加減知柏地黃湯對合并不育癥的Ⅳ型前列腺炎細(xì)胞因子影響的臨床研究

張 迅 ，何清湖，梁 兵 ，梁季鴻 ，鄺曉聰 ，蒙志斌 ，梁世坤 ，韋國強(qiáng) ，朱春暉 ，宋衛(wèi)儒 ，李廣裕

（1.廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院男性學(xué)科，廣西 南寧 530021；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙 410208）

加減知柏地黃湯對合并不育癥的Ⅳ型前列腺炎細(xì)胞因子影響的臨床研究

張 迅1，何清湖2*，梁 兵1，梁季鴻1，鄺曉聰1，蒙志斌1，梁世坤1，韋國強(qiáng)1，朱春暉1，宋衛(wèi)儒1，李廣裕1

（1.廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院男性學(xué)科，廣西 南寧 530021；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙 410208）

目的 觀察加減知柏地黃湯對合并不育癥的Ⅳ型前列腺炎細(xì)胞因子的影響。方法 將200例合并不育癥的Ⅳ型前列腺炎患者隨機(jī)分為治療組（加減知柏地黃湯組）及對照組（前列康片組）各100例，另選30例正常健康男性作為細(xì)胞因子基礎(chǔ)參考值。兩組均治療3個月，觀察治療后前列腺液（EPS）中白細(xì)胞(WBC)計數(shù)及白介素-1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-8（IL-8）、白介素-10（IL-10）水平的變化。結(jié)果 治療前兩組 EPS-WBC 計數(shù)及 IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10 水平均偏離正常（P＜0.05），治療后兩組均能降低 EPS-WBC 計數(shù)及 IL-1β、TNF-α、IL-8 水平（P＜0.05），提高IL-10水平（P＜0.05），且治療組能恢復(fù)IL-1β、TNF-α至正常水平，而對照組不能恢復(fù)至正常水平。結(jié)論 Ⅳ型前列腺炎發(fā)病與細(xì)胞因子失調(diào)有關(guān)，加減知柏地黃湯能有效降低EPS-WBC計數(shù)及調(diào)整細(xì)胞因子水平。

Ⅳ型前列腺炎；細(xì)胞因子；加減知柏地黃湯；不育癥；臨床觀察

與美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）其他類型前列腺炎相比，Ⅳ型前列腺炎無臨床癥狀，常因不育而就診時被發(fā)現(xiàn)[1]，常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)陰性，發(fā)病機(jī)制及臨床治療令人困惑。有證據(jù)顯示免疫系統(tǒng)在其發(fā)生發(fā)展中起重要作用[2]，這為認(rèn)識與治療Ⅳ型前列腺炎提供了新的視角。2007年11月至2010年11月，我們應(yīng)用加減知柏地黃湯治療伴有不育癥的Ⅳ型前列腺炎時發(fā)現(xiàn)其能提高精液質(zhì)量、降低前列腺液（EPS）白細(xì)胞（WBC）計數(shù)，為了進(jìn)一步揭示其治療機(jī)制以及Ⅳ型前列腺炎發(fā)病機(jī)制，我們從細(xì)胞因子水平進(jìn)行了臨床研究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2007年11月至2010年11月在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院男性科門診因不育癥診斷為Ⅳ型前列腺炎的患者200例，采取隨機(jī)數(shù)字表法，將病例分為治療組、對照組，各100例。并隨機(jī)選取30例年齡 20～50（29.32±8.55）歲正常健康男性作為Ⅳ型前列腺炎細(xì)胞因子基礎(chǔ)參考值。治療組年齡21～49（30.27±8.59）歲，自然不育時間 12～60（19.25±18.00）月；對照組年齡 19～48（30.30±9.73）歲，自然不育時間 13～55（21.17±16.95）月。兩組年齡、自然不育時間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 男性不育癥診斷標(biāo)準(zhǔn) 參照《男科學(xué)》[3]相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，即夫妻同居未避孕1年以上，性生活正常，排除女方原因，配偶未懷孕及生育者。

1.2.2 Ⅳ型前列腺炎診斷標(biāo)準(zhǔn) 參照1995年美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）制定Ⅳ型前列腺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，即無癥狀的前列腺炎，無主觀癥狀，前列腺活檢、精液、前列腺按摩液或按摩后尿液（VB3）有超過正常水平的白細(xì)胞。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)

