• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    有機(jī)污染物的微生物修復(fù)研究進(jìn)展

    2012-03-28 16:47:12王文飛劉銘瑤李德山
    關(guān)鍵詞:加氧酶芳香烴氯乙烯

    王文飛,劉銘瑤,李德山

    (東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,哈爾濱 150030)

    有機(jī)物污染由于其殘留期長(zhǎng)、生物蓄積度高及對(duì)生物體危害性大而備受關(guān)注[1]。目前對(duì)有機(jī)污染物的處理方法主要有填埋法、工程治理法和生物處理法。其中,填埋法由于難以阻止有機(jī)污染物在土壤環(huán)境中的遷移擴(kuò)散以及對(duì)地下水的進(jìn)一步污染,目前已經(jīng)被摒棄;工程治理法由于其投資大、占地多又需特殊設(shè)備,同時(shí)會(huì)產(chǎn)生二級(jí)垃圾,也不是最佳的處理方法。與上兩種方法相比,生物處理法主要利用天然生物(以微生物為主),利用生物體本身作為催化劑來降解環(huán)境中有機(jī)污染物。目前生物處理主要利用從被污染場(chǎng)地中篩選出可利用的菌株對(duì)污染物進(jìn)行處理,由于菌株活力不夠,該方法存在其降解效果不佳,出水COD濃度偏高,難以達(dá)到國(guó)家排放標(biāo)準(zhǔn)等問題,不能完全取代填埋及工程治理法。隨著近幾年分子生物學(xué)及微生物學(xué)的發(fā)展,科研人員通過基因組學(xué)、酶學(xué)等手段對(duì)降解微生物代謝有機(jī)污染物的機(jī)制有了更深的了解,本文總結(jié)了典型的有機(jī)污染物的生物修復(fù)途徑研究進(jìn)展[2-6],為研究人員通過基因工程等技術(shù)進(jìn)行污染物治理菌種的改良提供理論依據(jù)。

    1 微生物修復(fù)

    微生物對(duì)有機(jī)污染物的生物修復(fù)主要通過兩種方式來完成,一種是生長(zhǎng)代謝的方式,另一種是通過微生物的活動(dòng)改變化學(xué)或物理環(huán)境而間接作用于有機(jī)污染物的方式。能夠進(jìn)行生長(zhǎng)代謝生物修復(fù)的微生物本身含降解該有機(jī)物的酶系基因,或本身雖無該酶系基因,但是經(jīng)誘導(dǎo)或環(huán)境存在選擇壓力,基因發(fā)生重組或改變產(chǎn)生了新的降解酶系,能以有機(jī)污染物為碳源和能源物質(zhì)進(jìn)行分解和利用。具有第二種代謝方式的微生物又分為以下3種:①礦化作用:微生物直接以有機(jī)污染物作為生長(zhǎng)基質(zhì),將其完全分解成無機(jī)物;②共代謝作用:共代謝型微生物不能利用有機(jī)污染物作為碳源和能源,須從其它底物中獲取大部分或全部的碳源和能源,共代謝基質(zhì)選擇和代謝酶的誘導(dǎo)是控制目標(biāo)污染物降解的關(guān)鍵因素,高濃度有機(jī)污染物對(duì)共代謝微生物存在明顯的抑制作用;③種間協(xié)同代謝:同一環(huán)境中的幾種微生物聯(lián)合代謝某種有機(jī)污染物。目前對(duì)于微生物生物修復(fù)研究的核心問題是關(guān)鍵酶的誘導(dǎo)及其活性的維持、生長(zhǎng)機(jī)制與目標(biāo)污染物之間的競(jìng)爭(zhēng)抑制、目標(biāo)污染物及其中間降解產(chǎn)物對(duì)微生物毒性作用[7-8]。

    2 有機(jī)污染物的生物修復(fù)途徑

    2.1 芳香烴族化合物的生物修復(fù)途徑

    有機(jī)物、石油、汽油等產(chǎn)品的不完全燃燒和各類工業(yè)活動(dòng)都會(huì)導(dǎo)致芳香烴族化合物特別是多環(huán)芳香烴(PAHs)的產(chǎn)生[9-12],這類物質(zhì)對(duì)自然界的危害極大且利用傳統(tǒng)方法很難消除該類物質(zhì)。近年來的研究結(jié)果顯示,自然界中多種細(xì)菌、真菌和藻類等微生物可以用于PAHs的清除[13]。

    Sims等研究發(fā)現(xiàn),PAHs修復(fù)的第一步反應(yīng)是由雙加氧酶/單加氧酶參與下的氧化芳香環(huán)步驟,此后再經(jīng)過加氫、脫水等作用使C-C鍵斷裂,減少苯環(huán)數(shù),最后將污染物降解為TCA循環(huán)過程中的中間代謝產(chǎn)物[14]。真菌中含有的單加氧酶可加一個(gè)氧原子到苯環(huán)上形成環(huán)氧化物,加入H2O產(chǎn)生反式二醇和酚。細(xì)菌體內(nèi)的雙加氧酶可加兩個(gè)氧原子到苯環(huán)上,氧化為順式二醇,脫氫產(chǎn)生酚,最終將底物降解成三羧酸循環(huán)過程中的中間關(guān)鍵代謝產(chǎn)物,進(jìn)入循環(huán)氧化,近年來的研究結(jié)果顯示這一過程還伴隨著脫氮和硫的還原反應(yīng)[15-16]。

