死亡受體5和死亡誘騙受體2在腰椎間盤(pán)組織中的表達(dá)及意義

朱 宇 陳清漢 馬希峰 來(lái)秋山 張明生 張仲寧 邵 佳

(鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院骨科，河南 鄭州 450014)

死亡受體5和死亡誘騙受體2在腰椎間盤(pán)組織中的表達(dá)及意義

朱 宇 陳清漢 馬希峰 來(lái)秋山 張明生 張仲寧 邵 佳

(鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院骨科，河南 鄭州 450014)

目的 探討死亡受體5(DR5)、死亡誘騙受體2(DCR2)在腰椎間盤(pán)中的表達(dá)及意義。方法 選取腰椎間盤(pán)突出癥行椎間盤(pán)組織摘除術(shù)的患者73例作為觀(guān)察組;另外尋找非正常死亡成人15例取腰椎間盤(pán)32個(gè)。采用PV6000兩步免疫組織化學(xué)染色法對(duì)兩組腰椎間盤(pán)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果 觀(guān)察組髓核及纖維環(huán)內(nèi)的DR5細(xì)胞陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，兩組比較差異明顯(P＜0.05);DCR2細(xì)胞陽(yáng)性率兩組比較差異不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論 DR5可能參與了腰椎間盤(pán)組織的細(xì)胞凋亡過(guò)程。

死亡受體5;死亡誘騙受體2;腰椎;椎間盤(pán)

腫瘤壞死因子(TNF)超家族的成員在細(xì)胞凋亡中發(fā)揮了重要作用〔1〕，TNF相關(guān)細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)是最近發(fā)現(xiàn)的TNF中的一員，與其他成員不同，TRAIL在體內(nèi)的存在方式僅有膜結(jié)合一種。目前發(fā)現(xiàn)TRAIL在體內(nèi)有5種受體〔2〕，死亡受體5(DR5)和死亡誘騙受體2(DCR2)為其中兩種。本研究探討分析腰椎間盤(pán)突出患者髓核幾纖維環(huán)內(nèi)DR5和DCR2的表達(dá)水平及意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2009年3月至2012年2月我院收治的腰椎間盤(pán)突出癥并行椎間盤(pán)組織摘除術(shù)的患者73例，其中男38例，女 35例;年齡 21～28〔平均(23.85±8.24)〕歲;病程10 d～5年，平均(15.83 ±10.58)w;其中 L3～42 例，L4～541 例，L5～S130例;包含型突出椎間盤(pán)49例，非包含型突出椎間盤(pán)24例。另外，尋找非正常死亡成人15例作為對(duì)照組，均身體健康且無(wú)腰椎間盤(pán)突出癥病史，其中男8例，女7例;年齡19～25〔平均(24.10±7.76)〕歲;獲得腰椎間盤(pán)32個(gè)，其中 L3～41個(gè)，L4～518個(gè)，L5～S113個(gè)。所取標(biāo)本包括纖維環(huán)和髓核，血水通過(guò)生理鹽水清洗干凈，并以石蠟包埋。

1.2 方法 兩組患者均在相同條件下采用PV6000兩步免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)DR5、DCR2，其中DR5以肺癌、DCR2以子宮頸癌作為陽(yáng)性對(duì)照，用磷酸鹽緩沖液(PBS)作為陰性對(duì)照，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒樣物質(zhì)為陽(yáng)性。每張切片于髓核、纖維環(huán)區(qū)域各隨機(jī)選取10個(gè)高倍鏡視野，分別計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞以及總細(xì)胞數(shù)量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)資料以±s表示，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

觀(guān)察組髓核及纖維環(huán)內(nèi)的DR5細(xì)胞陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);DCR2細(xì)胞陽(yáng)性率兩組比較差異不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者DR5及DCR2陽(yáng)性率(±s，%)

表1 兩組患者DR5及DCR2陽(yáng)性率(±s，%)

