典型的有機(jī)污染物的生物修復(fù)途徑研究進(jìn)展[2-6],為研究人員通過基因工程等技術(shù)進(jìn)行污染物治理菌種的改良提供理論依據(jù)。

    1 微生物修復(fù)

    微生物對(duì)有機(jī)污染物的生物修復(fù)主要通過兩種方式來完成,一種是生長(zhǎng)代謝的方式,另一種是通過微生物的活動(dòng)改變化學(xué)或物理環(huán)境而間接作用于有機(jī)污染物的方式。能夠進(jìn)行生長(zhǎng)代謝生物修復(fù)的微生物本身含降解該有機(jī)物的酶系基因,或本身雖無該酶系基因,但是經(jīng)誘導(dǎo)或環(huán)境存在選擇壓力,基因發(fā)生重組或改變產(chǎn)生了新的降解酶系,能以有機(jī)污染物為碳源和能源物質(zhì)進(jìn)行分解和利用。具有第二種代謝方式的微生物又分為以下3種:①礦化作用:微生物直接以有機(jī)污染物作為生長(zhǎng)基質(zhì),將其完全分解成無機(jī)物;②共代謝作用:共代謝型微生物不能利用有機(jī)污染物作為碳源和能源,須從其它底物中獲取大部分或全部的碳源和能源,共代謝基質(zhì)選擇和代謝酶的誘導(dǎo)是控制目標(biāo)污染物降解的關(guān)鍵因素,高濃度有機(jī)污染物對(duì)共代謝微生物存在明顯的抑制作用;③種間協(xié)同代謝:同一環(huán)境中的幾種微生物聯(lián)合代謝某種有機(jī)污染物。目前對(duì)于微生物生物修復(fù)研究的核心問題是關(guān)鍵酶的誘導(dǎo)及其活性的維持、生長(zhǎng)機(jī)制與目標(biāo)污染物之間的競(jìng)爭(zhēng)抑制、目標(biāo)污染物及其中間降解產(chǎn)物對(duì)微生物毒性作用[7-8]。

    2 有機(jī)污染物的生物修復(fù)途徑

    2.1 芳香烴族化合物的生物修復(fù)途徑

    有機(jī)物、石油、汽油等產(chǎn)品的不完全燃燒和各類工業(yè)活動(dòng)都會(huì)導(dǎo)致芳香烴族化合物特別是多環(huán)芳香烴(PAHs)的產(chǎn)生[9-12],這類物質(zhì)對(duì)自然界的危害極大且利用傳統(tǒng)方法很難消除該類物質(zhì)。近年來的研究結(jié)果顯示,自然界中多種細(xì)菌、真菌和藻類等微生物可以用于PAHs的清除[13]。

    Sims等研究發(fā)現(xiàn),PAHs修復(fù)的第一步反應(yīng)是由雙加氧酶/單加氧酶參與下的氧化芳香環(huán)步驟,此后再經(jīng)過加氫、脫水等作用使C-C鍵斷裂,減少苯環(huán)數(shù),最后將污染物降解為TCA循環(huán)過程中的中間代謝產(chǎn)物[14]。真菌中含有的單加氧酶可加一個(gè)氧原子到苯環(huán)上形成環(huán)氧化物,加入H2O產(chǎn)生反式二醇和酚。細(xì)菌體內(nèi)的雙加氧酶可加兩個(gè)氧原子到苯環(huán)上,氧化為順式二醇,脫氫產(chǎn)生酚,最終將底物降解成三羧酸循環(huán)過程中的中間關(guān)鍵代謝產(chǎn)物,進(jìn)入循環(huán)氧化,近年來的研究結(jié)果顯示這一過程還伴隨著脫氮和硫的還原反應(yīng)[15-16]。

    對(duì)單環(huán)芳香烴苯的降解主要是利用苯雙加氧酶攻擊苯環(huán),形成鄰苯二酚,鄰苯二酚進(jìn)一步通過間位或鄰位雙加氧酶的作用而產(chǎn)生粘康酸半醛或粘康酸,之后代謝產(chǎn)物被進(jìn)一步降解。對(duì)于側(cè)鏈很長(zhǎng)的烷基取代苯,微生物不會(huì)降解苯環(huán);而對(duì)于側(cè)鏈較短的烷基取代苯,一般是使得苯環(huán)的2,3位羥化,形成不穩(wěn)定的鄰苯二酚類物質(zhì),最后開環(huán)降解。

