構(gòu)樹(shù)葉飼喂小白鼠引起的性別差異

王 雨 武 建 楊慧鵬 何永剛 張益民

（1.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，江蘇 南京 210095；2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院，江蘇 南京 210095）

構(gòu)樹(shù)是一種適應(yīng)性極強(qiáng)的落葉喬木，在我國(guó)大部分地區(qū)均有種植。構(gòu)樹(shù)葉中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、無(wú)機(jī)氮浸出物、鈣、磷以及多種微量元素，是極具開(kāi)發(fā)價(jià)值的非常規(guī)飼料資源[1]。但是，構(gòu)樹(shù)葉粗纖維含量高，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，單胃動(dòng)物難以消化，并且高比例飼喂未發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉時(shí)，會(huì)導(dǎo)致一定的肝腎損傷和體重增加減緩[2]。經(jīng)研究，發(fā)酵之后的構(gòu)樹(shù)葉能夠降低毒性，并改善其營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)[3]。光葉楮是近幾年從日本引進(jìn)的構(gòu)樹(shù)新品種，具有生長(zhǎng)快，產(chǎn)量高，經(jīng)濟(jì)效益好的特點(diǎn)[4]，且與野生構(gòu)樹(shù)相比，光葉楮葉營(yíng)養(yǎng)成分豐富全面，粗蛋白、粗纖維、鈣、磷等含量高[5]。目前，關(guān)于發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉飼喂對(duì)小白鼠性器官、肝功能影響上的性別差異，以及光葉楮構(gòu)樹(shù)葉飼喂小白鼠的毒性試驗(yàn)均未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)將研究不同比例的發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉引起小白鼠的性別差異，以及光葉楮構(gòu)樹(shù)葉飼喂對(duì)小白鼠產(chǎn)生的毒性影響，為構(gòu)樹(shù)葉飼料的實(shí)際應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

由南京市江寧區(qū)青龍山動(dòng)物繁殖場(chǎng)代購(gòu)自南通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心的清潔級(jí)小白鼠72只,體重約16～18 g，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，每組12只。

1.2 試驗(yàn)飼料

試驗(yàn)材料構(gòu)樹(shù)葉：10月份摘采自江蘇省連云港市贛榆縣的構(gòu)樹(shù)枝干的樹(shù)葉；發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉：上述構(gòu)樹(shù)葉參照張益民[3]的方法進(jìn)行發(fā)酵處理；光葉楮樹(shù)葉：相同時(shí)間采自上述地點(diǎn)的日本光葉楮品種構(gòu)樹(shù)的樹(shù)葉。以上構(gòu)樹(shù)葉經(jīng)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院粉碎處理，再由南京青龍山動(dòng)物繁殖場(chǎng)加入試驗(yàn)設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)日糧比例配入后，混勻、加工成條狀。

1.3 試驗(yàn)方法

在小白鼠基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上，按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)水平，將構(gòu)樹(shù)葉配入各組中。即光葉楮組飼喂10%光葉楮未發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉+90%基礎(chǔ)日糧；野生組飼喂10%野生未發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉+90%基礎(chǔ)日糧；發(fā)酵A組10%發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉+90%基礎(chǔ)日糧；發(fā)酵B組20%發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉+80%基礎(chǔ)日糧；發(fā)酵C組30%發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉+70%基礎(chǔ)日糧；對(duì)照組飼喂100%基礎(chǔ)日糧。

各組小白鼠按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)飼養(yǎng)49 d，自由采食，自由飲水。試驗(yàn)期間觀察小白鼠的精神狀況。每天稱(chēng)量每組小白鼠消耗的飼料重量。每周稱(chēng)量每只小白鼠的體重。試驗(yàn)結(jié)束后，稱(chēng)量體重，對(duì)所有小白鼠進(jìn)行斷頸采血，進(jìn)行血液指標(biāo)的分析；同時(shí)解剖所有雄性小白鼠，獲取睪丸，測(cè)量每個(gè)睪丸直徑以及每組睪丸的重量。

料肉比計(jì)算公式：料肉比=消耗飼料總量（kg）/增重總量（kg）

以上試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS軟件統(tǒng)計(jì)分析，采用LSD法進(jìn)行方差分析比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 健康狀況