符合Ⅳ型前列腺炎及男性不育癥診斷標(biāo)準(zhǔn)，按NIH慢性前列腺炎癥狀評分標(biāo)準(zhǔn)(Chronic prostatitis symptom index，CPSI)評分＜8 分， EPS-WBC 計數(shù)≥10個/高倍視野。治療前停用一切對本研究有影響的藥物7 d以上。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn)

合并有尿道炎、膀胱炎、泌尿系統(tǒng)結(jié)石、附睪炎、睪丸炎、精囊炎、精索靜脈曲張者；合并有前列腺增生或前列腺癌者；合并心腦血管、肝、腎及造血系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病者；合并有風(fēng)濕、類風(fēng)濕或其他結(jié)締組織疾病者；睪丸前性、睪丸性及其他睪丸后性因素所致男性不育者；其他類型前列腺炎者；前列腺液難以取出或EPS-WBC計數(shù)正常的Ⅳ型前列腺炎者（EPS白細(xì)胞計數(shù)正常，若按摩后VB3或精液中白細(xì)胞5個/高倍視野，也可診斷為Ⅳ型前列腺炎）；有明顯神經(jīng)官能癥或?qū)z查、治療不合作者。

1.5 治療方法

治療組以加減知柏地黃湯治療。加減知柏地黃湯基本方藥組成：山茱萸6 g，淮山藥10 g，澤瀉10 g，茯苓 10 g，虎杖 10 g，黃柏 6 g，蒲公英 15 g，野菊花15 g，金銀花15 g，連翹15 g，紫花地丁10 g，紫背天葵 10 g，菟絲子 10 g，補(bǔ)骨脂 10 g，桃仁 6 g，赤芍 10 g，當(dāng)歸 10 g，牡丹皮 6 g，桂枝 6 g。脈虛大者加灸黃芪20 g，黨參10 g。每日1劑，分2次服。對照組予以口服前列康片（浙江康恩貝集團(tuán)制藥有限公司，批號 090242， 0.57 g/片），4 片/次，3次/d。兩組療程均為3個月。服藥期間禁用其他治療前列腺炎的藥物，禁酒、久坐及辛辣食物。

1.6 觀察指標(biāo)及方法

檢查前禁欲2～3 d，由專人進(jìn)行前列腺按摩術(shù)，取EPS 1.0 mL，部分用于EPS常規(guī)檢查，其余-20℃保存待測細(xì)胞因子。放射免疫法測定前列腺液中 IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10（試劑盒購自北京解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免所），檢測方法嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行。

1.7 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后EPS-WBC計數(shù)、EPS中IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10水平變化及與正常組比較

與正常組比，治療前兩組細(xì)胞因子水平均有差異（P<0.05），表現(xiàn)為 IL-1β、TNF-α、IL-8 水平升高，IL-10水平降低；治療后兩組IL-8、IL-10水平均未恢復(fù)至正常水平（P<0.05），但治療組 IL-1β、TNF-α水平與正常組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。治療前兩組EPS-WBC計數(shù)及EPS中IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10 水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），治療后差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。與本組治療前比， 治療后兩組 IL-1β、TNF-α、IL-8 、IL-10 含量及EPS-WBC計數(shù)差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表 1 治療前后 EPS-WBC 計數(shù)及 IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10 水平比較 （，ng/mL）

表 1 治療前后 EPS-WBC 計數(shù)及 IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10 水平比較 （，ng/mL）

注：與本組治療前比較*P<0.05；與對照組比較▲P<0.05；與正常組比較#P<0.05。

組 別 n IL-1β TNF-α IL-8 IL-10 EPS-WBC（個/HP）治療組 100 治療前 1.06±0.34# 4.31±1.32# 11.73±8.64# 189.92±56.32# 26.92±6.52治療后 0.73±0.24*▲ 2.88±0.96*▲ 6.71±4.13*▲# 231.84±68.74*▲# 11.99±4.85*▲對照組 100 治療前 1.32±0.39# 4.76±1.25# 10.98±8.76# 186.79±50.08# 27.33±5.06治療后 0.88±0.30*# 3.44±1.04*# 8.42±6.15*# 204.45±69.46*# 16.12±4.36*正常組 30 0.70±0.33 2.58±1.36 4.47±5.59 259.74±61.65

2.2 不良反應(yīng)