    對(duì)單環(huán)芳香烴苯的降解主要是利用苯雙加氧酶攻擊苯環(huán),形成鄰苯二酚,鄰苯二酚進(jìn)一步通過間位或鄰位雙加氧酶的作用而產(chǎn)生粘康酸半醛或粘康酸,之后代謝產(chǎn)物被進(jìn)一步降解。對(duì)于側(cè)鏈很長(zhǎng)的烷基取代苯,微生物不會(huì)降解苯環(huán);而對(duì)于側(cè)鏈較短的烷基取代苯,一般是使得苯環(huán)的2,3位羥化,形成不穩(wěn)定的鄰苯二酚類物質(zhì),最后開環(huán)降解。

    已有研究表明,克隆編碼甲苯還原酶的基因todC1C2BA,并將重組質(zhì)粒導(dǎo)入P.putida mt-2中,可徹底降解苯、甲苯和二甲苯[17]等單環(huán)芳香烴。吳堅(jiān)陽(yáng)等從農(nóng)藥廠二沉池污泥中篩選分離得到兩株革蘭氏陰性的芳香烴降解菌ZD4-1和ZD4-3,利用紫外光譜掃描和雙加氧酶對(duì)產(chǎn)物的檢測(cè)發(fā)現(xiàn),菌株ZD4-1利用鄰裂途徑降解苯酚,而ZD4-3則通過間裂途徑降解苯酚,鄰裂途徑的1,2雙加氧酶和間裂途徑的2,3雙加氧酶都是可誘導(dǎo)的雙加氧酶,其活性強(qiáng)烈的依賴于降解底物的出現(xiàn)[18]。劉和從農(nóng)藥廠活性污泥和煤氣廠污水排放口處的土壤中分離到三株降解能力較好的芳香烴降解菌,分別屬于多食鞘氨醇桿菌,睪丸酮叢毛單胞菌和銅綠假單胞菌[19]。其中有關(guān)多食鞘氨醇桿菌對(duì)五氯酚(PCP)的共代謝降解的研究結(jié)果表明,以葡萄糖為生長(zhǎng)底物比以苯酚為生長(zhǎng)底物時(shí)PCP降解效果更好,當(dāng)葡萄糖的量能夠滿足細(xì)菌的生長(zhǎng),提供降解PCP所需的還原性物質(zhì)的量時(shí),則生長(zhǎng)底物不再是PCP降解的限制性因素。

    2.2 環(huán)硝胺類物質(zhì)(RDX、HMX和CL-20)的生物修復(fù)途徑

    環(huán)硝胺類物質(zhì)是軍用火藥,也是一種被廣泛用于化學(xué)工業(yè)和印染工業(yè)中的原料,該物質(zhì)的大量使用對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重的污染。目前已發(fā)現(xiàn)多種好氧細(xì)菌、厭氧細(xì)菌和真菌等可以轉(zhuǎn)化RDX、HMX和CL-20,通過微生物的代謝來降低其對(duì)自然界的危害[20]。

    Hawari認(rèn)為硝基還原酶可以催化cL-20首先形成陰離子自由基,使其處于一種易脫硝基的不穩(wěn)定狀態(tài),進(jìn)而發(fā)生開環(huán),生成的中間產(chǎn)物在水溶液中可被分解生成NH4+、N2O、HCOOH和乙二醛[21]。Bhushan等報(bào)道了來源于厭氧菌Clostridium kluyveri的心肌黃酶(EC.1.8.1.4)催化RDX的反應(yīng),發(fā)現(xiàn)RDX在心肌黃酶的作用下,以尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)為氫供體,首先生成陰離子自由基,即為初級(jí)反應(yīng);隨后RDX自由基發(fā)生脫氮反應(yīng),導(dǎo)致開環(huán),最終水解生成N2O、NH4+、HCHO和NO[22]。第二年,Bhushan又利用黃嘌呤氧化酶催化HMX[23],發(fā)現(xiàn)這種酶在厭氧條件下的催化速度優(yōu)于在有氧條件下的催化速度。在還原的過程中,HMX最終被分解產(chǎn)生亞硝酸鹽、亞甲基二硝基胺、甲醛、一氧化二氮和甲酸和銨鹽。

    2.3 烷烴的生物修復(fù)途徑

    對(duì)烷烴類物質(zhì)污染的研究歷史已久。陸健等從原油中分離篩選到一株可高效降解烷烴類物質(zhì)的細(xì)菌(銅綠假單胞菌,XCZ),XCZ以正十八烷為唯一碳源進(jìn)行復(fù)制增值[24]。研究表明,在以濃度為500 mg·L-1正十八烷為唯一碳源的培養(yǎng)基中,持續(xù)培養(yǎng)XCZ 40 h后正十八烷降解率高達(dá)97.5%,同時(shí)XCZ還可有效降解高濃度原油中C_(13)-C_(32)的直鏈烷烴,對(duì) C_(13)-C_(24)烷的降解率大于80%。張璐等從原油污染土壤中分離的一株石油烴降解菌15-3(紅球菌)也可利用正十八烷為唯一碳源進(jìn)行生長(zhǎng),且該菌株在低溫(10℃)及高鹽(4%~5%NaCl)等惡劣環(huán)境下也具備良好的降解烷烴能力,對(duì)C_13~C_32的正構(gòu)烷烴、芳香烴及姥鮫烷都有一定的降解能力[25]。

