補(bǔ)腎活血方對(duì)免疫性卵巢早衰小鼠卵泡凋亡相關(guān)蛋白的影響

劉慧萍 ，尤昭玲 ，張國(guó)民 ，劉春燕 ，王宏寶 ，肖 藝 ，吳 霞 ，莊 喬 ，黃珍琦 ，雷 磊 *

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)分子病理與藥理實(shí)驗(yàn)室，湖南 長(zhǎng)沙 410208；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)湘杏學(xué)院2008級(jí)中西醫(yī)結(jié)合專業(yè)，湖南 長(zhǎng)沙 410007）

補(bǔ)腎活血方對(duì)免疫性卵巢早衰小鼠卵泡凋亡相關(guān)蛋白的影響

劉慧萍1，尤昭玲1，張國(guó)民1，劉春燕1，王宏寶1，肖 藝1，吳 霞1，莊 喬2，黃珍琦2，雷 磊1*

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)分子病理與藥理實(shí)驗(yàn)室，湖南 長(zhǎng)沙 410208；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)湘杏學(xué)院2008級(jí)中西醫(yī)結(jié)合專業(yè)，湖南 長(zhǎng)沙 410007）

目的 研究補(bǔ)腎活血方對(duì)卵巢早衰（POF）小鼠卵泡凋亡調(diào)控相關(guān)基因的表達(dá)，為臨床中醫(yī)藥預(yù)防和治療卵巢早衰提供思路。方法 采用透明帶3作抗原，對(duì)BALB/c雌性小鼠皮下多點(diǎn)注射，建立免疫性POF模型。用補(bǔ)腎活血方低、中、高劑量進(jìn)行治療，設(shè)倍美力為陽(yáng)性對(duì)照藥，采用ELISA法測(cè)定外周血清抗透明帶抗體（AzpAb）的含量，進(jìn)行臟器指數(shù)及卵巢病理學(xué)觀察，免疫組織化學(xué)SABC法檢測(cè)卵泡凋亡調(diào)控基因（bcl-2/Bax）表達(dá)變化。結(jié)果 與空白組比較，模型組AzpAb表達(dá)明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與模型組比較，各劑量組、倍美力組表達(dá)均明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與空白組比較，模型組卵巢指數(shù)、胸腺指數(shù)均明顯下降，脾臟指數(shù)明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），與模型組比較，高劑組和倍美力組卵巢指數(shù)（P<0.01）、胸腺指數(shù)（P<0.05）增加，脾臟指數(shù)降低（P<0.05）；與空白組比較，模型組bcl-2蛋白表達(dá)明顯下降、Bax蛋白表達(dá)顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），與模型組比較，各劑量組、倍美力組bcl-2蛋白表達(dá)明顯增高（P<0.01），Bax蛋白表達(dá)顯著降低（P<0.01）。結(jié)論 補(bǔ)腎活血方可能通過(guò)調(diào)節(jié)凋亡調(diào)控基因（bcl-2/Bax）的表達(dá)，使AzpAb表達(dá)明顯下降，從而調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，抑制抗體集聚，阻止卵泡的過(guò)度凋亡，改善卵巢的免疫功能，使有生機(jī)卵泡增加，淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤(rùn)減少，達(dá)到抑制自身免疫損傷、保護(hù)卵巢、改善卵巢功能的目的。