    已有研究表明,克隆編碼甲苯還原酶的基因todC1C2BA,并將重組質(zhì)粒導(dǎo)入P.putida mt-2中,可徹底降解苯、甲苯和二甲苯[17]等單環(huán)芳香烴。吳堅(jiān)陽(yáng)等從農(nóng)藥廠二沉池污泥中篩選分離得到兩株革蘭氏陰性的芳香烴降解菌ZD4-1和ZD4-3,利用紫外光譜掃描和雙加氧酶對(duì)產(chǎn)物的檢測(cè)發(fā)現(xiàn),菌株ZD4-1利用鄰裂途徑降解苯酚,而ZD4-3則通過間裂途徑降解苯酚,鄰裂途徑的1,2雙加氧酶和間裂途徑的2,3雙加氧酶都是可誘導(dǎo)的雙加氧酶,其活性強(qiáng)烈的依賴于降解底物的出現(xiàn)[18]。劉和從農(nóng)藥廠活性污泥和煤氣廠污水排放口處的土壤中分離到三株降解能力較好的芳香烴降解菌,分別屬于多食鞘氨醇桿菌,睪丸酮叢毛單胞菌和銅綠假單胞菌[19]。其中有關(guān)多食鞘氨醇桿菌對(duì)五氯酚(PCP)的共代謝降解的研究結(jié)果表明,以葡萄糖為生長(zhǎng)底物比以苯酚為生長(zhǎng)底物時(shí)PCP降解效果更好,當(dāng)葡萄糖的量能夠滿足細(xì)菌的生長(zhǎng),提供降解PCP所需的還原性物質(zhì)的量時(shí),則生長(zhǎng)底物不再是PCP降解的限制性因素。

    2.2 環(huán)硝胺類物質(zhì)(RDX、HMX和CL-20)的生物修復(fù)途徑

    環(huán)硝胺類物質(zhì)是軍用火藥,也是一種被廣泛用于化學(xué)工業(yè)和印染工業(yè)中的原料,該物質(zhì)的大量使用對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重的污染。目前已發(fā)現(xiàn)多種好氧細(xì)菌、厭氧細(xì)菌和真菌等可以轉(zhuǎn)化RDX、HMX和CL-20,通過微生物的代謝來降低其對(duì)自然界的危害[20]。

    Hawari認(rèn)為硝基還原酶可以催化cL-20首先形成陰離子自由基,使其處于一種易脫硝基的不穩(wěn)定狀態(tài),進(jìn)而發(fā)生開環(huán),生成的中間產(chǎn)物在水溶液中可被分解生成NH4+、N2O、HCOOH和乙二醛[21]。Bhushan等報(bào)道了來源于厭氧菌Clostridium kluyveri的心肌黃酶(EC.1.8.1.4)催化RDX的反應(yīng),發(fā)現(xiàn)RDX在心肌黃酶的作用下,以尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)為氫供體,首先生成陰離子自由基,即為初級(jí)反應(yīng);隨后RDX自由基發(fā)生脫氮反應(yīng),導(dǎo)致開環(huán),最終水解生成N2O、NH4+、HCHO和NO[22]。第二年,Bhushan又利用黃嘌呤氧化酶催化HMX[23],發(fā)現(xiàn)這種酶在厭氧條件下的催化速度優(yōu)于在有氧條件下的催化速度。在還原的過程中,HMX最終被分解產(chǎn)生亞硝酸鹽、亞甲基二硝基胺、甲醛、一氧化二氮和甲酸和銨鹽。

    2.3 烷烴的生物修復(fù)途徑

    對(duì)烷烴類物質(zhì)污染的研究歷史已久。陸健等從原油中分離篩選到一株可高效降解烷烴類物質(zhì)的細(xì)菌(銅綠假單胞菌,XCZ),XCZ以正十八烷為唯一碳源進(jìn)行復(fù)制增值[24]。研究表明,在以濃度為500 mg·L-1正十八烷為唯一碳源的培養(yǎng)基中,持續(xù)培養(yǎng)XCZ 40 h后正十八烷降解率高達(dá)97.5%,同時(shí)XCZ還可有效降解高濃度原油中C_(13)-C_(32)的直鏈烷烴,對(duì) C_(13)-C_(24)烷的降解率大于80%。張璐等從原油污染土壤中分離的一株石油烴降解菌15-3(紅球菌)也可利用正十八烷為唯一碳源進(jìn)行生長(zhǎng),且該菌株在低溫(10℃)及高鹽(4%~5%NaCl)等惡劣環(huán)境下也具備良好的降解烷烴能力,對(duì)C_13~C_32的正構(gòu)烷烴、芳香烴及姥鮫烷都有一定的降解能力[25]。

