扶正固本膠囊對腎陽虛動(dòng)物的影響

楊和金，崔 濤，呂素珍，楊新義，趙春梅，吳德松

（1.云南省藥物研究所，云南 昆明 650111；2.云南省玉溪市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，云南 玉溪 653100；3.云南省澂江縣鳳麓鎮(zhèn)獸醫(yī)站，云南 澂江 652500）

扶正固本膠囊對腎陽虛動(dòng)物的影響

楊和金1，崔 濤1，呂素珍2，楊新義3，趙春梅1，吳德松1

（1.云南省藥物研究所，云南 昆明 650111；2.云南省玉溪市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，云南 玉溪 653100；3.云南省澂江縣鳳麓鎮(zhèn)獸醫(yī)站，云南 澂江 652500）

目的：研究扶正固本膠囊對大、小鼠腎陽虛模型的治療作用。方法：采用雄性大、小鼠氫化可的松所致腎陽虛模型，將造模成功的大、小鼠隨機(jī)分為模型組、陽性組和扶正固本膠囊低（2.5 g／kg）、中（5 g／kg）、高（10 g／kg）劑量組，另設(shè)空白對照組。小鼠連續(xù)灌胃給藥8 d，大鼠連續(xù)灌胃給藥21 d，并在相應(yīng)的時(shí)間稱量動(dòng)物的體重，測量低溫游泳存活時(shí)間，取出腎上腺、胸腺、脾臟、包皮腺、睪丸、前列腺和精液囊，稱濕重，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果：扶正固本膠囊內(nèi)服給藥，在2.5 g／kg，5 g／kg的劑量可顯著延長腎陽虛小鼠冰水游泳的時(shí)間，在5 g／kg，10 g／kg的劑量可顯著延長腎陽虛大鼠冰水游泳的時(shí)間，且10 g／kg劑量對腎陽虛大、小鼠腎上腺、脾臟萎縮有顯著改善作用；對腎陽虛大、小鼠的胸腺指數(shù)和性器官無明顯影響。結(jié)論：扶正固本膠囊對氫化可的松所致的大、小鼠腎陽虛模型有明顯的治療作用。

扶正固本膠囊；腎陽虛模型；大鼠；小鼠

腎陽虛證的研究一直是中醫(yī)研究的重點(diǎn)，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為，腎陽虛證與神經(jīng)內(nèi)分泌免疫系統(tǒng)（NEIS）有關(guān)，腎陽虛證（是由于）在下丘腦－垂體－靶腺（腎上腺皮質(zhì)、甲狀腺、性腺和胸腺）軸不同環(huán)節(jié)、不同程度的功能紊亂，且主要發(fā)病環(huán)節(jié)在下丘腦（或更高級）的調(diào)節(jié)功能紊亂，隨著科技的發(fā)展，越來越多地采用先進(jìn)技術(shù)對腎陽虛證動(dòng)物模型及其藥物影響進(jìn)行研究［1］。腎陽虛臨床主要表現(xiàn)為面色晄白，形寒肢冷，精神不振，腰膝酸冷，陽痿陰縮、遺精尿頻，小便清長，余瀝不凈，夜尿頻多，女子帶下清稀、宮寒不孕，或尿少心悸，肢腫氣短，喘咳痰飲等，舌淡苔白潤，脈虛弱無力［2］。