試驗(yàn)期間所有小白鼠均活動(dòng)正常，生長(zhǎng)狀況良好，無(wú)一死亡。

2.2 料肉比(見(jiàn)表1)

表1 小鼠各組料肉比

由表1可知，前3周內(nèi)，雌性小白鼠料肉比均明顯高于雄性小白鼠，可見(jiàn)雄性小白鼠對(duì)飼料的利用率更高。前2周內(nèi)雌、雄鼠光葉楮組料肉比低于野生品種，而高于對(duì)照組。發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉組料肉比大部分大于對(duì)照組，且料肉比隨著發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉含量增加而呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)，可見(jiàn)發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉濃度較高時(shí)對(duì)飼料利用率有不利影響。

2.3 體重（見(jiàn)表2、表3）

表2 雌性小鼠體重（g）

表3 雄性小鼠體重(g)

由表2可看出，經(jīng)過(guò)一段適應(yīng)期后，雌性小白鼠在較低濃度（10%）的構(gòu)樹(shù)葉（包括光葉楮樹(shù)葉、野生構(gòu)樹(shù)葉以及發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉）配比下，第三周起與對(duì)照組體重?zé)o顯著性差異；發(fā)酵B組與發(fā)酵C組小白鼠體重在試驗(yàn)期內(nèi)則一直明顯低于對(duì)照組，具顯著性差異。由表3可看出，對(duì)于雄性小白鼠，從第三周起，光葉楮組、野生構(gòu)樹(shù)葉組以及高濃度(30%)發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉組在試驗(yàn)期內(nèi)，體重均顯著低于對(duì)照組，可見(jiàn)未發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉與高濃度發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉飼喂對(duì)雄性小白鼠的生長(zhǎng)影響較明顯。未發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉飼喂對(duì)雄性小白鼠的生長(zhǎng)的影響比對(duì)雌性更大。

圖1 雌性小白鼠生長(zhǎng)曲線

圖2 雄性小白鼠生長(zhǎng)曲線

由圖1和圖2可看出，相同飼料喂養(yǎng)下的雄性小白鼠的平均體重和生長(zhǎng)速率均高于雌性小白鼠。雌雄小白鼠在第一周生長(zhǎng)都最為迅速，之后速率都開(kāi)始下降。雌性小白鼠第三周后的體重增長(zhǎng)開(kāi)始趨于平緩；雄性小白鼠在第四周后體重增長(zhǎng)開(kāi)始趨于平緩。

2.4 雄性小白鼠睪丸（見(jiàn)表4）

由表4可以看出，適量比例的發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉（20%）可以促進(jìn)睪丸增大；光葉楮組和發(fā)酵C組睪丸重量明顯低于對(duì)照組?？梢?jiàn)光葉楮構(gòu)樹(shù)葉及高濃度（30%）發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉飼喂對(duì)雄性小白鼠睪丸發(fā)育具有明顯抑制。

2.5 血清生化指標(biāo)（見(jiàn)表5、表6）

表4 雄性小鼠睪丸

表5 雌性小鼠肝功能變化

表6 雄性小鼠肝功能變化

由表5和表6可知，雌雄小白鼠血液中的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶和天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶含量均與對(duì)照組無(wú)顯著性差異?？梢?jiàn)在30%及以下的構(gòu)樹(shù)葉配比飼料對(duì)小白鼠的肝功能無(wú)顯著影響。

3 討論

3.1 料肉比

料肉比指飼養(yǎng)的畜禽增重10 kg所消耗的飼料量，是評(píng)價(jià)飼料報(bào)酬的一個(gè)重要指標(biāo)。后期小鼠生長(zhǎng)進(jìn)入平穩(wěn)期，體重增長(zhǎng)不明顯，且小鼠為嚙齒動(dòng)物，除正常食用外也會(huì)撕咬飼料，造成飼料消耗值的稱(chēng)量上存在一定誤差，因此只取前3周的料肉比進(jìn)行分析。本試驗(yàn)中，發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉組料肉比大部分大于對(duì)照組，且料肉比隨著發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉含量增加而呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)，其可能原因是動(dòng)物不能有效吸收構(gòu)樹(shù)葉中的營(yíng)養(yǎng)成分，飼料中構(gòu)樹(shù)葉添加的比例越大，影響越大；雌性小白鼠的料肉比均明顯高于雄性小白鼠，可見(jiàn)雄性小白鼠對(duì)飼料利用率更大。日本光葉楮品種料肉比普遍低于野生構(gòu)樹(shù)品種及對(duì)照組，可能是因?yàn)楣馊~楮構(gòu)樹(shù)葉營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)更加合理，更利于動(dòng)物吸收利用。

