孫淑潔 王寶維 葛文華 張名愛 李文立
(1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院,青島 266109;2.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)優(yōu)質(zhì)水禽研究所,青島 266109)
維生素A是家禽必需的一種脂溶性維生素,在維持機(jī)體生長、上皮組織生長與分化、淋巴細(xì)胞的增殖與分化、生殖及骨骼發(fā)育等方面具有重要作用[1],同時具有促進(jìn)和調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝的作用。維生素A缺乏或過量都會對畜禽生長性能及健康產(chǎn)生不利影響,甚至導(dǎo)致死亡[2]。劉建仁等[3]研究指出,大劑量的維生素A能降低肉仔雞血清堿性磷酸酶(AKP)活性及血清鈣、磷含量,影響其骨骼系統(tǒng),嚴(yán)重時出現(xiàn)骨營養(yǎng)不良癥狀。閆素梅[4]報道,飼糧維生素A缺乏可導(dǎo)致肉雞生長緩慢,添加量為3 000 IU/kg時生長速度最快,添加量為12 000 IU/kg時,生長速度有下降的趨勢。迄今為止,家禽維生素A營養(yǎng)的研究主要集中在雞、鴨等禽類,而鵝維生素A營養(yǎng)的研究報道國內(nèi)外較少,國內(nèi)至今尚未明確給出維生素A在鵝飼糧中的適宜添加水平。為探討不同水平維生素A對鵝生長性能的影響,本試驗(yàn)以青農(nóng)灰鵝為研究對象,研究不同水平維生素A對鵝生長性能及血清生化指標(biāo)的影響,旨在探討維生素A對鵝生長性能的影響機(jī)制,豐富國內(nèi)鵝維生素營養(yǎng)研究數(shù)據(jù),為制訂我國鵝的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)提供理論依據(jù)。
維生素A購自浙江新維普添加劑有限公司,其有效成分500 000 IU/g。
試驗(yàn)選擇1日齡青農(nóng)灰鵝200只,隨機(jī)分為5組,每組4個重復(fù),每個重復(fù)10只鵝。各組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0(Ⅰ組)、1 500(Ⅱ組)、3 000(Ⅲ組)、6 000(Ⅳ組)和12 000 IU/kg(Ⅴ組)的維生素A。試驗(yàn)時間為2010年5月16日至2010年8月8日,試驗(yàn)期12周。試驗(yàn)鵝基礎(chǔ)飼糧以玉米和豆粕為主要原料,參照《美國 NRC禽類營養(yǎng)需要量(1994年版)》[5]中推薦的鵝飼糧營養(yǎng)水平設(shè)計配方。全期分為1~4周齡、5~12周齡2個飼養(yǎng)階段,2個階段基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1,基礎(chǔ)飼糧多維中不含維生素A。
試驗(yàn)鵝自由采食和飲水,全期舍飼,自配混合料,喂料要少喂勤添。育雛期隨時調(diào)節(jié)育雛溫度,育雛前3周溫度分別為28~30℃、26~27℃、24~25℃,3周齡以后可逐漸降到常溫。光照:第1~2周,23 h;第3周,18 h;第4~12周采用自然光照。平均相對濕度65%。按常規(guī)程序進(jìn)行疫苗的免疫接種[1~3日齡接種小鵝瘟、鵝副黏病毒二聯(lián)滅活疫苗;10日齡接種禽流感 H5N1,每只0.3 m L;20日齡接種雞新城疫油苗,每只1 m L;50日齡接種禽流感(H5H9)二價滅活苗]。每天記錄喂料量、溫度、死淘數(shù)等相關(guān)數(shù)據(jù),并注意觀察鵝的生長狀況。
1.4.1 生長性能指標(biāo)
于4、12周齡末分別以重復(fù)為單位進(jìn)行空腹稱重,計算1~4周齡、5~12周齡的平均日增重。每周末以重復(fù)為單位,去除料槽中剩余料量,統(tǒng)計飼料消耗,并計算平均日采食量和料重比。每天記錄各試驗(yàn)組死亡情況,計算死淘率。
1.4.2 血清生化指標(biāo)
4、12周齡末稱重后,每重復(fù)隨機(jī)抽取2只鵝,翅靜脈采血10 m L,3 000 r/m in離心制得血清樣品。血清葡萄糖(GLU)含量采用葡萄糖氧化酶法測定;總蛋白(TP)含量采用考馬斯亮藍(lán)法測定;尿素氮(UN)含量采用脲酶法測定;尿酸(UA)含量采用比色法測定;AKP活性采用比色法測定。上述指標(biāo)均用試劑盒測定,試劑盒均購自南京建成生物研究所。
1.4.3 維生素A含量測定