    2.4 多氯聯(lián)苯(PCBs)類物質(zhì)的生物修復(fù)途徑

    PCBs是加工絕緣油、阻燃劑、導(dǎo)熱劑、液壓油、增塑劑等材料的主要原料。由于具有極強(qiáng)的脂溶性,PCBs能夠輕易地進(jìn)入自然界的食物鏈,從而在生物體內(nèi)蓄積進(jìn)而危害人類健康。研究表明以自然界中多種微生物都具備降解PCBs等能力。Seeger、Arsendorf、Abramowicz等研究認(rèn)為,對(duì)于氯取代位點(diǎn)集中在一個(gè)苯環(huán)上的氯代聯(lián)苯,其降解途徑是在2,3雙加氧酶的作用下生成氯代苯甲酸和4-羥基戊酸,生成的4-羥基戊酸可被降解菌株徹底礦化,而另一個(gè)產(chǎn)物氯代苯甲酸需被其他微生物進(jìn)一步降解[26-27]。由于自然界中的PCBs降解菌株的修復(fù)效率比較低,無法滿足治理污染的要求??蒲腥藛T目前已經(jīng)在通過重組DNA的方法獲得高效的工程菌以滿足需要。Brenner等利用2,3-雙加氧酶途徑的關(guān)鍵酶基因和寬宿主范圍的質(zhì)粒構(gòu)建了重組工程菌株,含有上述降解酶基因的大腸桿菌可以直接利用PCBs,而且不需要聯(lián)苯誘導(dǎo),從而大大加快了PCBs的修復(fù)速度[28]。

    2.5 氯乙烯類污染物的生物修復(fù)途徑

    氯乙烯類化合物中常見的是三氯乙烯(TEC),是地下水和土壤中的主要污染物。近年來,大量研究證實(shí)氯化物可通過共代謝好氧途徑降解。Michael等從被四氯乙烯污染的土壤中分離出大量對(duì)四氯乙烯及其潛在的降解產(chǎn)物具有修復(fù)能力的菌株,并在人工條件下進(jìn)行馴化和增殖,通過鼓氣和水流循環(huán)的辦法控制地下微生物的生存環(huán)境,進(jìn)而修復(fù)四氯乙烯污染[29]。檢測(cè)回流水獲得的數(shù)據(jù)顯示,采用改技術(shù)手段后,不到1個(gè)月的時(shí)間內(nèi)水中的四氯乙烯的濃度從470 pg·L-1下降到3.5 pg·L-1,四氯乙烯降解的中間產(chǎn)物三氯乙烯、二氯乙烯和一氯乙烯的濃度也在顯著下降,污染物的總?cè)コ试?0%~99%。

    2.6 硝基化合物的生物修復(fù)途徑

    常見的污染物包括三硝基苯甲硝胺(Tetryl)、梯恩梯(TNT)[30-31]。心肌黃酶是目前公認(rèn)一種可有效修復(fù)由硝基化合物造成的污染的蛋白酶。心肌黃酶是一種黃素蛋白酶,它的功能是制止醌類自由基和醌類自由基引發(fā)的超氧陰離子(O-2)的生成[32]。該蛋白酶不僅對(duì)一些染料既有降解的特性[33],還能夠高效地對(duì)硝基物進(jìn)行催化還原反應(yīng)。心肌黃酶的還原過程是一種單電子傳遞過程[34]。一氧化碳脫氫酶(CODH)在飽和CO條件下,催化TNT轉(zhuǎn)化成2種單羥胺衍生物(2HA46DNT和4HA26DNT),這些衍生物之后轉(zhuǎn)化為24DHANT,后者會(huì)慢慢轉(zhuǎn)化成Bamberger重排產(chǎn)物,從而達(dá)到對(duì)TNT的降解作用。Shah和Spain報(bào)道了一種對(duì)氧敏感的硝基還原酶—鐵氧化還原蛋白NADP氧化還原酶[35],首先轉(zhuǎn)移1個(gè)電子,使三硝基苯甲硝胺生成陰離子自由基,加氫使之脫去硝基,生成亞硝酸鹽,達(dá)到修復(fù)污染的目的。

    3 結(jié)論

    難降解性有機(jī)污染物,如多芳香烴(PAHs)、環(huán)硝胺類物質(zhì)(RDX、HMX、Tetryl和CL-20)、多氯聯(lián)苯(PCBs)、烷烴類化合物、氯乙烯類、硝基化合物(TNT)等物質(zhì)排放量的日益增多,由于傳統(tǒng)方法無法有效去除該類物質(zhì)引起的污染,因此研究更加清潔的方法來解決難降解性有機(jī)污染物迫在眉睫,而微生物的生物修復(fù)方法因其清潔、環(huán)保、不造成二次污染等優(yōu)點(diǎn),成為目前國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。目前的生物修復(fù)所選用的微生物菌株主要為污染場(chǎng)地篩選出的菌株為主,由于野生菌株處理難降解有機(jī)物時(shí)修復(fù)效率較低,而且分解氧化此類污染水中所含苯酚、氯苯胺及DDT等有機(jī)物的微生物的世代期較長(zhǎng),難以在常規(guī)的生物處理構(gòu)建物中大量存留,因此生物修復(fù)在有機(jī)污染物的處理上還沒有形成規(guī)模。