與對(duì)照組比較:1)P＜0.05

總體對(duì)照組 15 36.05±30.25 12.89±7.36 25.83±17.95 23.01組別 n DR5細(xì)胞陽(yáng)性率髓核 纖維環(huán) 總體DCR2細(xì)胞陽(yáng)性率髓核 纖維環(huán)±26.25 14.38±16.24 18.53±21.05觀(guān)察組 73 49.83±24.171) 27.92±12.411) 41.55±17.371)29.94±24.27 13.92±15.04 24.27±16.22

3 討論

近年來(lái)有研究認(rèn)為椎間盤(pán)的退行性變與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)，發(fā)生退變的椎間盤(pán)中存在著Fas介導(dǎo)的凋亡途徑〔3〕，且其中有TNFα-TNFR和Trail-TrailR〔4〕的表達(dá)。目前發(fā)現(xiàn)的TrailR共有5種，其中R1和R2被稱(chēng)為死亡受體，又叫DR4和DR5;R3及R4雖然可以與TRAIL結(jié)合，但并不能傳導(dǎo)凋亡新航，因此被稱(chēng)為誘騙受體，又叫DCR1和DCR2;此外還有可溶性受體骨保護(hù)性蛋白(OPG)。

DR5是配體依賴(lài)型受體，經(jīng)TRAIL活化后與Fas的某一結(jié)構(gòu)域相互耦聯(lián)而形成死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合體，隨后經(jīng)過(guò)一系列的反應(yīng)致使細(xì)胞DNA斷裂，直至細(xì)胞凋亡〔5〕。而DCR2胞質(zhì)內(nèi)含有的DD被截短，因此并不能夠完成傳遞信號(hào)的作用。其實(shí)TRAIL在人體的很多組織均有表達(dá)，有研究發(fā)現(xiàn)正常腰椎間盤(pán)髓核、纖維環(huán)以及軟骨終板中均有TRAIL表達(dá)，其中髓核表達(dá)最高，而纖維環(huán)表達(dá)最低〔3〕，這也提示了TRAIL受體可能誘導(dǎo)了椎間盤(pán)細(xì)胞的凋亡途徑。

本研究發(fā)現(xiàn)，腰椎間盤(pán)突出癥患者髓核及纖維環(huán)內(nèi)的DR5細(xì)胞陽(yáng)性率明顯高于正常人，而DCR2細(xì)胞陽(yáng)性率差別不明顯，因此認(rèn)為腰椎間盤(pán)組織中DR5可能參與了細(xì)胞凋亡。

1 Park JB，Lee JK，Park SJ，et al.Mitchondrial involvement in fas-mediated apoptosis of human lumbar disc cells〔J〕.JBone Joint Surg(Am)，2005;87(6):1338-42.

2 Weiler C，Nerlich AG，Bachmeier BE，etal.Expression and distribution of tumor necrosis factor alpha in human lumbar intervertevral discs:a study in surgical specimen and autopsy controls〔J〕.Spine，2005;30(1):44-53.

3 王艷鴿，李燕杰.正常人群中DR5天然自身抗體的分布特點(diǎn)及與腫瘤患者的差異分析〔J〕.中國(guó)免疫學(xué)雜志，2010;26(9):797-800.

4 Cui M，Wang L，Liang X，etal.Blocking TRAIL-DR5 signalingwith soluble DR5 reduces delayed neuronal damage after transient global cerebral ischemia〔J〕.Neurobiol Dis，2010;39(2):138-47.

5 Pavet V，Beyrath J，Pardin C，et al.Multivalent DR5 peptides activate the TRAIL death pathway and exert tumoricidal activity〔J〕.Cancer Res，2010;70(3):1101-10.

R681.5+3

A

1005-9202(2012)16-3429-02;

10.3969/j.issn.1005-9202.2012.16.033

朱 宇(1978-)，男，主治醫(yī)師，主要從事脊柱外科疾病的臨床診治工作。

book=1,ebook=4604

〔2012-01-05收稿 2012-01-21修回〕

(編輯 袁左鳴)