    2.4 多氯聯(lián)苯(PCBs)類物質(zhì)的生物修復(fù)途徑

    PCBs是加工絕緣油、阻燃劑、導(dǎo)熱劑、液壓油、增塑劑等材料的主要原料。由于具有極強(qiáng)的脂溶性,PCBs能夠輕易地進(jìn)入自然界的食物鏈,從而在生物體內(nèi)蓄積進(jìn)而危害人類健康。研究表明以自然界中多種微生物都具備降解PCBs等能力。Seeger、Arsendorf、Abramowicz等研究認(rèn)為,對(duì)于氯取代位點(diǎn)集中在一個(gè)苯環(huán)上的氯代聯(lián)苯,其降解途徑是在2,3雙加氧酶的作用下生成氯代苯甲酸和4-羥基戊酸,生成的4-羥基戊酸可被降解菌株徹底礦化,而另一個(gè)產(chǎn)物氯代苯甲酸需被其他微生物進(jìn)一步降解[26-27]。由于自然界中的PCBs降解菌株的修復(fù)效率比較低,無法滿足治理污染的要求??蒲腥藛T目前已經(jīng)在通過重組DNA的方法獲得高效的工程菌以滿足需要。Brenner等利用2,3-雙加氧酶途徑的關(guān)鍵酶基因和寬宿主范圍的質(zhì)粒構(gòu)建了重組工程菌株,含有上述降解酶基因的大腸桿菌可以直接利用PCBs,而且不需要聯(lián)苯誘導(dǎo),從而大大加快了PCBs的修復(fù)速度[28]。

    2.5 氯乙烯類污染物的生物修復(fù)途徑

    氯乙烯類化合物中常見的是三氯乙烯(TEC),是地下水和土壤中的主要污染物。近年來,大量研究證實(shí)氯化物可通過共代謝好氧途徑降解。Michael等從被四氯乙烯污染的土壤中分離出大量對(duì)四氯乙烯及其潛在的降解產(chǎn)物具有修復(fù)能力的菌株,并在人工條件下進(jìn)行馴化和增殖,通過鼓氣和水流循環(huán)的辦法控制地下微生物的生存環(huán)境,進(jìn)而修復(fù)四氯乙烯污染[29]。檢測(cè)回流水獲得的數(shù)據(jù)顯示,采用改技術(shù)手段后,不到1個(gè)月的時(shí)間內(nèi)水中的四氯乙烯的濃度從470 pg·L-1下降到3.5 pg·L-1,四氯乙烯降解的中間產(chǎn)物三氯乙烯、二氯乙烯和一氯乙烯的濃度也在顯著下降,污染物的總?cè)コ试?0%~99%。

    2.6 硝基化合物的生物修復(fù)途徑

    常見的污染物包括三硝基苯甲硝胺(Tetryl)、梯恩梯(TNT)[30-31]。心肌黃酶是目前公認(rèn)一種可有效修復(fù)由硝基化合物造成的污染的蛋白酶。心肌黃酶是一種黃素蛋白酶,它的功能是制止醌類自由基和醌類自由基引發(fā)的超氧陰離子(O-2)的生成[32]。該蛋白酶不僅對(duì)一些染料既有降解的特性[33],還能夠高效地對(duì)硝基物進(jìn)行催化還原反應(yīng)。心肌黃酶的還原過程是一種單電子傳遞過程[34]。一氧化碳脫氫酶(CODH)在飽和CO條件下,催化TNT轉(zhuǎn)化成2種單羥胺衍生物(2HA46DNT和4HA26DNT),這些衍生物之后轉(zhuǎn)化為24DHANT,后者會(huì)慢慢轉(zhuǎn)化成Bamberger重排產(chǎn)物,從而達(dá)到對(duì)TNT的降解作用。Shah和Spain報(bào)道了一種對(duì)氧敏感的硝基還原酶—鐵氧化還原蛋白NADP氧化還原酶[35],首先轉(zhuǎn)移1個(gè)電子,使三硝基苯甲硝胺生成陰離子自由基,加氫使之脫去硝基,生成亞硝酸鹽,達(dá)到修復(fù)污染的目的。

    3 結(jié)論

    難降解性有機(jī)污染物,如多芳香烴(PAHs)、環(huán)硝胺類物質(zhì)(RDX、HMX、Tetryl和CL-20)、多氯聯(lián)苯(PCBs)、烷烴類化合物、氯乙烯類、硝基化合物(TNT)等物質(zhì)排放量的日益增多,由于傳統(tǒng)方法無法有效去除該類物質(zhì)引起的污染,因此研究更加清潔的方法來解決難降解性有機(jī)污染物迫在眉睫,而微生物的生物修復(fù)方法因其清潔、環(huán)保、不造成二次污染等優(yōu)點(diǎn),成為目前國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。目前的生物修復(fù)所選用的微生物菌株主要為污染場(chǎng)地篩選出的菌株為主,由于野生菌株處理難降解有機(jī)物時(shí)修復(fù)效率較低,而且分解氧化此類污染水中所含苯酚、氯苯胺及DDT等有機(jī)物的微生物的世代期較長(zhǎng),難以在常規(guī)的生物處理構(gòu)建物中大量存留,因此生物修復(fù)在有機(jī)污染物的處理上還沒有形成規(guī)模。

    除傳統(tǒng)的誘變菌種外,隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)(核酸探針技術(shù)、熒光原位雜交、基因重組及基因芯片技術(shù)等)在環(huán)境微生物中的進(jìn)一步應(yīng)用,對(duì)微生物生物修復(fù)途徑及機(jī)理有了深層次了解。明確化合物的降解途徑和生物降解規(guī)律,在此基礎(chǔ)上構(gòu)建能夠高效降解多種污染物的重組菌株,是開發(fā)新的生物降解技術(shù)、培養(yǎng)和馴化適宜的生物種群和生物酶、以及研究有機(jī)污染物生物降解的必然選擇。

    [1]吳克.微生物代謝環(huán)境難降解性有機(jī)物的酶學(xué)研究進(jìn)展[J].生物工程學(xué)報(bào),2009,25(12):1871-1881.