扶正固本膠囊主要由附子、枸杞、肉桂等多味藥組成的中藥復(fù)方制劑，附子功能峻補(bǔ)元陽，益火之源，凡腎陽不足，命火衰微，氣化功能減退所致的諸證，都可用附子治之，如果配伍肉桂、枸杞等多味藥，有溫補(bǔ)腎陽，鼓舞腎氣，有益火、溫腎化氣的功效。本次實(shí)驗(yàn)采用扶正固本膠囊灌胃給藥于用氫化可的松造成腎陽虛的大、小鼠，觀察給藥后大、小鼠的體重、低溫游泳時(shí)間、免疫器官指數(shù)、性器官指數(shù)等指標(biāo)，研究其對雄性大、小鼠腎陽虛的治療作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料 扶正固本膠囊，臨床用量為30 g／d，1次／d。小鼠用量按臨床用量的20、10、5倍折算成2.5 g／kg，5 g／kg，10 g／kg 3個(gè)劑量組。批號：20090820，由云南藥物研究所科研部提供。金匱腎氣丸，云南省騰沖制藥廠生產(chǎn)，批號：081233；桂附地黃丸，九芝堂股份有限公司生產(chǎn)，批號：20090133；氫化可的松，西安利君制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號：080408。

SPF級ICR小鼠，雄性，體重（18～22）g；SPF級SD大鼠，雄性，體重（200～250）g；由昆明醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供。許可證號：SCXK（滇）20050008；飼料許可證：SCXK（滇）20050009；動(dòng)物使用許可證：SCXK（滇）20050001。AG285型電子分析天平，METTLER TOLEDO公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 扶正固本膠囊對腎陽虛小鼠的影響［3］雄性小鼠，分組見表1，按0.3 m L／10 g灌胃給藥。除空白對照組外，其余5組ig氫化可的松注射液，劑量1 mg／只（12 d），造模后根據(jù)腎陽虛癥狀的指標(biāo)：怕冷、畏寒喜暖、四肢不溫、倦縮拱背、精神萎頓、消瘦等確定模型成功與否。選擇模型成功小鼠，于第13 d開始灌胃給藥，空白對照組及模型組給予等體積的蒸餾水，其他各組按分組給予受試藥物，連續(xù)給藥8 d。觀察指標(biāo)：1）對小鼠體重的影響：給藥第8 d，稱動(dòng)物體重，取平均數(shù)與模型對照組比較，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)。2）對小鼠低溫游泳存活時(shí)間的影響：末次給藥1 h后，將小鼠放入水溫為（8±1）℃的水中。記錄其入水至溺死的游泳存活時(shí)間。3）對小鼠免疫器官和性器官的影響：記錄完小鼠的游泳存活時(shí)間后，即刻將小鼠取出行解剖術(shù)，取腎上腺、胸腺、脾臟、包皮腺、睪丸、前列腺和精液囊，稱濕重，計(jì)算臟器指數(shù)，取平均數(shù)與模型對照組比較，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)。

1.2.2 扶正固本膠囊對腎陽虛大鼠的影響［4］雄性大鼠，分組見表4，按1mL／100 g灌胃給藥。除空白對照組外，其余大鼠均每日肌內(nèi)注射氫化可的松注射液10 mg／只，連續(xù)12 d，造成腎陽虛模型，造模后根據(jù)腎陽虛癥狀的指標(biāo)：怕冷、畏寒喜暖、四肢不溫或厥逆、小便清長、脈細(xì)、舌淡胖、倦縮拱背、精神萎頓、消瘦等確定模型成功與否。選擇模型成功大鼠，于第13 d開始灌胃給藥，正常對照組及模型組給予等體積的蒸餾水，其他各組按分組給予受試藥物，連續(xù)給藥21 d，觀察指標(biāo)：1）對大鼠體重的影響：給藥第20 d，稱動(dòng)物體重，取平均數(shù)與模型對照組比較，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)。2）對大鼠低溫游泳存活時(shí)間的影響：末次給藥1 h后，將大鼠放入水溫為（4±1）℃的水中。記錄其入水至溺死的游泳存活時(shí)間。4）對大鼠免疫器官和性器官的影響：記錄完大鼠的游泳存活時(shí)間后，即刻將大鼠取出行解剖術(shù)，取其腎上腺、胸腺、脾臟、包皮腺、睪丸、前列腺和精液囊，稱濕重，計(jì)算臟器指數(shù)。取平均數(shù)與模型對照組比較，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS11.5處理數(shù)據(jù)，結(jié)果用（±s）表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 對腎陽虛小鼠的影響 見表1。

