5971例抗核抗體陰性病例的抗核抗體譜分析

蔣小燕

(四川省醫(yī)學科學院·四川省人民醫(yī)院檢驗科，四川 成都 610072)

自身免疫性疾病是由遺傳、環(huán)境等多種因素引起的機體免疫功能紊亂，臨床表現(xiàn)多樣，多器官受累明顯?？购丝贵w(Antinuclear antibody，ANA)是具有多種細胞核成分的自身抗體，是以真核細胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱，可用于多種自身免疫性疾病的篩查，但其對各種疾病診斷的特異性［1］和敏感性不高［2］。而ANA譜采用免疫印跡技術是將凝膠電泳、抗原抗體反應的固相免疫和免疫標記方法結合，把多種純化的生化性質(zhì)明確的抗原包被到膜條上作為固相，然后讓膜條固定到合成的薄膜上，其特異性較ANA有較大的提高。本研究通過對5971例ANA陰性標本進行ANA譜檢測，探討兩者聯(lián)合檢測的意義及價值。

1 材料與方法

1.1 標本來源 5971例標本均來源于2010年1月至2011年6月四川省人民醫(yī)院疑似自身免疫性疾病的門診和住院病例，年齡0～91歲［(45.83±18.65)歲］。其中男2515例，女3456例。

1.2 方法 ①標本處理:采集受檢者非抗凝靜脈血3 ml，3000 r/min離心10 min并分離血清。②實驗方法:ANA采用間接免疫熒光法檢測，用Garlzeiss熒光顯微鏡觀察結果，滴度＜1∶100判斷為陰性。ANA譜用免疫印跡法，采用EUROLineScan儀器軟件判斷結果。實驗操作嚴格按照說明書進行。試劑均來自于歐蒙(杭州)醫(yī)學實驗診斷有限公司。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 10.0軟件處理檢測數(shù)據(jù)。率的比較采用卡方檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 ANA譜陽性率 在5971例樣本中，ANA譜陽性的標本為422例，占7.07%。共有524個陽性項目。其中抗SSB抗體、抗Scl-70抗體、抗PM-Scl抗體、抗JO-1抗體(抗PCNA)、抗細胞周期蛋白抗體、抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體(抗tis)、抗核糖體P蛋白抗體(抗RPA)和抗AMA-M2型(抗AMAM2)陽性率分別為0.33%、0.35%、0.35%、0.28%、 0.32%、0.83%、0.63%、0.60%和0.75%。其中抗Ro-52抗體陽性率最高，為2.04%;抗SSA陽性率次之，為1.46%，見表1。

2.2 ANA譜陽性抗體陽性率及性別比 ANA陰性但ANA譜陽性共422例，其中男161例，年齡(49.82±20.18)歲;女261例，年齡(45.53±16.85)歲。單項抗體陽性346例，二聯(lián)抗體陽性66例，三聯(lián)及以上抗體陽性10例。單項抗體陽性病例中，男女陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，其中抗dsDNA＆抗組蛋白陽性10例，抗SSA＆抗SSB陽性4例，抗dsDNA＆抗核糖體P蛋白陽性11例，抗Ro-52＆抗線粒體M2型陽性3例，抗SSA＆抗組蛋白陽性3例，見表2。

表1 5971例ANA陰性標本的ANA譜陽性率

表2 422例ANA譜陽性抗體陽性率及性別比 ［%(n/n)］

2.3 不同年齡組ANA譜陽性率比較 抗PCNA≤20歲組最高，≥50組次之，21～49歲組最低(P＜0.05)。不同年齡組抗Ro-52、抗nRNP、抗SSA、抗Sm、抗Jo-1、抗ScL-1、抗AMA-M2和抗dsDNA陽性率差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，見表3。

表3 不同年齡組ANA譜陽性率比較

3 討論

自身免疫性疾病的診斷標準之一是檢測出特異性或相關性的自身抗體［3］。ANA是一組具有多種細胞核成分的自身抗體，理論上考慮若ANA陰性，其他自身抗體不應為陽性，但是在臨床中仍然發(fā)現(xiàn)不少ANA陰性而ANA譜的病例。

本次研究結果顯示，在5971例ANA陰性的病例中，篩查 ANA譜有422例陽性病例，陽性率達7.07%，與文獻報道［4］相比陽性率略低，可能與樣本量多少有關。Manousaakis等［5］也報道，這種現(xiàn)象的臨床意義需在大樣本范圍內(nèi)進行探討。鄧學新等［6］報道，顯示即使抗ENA抗體陽性ANA也存在陰性的現(xiàn)象。在422例ANA譜陽性的病例中，女性占61.8%，以20歲以上年齡段為主，說明自身免疫性疾病在女性中年人群中多發(fā)［7］。

在422例ANA陰性但ANA譜陽性的病例中，以抗Ro-52陽性率最高，為28.9%;抗SSA抗體次之，為20.7%，與文獻報道［3］一致。在ANA譜陽性病例中，單項抗體陽性病例346例，占82.0%;二聯(lián)抗體陽性病例66，比例為15.64%;三聯(lián)及三聯(lián)以上抗體陽性者10例，比例為2.37%。單項抗體陽性病例中男女陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。說明ANA譜能夠檢測出很多自身抗體較弱者，尤其是女性疑似自身免疫疾病患者，結合臨床表現(xiàn)更能使醫(yī)生診斷疾病或者決定定期隨訪提供有益的參考依據(jù)。

對于ANA檢測陰性而ANA譜陽性的原因大多不明。陳寶萍等［8］認為有可能在疾病初期，ANA含量較少難以被檢出或者因臨床治療有效病情得到緩解，總ANA轉陰。也有觀點［9］認為在ANA檢測中采用的二抗均是IgG，而ANA主要有IgG、IgE和IgD 3種類型，對后兩種抗體的忽略也是ANA漏檢的原因之一。因此其原因還需做進一步探討。

綜上所述，對疑似自身免疫性疾病患者，當ANA陰性時，仍有必要進行ANA譜檢測，特別是對中年以上的女性患者更有必要進行兩者聯(lián)合檢測以提高對自身免疫疾病的檢出率，有利于早期治療。

［1］劉蘭，陳娟.抗核抗體在5種自身免疫疾病診斷中的應用［J］.檢驗醫(yī)學與臨床，2010，7(20):2263-2264.

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［3］鄧安梅，仲人前，施笑梅，等.自身免疫病患者可提取核抗體譜與體液免疫的關系［J］.中華醫(yī)學檢驗雜志，1999，22(5):299-300.

［4］孫家祥，李艷.625例抗核抗體陰性病例的抗核抗體譜的檢測分析［J］.海南醫(yī)學，2011，22(7):113-114.

［5］Manoussaki MN，Caralea KL，Tzioufas AG，et al.Testing for antibodies to ENA and to dsDNA is not indicated in FANA-negative sera［J］.Clin Rheumatol，1988，7:465-469.

［6］鄧學新，曲昌華.818例自身免疫病抗ENA抗體與抗核抗體的對照分析［J］.臨床檢驗雜志，2005，23(4):302-303.

［7］張毅，儲以微.Th17與自身免疫疾?。跩］.復旦學報(醫(yī)學版)，2008，35(1):145-147.

［8］陳寶萍，任緒義，程新定.抗核抗體陰性標本的抗可提取核抗原譜分析［J］.浙江臨床醫(yī)學，2010，12(1):75-76.

［9］邢艷，唐中.抗核抗體的研究進展［J］.國外醫(yī)學科學分冊，2006，33(5):218-219.