    除傳統(tǒng)的誘變菌種外,隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)(核酸探針技術(shù)、熒光原位雜交、基因重組及基因芯片技術(shù)等)在環(huán)境微生物中的進(jìn)一步應(yīng)用,對(duì)微生物生物修復(fù)途徑及機(jī)理有了深層次了解。明確化合物的降解途徑和生物降解規(guī)律,在此基礎(chǔ)上構(gòu)建能夠高效降解多種污染物的重組菌株,是開發(fā)新的生物降解技術(shù)、培養(yǎng)和馴化適宜的生物種群和生物酶、以及研究有機(jī)污染物生物降解的必然選擇。

    [1]吳克.微生物代謝環(huán)境難降解性有機(jī)物的酶學(xué)研究進(jìn)展[J].生物工程學(xué)報(bào),2009,25(12):1871-1881.

    [2]Oldenhuis R,Vink R L J M,Janssen D B,et al.Degradation of chlorinated aliphatic hydrocarbons by Methylosinus trichosporium OB3b expressing soluble methane monooxygenase[J].Appl Environ Microbiol,1998,55:2819.

    [3]Commandeur L C M,Vaneyseren H E,Opmeer M R,et al.Biodegradation kinetics of highly chlorinated biphenyls by Al-caligenessp JB1 in an aerobic continuous culture system[J].Environ Sci Technol,2001,29(12):3038

    [4]Bouchez M,Blanchet D,Vandecasteele J P.Degradation of polycyclic aromatic hydrocarbons by pure strains and defined strain associations:inhibition phenomena and cometabolism[J].Appl Microbiol Biotechnol,2003,43(1):156.

    [5]Kropp K G,Saftic S,Anderson J T.Transformations of six isomers of dimethylbenzothiophene by three pseudomonas strains[J].Biodegradation,1999,7(3):203.

    [6]Robertson B,Alexander M.Growth-linked and cometabolic biodegradation:possible reason for occurrence or absence of accelerated pesticide biodegradation[J].Pesticide Sci,1995,41(4):311.

    [7]Alvarez-Cohen L,Speitel GE Jr.Kinetics of aerobic cometabolism of chlorinated solvens[J].Bidegradation,2001,12:105-126.

    [8]Sun W J,Liu Y D.Models of the kinetics of biological co-metabolism[J].J of Zhengzhou University:English Science Edtion,2003,24(2):108-112.

    [9]Blumer M.Polycyclic aromatic compounds in nature[J].Sci American,2002,23(4):35-45.

    [10]Saraswathy A,Hallberg R.Degradation of pyrene byindigenous fungi from a former gasworks site[J].FEMS Microbiol Lett,2002,210:227-232.

    [11]Brandt H C A,Watson W P.Monitoring human occupational and environmental exposures to polycyclic aromatic compounds[J].Ann Occup Hyg,2003,47:349-378.

    [12]Hammond E C,Selikof I J,Lawther P L,et al.Inhalation of benz pyrene and cancer in man[J].Ann NY Acad Sci,2000,271:116-124.

    [13]Pritchard PH.Strategy using bioreactors and specially selected micro-organisms for bioremediation of groundwater contaminated with creosote and pentachlorophenol[J].Environ Sci Technol,1993,27:691-698.

    [14]Sims R C,Overcash M R.Fate of polynuclear aromatic compounds(PNAs)in soil-plant systems[J].Residue Reviews,1999,88:1-68.

    [15]Ambrosoli R,Petruzzelli L,Minati J L,et al.Anaerobic PAH degradation in soil by a mixed bacterial consortium under denitrifying conditions[J].Chemosphere,2005,60:1231-1236.

    [16]Zhang X,Sullivan E R,Young L Y.Evidence for aromatic ring reduction in the biodegradation pathway of carboxylated naphthalene by a sulphate-reducing consortium[J].Biodegradation,2000(11):117-124.

    [17]Lee J Y,Jung K H,Choi S H,et al.Combination of the tod and the tol pathways in redesigning a metabolic route of Pseudomonas putida for the mineralization of a benzene,toluene,and pxylene mixture[J].Appl Envir Microbiol,1995,61:2211-2217.

    [18]劉和,吳堅(jiān)陽(yáng),陳英旭.叢毛睪丸酮單胞菌ZD4-1和銅綠假單胞菌ZD4-3降解芳香烴化合物的機(jī)理[J].微生物學(xué)報(bào),2004,44(1):107-110.

    [19]劉和.芳香烴化合物的微生物降解及基因工程菌的構(gòu)建[D].杭州:浙江大學(xué),2004.