    [2]Oldenhuis R,Vink R L J M,Janssen D B,et al.Degradation of chlorinated aliphatic hydrocarbons by Methylosinus trichosporium OB3b expressing soluble methane monooxygenase[J].Appl Environ Microbiol,1998,55:2819.

    [3]Commandeur L C M,Vaneyseren H E,Opmeer M R,et al.Biodegradation kinetics of highly chlorinated biphenyls by Al-caligenessp JB1 in an aerobic continuous culture system[J].Environ Sci Technol,2001,29(12):3038

    [4]Bouchez M,Blanchet D,Vandecasteele J P.Degradation of polycyclic aromatic hydrocarbons by pure strains and defined strain associations:inhibition phenomena and cometabolism[J].Appl Microbiol Biotechnol,2003,43(1):156.

    [5]Kropp K G,Saftic S,Anderson J T.Transformations of six isomers of dimethylbenzothiophene by three pseudomonas strains[J].Biodegradation,1999,7(3):203.

    [6]Robertson B,Alexander M.Growth-linked and cometabolic biodegradation:possible reason for occurrence or absence of accelerated pesticide biodegradation[J].Pesticide Sci,1995,41(4):311.

    [7]Alvarez-Cohen L,Speitel GE Jr.Kinetics of aerobic cometabolism of chlorinated solvens[J].Bidegradation,2001,12:105-126.

    [8]Sun W J,Liu Y D.Models of the kinetics of biological co-metabolism[J].J of Zhengzhou University:English Science Edtion,2003,24(2):108-112.

    [9]Blumer M.Polycyclic aromatic compounds in nature[J].Sci American,2002,23(4):35-45.

    [10]Saraswathy A,Hallberg R.Degradation of pyrene byindigenous fungi from a former gasworks site[J].FEMS Microbiol Lett,2002,210:227-232.

    [11]Brandt H C A,Watson W P.Monitoring human occupational and environmental exposures to polycyclic aromatic compounds[J].Ann Occup Hyg,2003,47:349-378.

    [12]Hammond E C,Selikof I J,Lawther P L,et al.Inhalation of benz pyrene and cancer in man[J].Ann NY Acad Sci,2000,271:116-124.

    [13]Pritchard PH.Strategy using bioreactors and specially selected micro-organisms for bioremediation of groundwater contaminated with creosote and pentachlorophenol[J].Environ Sci Technol,1993,27:691-698.

    [14]Sims R C,Overcash M R.Fate of polynuclear aromatic compounds(PNAs)in soil-plant systems[J].Residue Reviews,1999,88:1-68.

    [15]Ambrosoli R,Petruzzelli L,Minati J L,et al.Anaerobic PAH degradation in soil by a mixed bacterial consortium under denitrifying conditions[J].Chemosphere,2005,60:1231-1236.

    [16]Zhang X,Sullivan E R,Young L Y.Evidence for aromatic ring reduction in the biodegradation pathway of carboxylated naphthalene by a sulphate-reducing consortium[J].Biodegradation,2000(11):117-124.

    [17]Lee J Y,Jung K H,Choi S H,et al.Combination of the tod and the tol pathways in redesigning a metabolic route of Pseudomonas putida for the mineralization of a benzene,toluene,and pxylene mixture[J].Appl Envir Microbiol,1995,61:2211-2217.

    [18]劉和,吳堅(jiān)陽(yáng),陳英旭.叢毛睪丸酮單胞菌ZD4-1和銅綠假單胞菌ZD4-3降解芳香烴化合物的機(jī)理[J].微生物學(xué)報(bào),2004,44(1):107-110.

    [19]劉和.芳香烴化合物的微生物降解及基因工程菌的構(gòu)建[D].杭州:浙江大學(xué),2004.

    [20]Arsendorf J J,F(xiàn)ocht D D.A Meta cleavage pathway for 4-chlorobenzoate,an intermediate in the metabolism of 4-chlorobiphenyl by Pseudomonas cepacia P116[J].Appl Environ Microbiol,1995,61:443-447.

    [21]Bhushan B,Halasz A,Hawari J.Nitroreductase catalyzed biotransformation of CL-20[J].Biochemical and Biophysical Research Communications,2004,322:271-276.

    [22]Bhushan B,Halasz A,Spain J C,et al.Diaphorase catalyzed biotransformation of RDX via N-denitrationmechanism[J].Biochemical and Biophysical ResearchCommunications,2002,296:779-784.

    [23]Bhushan B,Paquet L,Halasz A,et al.Mechanism of xanthine oxidase catalyzed biotransformation of HMXunder anaerobic conditions[J].Biochemical and Biophysical Research Communication,2003,306:509-515.

