兩種日糧及補(bǔ)添左旋精氨酸對(duì)薩福克肉羊繁殖性能及血清激素水平的影響

吳海榮，余 雄，艾合買提江·吐爾遜，古蘭白爾·木合塔爾，阿布力孜·吾斯曼

（1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，烏魯木齊 830052；2.新疆肉乳草食動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室）

左旋精氨酸（L－Arg）是動(dòng)物體內(nèi)一種重要的堿性氨基酸，是精子蛋白的重要組成成分。除參與體內(nèi)蛋白質(zhì)沉積外，還通過多種酶參與機(jī)體代謝，并通過其代謝產(chǎn)物一氧化氮（NO）和多胺等在動(dòng)物體內(nèi)發(fā)揮多重營(yíng)養(yǎng)生理效應(yīng)。此外，Arg還能有效促進(jìn)機(jī)體的激素分泌［1］，對(duì)調(diào)控母畜的生長(zhǎng)發(fā)育與繁殖生理具有重要作用。L－Arg對(duì)母畜繁殖性能的影響報(bào)道不多，多見于母豬繁殖的應(yīng)用，提高母豬的胚胎著床率、產(chǎn)仔率和出生重。Mateo在妊娠第30～114天的母豬飼料中添加1.0%L－Arg的飼料，發(fā)現(xiàn)母豬窩產(chǎn)活仔數(shù)增加2頭［2］。但在提高綿羊繁殖性能的方面尚未見報(bào)道。本試驗(yàn)旨在研究薩?？巳庋蛟缙谌焉锲谌占Z中添加L－Arg對(duì)其繁殖性能以及血清中激素水平的影響，為提高綿羊胎產(chǎn)羔數(shù)提供一定參考。

1 材料與方法

1.1 時(shí)間及地點(diǎn)

試驗(yàn)時(shí)間為2011年8月—2012年4月，試驗(yàn)地點(diǎn)在新疆阿克蘇地區(qū)天山肉用種羊有限公司。

1.2 動(dòng)物及飼養(yǎng)管理

選擇健康無(wú)病、年齡相近且均無(wú)產(chǎn)雙羔記錄的薩福克純種母羊105只，隨機(jī)分為3組，每組35只，分別作為對(duì)照組、試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組。每日06：00和18：00點(diǎn)飼喂，自由飲水。

1.3 材料與儀器

L－精氨酸鹽酸鹽（純度均≥98.5%），購(gòu)于北京嘉康源科技有限公司。孕酮陰道海綿栓、多管架自動(dòng)平衡離心機(jī)、真空采血管、移液槍。

1.4 方法

1.4.1 試驗(yàn)羊的飼喂 參照國(guó)內(nèi)肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)NY/T816—2004并做適當(dāng)調(diào)整，進(jìn)行日糧精料配方設(shè)計(jì)。試驗(yàn)精料配方見表1。

表1 混合精料配方

對(duì)照組：飼喂配方1精料，每只母羊600 g/d，飼喂30 d，飼喂結(jié)束后對(duì)自然發(fā)情羊只進(jìn)行人工輸精。配種結(jié)束后，飼喂配方1精料，每只羊200 g/d，直至產(chǎn)羔。

試驗(yàn)Ⅰ組:飼喂配方2精料，每只母羊600 g/d，飼喂30 d，飼喂結(jié)束后，采用外源激素處理后進(jìn)行人工輸精，配種后停用精料7 d后開始采用精料中添加精氨酸，每只羊100 g/d配方2精料（包括17g精氨酸），持續(xù)飼喂40 d后，飼喂配方1精料，每只羊200 g/d，直至生產(chǎn)。

試驗(yàn)Ⅱ組:飼喂配方2精料，每只羊600 g/d，飼喂30 d，飼喂結(jié)束后，采用外源激素處理后進(jìn)行人工輸精，配種后停用精料7 d后開始，每只羊100 g/d，持續(xù)飼喂40 d后，飼喂配方1精料，每只羊200 g/d，直至生產(chǎn)。