表1 扶正固本膠囊對腎陽虛小鼠體重、低溫游泳時(shí)間、免疫器官的影響（±s，n＝12）

表1 扶正固本膠囊對腎陽虛小鼠體重、低溫游泳時(shí)間、免疫器官的影響（±s，n＝12）

注：與空白對照組比較：▼P＜0.05，▼▼P＜0.01，與模型組比較：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

組別 劑量（／kg） 體重（g） 游泳時(shí)間（min） 腎上腺指數(shù) 胸腺指數(shù) 脾臟指數(shù)空白對照組 32.23±1.44 18.22±2.46 0.13±0.03 1.67±0.27 3.84±0.60模型對照組 25.24±1.89▼▼ 13.56±2.52▼ 0.08±0.02▼▼ 1.60±0.42 2.83±1.73▼桂附地黃丸對照組 4.0 g 27.57±1.68▼▼ 18.51±2.50＊＊ 0.08±0.03▼▼ 1.53±0.42 2.89±2.24▼2.5 g 28.73±1.64▼▼ 18.94±2.65＊＊ 0.08±0.03▼▼ 1.76±0.32 2.82±0.63▼扶正固本膠囊 5.0 g 28.97±2.17▼▼ 17.20±1.80＊＊ 0.09±0.02▼▼ 1.73±0.34 3.10±0.77▼10.0 g 28.21±2.33▼▼ 15.45±2.23 0.11±0.03▼▼ 1.96±0.36＊＊3.65±0.63▼

2.2 對腎陽虛小鼠性器官的影響 見表2

表2 扶正固本膠囊對腎陽虛小鼠性器官的影響（±s，n＝12）

表2 扶正固本膠囊對腎陽虛小鼠性器官的影響（±s，n＝12）

組別動(dòng)物（只）劑量（／kg） 包皮腺指數(shù) 睪丸指數(shù) 前列腺指數(shù)空白對照組10 3.26±0.80 7.30±0.31 8.28±1.03模型對照組 12 2.83±0.83 8.43±1.16 9.01±1.28桂附地黃丸對照組 12 4.0 g 2.99±0.83 7.79±1.92 8.48±1.16 12 2.5 g 2.98±0.83 8.07±0.75 8.55±0.91 2.90±0.61 8.02±0.84 8.85±0.92扶正固本膠囊 12 5.0 g 2.73±0.68 8.44±0.77 8.91±0.95 12 10.0 g

2.3 對腎陽虛大鼠的影響 見表3。

表3 扶正固本膠囊對腎陽虛大鼠體重、低溫游泳時(shí)間、免疫器官的影響（±s，n＝12）

表3 扶正固本膠囊對腎陽虛大鼠體重、低溫游泳時(shí)間、免疫器官的影響（±s，n＝12）

注：與空白對照組比較：P▼＜0.05，P▼▼＜0.01，與模型組比較：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

組別 劑量（／kg） 體重（g） 游泳時(shí)間（min） 腎上腺指數(shù) 胸腺指數(shù) 脾臟指數(shù)空白對照組 466.66±43.52 10.73±1.66 0.15±0.024 0.64±0.20 4.17±0.421模型對照組 406.49±36.12▼ 8.66±1.35▼▼ 0.10±0.028▼ 0.50±0.20 3.22±0.74金匱腎氣丸對照組 4.0 g 429.26±29.54 10.56±1.47＊ 0.12±0.029 0.66±0.13 3.84±1.13 2.5 g 430.33±27.68 9.99±2.91 0.11±0.023 0.55±0.19 3.52±1.37扶正固本膠囊 5.0 g 446.13±46.23 10.60±1.30＊ 0.12±0.025 0.61±0.17 3.61±1.06 10.0 g 470.07±31.16＊ 11.68±1.39＊＊ 0.14±0.022＊0.77±0.20 3.96±0.58

