胃腸道間質(zhì)瘤臨床病理及OCT3/4表達(dá)與意義

馬 琳 李貴柱(蚌埠醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，安徽 蚌埠 233030)

胃腸道間質(zhì)瘤臨床病理及OCT3/4表達(dá)與意義

馬 琳 李貴柱1(蚌埠醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，安徽 蚌埠 233030)

目的探討本院49例胃腸道間質(zhì)瘤臨床病理及干細(xì)胞因子OCT3/4在其中的表達(dá)及意義。方法回顧性研究蚌埠醫(yī)學(xué)院病理科2006～2009年三年間的存檔49例GIST病例的臨床病理學(xué)特征，免疫組化SP法檢測49例胃腸道間質(zhì)瘤石蠟標(biāo)本的OCT3/4表達(dá)狀況。結(jié)果61%病例OCT3/4表達(dá)陽性，表達(dá)于瘤細(xì)胞核，OCT3/4表達(dá)與生物學(xué)行為表現(xiàn)無相關(guān)性(P＞0.05)。結(jié)論OCT3/4可能參與了胃腸道間質(zhì)瘤的發(fā)病機(jī)制但與生物學(xué)行為可能無關(guān)。

胃腸道間質(zhì)瘤;OCT3/4;發(fā)生機(jī)制

胃腸道間質(zhì)瘤(gastrointestinal stromal tumors，GIST)是消化道最常見的間葉源性腫瘤，組成了胃和小腸原發(fā)性非上皮性腫瘤的絕大部分，因KIT/PDGFRA基因突變所致，被認(rèn)為可能起自原始的、具有多潛能分化的中胚葉間充質(zhì)干細(xì)胞，由于分子靶向藥物對GIST的獨(dú)特療效使得準(zhǔn)確評估GIST的發(fā)病機(jī)制及生物學(xué)行為越來越受到重視〔1～4〕。OCT-4也被稱為OCT3、POU5F1、OTF3或OTF4，是一個(gè)POU結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄因子，位于染色體6p21.3上，OCT4和轉(zhuǎn)錄蛋白Sox2一起高表達(dá)于胚胎干細(xì)胞，但在所有分化后體細(xì)胞中減弱，作為胚胎干細(xì)胞的特異性基因，它們的過度表達(dá)對于維系未分化體細(xì)胞的多潛能性發(fā)揮關(guān)鍵作用，是維持未分化體細(xì)胞的多潛能性的信號網(wǎng)絡(luò)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)點(diǎn)，因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞與癌癥都具有自我更新這一關(guān)鍵特征，而GIST被認(rèn)為可能起自原始的、具有多潛能分化的中胚葉間充質(zhì)干細(xì)胞，因此我們設(shè)想OCT4在胃腸道間質(zhì)瘤中也許可能會有高表達(dá)〔5，6〕。在本研究中，我們分析胃腸道間質(zhì)瘤病例的臨床病理特征，用免疫組織化學(xué)方法檢測OCT3/4抗體在其中的表達(dá)狀況，為臨床GIST患者提供病理診斷和判斷預(yù)后，并為提高患者的生存提供重要的生物學(xué)檢測指標(biāo)。

1 材料與方法

1.1 病人資料 我們回顧性分析蚌埠醫(yī)學(xué)院病理科2006～2009年存檔49例GIST病例。由兩位高年資病理醫(yī)師復(fù)習(xí)切片，鏡下形態(tài)學(xué)觀察，按每50個(gè)高倍視野計(jì)數(shù)核分裂相數(shù)，挑選合適蠟塊進(jìn)行免疫組化染色。本組病例的病理診斷組織學(xué)符合典型GIST，CD117全部陽性。年齡20～85歲，平均57歲，男24例，女25例，局限性43例，其中胃部24例(49%)，直徑1～22 cm，平均8 cm;小腸11例(22%)，直徑2.5～19 cm，平均10 cm;結(jié)腸3例，平均直徑7 cm;十二指腸1例，徑2.8 cm;直腸部1例，直徑6.5 cm;腸系膜單發(fā)性1例，徑15 cm;腹膜后單發(fā)性1例，直徑24 cm;上腹部(具體部位不清)1例，直徑12.5 cm。多發(fā)性3例，均考慮為多灶性、區(qū)域性起源?？紤]為網(wǎng)膜播散3例。