4、12周齡末稱重后,每重復(fù)隨機(jī)抽取2只鵝,翅靜脈采血10 m L,3 000 r/m in離心制得血清樣品,置于-70℃冰箱中保存,待測血清維生素A含量。屠宰后迅速取肝臟置于-70℃冰箱中保存,待測肝臟維生素A含量。血清和肝臟維生素A含量采用高效液相色譜(HPLC)法測定,由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所測定。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diets(air-dry basis) %
采用 SPSS 17.0軟件中單因素方差分析(One-way ANOVA)中的LSD法進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。通過回歸分析對劑量-效應(yīng)關(guān)系作二次曲線擬合,根據(jù)二次方程計算最適添加量。P<0.05和P<0.01分別為差異顯著和極顯著水平。
由表2可見,1~4周齡維生素A添加組平均日增重及平均日采食量均顯著高于未添加組(P<0.05),其中Ⅳ、Ⅴ組平均日增重極顯著高于Ⅰ組(P<0.01),Ⅱ、Ⅳ組平均日采食量極顯著高于Ⅰ組(P<0.01);各組間料重比差異不顯著(P>0.05);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組死淘率分別比Ⅰ組降低了100%、100%、75%、75%。通過擬合二次曲線,只有平均日增重(Y)與飼糧維生素A水平(X)間的二次曲線擬合效果理想:Y=-0.219X2+2.317X+69.287(R2=0.868,PQ=0.132),飼糧維生素A水平為7 934.93 IU/kg時平均日增重最大。平均日采食量和料重比與維生素A添加水平間的二次曲線關(guān)系不明顯(R2<0.700)。
5~12周齡維生素A添加組平均日增重均顯著高于未添加組(P<0.05),其中Ⅳ、Ⅴ組極顯著高于Ⅰ組(P<0.01);Ⅳ組平均日采食量極顯著高于Ⅰ組(P<0.01),Ⅴ組顯著高于Ⅰ組(P<0.05),其他各組之間差異不顯著(P>0.05);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組料重比均低于Ⅰ組但差異不顯著(P>0.05);死淘率分別比Ⅰ組降低了100%、50%、100%、100%。通過擬合二次曲線,平均日增重(Y)與飼糧維生素A水平(X)間的二次曲線為:Y= - 0.184X2+2.196X+51.843(R2=0.939,PQ=0.061),當(dāng)維生素 A 水平為 8 951.09 IU/kg時平均日增重最大。平均日采食量和料重比與維生素A添加水平間的二次曲線關(guān)系不明顯(R2<0.700)。
由表3可見,4周齡時,血清UA含量呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢,其中Ⅲ、Ⅳ組顯著低于Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ組(P<0.05);血清AKP活性呈現(xiàn)先升高后降低趨勢,Ⅲ、Ⅳ組極顯著高于Ⅰ組(P<0.01),Ⅱ組顯著高于Ⅰ組(P<0.05),以Ⅲ組活性最高;各組間血清GLU、TP及UN含量差異均不顯著(P>0.05)。經(jīng)回歸分析,血清UA含量(Y)與飼糧維生素 A水平(X)間呈二次曲線關(guān)系,Y=6.478X2-53.320X+294.389(R2=0.908,PQ=0.092),血清 UA含量最低時,維生素A水平為6 173.20 IU/kg。其他各指標(biāo)與維生素A添加水平間的二次曲線關(guān)系不明顯(R2<0.700)。
12周齡時,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組血清GLU含量均顯著低于Ⅰ組(P<0.05),其他各組間差異不顯著(P>0.05);血清UA含量呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢,其中Ⅳ組顯著低于Ⅰ組(P<0.05),與其他組之間差異不顯著(P>0.05);Ⅳ組血清UN含量極顯著高于Ⅱ組(P<0.01)、顯著高于其他添加組(P <0.05),Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ組間差異不顯著(P >0.05);血清AKP活性呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,Ⅳ組顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ組(P<0.05)。各組間血清TP含量差異不顯著(P>0.05)。回歸分析表明,12周齡時各項(xiàng)血清生化指標(biāo)與維生素A添加水平間的二次曲線關(guān)系均不明顯(R2<0.700)。