3組飼喂粗料均為全株青貯玉米每只羊2 kg/d、干麥草每只羊0.8 kg/d，自由采食。

1.4.2 母羊外源激素處理方法 對(duì)試驗(yàn)Ⅰ組、試驗(yàn)Ⅱ組進(jìn)行放置孕酮海綿陰道栓（CIDR，放置日為第0天），于第12～14天撤陰道栓的同時(shí)肌肉注射孕馬血清促性腺激素400～450 u/只，并于撤栓24 h后用試情公羊進(jìn)行試情，并對(duì)發(fā)情母羊進(jìn)行人工適時(shí)輸精，同時(shí)肌肉注射促排 3 號(hào) 4～6 μg/只。

1.5 血樣采集

分別在試驗(yàn)的補(bǔ)飼前、配種后和配種47 d后對(duì)3組所有母羊，使用一次性采血針進(jìn)行羊頸靜脈空腹采血10 mL，室溫下靜置30 min，以4 000 r/min離心15 min，取上層血清-20℃冷凍保存。

1.6 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.6.1 母羊繁殖性能 記錄母羊的發(fā)情數(shù)、配種數(shù)、受胎數(shù)、產(chǎn)羔數(shù)、產(chǎn)雙羔數(shù)以及產(chǎn)羔時(shí)間。

1.6.2 血樣測(cè)定 血清樣本測(cè)定指標(biāo):雌二醇（E2）、雌三醇（E3）、孕酮（P）、促卵泡素（FSH）、促黃體素（LH）、人絨毛膜促性腺激素（hCG）、皮質(zhì)醇（Cor）。樣本送北京華英生物技術(shù)研究所檢測(cè)，測(cè)定方法采用放射免疫法，儀器為r-911型全自動(dòng)放免儀，試劑盒均來(lái)自于北京華英生物技術(shù)研究所。

1.7 統(tǒng)計(jì)處理

數(shù)據(jù)先用EXCEL作初步統(tǒng)計(jì)，采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行重復(fù)數(shù)不等的方差分析，處理間差異采用LSD、Duncan檢驗(yàn)，百分?jǐn)?shù)采用卡方檢驗(yàn)。除百分?jǐn)?shù)以外，所有數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，以P＜0.05作為差異顯著性評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 兩種日糧及補(bǔ)添精氨酸對(duì)薩福克肉羊繁殖性能的影響

由表2可知，在妊娠期，試驗(yàn)Ⅱ組的受胎率顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.05）；產(chǎn)羔率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；雙羔率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），試驗(yàn)Ⅰ組與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）；3組的發(fā)情率差異不顯著（P＞0.05）。在第1情期，試驗(yàn)Ⅱ組的受胎率、產(chǎn)羔率、雙羔率均顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組和對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)Ⅰ組與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）。

表2 薩?？巳庋蚍敝承阅苤笜?biāo)

2.2 兩種日糧及補(bǔ)添L-Arg對(duì)薩?？巳庋蜓寮に厮降挠绊?/h3>

由表3可看出，在配種前，對(duì)照組血清中hCG水平極顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組（P<0.01），在配種47 d，試驗(yàn)Ⅱ組血清中E2水平顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組和對(duì)照組（P<0.05）；試驗(yàn)Ⅰ組血清中P水平極顯著低于試驗(yàn)Ⅱ組和對(duì)照組（P<0.01）；對(duì)照組血清中LH水平顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組（P<0.05）。

在試驗(yàn)Ⅰ組中，補(bǔ)飼前血清中E2水平極顯著低于配種前與配種47 d（P<0.01）；配種47 d血清中Cor水平極顯著低于補(bǔ)飼前與配種前（P<0.01）；在試驗(yàn)Ⅱ組中，配種47 d血清中E3水平極顯著高于補(bǔ)飼前與配種前（P<0.01）；配種47 d后血清中P水平極顯著高于補(bǔ)飼前與配種前（P<0.01）；在對(duì)照組中，配種47 d后血清中P水平極顯著高于補(bǔ)飼前與配種前（P<0.01）；配種前血清中FSH水平顯著高于補(bǔ)飼前與配種47 d后（P<0.05）；配種47 d血清中LH水平極顯著高于補(bǔ)飼前與配種前（P<0.01）。