1.2 試劑與方法 抗體 CD117、CD34、desmin、SMA、S-100，鼠抗人OCT3/4免疫組化單克隆抗體(克隆號 C10，產(chǎn)品編號MAB-0618，形式:即用型)，即用型非生物素免疫組化 ElivisionTMPLUS檢測試劑盒，均購自福建福州邁新公司。按Fletcher等〔7〕推薦的GIST生物學(xué)行為評價(jià)表進(jìn)行評估分級并進(jìn)行分組。免疫組織化學(xué)方法采用SP兩步法檢測，連續(xù)切片，厚度4μm，OCT3/4抗體用pH9.0的EDTA修復(fù)液進(jìn)行水煮加熱抗原修復(fù)。

1.3 結(jié)果判定 分陽性和陰性，OCT3/4抗體陽性為胞核呈棕黃色，染色強(qiáng)度明顯高于背景。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 GIST的鏡下觀察 GIST組織細(xì)胞學(xué)形態(tài)變化較大(圖1)，從梭形細(xì)胞到明顯的上皮樣細(xì)胞，惡性度較低者排列柵欄狀，梭形細(xì)胞有明顯的胞漿內(nèi)空泡，上皮樣瘤細(xì)胞圓形、多角形或星狀，胞漿淡，小腸間質(zhì)瘤細(xì)胞外骨樣纖維積聚成嗜伊紅小球，惡性度較高者有較多的核分裂相并可伴有壞死，細(xì)胞豐富致密，彌漫分布，與間質(zhì)分界不清，腫瘤的間質(zhì)結(jié)締組織少，血管較豐富。

圖1 GIST的病理學(xué)形態(tài)(HE，×200)

2.2 肉眼觀察 大體上，生物學(xué)行為評價(jià)惡性度較低者切面灰白灰黃色，質(zhì)硬或韌，較干燥，呈膨脹性生長，而惡性度較高者結(jié)節(jié)狀或分葉狀腫塊，切面呈灰紅色或灰白色，質(zhì)稚嫩或軟，濕潤，有的魚肉狀，易伴有出血壞死、囊性變，內(nèi)含血性液及血塊，浸潤性生長，擠壓周圍組織形成假包膜。

2.3 GIST的免疫組化特征 CD117、CD34顯示于瘤細(xì)胞胞質(zhì)和胞膜上，desmin、SMA、S-100顯示于胞質(zhì)，CD117達(dá)100%陽性表達(dá)，CD34約80%陽性表達(dá)，desmin、SMA、S-100少量表達(dá)。OCT3/4表達(dá)于瘤細(xì)胞核，背景清晰(圖2)，總計(jì)約61%(30/49)病例OCT3/4表達(dá)陽性，按照生物學(xué)行為分組，OCT3/4表達(dá)各組間無相關(guān)性(P＞0.05)(見表1)。

表1 各組間OCT3/4表達(dá)狀況〔n(%)〕

圖2 GIST上皮型和梭型細(xì)胞核OCT3/4強(qiáng)陽性表達(dá)(SP法，×200)

3 討論

我們的研究發(fā)現(xiàn)GIST具有間葉性腫瘤的一般特征，大體上，生物學(xué)行為評價(jià)惡性度較低者切面灰白灰黃色，質(zhì)硬或韌，較干燥，呈膨脹性生長，而惡性度較高者結(jié)節(jié)狀或分葉狀腫塊，切面呈灰紅色或灰白色，質(zhì)稚嫩或軟，濕潤，有的魚肉狀，易伴有出血壞死、囊性變，內(nèi)含血性液及血塊，浸潤性生長，擠壓周圍組織形成假包膜。組織學(xué)上惡性度較高者有較多的核分裂相并可伴有壞死，細(xì)胞豐富致密，彌漫分布，與間質(zhì)分界不清，腫瘤的間質(zhì)結(jié)締組織少，血管較豐富。