2.4 對腎陽虛大鼠性器官的影響 見表4。

表4 扶正固本膠囊對腎陽虛大鼠性器官的影響（±s，n＝12）

表4 扶正固本膠囊對腎陽虛大鼠性器官的影響（±s，n＝12）

注：與模型組比較：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

組別 劑量（／kg） 包皮腺指數(shù) 睪丸指數(shù) 前列腺指數(shù)空白對照組0.38±0.071 5.65±1.49 5.76±0.36模型對照組 0.28±0.053 6.36±1.68 6.61±1.00＊金匱腎氣丸對照組 4.0 g 0.32±0.036 7.20±1.21＊ 6.29±0.75 2.5 g 0.32±0.036 5.84±1.63＊ 6.28±0.50＊扶正固本膠囊 5.0 g 0.32±0.060 7.71±1.54＊＊ 6.87±0.89 10.0 g 0.34±0.063 7.70±1.90＊＊6.89±0.97

試驗(yàn)結(jié)果顯示：扶正固本膠囊內(nèi)服給藥，連續(xù)8 d，在2.5 g／kg，5 g／kg的劑量可顯著延長腎陽虛（氫化可的松）小鼠冰水游泳的時(shí)間；且10 g／kg劑量對氫化可的松所至的腎上腺、脾臟萎縮有顯著改善作用；對腎陽虛小鼠的胸腺指數(shù)和性器官無明顯影響。

扶正固本膠囊內(nèi)服給藥，連續(xù)21 d，在5 g／kg、10 g／kg的劑量可顯著延長腎陽虛（氫化可的松）大鼠冰水游泳的時(shí)間；且10 g／kg劑量對氫化可的松所至的腎上腺、脾臟萎縮有顯著改善作用；對腎陽虛大鼠的胸腺指數(shù)和性器官無明顯影響。以上試驗(yàn)結(jié)果顯示：扶正固本膠囊對氫化可的松所致的大、小鼠腎陽虛模型有明顯的改善作用。

3 討論

腎陽虛證的主癥有腰膝酸軟，性欲減退，畏寒肢冷；次癥有精神萎靡，夜尿頻多，下肢浮腫，動(dòng)則氣促，發(fā)槁齒搖，舌淡苔白，沉遲，無力。本實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)典的腎陽虛造模方法制造大、小鼠腎陽虛模型，其特點(diǎn)是模型與腎陽虛患者的表現(xiàn)吻合，能夠體現(xiàn)腎陽虛的病變機(jī)制，且造模方法固定，成功率高［5］。扶正固本膠囊內(nèi)服給藥，相應(yīng)劑量可顯著延長腎陽虛大、小鼠冰水游泳的時(shí)間，體重增長明顯，表明扶正固本膠囊有改善腰膝酸軟、四肢無力，減輕多種腎陽虛證候，增強(qiáng)機(jī)體抗應(yīng)激作用，同時(shí)體重增重表明扶正固本膠囊有恢復(fù)蛋白質(zhì)合成的作用，這些作用可能都與扶正固本膠囊甘溫入腎，能溫陽、益腎作用有關(guān)。

腎陽虛證與免疫功能密切相關(guān)，腎陽虛證患者臨床表現(xiàn)為細(xì)胞免疫、體液免疫下降，在免疫器官方面，主要表現(xiàn)為脾臟、胸腺縮小、重量減輕［6］。本實(shí)驗(yàn)扶正固本膠囊10 g／kg劑量對氫化可的松所至的腎上腺、脾臟萎縮有顯著改善作用，這些作用說明扶正固本膠囊能增強(qiáng)腎陽虛證的免疫功能，所以扶正固本膠囊對氫化可的松所致的大、小鼠腎陽虛模型有明顯的改善作用。