補(bǔ)腎活血方；卵巢早衰；自身免疫；卵泡凋亡；抗透明帶抗體；小鼠；補(bǔ)骨脂；紫石英；菟絲子

卵巢早衰(Premature Ovarina Failuer，POF)是由多種病因?qū)е碌穆殉补δ芩ソ?，可?dǎo)致不孕及絕經(jīng)等癥狀，嚴(yán)重影響廣大婦女的健康[1]。西醫(yī)對(duì)該病的治療以雌激素為主，但長(zhǎng)期使用雌激素副作用大，使患者難以接受。中醫(yī)藥治療本病副作用較小[2]，積極探索中醫(yī)藥防治POF的有效方法，開(kāi)辟一條安全、有效和經(jīng)濟(jì)的新途徑非常必要。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察小鼠卵巢病理形態(tài)、卵泡凋亡調(diào)控基因（bcl-2/Bax）表達(dá)和外周血AzpAb含量變化，探討補(bǔ)腎活血方對(duì)調(diào)節(jié)卵巢免疫反應(yīng)、改善卵巢功能的機(jī)制?，F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 健康雌性Balb/c小鼠60只，體質(zhì)量（20±0.2）g，SPF 級(jí)，8 周齡， 廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證：2008A023。在湖南中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心IVC籠具分籠喂養(yǎng)，自由飲水?dāng)z食，保持每天12 h明、12 h暗環(huán)境。

1.1.2 藥物 補(bǔ)腎活血方：補(bǔ)骨脂、紫石英、菟絲子、生熟地、桑寄生、覆盆子、山萸肉、土鱉蟲(chóng)、水蛭、雞內(nèi)金、路路通、澤瀉、澤蘭、桔梗、烏藥、甘草，由湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院中藥房提供。倍美力：惠氏制藥有限公司。

1.1.3 試劑 小鼠透明帶多肽溶液：小鼠透明帶3(ZP3)第330-342個(gè)氨基酸序列(NSSSSQFQIHGPR)，分析純度>90%，杭州中肽生化有限公司，批號(hào)：P00105。弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑：美國(guó) Sigma公司，批號(hào)：F5881、F5506。 小鼠抗透明帶抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒：美國(guó)USCNLIFE公司，96例/份。bcl-2、Bax免疫組化試劑盒：武漢博士德生物工程有限公司，批號(hào)：AB112-1、AB026-1。

1.1.4 儀器 LEICA DM LB2型雙目顯微鏡（德國(guó)LEICA公司），MIAS醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng) (北航公司)，Shandon325型石蠟切片機(jī)(英國(guó) Shandon公司)，Motic B5顯微攝像系統(tǒng)（麥克奧迪實(shí)業(yè)集團(tuán)公司）等。

1.2 方法

1.2.1 模型制備 取6 mg zp3透明多肽粉，加入6 mL雙蒸水配成溶液，與弗氏完全佐劑按1∶1配制成免疫試劑，與弗氏不完全佐劑按1∶1配制成免疫強(qiáng)化試劑。每只小鼠給予0.15 mL免疫試劑注射雙后腳掌處及腹腔皮下，14 d后予免疫強(qiáng)化試劑0.15 mL再次注射雙后腳掌處及腹腔皮下加強(qiáng)免疫。空白組予0.15 mL生理鹽水注射雙后腳掌處及腹腔皮下。

1.2.2 分組及給藥方法 空白組造模后50只小鼠隨機(jī)分為模型組、倍美力組、補(bǔ)腎活血方低、中、高劑量組（以下簡(jiǎn)稱為低、中、高劑量組），每組10只。給藥劑量均按“60 kg成人體表面積換算，臨床成人用藥劑量的1、2、4倍，補(bǔ)腎活血方煎成濃縮劑，分別含生藥 0.54、1.08、2.16 g/mL。 倍美力：0.625 mg/片，0.625 mg/d，用冷開(kāi)水溶解，制成溶液，含倍美力0.002 mg/mL。造模后1周開(kāi)始灌胃，倍美力組予倍美力溶液0.3 mL，空白組和模型組均予等量生理鹽水；補(bǔ)腎活血方低、中、高劑量組分別予補(bǔ)腎活血方混懸液 0.3 mL（含生藥0.54、1.08、2.16 g/mL），連續(xù)給藥60 d（每周休息1 d）。

1.2.3 AzpAb檢測(cè) 小鼠眼球采血，離心，取血清，采用ELISA法測(cè)定AzpAb含量，具體方法見(jiàn)試劑盒。

1.2.4 卵巢、胸腺、脾臟指數(shù)測(cè)定 小鼠眼球采血后，頸椎脫臼處死，取雙側(cè)卵巢、胸腺、脾臟于電子天平稱重，計(jì)算臟器指數(shù)（臟器指數(shù)=臟器質(zhì)量/體質(zhì)量）。