表3 維生素A對青農(nóng)灰鵝血清生化指標(biāo)的影響Table 3 Effects of vitam in A on serum biochem ical parameters of Qingnonghui geese
由表4可見,4周齡時,Ⅳ組血清維生素A含量極顯著高于其他各組(P<0.01),Ⅴ組極顯著高于Ⅰ組(P <0.01),顯著高于Ⅱ組(P <0.05),Ⅱ組極顯著高于Ⅰ組(P<0.01),其他組之間差異不顯著(P>0.05);肝臟維生素A含量隨著飼糧中維生素A水平的提高而增加,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組之間差異極顯著(P<0.01)且均極顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P <0.01),Ⅰ、Ⅱ組間差異不顯著(P >0.05)。血清維生素A含量(Y)與飼糧維生素A水平(X)間呈二次曲線關(guān)系,Y= -0.069X2+0.703X+0.539(R2=0.985,PQ=0.015)。
12周齡時,Ⅳ、Ⅴ組血清維生素A含量極著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組(P<0.01),Ⅱ、Ⅲ組極顯著高于Ⅰ組(P<0.01);肝臟維生素A含量隨著飼糧中維生素A水平的提高而增加,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組之間差異極顯著(P<0.01)且均極顯著高于Ⅰ、Ⅱ(P<0.01),Ⅱ組顯著高于Ⅰ組(P <0.05)。血清維生素A含量(Y)與飼糧維生素A水平(X)間呈二次曲線關(guān)系,Y= - 0.050X2+0.671X+0.677(R2=0.985,PQ=0.015)。
表4 維生素A對青農(nóng)灰鵝血清和肝臟維生素A含量的影響Table 4 Effects of vitam in A on tissue vitam in A content of Qingnonghui geese
維生素A是維持家禽正常生長必需的營養(yǎng)物質(zhì),但飼糧中添加不同水平的維生素A對禽類生長性能影響的研究結(jié)果報道不一。魏立民等[6]指出,飼糧中添加維生素A能顯著提高1~24日齡北京鴨的平均日增重及平均日采食量,對料重比的影響不顯著,當(dāng)維生素A的添加量為5 000和10 000 IU/kg時,北京鴨能獲得較好的生長性能;張海琴[7]研究指出,飼糧維生素 A的添加量為3 000 IU/kg時,肉雞可獲得最大的生長速度,添加量高于15 000 IU/kg時,生長速度呈下降趨勢。Aburto等[8]研究指出飼糧中維生素A添加量高于80 000 IU/kg時,肉仔雞體重開始降低。也有相關(guān)報道指出飼糧維生素A添加水平對肉仔雞的料重比影響不顯著[9-10]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼糧維生素A水平為1 500~12 000 IU/kg時能顯著提高試驗(yàn)鵝生長前期(1~4周齡)及后期(5~12周齡)的平均日增重和平均日采食量,降低死淘率,但對料重比影響不顯著。根據(jù)統(tǒng)計分析,1~4周齡和5~12周齡飼糧維生素A水平分別為7 934.93和8 951.09 IU/kg時,青農(nóng)灰鵝可獲得最佳生長性能。
血清中的GLU主要來源于腸道吸收、糖原分解和糖的異生,是機(jī)體所有細(xì)胞的能源物質(zhì)。維生素A可促進(jìn)腎上腺皮質(zhì)酮的分泌,其缺乏會導(dǎo)致腎上腺萎縮和糖原異生作用降低[11]。明慶磊等[12]對高溫應(yīng)激條件下蛋雞添加不同水平維生素A(3 000、7 500和12 000 IU/kg)時,發(fā)現(xiàn)添加3 000 IU/kg組的GLU含量最高,表明飼糧維生素A水平過高可使GLU含量降低。本試驗(yàn)與上述研究結(jié)果存在差異,飼糧中添加不同水平維生素A與未添加組相比,不同程度的降低青農(nóng)灰鵝后期(5~12周齡)血清 GLU含量,且以7 951.92 IU/kg維生素A水平最低。這可能與動物品種、飼養(yǎng)條件及基礎(chǔ)飼糧組成有關(guān),其具體作用機(jī)理有待于進(jìn)一步研究。