臨床藥理學(xué)研究證明，助陽劑對垂體－腎上腺軸、垂體－甲狀腺軸和垂體－性腺軸均有興奮作用，反證了腎陽虛證的內(nèi)分泌功能衰退的病理實(shí)質(zhì)［7］。本制劑含附子、枸杞、肉桂等藥物，對氫化可的松造成的垂體－腎上腺軸功能紊亂的小鼠各項(xiàng)指標(biāo)有明顯的改善，為扶正固本膠囊補(bǔ)腎陽的功效提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。腎陽虛模型動(dòng)物的性腺、性器官重量會減輕、萎縮，經(jīng)藥物治療后，動(dòng)物睪丸、精液囊、前列腺重量會有所增加。在本次實(shí)驗(yàn)中，與空白組比較，各組動(dòng)物睪丸指數(shù)、前列腺指數(shù)有增加趨勢，但無明顯影響，與模型組比較各給藥組動(dòng)物睪丸指數(shù)、前列腺指數(shù)無明顯變化，采取其他腎陽虛模型作進(jìn)一步研究。

［1］蔡定芳，沈自尹，陳曉紅，等 .烏頭堿對大鼠下丘腦促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素含量的影響［J］.中西醫(yī)結(jié)合雜志，1996，16（9）：544.

［2］肖靜，王毅興，高建東，等 .腎陽虛證的研究進(jìn)展［J］.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào).2008.16－19.

［3］陳奇等 .中藥藥理研究方法學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：982～985.

［4］陳奇等 .中藥藥理研究方法學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：1038～1039.

［5］梁華龍，李珊珊，郭芳 .真武湯利水作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究［J］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，22（2）：701.

［6］雷娓娓，黃真炎，鄭尚飛，等 .腎虛、脾虛造型動(dòng)物免疫、內(nèi)分泌器官超微結(jié)構(gòu)的比較研究［J］.中藥新藥與臨床藥理，1999，10（4）：2082211.

［7］儀奎，姜名瑛 .中藥藥理學(xué)［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，1992：24.

Effect of Fuzhengguben Capsule on Animals with Deficiency of Kidney Yang

YANG He－jin，CUI Tao，Lv Su－zhen，et al

（Yunnan Institute of Pharmacology，Kunming，Yunnan，650111）

Objective：To study the effect of Fuzhengguben Capsule on big and small mice with deficiency of kidney yang.Methods：Male big and small mice were used to make kidney yang deficiency model by hydrocortisone，which were randomly divided into a model group，positive group，F(xiàn)uzhengguben Capsule groups（2.5 g／kg），medium dose group（5 g／kg），high dose group（10 g／kg）as well as blank control group.The small mice were given a continuous intragastric administration for 8 days while the big small mice were administered orally for 21 days.The weight of the mice was weighed in the appropriate time and the swimming survival time was measured at low－temperature.The adrenal gland，thymus，spleen，preputial glands，testes，prostate and sperm sac of the mice were taken out and measured at wet weight and analyzed statistically.Results：The small mice of Fuzhengguben Capsule groups，orally administered 2.5 g／kg and 5 g／kg dose，could significantly extend the time of the kidney yang deficiency mice swimming in icy water.The big mice，administered 5 g／kg and 10 g／kg dose，could significantly extend the time of kidney yang deficiency mice swimming in icy water，and the mice given with 10 g／kg doses significantly improved in the adrenal gland and spleen atrophy of the big and small mice with deficiency of kidney yang，with no obvious impact on the mouse thymus and sexual organs.Conclusion：Fuzhengguben Capsule has an obvious effect on the treatment of hydrocortisone－induced mice model with deficiency of kidney yang.

Fuzhengguben Capsule；deficiency of kidney yang；big mice；small mice

R285

A

1007－2349（2012）05－0048－03

楊和金（1972～），男，云南牟定人，高級工程師，主要從事藥理、毒理、新藥篩選研究和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理等工作。

2012－03－06）