    [20]Arsendorf J J,F(xiàn)ocht D D.A Meta cleavage pathway for 4-chlorobenzoate,an intermediate in the metabolism of 4-chlorobiphenyl by Pseudomonas cepacia P116[J].Appl Environ Microbiol,1995,61:443-447.

    [21]Bhushan B,Halasz A,Hawari J.Nitroreductase catalyzed biotransformation of CL-20[J].Biochemical and Biophysical Research Communications,2004,322:271-276.

    [22]Bhushan B,Halasz A,Spain J C,et al.Diaphorase catalyzed biotransformation of RDX via N-denitrationmechanism[J].Biochemical and Biophysical ResearchCommunications,2002,296:779-784.

    [23]Bhushan B,Paquet L,Halasz A,et al.Mechanism of xanthine oxidase catalyzed biotransformation of HMXunder anaerobic conditions[J].Biochemical and Biophysical Research Communication,2003,306:509-515.

    [24]陸健.高效烷烴降解菌XCZ的分離、鑒定及其烷烴單加氧酶基因alkB功能的研究[D].南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

    [25]張璐,趙碩偉,李鳳玲,等.石油烴降解菌Rhodococcus sp.15-3的分離鑒定及特性研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào),2008(5):1737-1741.

    [26]Seeger M,Timmis K N,Hofer B.Bacterial pathways for the degradation of polychlorinated biphenyls[J].Marine Chemistry,1997,58:327-333.

    [27]Abramowicz D A.Aerobic and anaerobic biodegradation of PCBs:A review[J].Critical Rev Biotechnol,2000,10:241-251.

    [28]Higson F K,Focht D D.Bacterial degradation of ring-chlorinated acetophenones[J].Appl Environ Microbiol,1998,56:3678-3685.

    [29]Micbael T Saul.Aerobic cometabolism of halogenated aliphatic hydrocarbons:a technology overview[J].Remediation,2001(1):29-36.

    [30]Talmage S S,Opresko D M,Maxwel C J,et al.Nitroar-omatic munition compounds:environmental effects andscreening values[J].Environmental Contamination Toxicology,1999,161:152-156.

    [31]Gong P,Hawari J,Thiboutot S.Toxicity of octahydro1,3,5,7-tetranitro-1,3,5,7-tetrazocine(HMX)to soilmicrobes[J].Environmental Contamination Toxicology,2002,69:97-103.

    [32]Guan J Y,Huang S M,Zhang Z L,et al.Study on Gene expression of DT diaphorase in ischemic myocardium from rats induced byβnaphthoflavone[J].Chinese Journal of Cndemiology,1998,17(6):359-361.

    [33]Aplan F,Setlow P,Kaplan N O.Purification and properties of a DPNH-TPNH diaphorase from clostridium kluyveri,Arch[J].Biochemical and Biophysical Research Communications,2003,132:91-98.

    [34]Ritter C L,Malejka-Giganti D.Nitroreduction of nitra ted and C-9 oxidized uorenes in vitro[J].Chemical Research in Toxicology,1998,11:1361-1367.

    [35]Shah M M,Spain J C.Elimination of nitrite from theexplosive 2,4,6-trinitrophenylmethylnitramina(tetryl)catalyzed by ferredoxin NADP oxidoreductase fromspinach[J].Biochemical Biophysical Research Communications,1996,220:563-568.