血清UN和TP是反映蛋白質(zhì)代謝的2個重要指標(biāo)。UN是體內(nèi)蛋白質(zhì)降解的產(chǎn)物,其含量升高,提示體內(nèi)蛋白質(zhì)分解增強(qiáng),合成降低,氮沉積減少。本試驗(yàn)中,飼糧中添加不同水平維生素A對血清TP含量無顯著影響,對4、12周齡血清UN含量測定結(jié)果顯示,其變化規(guī)律不明顯。這與原立海等[13]和夏兆飛等[14]報道結(jié)果一致。另外,張養(yǎng)東[15]對籠養(yǎng)蛋鴨進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),維生素A添加組與未添加組相比顯著的提高了血清TP含量,但對UN含量影響不顯著。造成這一結(jié)果的原因可能是動物自身調(diào)節(jié)能力不同所造成的。
家禽體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生的氨在肝臟和腎臟合成嘌呤,再轉(zhuǎn)變成UA隨尿排出。血清中的UA含量直接反應(yīng)蛋白分解代謝情況以及肝、腎功能是否正常。維生素A對血清UA含量的影響報道不一。明慶磊等[12]指出,高溫應(yīng)激條件下,肉雞飼糧中隨著維生素A添加水平的提高,血清中UA含量極顯著降低。夏兆飛等[14]在肉雞基礎(chǔ)飼糧中添加不同水平維生素A,發(fā)現(xiàn)缺乏維生素A組及高劑量維生素A組血清UA含量均顯著低于適量組。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,隨著飼糧維生素A水平的提高,血清UA含量呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢,并且前期與后期添加水平分別為6 173.20和6 000.00 IU/kg時血清UA含量最低。這說明飼糧添加適宜水平的維生素A能夠降低血清UA含量,分析其原因可能為以下2點(diǎn):其一,維生素A缺乏或過量影響機(jī)體蛋白質(zhì)代謝,使蛋白質(zhì)合成降低,分解代謝增強(qiáng),導(dǎo)致血清UA含量升高;其二,大劑量的維生素A 使肝腎受損[3,14],造成血清UA沉積增加,使血清UA含量升高。
維生素A是維持成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞正常功能,保障骨細(xì)胞正常代謝的必需物質(zhì),而AKP主要由成骨細(xì)胞產(chǎn)生,因此,維生素A的缺乏對血清AKP活性有一定影響。也有報道指出飼糧中維生素A過高可以使血清AKP活性降低。索蘭弟等[16]報道飼糧維生素A缺乏顯著降低了肉仔雞血清AKP活性,但高劑量的維生素A反而使血清AKP活性降低。本試驗(yàn)結(jié)果顯示隨著飼糧維生素A的增加,血清AKP活性呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,其中3 000、6 000 IU/kg維生素A能極顯著提高4周齡鵝血清AKP活性,6 000 IU/kg維生素A顯著提高了12周齡鵝血清AKP活性。飼糧中添加適量維生素A可不同程度的提高血清AKP活性,說明維生素A在一定程度上能夠提高成骨細(xì)胞活性,促進(jìn)骨骼的正常發(fā)育。
維生素A以游離醇或酯2種形式被輸送到血漿,主要在肝細(xì)胞內(nèi)存儲。有試驗(yàn)顯示,血清、肝臟維生素A含量一定程度上可反映其對機(jī)體的營養(yǎng)作用[4]。姜俊芳等[17]研究發(fā)現(xiàn),4 周齡肉仔雞肝臟、血清維生素A含量均隨著飼糧維生素A添加水平的提高而顯著增加。Green等[18]研究表明,飼糧維生素A缺乏可引起血清維生素A濃度低于正常水平。洪平等[19]對1~3周齡黃羽肉雞研究發(fā)現(xiàn),血漿和肝臟中維生素A含量隨著飼糧中維生素A水平的提高而顯著增加,其中12 000 IU/kg添加水平極顯著高于其他水平。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,隨著飼糧維生素A含量的提高,血清和肝臟維生素A含量均極顯著升高,肝臟維生素A含量與飼糧維生素A添加量之間呈正相關(guān);血清維生素A含量與飼糧維生素A呈二次曲線關(guān)系,經(jīng)回歸分析,4、12周齡血清維生素A含量最高時,其添加水平分別為7 641.30和10 065.00 IU/kg。說明提高飼糧維生素A添加水平能提高其在機(jī)體內(nèi)貯存量。
①飼糧添加維生素A能提高青農(nóng)灰鵝生長性能。從鵝的生長性能考慮,1~4、5~12周齡飼糧維生素A適宜添加水平分別為8 000、9 000 IU/kg。
②飼糧維生素A水平為6 000 IU/kg時,能顯著降低血清GLU和UA含量,提高血清AKP活性。
③血清與肝臟維生素A含量隨飼糧維生素A的添加而顯著升高。
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