    [24]陸健.高效烷烴降解菌XCZ的分離、鑒定及其烷烴單加氧酶基因alkB功能的研究[D].南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

    [25]張璐,趙碩偉,李鳳玲,等.石油烴降解菌Rhodococcus sp.15-3的分離鑒定及特性研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),2008(5):1737-1741.

    [26]Seeger M,Timmis K N,Hofer B.Bacterial pathways for the degradation of polychlorinated biphenyls[J].Marine Chemistry,1997,58:327-333.

    [27]Abramowicz D A.Aerobic and anaerobic biodegradation of PCBs:A review[J].Critical Rev Biotechnol,2000,10:241-251.

    [28]Higson F K,Focht D D.Bacterial degradation of ring-chlorinated acetophenones[J].Appl Environ Microbiol,1998,56:3678-3685.

    [29]Micbael T Saul.Aerobic cometabolism of halogenated aliphatic hydrocarbons:a technology overview[J].Remediation,2001(1):29-36.

    [30]Talmage S S,Opresko D M,Maxwel C J,et al.Nitroar-omatic munition compounds:environmental effects andscreening values[J].Environmental Contamination Toxicology,1999,161:152-156.

    [31]Gong P,Hawari J,Thiboutot S.Toxicity of octahydro1,3,5,7-tetranitro-1,3,5,7-tetrazocine(HMX)to soilmicrobes[J].Environmental Contamination Toxicology,2002,69:97-103.

    [32]Guan J Y,Huang S M,Zhang Z L,et al.Study on Gene expression of DT diaphorase in ischemic myocardium from rats induced byβnaphthoflavone[J].Chinese Journal of Cndemiology,1998,17(6):359-361.

    [33]Aplan F,Setlow P,Kaplan N O.Purification and properties of a DPNH-TPNH diaphorase from clostridium kluyveri,Arch[J].Biochemical and Biophysical Research Communications,2003,132:91-98.

    [34]Ritter C L,Malejka-Giganti D.Nitroreduction of nitra ted and C-9 oxidized uorenes in vitro[J].Chemical Research in Toxicology,1998,11:1361-1367.

    [35]Shah M M,Spain J C.Elimination of nitrite from theexplosive 2,4,6-trinitrophenylmethylnitramina(tetryl)catalyzed by ferredoxin NADP oxidoreductase fromspinach[J].Biochemical Biophysical Research Communications,1996,220:563-568.