治療期間，治療組中有8例胃腸道不適，其不良反應(yīng)發(fā)生率為8.0%。對照組無明顯不良反應(yīng)。治療組胃腸道不良反應(yīng)均輕微，一般能耐受，3 d后不良反應(yīng)消失，未影響治療，且均完成全部療程。

3 討論

慢性前列腺炎的病因及病理機(jī)制至今尚不明確。近年來的研究表明，自身免疫反應(yīng)和細(xì)胞因子在其發(fā)病中起著重要的作用。細(xì)胞因子可以被分為兩大類：促炎癥細(xì)胞因子如IL-1β、TNF-α、IL-8等和抗炎癥細(xì)胞因子如IL-10等。促炎癥細(xì)胞因子在組織的炎癥反應(yīng)過程中起促進(jìn)作用，而抗炎癥細(xì)胞因子可抑制炎癥反應(yīng)及促進(jìn)組織的修復(fù)和再生。兩者的平衡將影響組織創(chuàng)傷和炎癥的結(jié)局[4-5]。促炎性細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α主要由單核-吞噬細(xì)胞產(chǎn)生，主要作用于內(nèi)皮細(xì)胞，增加某些黏附分子的表達(dá)，促進(jìn)炎癥細(xì)胞黏附、游走、浸潤及中性粒細(xì)胞脫顆粒，參與和促進(jìn)炎癥反應(yīng)[6]。IL-8也是一種促炎癥細(xì)胞因子，在炎癥刺激后由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和多種上皮細(xì)胞產(chǎn)生，主要的特點(diǎn)是幫助募集中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞進(jìn)入炎癥部位和調(diào)節(jié)白細(xì)胞黏附分子的表達(dá)，對于上述細(xì)胞離開血液循環(huán)并滲透入組織是必需的[7]。IL-10是人類免疫應(yīng)答中已發(fā)現(xiàn)的最重要的抗炎癥因子，主要由單核巨噬細(xì)胞、T和B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，在炎癥過程中，IL-10被認(rèn)為是單核吞噬細(xì)胞功能的強(qiáng)抑制劑，它抑制單核吞噬細(xì)胞、多形核白細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞產(chǎn)生前炎癥因子，如TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8，以及下調(diào)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的炎癥介質(zhì)一氧化氮[8]。因而，IL-10被認(rèn)為是一種強(qiáng)有力的抗炎癥因子，它下調(diào)T1淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的IFN2γ、IL-2和TNF-α[8]。

本研究中，正常人 EPS 中 IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10均能被檢出，但與Ⅳ型前列腺炎相比含量有顯著性差異。說明細(xì)胞因子水平的改變存在于Ⅳ型前列腺炎EPS中，并且與其發(fā)病相關(guān)。治療后，加減知柏地黃湯與前列康片均能降低Ⅳ型前列腺炎EPS-WBC計數(shù)及促炎癥細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α、IL-8含量，提高抗炎癥細(xì)胞因子IL-10含量，但加減知柏地黃湯更有效，并且雖然兩組均不能恢復(fù)IL-8、IL-10至正常水平，但加減知柏地黃湯能而前列康片不能恢復(fù)IL-1β、TNF-α至正常水平。這為加減知柏地黃湯臨床療效優(yōu)于前列康片從細(xì)胞因子水平提供了理論基礎(chǔ)。

本研究中可以得出Ⅳ型前列腺炎發(fā)病的假設(shè)模型：在特定的條件下，抗原性物質(zhì)激活自身免疫系統(tǒng)，組織局部上皮細(xì)胞以及單核-巨噬細(xì)胞激活釋放出細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α等，增加血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子的表達(dá)以及中性粒細(xì)胞游走、浸潤，緊接著局部多種細(xì)胞激活釋放細(xì)胞因子IL-8，募集大量的中性粒細(xì)胞向炎癥部位集中，同時抗炎癥細(xì)胞因子IL-10分泌相對不足，無法對抗促炎癥細(xì)胞因子如IL-1β、TNF-α、IL-8等的效應(yīng)，這樣Ⅳ型前列腺炎得以發(fā)生發(fā)展。同時，由于種種不明原因，環(huán)氧化酶(Cox2)/前列腺素E2(PGE2)系統(tǒng)沒有被激活，因而患者無臨床癥狀。這說明了細(xì)胞因子譜系在不同類型前列腺炎中扮演角色不同，因而治療方法也不一樣。由于臨床試驗條件的限制，本研究并沒有進(jìn)一步指出更起決定性作用的細(xì)胞因子及干預(yù)細(xì)胞因子何環(huán)節(jié)能取得更有效的臨床治療效果。