    猜你喜歡
    加氧酶芳香烴氯乙烯
    系列芳香烴在土壤中洗脫規(guī)律的分子動(dòng)力學(xué)模擬
    吲哚胺2,3-雙加氧酶在結(jié)核病診斷和治療中的作用
    氯乙烯生產(chǎn)中變溫吸附脫水工藝的使用及改進(jìn)
    職業(yè)性氯乙烯中毒的預(yù)防
    先天性心臟病相關(guān)性肺動(dòng)脈高壓肺組織芳香烴受體的表達(dá)及其與肺血管重構(gòu)的相關(guān)性研究
    血紅素加氧酶-1對(duì)TNF-α引起內(nèi)皮細(xì)胞炎癥損傷的保護(hù)作用
    吲哚胺2,3雙加氧酶在系統(tǒng)性近平滑念珠菌感染小鼠中的作用
    偏氯乙烯生產(chǎn)精餾過程仿真和優(yōu)化
    不同微生物來源的加氧酶及其催化反應(yīng)特征的研究進(jìn)展
    道路灰塵中多環(huán)芳香烴污染研究
    真人做人爱边吃奶动态| 全区人妻精品视频| av女优亚洲男人天堂| 成人国产综合亚洲| 18+在线观看网站| 精品久久久久久成人av| 国产成人系列免费观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 中亚洲国语对白在线视频| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 高潮久久久久久久久久久不卡| 最近在线观看免费完整版| 午夜日韩欧美国产| 在线观看舔阴道视频| 美女 人体艺术 gogo| 欧美一区二区亚洲| 欧美又色又爽又黄视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 日韩欧美免费精品| 精品国产美女av久久久久小说| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产成人av激情在线播放| 国产精品野战在线观看| 国产av一区在线观看免费| 十八禁网站免费在线| 观看美女的网站| 一本久久中文字幕| 91麻豆av在线| 午夜福利成人在线免费观看| 真实男女啪啪啪动态图| 欧美高清成人免费视频www| 日韩国内少妇激情av| 又黄又粗又硬又大视频| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 亚洲天堂国产精品一区在线| 观看免费一级毛片| 一级毛片高清免费大全| 在线a可以看的网站| 欧美日韩黄片免| 成人国产一区最新在线观看| 亚洲国产精品999在线| 欧美日韩一级在线毛片| 久99久视频精品免费| 免费人成在线观看视频色| 中出人妻视频一区二区| 欧美成狂野欧美在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲精品色激情综合| 午夜a级毛片| 亚洲美女黄片视频| 久久精品91蜜桃| 在线观看舔阴道视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 天堂影院成人在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 男女那种视频在线观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 欧美+亚洲+日韩+国产| 在线观看66精品国产| 日韩欧美在线乱码| 一级毛片高清免费大全| 男女那种视频在线观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲人与动物交配视频| tocl精华| www.www免费av| 国产黄色小视频在线观看| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 99久久精品热视频| 91av网一区二区| 国产一区二区三区视频了| 国产免费男女视频| 国产av麻豆久久久久久久| 又紧又爽又黄一区二区| 黄色视频,在线免费观看| 男女床上黄色一级片免费看| 国产一区二区在线观看日韩 | 在线观看美女被高潮喷水网站 | 在线观看66精品国产| 岛国在线观看网站| 免费在线观看日本一区| 精品久久久久久久久久免费视频| 精品日产1卡2卡| 99久久精品国产亚洲精品| 黄色片一级片一级黄色片| 18美女黄网站色大片免费观看| 岛国在线免费视频观看| 成人特级av手机在线观看| a级毛片a级免费在线| 国产欧美日韩精品亚洲av| 日韩成人在线观看一区二区三区| 久久香蕉精品热| 一个人看的www免费观看视频| 无限看片的www在线观看| 少妇的逼水好多| 在线国产一区二区在线| 真实男女啪啪啪动态图| 日本在线视频免费播放| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产伦人伦偷精品视频| 97超视频在线观看视频| 久久精品国产清高在天天线| 2021天堂中文幕一二区在线观| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 十八禁人妻一区二区| 99久久无色码亚洲精品果冻| 一二三四社区在线视频社区8| 香蕉av资源在线| 无遮挡黄片免费观看| 免费搜索国产男女视频| 九色成人免费人妻av| 亚洲精品色激情综合| 丰满的人妻完整版| 啦啦啦免费观看视频1| 99久久精品热视频| 五月伊人婷婷丁香| 午夜影院日韩av| 欧美又色又爽又黄视频| 精品人妻1区二区| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产黄片美女视频| 国语自产精品视频在线第100页| 亚洲国产精品合色在线| 国产免费男女视频| 欧美不卡视频在线免费观看| 老司机在亚洲福利影院| 国产免费男女视频| 亚洲午夜理论影院| 怎么达到女性高潮| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 天堂影院成人在线观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 成年版毛片免费区| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产探花在线观看一区二区| 国产精品一区二区免费欧美| 天堂网av新在线| 免费人成在线观看视频色| 18+在线观看网站| 日韩精品中文字幕看吧| 国产免费男女视频| 激情在线观看视频在线高清| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 国产熟女xx| 国产精品亚洲美女久久久| www.熟女人妻精品国产| avwww免费| 2021天堂中文幕一二区在线观| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲 国产 在线| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 免费在线观看影片大全网站| 99国产极品粉嫩在线观看| 久久精品国产自在天天线| 在线观看一区二区三区| 一区福利在线观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| АⅤ资源中文在线天堂| а√天堂www在线а√下载| 精品一区二区三区视频在线 | 91在线观看av| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 国内精品久久久久久久电影| 国产中年淑女户外野战色| a在线观看视频网站| 国产精华一区二区三区| 99riav亚洲国产免费| 麻豆成人午夜福利视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产视频内射| 亚洲国产中文字幕在线视频| 久久久国产成人精品二区| 校园春色视频在线观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 天堂影院成人在线观看| 中文字幕久久专区| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 午夜视频国产福利| 欧美乱色亚洲激情| 麻豆成人av在线观看| 久久香蕉精品热| 午夜福利高清视频| 日本与韩国留学比较| 