HPLC法測定宣清止咳糖漿中鹽酸麻黃堿的含量

王 戈，趙培敬

(南陽市食品藥品檢驗(yàn)所，河南南陽473061)

宣清止咳糖漿具有宣肺清熱、化痰止咳的功效，可用于治療風(fēng)熱客肺所致的氣管炎、支氣管炎、肺炎、肺膿腫、支氣管擴(kuò)張、支氣管哮喘等病癥。由麻黃、苦杏仁、甘草、黃芩、桔梗等提取制成。制劑標(biāo)準(zhǔn)為豫藥制字Z04130046。麻黃為方中主藥，鹽酸麻黃堿為其主要活性成分，原標(biāo)準(zhǔn)中僅有麻黃的薄層色譜法鑒別，而沒有鹽酸麻黃堿的含量測定。不利于制劑質(zhì)量的控制。本文采用高效液相色譜法測定宣清止咳糖漿中鹽酸麻黃堿的含量，方法簡便、快速、重現(xiàn)性好，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試劑

LC－2010C高效液相色譜儀(日本島津公司);鹽酸麻黃堿對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所，批號(hào):171241－201007);宣清止咳糖漿(新野縣中醫(yī)院)。試劑中甲醇為色譜純，水為純化水，氫氧化鈉、乙醚、鹽酸、磷酸二氫鉀等均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱:Hypersil C18(4.6 mm×250 mm，5 μm);流動(dòng)相:0.01 mol·L－1磷酸二氫鉀(用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.5)－甲醇(90∶10);流速:1.0 mL·min－1;檢測波長:210 nm;柱溫:25℃;進(jìn)樣量:10 μL。在上述條件下鹽酸麻黃堿與相鄰成分實(shí)現(xiàn)基線分離。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 取鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，精密稱定，加0.1%鹽酸甲醇溶液制成每1 mL含40 μg的溶液，作為對(duì)照品溶液［1］。

2.3 供試品溶液的制備 精密吸取宣清止咳糖漿10 mL，加水20 mL，加5mol·L－1氫氧化鈉溶液5 mL，輕輕搖勻，用乙醚振搖提取4次，每次40 mL，合并乙醚液，加0.1%鹽酸甲醇溶液2 mL，搖勻，揮干，殘?jiān)?.1%鹽酸甲醇溶液使溶解于50 mL量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液［2］。

2.4 陰性對(duì)照溶液的制備 取處方中除去麻黃外的其他藥材，照制法制取缺麻黃陰性樣品。按供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照溶液，測定。

2.5 線性關(guān)系考察 精密稱取鹽酸麻黃堿對(duì)照品適量，加0.1%鹽酸甲醇溶液制成每1 mL含98.2 μg的溶液。精密量取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL分別置10 mL量瓶中，加0.1%鹽酸甲醇溶液并稀釋至刻度，搖勻，精密量取上述溶液各10 μL，注入液相色譜儀測定，記錄色譜圖，將所測得的鹽酸麻黃堿峰面積Y和進(jìn)樣量X進(jìn)行回歸，得方程:Y=402 892 X+2 309，r=0.999 7(n=6)。結(jié)果表明鹽酸麻黃堿進(jìn)樣量在9.82～98.2 μg·mL－1范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

圖1 鹽酸麻黃堿對(duì)照品HPLC圖

圖2 宣清止咳糖漿HPLC圖

圖3 陰性對(duì)照溶液HPLC圖

2.6 精密度試驗(yàn) 精密吸取同一份鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液10 μL，重復(fù)進(jìn)樣5次，按上述色譜條件測定，鹽酸麻黃堿面積RSD為0.62%。

2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取同一批號(hào)的宣清止咳糖漿，按2.3方法分別制備5份供試品溶液，按上述色譜條件測定，鹽酸麻黃堿的含量平均為0.349 8 mg·mL－1，RSD為0.74%(n= 5)。表明該方法重現(xiàn)性良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 按2.3方法制備樣品溶液，在室溫下放置0、2、4、6、8、10 h，按上述色譜條件測定，鹽酸麻黃堿峰面積RSD為0.56%，表明供試品溶液在10 h內(nèi)保持穩(wěn)定。

2.9 回收率試驗(yàn) 采用加樣回收，精密量取6份已知含量的樣品(含量為0.342 1 mg·mL－1)各5 mL，分別精密加入鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液(1.692 5 mg· mL－1)各1 mL，按供試品制備方法制備，進(jìn)樣測定，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.10 樣品測定 取宣清止咳糖漿5批，按上述方法制備供試品溶液和對(duì)照品溶液，精密量取各溶液10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，5批樣品含量分別為0.332 6、0.356 1、0.355 0、0.348 3、0.351 1 mg·mL－1。

3 討論

曾有文獻(xiàn)報(bào)道［2，3］HPLC法測定中藥中麻黃堿的含量，以甲醇－水、乙腈－水為流動(dòng)相進(jìn)行分離，但分離度不好，基線沒有得到很好的改善。本文選用C18色譜柱，以0.01 mol ·L－1磷酸二氫鉀(用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.5)－甲醇為流動(dòng)相，比例90∶10，使得鹽酸麻黃堿和相鄰峰得到較好的分離，提高了分離度，色譜峰形對(duì)稱，基線平直，系統(tǒng)穩(wěn)定?？勺鳛樵撝苿┑馁|(zhì)量控制方法。

［1］ 國家藥品監(jiān)督管理局.國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編內(nèi)科肺系分冊［S］.北京:人民衛(wèi)生出版社.2002:263－264.

［2］ 景金柱，余衛(wèi)兵，畢雪艷，等.HPLC測定麻杏止咳糖漿中鹽酸麻黃堿的含量［J］.河北醫(yī)藥，2006，28(3):225－226.

［3］ 李紅霞，丁明玉，呂琨，等.高效液相色譜法則測定麻黃及其制劑中的麻黃類生物堿和川芎嗪［J］.色譜，2001，19(2):161－163.