    猜你喜歡
    加氧酶芳香烴氯乙烯
    系列芳香烴在土壤中洗脫規(guī)律的分子動(dòng)力學(xué)模擬
    吲哚胺2,3-雙加氧酶在結(jié)核病診斷和治療中的作用
    氯乙烯生產(chǎn)中變溫吸附脫水工藝的使用及改進(jìn)
    職業(yè)性氯乙烯中毒的預(yù)防
    先天性心臟病相關(guān)性肺動(dòng)脈高壓肺組織芳香烴受體的表達(dá)及其與肺血管重構(gòu)的相關(guān)性研究
    血紅素加氧酶-1對(duì)TNF-α引起內(nèi)皮細(xì)胞炎癥損傷的保護(hù)作用
    吲哚胺2,3雙加氧酶在系統(tǒng)性近平滑念珠菌感染小鼠中的作用
    偏氯乙烯生產(chǎn)精餾過程仿真和優(yōu)化
    不同微生物來源的加氧酶及其催化反應(yīng)特征的研究進(jìn)展
    道路灰塵中多環(huán)芳香烴污染研究
    午夜福利免费观看在线| av超薄肉色丝袜交足视频| 99香蕉大伊视频| 国产成人啪精品午夜网站| 中文字幕高清在线视频| 一二三四在线观看免费中文在| 999久久久国产精品视频| 在线免费观看的www视频| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 99热网站在线观看| 久久青草综合色| 久久香蕉精品热| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲黑人精品在线| 大码成人一级视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产成人欧美| 欧美黑人欧美精品刺激| 成年人黄色毛片网站| 99久久综合精品五月天人人| 免费日韩欧美在线观看| 国产淫语在线视频| 18禁美女被吸乳视频| 免费在线观看黄色视频的| 精品久久久久久久久久免费视频 | 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产午夜精品久久久久久| 男人的好看免费观看在线视频 | 欧美性长视频在线观看| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产免费现黄频在线看| av片东京热男人的天堂| 一本综合久久免费| 国产一区有黄有色的免费视频| 精品久久久久久久毛片微露脸| 国产国语露脸激情在线看| 日日夜夜操网爽| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 一进一出好大好爽视频| 免费看十八禁软件| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲中文av在线| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 国产成人系列免费观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 欧美黄色淫秽网站| 色老头精品视频在线观看| 十八禁高潮呻吟视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 精品第一国产精品| 日韩中文字幕欧美一区二区| 日韩欧美三级三区| 69精品国产乱码久久久| 亚洲av片天天在线观看| 在线观看一区二区三区激情| 一级片免费观看大全| 国产成人欧美在线观看 | 亚洲精品自拍成人| 黄片播放在线免费| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 日韩三级视频一区二区三区| 性少妇av在线| 黑人操中国人逼视频| 乱人伦中国视频| 国产精品一区二区在线观看99| 人人妻人人澡人人看| 黄色毛片三级朝国网站| 飞空精品影院首页| 亚洲性夜色夜夜综合| 很黄的视频免费| 在线国产一区二区在线| 国产一区有黄有色的免费视频| 五月开心婷婷网| 国产国语露脸激情在线看| 国产成人精品久久二区二区免费| 午夜影院日韩av| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 欧美色视频一区免费| 午夜免费鲁丝| 国产高清视频在线播放一区| 国产亚洲欧美精品永久| 久久国产精品影院| 亚洲精品美女久久av网站| 欧美色视频一区免费| 窝窝影院91人妻| 欧美日韩亚洲高清精品| 99在线人妻在线中文字幕 | 在线视频色国产色| 91av网站免费观看| 搡老乐熟女国产| 午夜两性在线视频| 在线天堂中文资源库| 亚洲人成电影免费在线| 国产亚洲精品一区二区www | 欧美最黄视频在线播放免费 | 午夜福利视频在线观看免费| 国产精品久久久人人做人人爽| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 欧美乱妇无乱码| 波多野结衣一区麻豆| 亚洲综合色网址| 真人做人爱边吃奶动态| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 91字幕亚洲| 亚洲男人天堂网一区| 黄频高清免费视频| 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 亚洲第一av免费看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 极品教师在线免费播放| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 美女 人体艺术 gogo| 黑人猛操日本美女一级片| 老司机午夜十八禁免费视频| 高清欧美精品videossex| 国产又爽黄色视频| 最新的欧美精品一区二区| 91老司机精品| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 在线观看一区二区三区激情| 免费在线观看完整版高清| 国产成人精品在线电影| 久久久久国内视频| 国产97色在线日韩免费| 韩国av一区二区三区四区| 国产成人精品无人区| 男女免费视频国产| 99热国产这里只有精品6| svipshipincom国产片| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲熟女毛片儿| 无遮挡黄片免费观看| 美女高潮到喷水免费观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 国产单亲对白刺激| 看片在线看免费视频| 在线观看www视频免费| 99re在线观看精品视频| 大陆偷拍与自拍| 后天国语完整版免费观看| svipshipincom国产片| 又黄又粗又硬又大视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 久久天堂一区二区三区四区| 成年人黄色毛片网站| 色播在线永久视频| 少妇被粗大的猛进出69影院| 麻豆国产av国片精品| 在线国产一区二区在线| 18禁国产床啪视频网站| 午夜老司机福利片| 国产精品免费视频内射| 大香蕉久久网| 国产精品免费大片| 久久人人97超碰香蕉20202| 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 丰满饥渴人妻一区二区三| 精品久久久久久,| 国产精品av久久久久免费| bbb黄色大片| 国产高清国产精品国产三级| 国产精品综合久久久久久久免费 | 亚洲三区欧美一区| 大陆偷拍与自拍| www.精华液| 身体一侧抽搐| 在线看a的网站| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 999精品在线视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产高清videossex| 超碰97精品在线观看| 90打野战视频偷拍视频| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲精品国产区一区二| 69av精品久久久久久| 最新美女视频免费是黄的| 乱人伦中国视频| 电影成人av| 高潮久久久久久久久久久不卡| 精品人妻1区二区| 免费人成视频x8x8入口观看| 99久久99久久久精品蜜桃| 精品视频人人做人人爽| 国产熟女午夜一区二区三区| 欧美乱色亚洲激情| www.999成人在线观看| bbb黄色大片| 精品福利观看| 日韩视频一区二区在线观看| 黄色a级毛片大全视频| 嫩草影视91久久| 国产成人精品无人区| 亚洲精品久久午夜乱码| 精品一品国产午夜福利视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 少妇 在线观看| av有码第一页| 国产片内射在线| 亚洲伊人色综图| 视频在线观看一区二区三区| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 色综合欧美亚洲国产小说| 天堂俺去俺来也www色官网| 久久久国产精品麻豆| 成熟少妇高潮喷水视频| 丝袜在线中文字幕| 久久99一区二区三区| 午夜免费鲁丝| 国产欧美日韩一区二区三| 性少妇av在线| 中文字幕制服av| 亚洲一码二码三码区别大吗| 丝袜美足系列| 午夜免费观看网址| 99久久精品国产亚洲精品| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 日韩欧美三级三区| www.