本研究發(fā)現(xiàn)胃腸道間質(zhì)瘤病例OCT3/4總計(jì)約61%(30/49)表達(dá)陽性，強(qiáng)表達(dá)于瘤細(xì)胞的細(xì)胞核，OCT3/4表達(dá)提示GIST與胚胎干細(xì)胞一樣具有干細(xì)胞特性，也具有自我更新與多潛能的特征，OCT3/4可能參與了GIST的發(fā)生機(jī)制，在GIST的發(fā)生、發(fā)展中可能發(fā)揮著重要作用。

OCT3/4是迄今人們發(fā)現(xiàn)最早也是最重要的維持胚胎干細(xì)胞多潛能性和自我更新的關(guān)鍵基因，在具有多潛能的精原細(xì)胞瘤和胚胎性癌的原發(fā)性睪丸生殖細(xì)胞腫瘤中也可以檢測到。OCT3/4作為干細(xì)胞自我更新中重要的轉(zhuǎn)錄因子，在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用也備受重視，其在低分化乳腺癌腫瘤組織中，表達(dá)水平顯著高于高分化乳腺癌腫瘤組織，Ⅳ級神經(jīng)膠質(zhì)瘤表達(dá)水平顯著高于Ⅱ級和Ⅲ級，轉(zhuǎn)移性肉瘤腫瘤組織OCT3/4的表達(dá)水平也顯著高于未轉(zhuǎn)移者〔5，8，9〕。但本研究發(fā)現(xiàn) OCT3/4 表達(dá)與生物學(xué)行為間無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性，按照按Fletcher等〔7〕推薦的GIST生物學(xué)行為評價(jià)表進(jìn)行評估分級分為極低度侵襲危險(xiǎn)性全部強(qiáng)陽性表達(dá)，低度侵襲危險(xiǎn)性陽性表達(dá)者也較高，而高度侵襲危險(xiǎn)性者陽性表達(dá)只有50%。這與文獻(xiàn)報(bào)道的其他腫瘤中的表達(dá)不同，我們推測由于影響胃腸道間質(zhì)瘤的生物學(xué)行為的因素很多，按現(xiàn)有文獻(xiàn)判斷指標(biāo)應(yīng)慎重，這些指標(biāo)間可能存在良惡性交替的現(xiàn)象，通過臨床表現(xiàn)和形態(tài)學(xué)觀察遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，有很多因素(特別是分子水平的改變)還知之甚少，OCT3/4有可能在將來成為分子水平的評估生物學(xué)行為的實(shí)用的指標(biāo)?？傊狙芯繉ξ改c道間質(zhì)瘤的生物學(xué)行為的評估有一定的參考價(jià)值，OCT3/4可能成為有用的分子水平評估指標(biāo)。

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5 王 育，肖世金，趙愛民.人重組OCT3/4真核表達(dá)載體構(gòu)建及在卵巢癌細(xì)胞中的表達(dá)研究〔J〕.上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2010;30(7):797-801.

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R735.2

A

1005-9202(2012)16-3421-03;

10.3969/j.issn.1005-9202.2012.16.029

蚌埠醫(yī)學(xué)院科研項(xiàng)目(No.BY0811)

1 合肥市第二人民醫(yī)院病理科

李貴柱(1975-)，男，碩士，醫(yī)師，主要從事腫瘤學(xué)研究。

馬 琳(1977-)，女，碩士，講師，主要從事腫瘤學(xué)研究。

〔2011-07-04收稿 2012-01-20修回〕

(編輯 曹夢園)