表3 3組羊在不同時(shí)期的血清激素指標(biāo)

由表4可知，在配種后，試驗(yàn)Ⅰ組經(jīng)產(chǎn)羊血清中E2、E3的含量顯著低于初產(chǎn)羊（P<0.05）；經(jīng)產(chǎn)羊血清中hCG的含量顯著高于初產(chǎn)羊（P<0.05）。配種47 d后，試驗(yàn)Ⅰ組經(jīng)產(chǎn)羊血清中E3、hCG的含量均顯著低于初產(chǎn)羊（P<0.05）；經(jīng)產(chǎn)羊血清中Cor的含量也顯著高于初產(chǎn)羊（P<0.05），P、FSH、LH含量差異均不顯著（P＞0.05）。

表4 試驗(yàn)Ⅰ組經(jīng)產(chǎn)、初產(chǎn)羊在不同時(shí)期的血清激素指標(biāo)

由表5可知，在補(bǔ)飼前，試驗(yàn)Ⅱ組中經(jīng)產(chǎn)羊血清中E2的含量極顯著高于初產(chǎn)羊（P<0.01）；經(jīng)產(chǎn)羊血清中hCG的含量極顯著低于初產(chǎn)羊（P<0.01）；在配種后，試驗(yàn)Ⅱ組中經(jīng)產(chǎn)羊血清中E2、hCG的含量顯著低于初產(chǎn)羊（P<0.05）；在配種47 d后，試驗(yàn)Ⅱ組中經(jīng)產(chǎn)羊血清中E2的含量顯著高于初產(chǎn)羊，差異顯著（P<0.05）。

表5 試驗(yàn)Ⅱ組經(jīng)產(chǎn)、初產(chǎn)羊在不同時(shí)期的血清激素指標(biāo)

3 討論

3.1 L-Arg對(duì)薩?？巳庋蚍敝承阅艿挠绊?/h3>

在母畜的繁殖過程中，早期胚胎死亡、胚胎著床失敗是導(dǎo)致產(chǎn)仔數(shù)目減少的一個(gè)重要繁殖問題。研究表明，在母畜妊娠早期或整個(gè)妊娠期間的日糧中補(bǔ)充一定的L－Arg能增加胚胎著床點(diǎn)、胚胎存活率和窩產(chǎn)仔數(shù)［3］。Berard等在妊娠第14～28 d給母豬飼喂添加1%L－Arg的飼料，使妊娠第70天胎兒數(shù)目提高了3.7頭［4］。在本次試驗(yàn)中，試驗(yàn)Ⅰ組的產(chǎn)羔率、雙羔率均低于試驗(yàn)Ⅱ組，其原因包括:試驗(yàn)Ⅰ組中比試驗(yàn)Ⅱ組存在較多數(shù)目的初產(chǎn)羊，試驗(yàn)Ⅰ組的經(jīng)、初產(chǎn)羊比為18∶17；試驗(yàn)Ⅱ組的經(jīng)、初產(chǎn)羊比為24∶11，而初產(chǎn)羊的產(chǎn)羔率、雙羔率一般要比經(jīng)產(chǎn)羊低。另外，試驗(yàn)Ⅰ組在經(jīng)過2次人工授精和本交之后，仍存在9只羊未妊娠的情況，說(shuō)明這9只羊可能存在繁殖疾病或障礙，大大降低了試驗(yàn)Ⅰ組的產(chǎn)羔率與雙羔率，在試驗(yàn)Ⅱ組中，僅有4只羊未妊娠。