精华液| 99久久人妻综合| 99riav亚洲国产免费| 亚洲欧美一区二区三区久久| 日本黄色日本黄色录像| 欧美国产精品一级二级三级| 国产在线一区二区三区精| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 最近最新免费中文字幕在线| 99国产精品一区二区三区| 天堂√8在线中文| 亚洲avbb在线观看| 男女午夜视频在线观看| 99精品久久久久人妻精品| a级毛片黄视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 高潮久久久久久久久久久不卡| 欧美在线黄色| 操美女的视频在线观看| 日韩免费av在线播放| 久久久久久久精品吃奶| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产精品久久久久成人av| 亚洲久久久国产精品| 777米奇影视久久| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 久久精品亚洲av国产电影网| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲精品美女久久av网站| 国产亚洲欧美精品永久| 18禁观看日本| av网站免费在线观看视频| 精品高清国产在线一区| 亚洲成人国产一区在线观看| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 成人国产一区最新在线观看| 99香蕉大伊视频| 久久国产精品影院| 久久人妻熟女aⅴ| av一本久久久久| 国产视频一区二区在线看| 99re在线观看精品视频| 极品教师在线免费播放| 老司机午夜福利在线观看视频| 精品国产亚洲在线| 久久久久久久久久久久大奶| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 99在线人妻在线中文字幕 | 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国产成人啪精品午夜网站| videos熟女内射| 男人操女人黄网站| 亚洲熟女毛片儿| 交换朋友夫妻互换小说| av不卡在线播放| 大香蕉久久网| 黄片播放在线免费| 欧美激情 高清一区二区三区| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲欧美色中文字幕在线| 中文字幕人妻熟女乱码| 一边摸一边做爽爽视频免费| 久久久久久久精品吃奶| 亚洲国产精品合色在线| 日本a在线网址| 国产精品电影一区二区三区 | 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 久久久国产精品麻豆| 久久国产精品人妻蜜桃| 久久中文看片网| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 久久国产乱子伦精品免费另类| 国产欧美日韩一区二区精品| 中文亚洲av片在线观看爽 | 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 后天国语完整版免费观看| 亚洲五月色婷婷综合| 大型av网站在线播放| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 露出奶头的视频| 黄色a级毛片大全视频| 丰满的人妻完整版| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 精品一区二区三卡| 国产亚洲欧美精品永久| 一a级毛片在线观看| 99久久精品国产亚洲精品| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 亚洲七黄色美女视频| 99国产精品99久久久久| 国产欧美亚洲国产| 国精品久久久久久国模美| 欧美精品高潮呻吟av久久| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 成年人午夜在线观看视频| 美女高潮到喷水免费观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区 | 午夜久久久在线观看| 精品亚洲成国产av| 91国产中文字幕| 国产精品免费视频内射| 丝袜人妻中文字幕| 欧美成人午夜精品| 亚洲五月婷婷丁香| 久久国产精品影院| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 亚洲欧美一区二区三区黑人| 老司机深夜福利视频在线观看| 视频区欧美日本亚洲| 黄色毛片三级朝国网站| 91成年电影在线观看| 久久青草综合色| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 免费在线观看日本一区| 久久久水蜜桃国产精品网| 黄色怎么调成土黄色| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 国产片内射在线| 少妇被粗大的猛进出69影院| 国产精品国产高清国产av | 国产一区在线观看成人免费| 免费观看人在逋| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲全国av大片| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 精品福利永久在线观看| 精品国内亚洲2022精品成人 | 精品久久久久久久毛片微露脸| 91麻豆av在线| 亚洲精品国产区一区二| 男女免费视频国产| 亚洲色图综合在线观看| 欧美在线黄色| 人人妻人人澡人人看| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲人成77777在线视频| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 精品亚洲成国产av| av福利片在线| 激情在线观看视频在线高清 | 中文字幕最新亚洲高清| 亚洲美女黄片视频| 超色免费av| 热re99久久国产66热| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲中文字幕日韩| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 黑人欧美特级aaaaaa片| 91成人精品电影| 亚洲熟女精品中文字幕| 色老头精品视频在线观看| 美女高潮到喷水免费观看| 高清在线国产一区| 男女午夜视频在线观看| 制服诱惑二区| 亚洲色图av天堂| 成人亚洲精品一区在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3 | 国产成人精品在线电影| 午夜福利影视在线免费观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 亚洲av成人av| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲精品久久午夜乱码| 精品久久久久久久毛片微露脸| 午夜91福利影院| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 美女国产高潮福利片在线看| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 女人精品久久久久毛片| 