少妇的丰满在线观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久亚洲真实| 免费看十八禁软件| x7x7x7水蜜桃| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 久久草成人影院| 亚洲第一电影网av| 欧美最黄视频在线播放免费| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国内精品美女久久久久久| 男女午夜视频在线观看| eeuss影院久久| 亚洲美女视频黄频| eeuss影院久久| 国产av不卡久久| 色播亚洲综合网| 国产精华一区二区三区| 欧美极品一区二区三区四区| 成人精品一区二区免费| 一区二区三区激情视频| 亚洲 国产 在线| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 午夜福利免费观看在线| 成人av在线播放网站| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | av欧美777| 国产亚洲欧美在线一区二区| 欧美成人a在线观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 国产综合懂色| 久久久久免费精品人妻一区二区| 婷婷亚洲欧美| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 精品久久久久久久末码| 免费在线观看亚洲国产| 天堂网av新在线| 手机成人av网站| 亚洲国产精品999在线| 国产精品日韩av在线免费观看| a在线观看视频网站| 久久草成人影院| 午夜视频国产福利| 中文字幕高清在线视频| 又黄又粗又硬又大视频| 久久精品人妻少妇| 黄色女人牲交| 夜夜爽天天搞| 91麻豆av在线| 国产熟女xx| 91字幕亚洲| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| or卡值多少钱| 一级黄片播放器| 中文字幕久久专区| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 午夜福利18| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 丝袜美腿在线中文| 在线看三级毛片| 国产激情欧美一区二区| 婷婷精品国产亚洲av| 一区二区三区激情视频| 午夜福利欧美成人| 免费看美女性在线毛片视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 天堂√8在线中文| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲人成网站高清观看| 一个人看的www免费观看视频| 一区二区三区免费毛片| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 99久久精品热视频| 国产精品一区二区三区四区久久| 哪里可以看免费的av片| 亚洲最大成人手机在线| 国产单亲对白刺激| 国产av一区在线观看免费| 欧美精品啪啪一区二区三区| 国产三级中文精品| 免费电影在线观看免费观看| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 午夜免费激情av| 欧美3d第一页| 亚洲在线自拍视频| 免费看光身美女| 欧美日韩精品网址| 国产极品精品免费视频能看的| 免费av毛片视频| 夜夜爽天天搞| 久久草成人影院| 欧美高清成人免费视频www| 我的老师免费观看完整版| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 最近视频中文字幕2019在线8| 禁无遮挡网站| 国产久久久一区二区三区| 在线国产一区二区在线| 国产精品久久久久久久电影 | 国产精品嫩草影院av在线观看 | av专区在线播放| 黄色成人免费大全| 精品久久久久久,| 国产一区二区激情短视频| www.www免费av| 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 波野结衣二区三区在线 | 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 男女视频在线观看网站免费| 欧美黄色淫秽网站| 窝窝影院91人妻| 国产99白浆流出| 9191精品国产免费久久| 国产在线精品亚洲第一网站| 一个人看的www免费观看视频| 婷婷精品国产亚洲av在线| 十八禁网站免费在线| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 女人被狂操c到高潮| 少妇的逼水好多| 精品一区二区三区人妻视频| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 超碰av人人做人人爽久久 | 亚洲精品456在线播放app | 一二三四社区在线视频社区8| 欧美成人a在线观看| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲成av人片在线播放无| 我的老师免费观看完整版| 国产精品久久久人人做人人爽| 香蕉丝袜av| 99久久精品国产亚洲精品| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲av二区三区四区| 欧美在线黄色| 免费看美女性在线毛片视频| 一级作爱视频免费观看| 黑人欧美特级aaaaaa片| 精品不卡国产一区二区三区| 热99在线观看视频| 亚洲av熟女| 欧美成人免费av一区二区三区| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 欧美又色又爽又黄视频| 国产精品三级大全| 青草久久国产| 99久久综合精品五月天人人| 啦啦啦韩国在线观看视频| 免费无遮挡裸体视频| 91av网一区二区| 国产精品女同一区二区软件 | 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 身体一侧抽搐| 深夜精品福利| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 小说图片视频综合网站| 成年女人看的毛片在线观看| 美女免费视频网站| 亚洲无线在线观看| 热99re8久久精品国产| 久久草成人影院| 99热精品在线国产| 黄色日韩在线| 人妻夜夜爽99麻豆av| 麻豆国产97在线/欧美| 操出白浆在线播放| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 在线观看av片永久免费下载| 久久久久久久午夜电影| 男人的好看免费观看在线视频| 真实男女啪啪啪动态图| 身体一侧抽搐| 国产一区二区激情短视频| xxxwww97欧美| 国产精品亚洲美女久久久| 3wmmmm亚洲av在线观看| 真人一进一出gif抽搐免费| 麻豆一二三区av精品| 精品电影一区二区在线| a级毛片a级免费在线| 两人在一起打扑克的视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 色av中文字幕| 国产成+人综合+亚洲专区| 亚洲成人精品中文字幕电影| 制服丝袜大香蕉在线| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 欧美不卡视频在线免费观看| 婷婷六月久久综合丁香| 午夜福利在线观看吧| 亚洲人成网站高清观看| 精品一区二区三区人妻视频| 床上黄色一级片| 99热6这里只有精品| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲精品一区av在线观看| 一个人免费在线观看电影| 欧美中文综合在线视频| 国产精品亚洲一级av第二区| 88av欧美| 午夜激情欧美在线| 国产亚洲精品av在线| 国产真人三级小视频在线观看| 久久亚洲真实| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲专区中文字幕在线| 欧美一区二区亚洲| 欧美一级毛片孕妇| 波野结衣二区三区在线 | 