Van等［5］在母豬妊娠第14～30天日糧中補(bǔ)加1%精氨酸后發(fā)現(xiàn)，母豬的分娩率和窩產(chǎn)仔數(shù)分別提高了15%和8%。但本試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)Ⅰ組的產(chǎn)羔率、雙羔率與對(duì)照組相比，差異不顯著（P＞0.05），這說(shuō)明在經(jīng)過PMSG+A3處理，促進(jìn)卵巢排卵后，在薩?？巳庋蝻暳现刑砑覮－Arg可改善胚胎的附植和存活率方面未見顯著效果。這可能與動(dòng)物的種屬有關(guān)，L－Arg在瘤胃中的消化代謝與單胃存在較大差異，可能是由于大量的L－Arg被瘤胃微生物分解消化，只有少量的L－Arg進(jìn)入機(jī)體內(nèi)循環(huán)，但其作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

3.2 L-Arg對(duì)薩?？巳庋蜓逯屑に厮降挠绊?/h3>

動(dòng)物繁殖是一個(gè)復(fù)雜過程，受許多激素的影響，它們直接調(diào)節(jié)動(dòng)物的發(fā)情、排卵、生殖細(xì)胞在生殖道內(nèi)的運(yùn)行、胚胎的著床、妊娠、分娩、泌乳等繁殖行為［6］。本試驗(yàn)結(jié)果顯示:在對(duì)照組中，配種后血清中FSH、LH的含量顯著高于補(bǔ)飼前（P＜0.05），這是由于母羊妊娠后的自然結(jié)果造成的。在試驗(yàn)Ⅰ組與試驗(yàn)Ⅱ組血清中兩者在配種后未出現(xiàn)顯著變化，這是由于兩個(gè)試驗(yàn)組均經(jīng)過PMSG+A3處理，說(shuō)明外源激素的處理會(huì)影響到母羊自身FSH、LH的分泌。

在補(bǔ)飼前、配種后、配種47 d后，試驗(yàn)Ⅱ組和對(duì)照組血清中P的含量均呈現(xiàn)上升的變化趨勢(shì)，差異極顯著（P＜0.01），而試驗(yàn)Ⅰ組血清中P的含量無(wú)顯著變化（P＞0.05），但血清中Cor的含量呈上升的變化趨勢(shì)，差異極顯著（P＜0.01），且在配種47 d后經(jīng)產(chǎn)羊血清中Cor的含量顯著高于初產(chǎn)羊（P＜0.05）。試驗(yàn)Ⅱ組和對(duì)照組血清中P含量的顯著上升，是由于母羊妊娠后造成的正常變化。在試驗(yàn)Ⅰ組血清中P的含量在配種后未出現(xiàn)顯著變化，經(jīng)產(chǎn)羊和初產(chǎn)羊血清中P的含量也無(wú)顯著差異，且試驗(yàn)Ⅱ組和對(duì)照組在配種47 d后血清中P的含量極顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.01）。這說(shuō)明在薩?？巳庋蛟缙谌焉飼r(shí)，飼料中添加L－Arg可能會(huì)影響其血清中P的分泌，繼而影響薩?？巳庋虻姆敝承阅堋or是一種由性腺和腎上腺分泌的類固醇激素，對(duì)動(dòng)物的性行為和生殖激素的分泌有直接或間接的作用。值得注意的是，在配種47 d后試驗(yàn)Ⅰ組血清中Cor含量顯著提高，這可能由于添加LArg會(huì)影響經(jīng)產(chǎn)羊血清中Cor的分泌，但其作用機(jī)制還需進(jìn)一步的研究。

4 小結(jié)

1）在薩?？巳庋蛟缙谌焉?5～50 d時(shí)，按照每天每只添加17g L－Arg到精料補(bǔ)充料中，添加L－Arg在改善薩?？巳庋蚺咛サ母街埠痛婊盥史矫嫖匆婏@著效果。

2）在補(bǔ)飼前、配種后以及配種47 d后，添加L－Arg降低了薩福克肉羊血清中P、E3、水平。

3）在補(bǔ)飼前、配種后以及配種47 d后，添加L－Arg對(duì)薩?？巳庋蜓逯蠩2、FSH、LH、、hCG的分泌無(wú)顯著影響。

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