国产淫语在线视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 黄片小视频在线播放| 久久久久久久久免费视频了| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 精品国产国语对白av| 国产精品av久久久久免费| 国产免费男女视频| 交换朋友夫妻互换小说| 日本黄色视频三级网站网址 | 亚洲欧美色中文字幕在线| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 一个人免费在线观看的高清视频| 超碰成人久久| 久久精品成人免费网站| 飞空精品影院首页| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲第一av免费看| 国产高清videossex| 男女床上黄色一级片免费看| 一级毛片精品| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产精华一区二区三区| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 久久 成人 亚洲| 好男人电影高清在线观看| 亚洲精华国产精华精| 午夜福利影视在线免费观看| 免费在线观看完整版高清| 精品国内亚洲2022精品成人 | 成年女人毛片免费观看观看9 | e午夜精品久久久久久久| 无遮挡黄片免费观看| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 久久中文看片网| 日日夜夜操网爽| 黄色视频,在线免费观看| 色老头精品视频在线观看| 久久草成人影院| 日本五十路高清| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 精品视频人人做人人爽| 亚洲在线自拍视频| 久久国产精品大桥未久av| 欧美精品啪啪一区二区三区| 一区二区三区精品91| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产精品亚洲av一区麻豆| 一区福利在线观看| 欧美久久黑人一区二区| 午夜福利在线免费观看网站| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 日韩人妻精品一区2区三区| 成人特级黄色片久久久久久久| 操出白浆在线播放| 波多野结衣av一区二区av| 国产精品 欧美亚洲| 午夜福利,免费看| 精品高清国产在线一区| 99国产精品一区二区蜜桃av | 99香蕉大伊视频| 91成人精品电影| 国产精品永久免费网站| 啦啦啦 在线观看视频| 91九色精品人成在线观看| 久久久久久久精品吃奶| 久久婷婷成人综合色麻豆| 日本vs欧美在线观看视频| 精品一品国产午夜福利视频| 免费观看精品视频网站| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 欧美日韩福利视频一区二区| 丁香欧美五月| 精品一区二区三区av网在线观看| 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲精品成人av观看孕妇| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产一区有黄有色的免费视频| 国产人伦9x9x在线观看| 五月开心婷婷网| 亚洲国产精品合色在线| 制服诱惑二区| 在线视频色国产色| av天堂久久9| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产乱人伦免费视频| 成人黄色视频免费在线看| 精品亚洲成国产av| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 90打野战视频偷拍视频| 九色亚洲精品在线播放| 人人妻人人澡人人看| av在线播放免费不卡| 精品久久久久久久久久免费视频 | 免费看十八禁软件| av线在线观看网站| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产精品九九99| 成年人午夜在线观看视频| tocl精华| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产成人av激情在线播放| 亚洲精品粉嫩美女一区| 757午夜福利合集在线观看| 制服诱惑二区| 一级a爱片免费观看的视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 欧美激情高清一区二区三区| 国产亚洲一区二区精品| 精品国产一区二区久久| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 窝窝影院91人妻| 天堂中文最新版在线下载| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 99久久精品国产亚洲精品| 欧美午夜高清在线| 欧美乱码精品一区二区三区| 超色免费av| 国产野战对白在线观看| av天堂久久9| 亚洲性夜色夜夜综合| 一边摸一边做爽爽视频免费| 亚洲免费av在线视频| 在线免费观看的www视频| 欧美乱码精品一区二区三区| 在线观看免费日韩欧美大片| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 我的亚洲天堂| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲精品乱久久久久久| 一二三四社区在线视频社区8| 欧美国产精品va在线观看不卡| 久久九九热精品免费| 亚洲美女黄片视频| 两个人看的免费小视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产乱人伦免费视频| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产免费av片在线观看野外av| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 超色免费av| 精品久久久久久,| 国产成人av激情在线播放| 久久精品国产亚洲av高清一级| 飞空精品影院首页| 法律面前人人平等表现在哪些方面| videosex国产| 亚洲熟女毛片儿| 三级毛片av免费| 美女午夜性视频免费| 搡老乐熟女国产| 岛国毛片在线播放| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 大型av网站在线播放| 久热爱精品视频在线9| 亚洲黑人精品在线| 妹子高潮喷水视频| 亚洲一区高清亚洲精品| 99精品欧美一区二区三区四区| www日本在线高清视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产精品.久久久| 国产精品一区二区精品视频观看| 黄色片一级片一级黄色片| 国产欧美日韩一区二区三| 成人永久免费在线观看视频| 久9热在线精品视频| 一a级毛片在线观看| 色综合婷婷激情| 黄片大片在线免费观看| 国产一区在线观看成人免费| 中文字幕高清在线视频| 一区二区三区精品91| 国产xxxxx性猛交| 男男h啪啪无遮挡| 桃红色精品国产亚洲av| 精品久久久久久,| 日日夜夜操网爽| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 国产在线精品亚洲第一网站| 亚洲av熟女| 99久久人妻综合| 91老司机精品| 夜夜爽天天搞| 亚洲精品在线观看二区| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 啪啪无遮挡十八禁网站| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 黑人欧美特级aaaaaa片| cao死你这个sao货| 十八禁高潮呻吟视频| 人妻丰满熟妇av一区二区三区 | 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 波多野结衣一区麻豆| 国产免费av片在线观看野外av| 又黄又粗又硬又大视频| 99热国产这里只有精品6| a级片在线免费高清观看视频| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 欧美色视频一区免费| av视频免费观看在线观看| 高清欧美精品videossex| 国产精品美女特级片免费视频播放器 |