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 午夜激情欧美在线| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 最新中文字幕久久久久| 国产淫片久久久久久久久 | 成年人黄色毛片网站| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 我的老师免费观看完整版| 黄色视频,在线免费观看| 精品日产1卡2卡| 日本黄色视频三级网站网址| 国产精品三级大全| 性欧美人与动物交配| 国产乱人伦免费视频| 99在线人妻在线中文字幕| 熟女人妻精品中文字幕| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 久久99热这里只有精品18| 国产亚洲精品久久久com| 在线播放无遮挡| 国产不卡一卡二| 午夜免费激情av| 人人妻人人看人人澡| eeuss影院久久| 给我免费播放毛片高清在线观看| a级一级毛片免费在线观看| 国产一区在线观看成人免费| 嫩草影院入口| 免费观看精品视频网站| 亚洲美女黄片视频| 久久久久国内视频| 国产激情欧美一区二区| 国产av在哪里看| 99国产精品一区二区蜜桃av| 精品久久久久久久久久久久久| 成人av一区二区三区在线看| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 日本在线视频免费播放| 一进一出好大好爽视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 亚洲天堂国产精品一区在线| 免费在线观看影片大全网站| 搡老妇女老女人老熟妇| 午夜久久久久精精品| 日本与韩国留学比较| 国产成人影院久久av| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 最好的美女福利视频网| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产综合懂色| 精品人妻偷拍中文字幕| av在线天堂中文字幕| 日韩高清综合在线| 日本 欧美在线| 看黄色毛片网站| 国产精品久久久人人做人人爽| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产免费男女视频| 亚洲av成人av| www国产在线视频色| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 久久久久久大精品| 久久久久精品国产欧美久久久| 男人舔奶头视频| 亚洲精品久久国产高清桃花| 9191精品国产免费久久| 国产私拍福利视频在线观看| 日本黄色片子视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 内地一区二区视频在线| 嫩草影视91久久| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲最大成人手机在线| 天天一区二区日本电影三级| 少妇的逼好多水| 亚洲av电影不卡..在线观看| 日韩免费av在线播放| 亚洲精华国产精华精| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 高潮久久久久久久久久久不卡| 91av网一区二区| 午夜精品久久久久久毛片777| 99久久九九国产精品国产免费| 久久久久久久午夜电影| 国产久久久一区二区三区| 97碰自拍视频| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲欧美日韩东京热| 国产黄a三级三级三级人| 色尼玛亚洲综合影院| 久久久久久九九精品二区国产| 免费人成视频x8x8入口观看| 波多野结衣巨乳人妻| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产成人欧美在线观看| 两个人的视频大全免费| 两个人视频免费观看高清| 国产激情欧美一区二区| 亚洲激情在线av| 99久久综合精品五月天人人| 中文字幕av成人在线电影| 亚洲精品久久国产高清桃花| 日韩国内少妇激情av| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 天堂影院成人在线观看| 91av网一区二区| 免费在线观看亚洲国产| 成年女人看的毛片在线观看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产高清videossex| 国产真人三级小视频在线观看| 午夜激情福利司机影院| 人妻夜夜爽99麻豆av| 给我免费播放毛片高清在线观看| 老司机在亚洲福利影院| 性色av乱码一区二区三区2| 可以在线观看毛片的网站| 97超视频在线观看视频| 亚洲国产中文字幕在线视频| 日韩欧美精品v在线| 51国产日韩欧美| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲不卡免费看| 国内精品久久久久久久电影| 黄色成人免费大全| а√天堂www在线а√下载| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 亚洲av成人av| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 欧美日本视频| 亚洲18禁久久av| 日韩欧美国产在线观看| 男女下面进入的视频免费午夜| 桃色一区二区三区在线观看| 欧美又色又爽又黄视频| 久久久国产成人免费| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 欧美zozozo另类| 特级一级黄色大片| 亚洲av成人av| 国产在线精品亚洲第一网站| 热99在线观看视频| 欧美黄色淫秽网站| 国产男靠女视频免费网站| 少妇人妻精品综合一区二区 | 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 久久人妻av系列| 99久久精品热视频| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲精品在线观看二区| 国产成人av教育| 日韩免费av在线播放| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 亚洲五月天丁香| 婷婷精品国产亚洲av| 久久亚洲真实| www日本在线高清视频| 免费观看人在逋| 国产欧美日韩精品一区二区| 长腿黑丝高跟| 欧美国产日韩亚洲一区| 搡老岳熟女国产| 色视频www国产| 欧美日本亚洲视频在线播放| 老司机午夜十八禁免费视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 三级毛片av免费| 神马国产精品三级电影在线观看| 两个人视频免费观看高清| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 在线观看一区二区三区| 中国美女看黄片| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 在线观看一区二区三区| 日本三级黄在线观看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 国产精品 欧美亚洲| 男人舔女人下体高潮全视频| 亚洲国产中文字幕在线视频| 午夜福利免费观看在线| 波多野结衣巨乳人妻| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产精品日韩av在线免费观看| 可以在线观看毛片的网站| 成年女人永久免费观看视频| 中文字幕久久专区| АⅤ资源中文在线天堂| 啦啦啦韩国在线观看视频| 综合色av麻豆| 99久久精品一区二区三区| 久久精品影院6| 亚洲在线自拍视频| 天堂√8在线中文| 国产欧美日韩精品一区二区| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 欧美最黄视频在线播放免费| 久久久久久久午夜电影| 99久久99久久久精品蜜桃| 叶爱在线成人免费视频播放| 熟妇人妻久久中文字幕3abv|