3.2 體重

隨著構(gòu)樹(shù)葉添加水平的增加，小白鼠的體重增長(zhǎng)在下降。雌性小白鼠在10%的構(gòu)樹(shù)葉配比下，經(jīng)前三周適應(yīng)期后與對(duì)照組的體重?zé)o顯著差異；而雄性小鼠除低濃度發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉組外，其他組差異顯著。未發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉飼喂對(duì)雄性小白鼠的生長(zhǎng)影響更大。相同飼料喂養(yǎng)下的小白鼠在平均體重及體重增長(zhǎng)速率方面雄性均高于雌性，且雄性小白鼠體重增長(zhǎng)周期更長(zhǎng)：前5周內(nèi)一直以較快速率增長(zhǎng)，第5周之后較緩慢增長(zhǎng)；而雌性小白鼠第3周后的生長(zhǎng)速率即開(kāi)始變緩。日本光葉楮品種在小白鼠體重方面未見(jiàn)明顯優(yōu)勢(shì)。

3.3 雄性小白鼠睪丸

結(jié)果顯示，適當(dāng)比例的發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉（20%）可以促進(jìn)睪丸增大。雄性小白鼠光葉楮組睪丸重量明顯低于對(duì)照組，由此可見(jiàn)光葉楮品種構(gòu)樹(shù)葉對(duì)雄性小白鼠的性激素分泌可能有顯著影響。同時(shí)，發(fā)酵C組睪丸重量也明顯小于對(duì)照組，可見(jiàn)30%構(gòu)樹(shù)葉配比對(duì)雄性小白鼠性激素分泌也可能有顯著影響。

3.4 血清生化指標(biāo)

丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶與天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶是臨床上檢測(cè)肝功能的重要指標(biāo)。當(dāng)肝臟受到損傷時(shí)，血清中丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶與天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶的含量均會(huì)升高。本試驗(yàn)中所有組的小白鼠此兩項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)顯著增高?？梢?jiàn)30%及以下的構(gòu)樹(shù)葉配比對(duì)小白鼠的肝功能沒(méi)有顯著影響。

4 結(jié)論

①日本光葉楮品種的吸收利用率更高。

②對(duì)于雌性可用10%構(gòu)樹(shù)葉配比的飼料飼喂，發(fā)酵與否均可；但對(duì)于雄性，未發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉以及高比例發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉配比均會(huì)對(duì)體重增長(zhǎng)產(chǎn)生影響，比例越高影響越大，低濃度發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉影響不顯著。

③日本光葉楮品種對(duì)于小鼠體重增長(zhǎng)并無(wú)優(yōu)勢(shì)。

④適量比例的發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉配比（20%）可引起小鼠睪丸直徑的增大。日本光葉楮及30%發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉飼料對(duì)雄性小白鼠睪丸發(fā)育可能具有不利影響。

⑤30%及以下的構(gòu)樹(shù)葉配比飼料對(duì)動(dòng)物的肝功能沒(méi)有顯著影響。

[1]李海新.發(fā)酵構(gòu)樹(shù)葉對(duì)生長(zhǎng)豬營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率、肥育性能、屠宰性能及肉質(zhì)的影響[D].湛江：廣東海洋大學(xué)，2010.

[2]趙峰，劉丹，黃所含，等.構(gòu)樹(shù)葉飼喂小白鼠的亞慢性毒性試驗(yàn)[J].食品與飼料工業(yè)，2006(6):30-32.

[3]張益民,于漢壽,張永忠,等.構(gòu)樹(shù)葉發(fā)酵飼料中營(yíng)養(yǎng)成分的變化[J].飼料工業(yè),2008，29（23）：54-55.

[4]宋協(xié)峰，范學(xué)鵬，孫廣佩，等.新型“搖錢(qián)樹(shù)”——光葉楮[J].種子世界,2008(3):37.

[5]李維英，蘇印泉，玉泉幸一郎，等.光葉楮成分測(cè)定與分析[J].西北林學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，22（3）：141-143.