慢性前列腺炎（包括Ⅳ型前列腺炎）屬于中醫(yī)學(xué)“精濁”的范疇，其病因病機(jī)以“腎虛”為本，“血瘀”、“濕熱”、“毒”為標(biāo)。目前，中醫(yī)藥治療前列腺炎取得比較滿意療效，研究重點(diǎn)也逐漸從臨床水平向細(xì)胞因子水平進(jìn)展[9]。本研究中，與前列康片單味成分油菜花花粉相比，加減知柏地黃湯組方以補(bǔ)腎為主，兼以活血、利濕解毒，更符合中醫(yī)前列腺炎病因病機(jī)。方以山茱萸、淮山藥、補(bǔ)骨脂、菟絲子補(bǔ)腎，為君藥；以金銀花、蒲公英、紫花地丁、紫背天葵、連翹清熱解毒，以桃仁、丹皮、赤芍、當(dāng)歸活血化瘀，虎杖、茯苓、澤瀉清熱利濕，以上均為臣藥；桂枝溫經(jīng)通脈，既能有助于活血化瘀，又能防止諸藥寒涼冰伏濕熱之毒，為佐藥；黃柏既能清利下焦?jié)駸幔稚谱呦陆?，引諸藥下歸前列腺，為佐使藥。綜觀全方，以知柏地黃湯、五味消毒飲、桂枝茯苓丸（桂枝、茯苓、桃仁、丹皮、芍藥）加減化裁，緊扣慢性前列腺炎的病因病機(jī)，不良反應(yīng)少，因而能有效改善前列腺液EPS-WBC計數(shù)及 IL-1β、TNF-α、IL-8、IL-10 水平。

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（本文編輯 馬 薇）

Clinical study on effects of Modified Zhibo Dihuang decoction on cytokines in patients with NIH-IV prostatitis accompanying with infertility

ZHANG Xun1， HE Qing-hu2*,LIANG Bing1， LIANG Ji-hong1， KUANG Xiao-cong1，MENG Zhi-bin1， LIANG Shi-kun1， WEI Guo-qiang1， ZHU Chun-hui1， SONG Wei-ru1，LI Guang-yu1
(1.Department of Andrology,First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University，Nanning,Guangxi 530021，China;2.College of Integrative Medicine,TCM University of Hunan,Changsha,Hunan,410208 China)

Objective To evaluate effects of Modified Zhibo Dihuang decoction on cytokines in prostatic fluid in patients with NIH-IV prostatitis accompanying with infertility.Methods 200 patients with NIH-IV prostatitis accompanying with infertility were randomly divided into 2 groups,100 patients in treatment group were treated with Modified Zhibo Dihuang decoction and 100 in control group with Qianliekang tablets;and other 30 healthy men were tested for cytokine reference values.The count of EPS-WBC and the levels of IL-1β,TNF-α,IL-8 and IL-10 in 2 groups were examined before and after 3 months treatment.Results The count of EPS-WBC and the levels of IL-1β,TNF-α,IL-8 and IL-10 in 2 groups were deviated from the normal before therapy.After 3 months treatment,in both groups the counts of EPS-WBC and the levels of IL-1β,TNF-α and IL-8 were decreased effectively and the level of IL-10 was increased effectively.The levels of IL-1β and TNF-α in treatment group returned to the normal but those data of the control group could not.Conclusion NIH-IV prostatitis is correlated to Cytokines dysfunction in prostatic fluid.Modified Zhibo Dihuang decoction can effectively decrease the count of EPSWBC and adjust the levels of cytokines in prostatic fluid.

NIH-IV prostatitis;cytokines;Modified Zhibo Dihuang decoction;Infertility;Clinical observation

R697.33

B

10.3969/j.issn.1674－070X.2012.05.014.056.04

2011－12－13

廣西教育廳課題資助項目（200710LX064）。

張 迅（1978-），男，湖南攸縣人，主治醫(yī)師，主要從事中西醫(yī)結(jié)合男科研究。

* 何清湖，男，博士研究生導(dǎo)師，Email：chaoliu2807@sina.com。