1.2.5 免疫組化染色 卵巢標(biāo)本修整3 mm×5 mm，迅速于4%多聚甲醛液固定20 min，4℃于DEPC處理30%蔗糖液過(guò)夜至沉，取出于異戊烷-液氮法速凍。冰凍切片機(jī)切片，載玻片清洗、硅化、多聚賴氨酸包被。按免疫組化試劑盒方法檢測(cè)各組bcl-2和Bax蛋白定性和定量，包括標(biāo)本處理（脫水、浸蠟、包埋）、切片及貼片、脫蠟和染色。免疫組化SABC法檢測(cè)bcl-2和Bax，具體操作按說(shuō)明書(shū)。

1.2.6 圖像分析 光鏡下400倍放大，經(jīng)顯微攝像系統(tǒng)隨機(jī)攝取5個(gè)視野，定位陽(yáng)性區(qū)域在細(xì)胞表達(dá)的位置，采用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)對(duì)bcl-2和Bax進(jìn)行定量，陽(yáng)性區(qū)域著色呈棕黃色，用平均灰度值表示陽(yáng)性細(xì)胞區(qū)域，灰度值越小，說(shuō)明陽(yáng)性反應(yīng)程度越高，表達(dá)越強(qiáng)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用“”表示，單因素方差分析P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

觀察小鼠精神狀態(tài)、活動(dòng)度、飲食、二便、毛發(fā)光澤度等均正常。

2.2 各組小鼠血清抗透明帶抗體（AzpAb）的影響

空白組、補(bǔ)腎活血方各劑量組、倍美力組與模型組比較表達(dá)均顯著下降（P＜0.01）；高劑量組與倍美力組比較，表達(dá)下降，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），中、低劑量組明顯高于倍美力組（P＜0.01）；補(bǔ)腎活血方各組比較，高劑量組較中、低劑量組表達(dá)顯著下降（P＜0.01）。結(jié)果顯示，造模后，AzpAb表達(dá)顯著增加，給藥后，分別均能使AzpAb表達(dá)顯著下調(diào)，與模型組比較有顯著性差異，說(shuō)明中西藥均能在一定程度上使AzpAb表達(dá)下降。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 各組小鼠血清AzpAb表達(dá)水平比較 （）

表1 各組小鼠血清AzpAb表達(dá)水平比較 （）

注：與空白組比較#P<0.01；與模型組比較**P<0.01；與高劑量組比較△P<0.01。

組 別 n 藥物劑量（g/kg） AzpAb（pg/mL）空 白 組 10 — 10.07±2.75模 型 組 10 — 70.71±10.47##低劑量組 10 8.1 50.12±8.66**△△中劑量組 10 16.2 44.02±6.08*△△高劑量組 10 32.4 21.83±4.14*△倍美力組 10 3×10-5 26.76±4.48*

2.3 各組小鼠卵巢指數(shù)、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)的影響

卵巢指數(shù)：模型組與空白組比較，卵巢指數(shù)顯著下降（P<0.01）；補(bǔ)腎活血方高劑量組、倍美力組與模型組比較，顯著增加（P<0.01），補(bǔ)腎活血方低、中劑量組雖有增加，但二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；補(bǔ)腎活血方高劑量組與倍美力組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

胸腺指數(shù)：模型組與空白組比較，胸腺指數(shù)顯著下降（P<0.05）；藥物各組與模型組比較，均增加，高劑量組和倍美力組顯著增加（P<0.01）；高劑量組與倍美力組比較，雖有增重，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

脾臟指數(shù)：模型組與空白組比較，脾臟指數(shù)顯著增加（P<0.01）；各給藥組與模型組比較，均有下降，高劑量組和倍美力組顯著下降（P<0.01）。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 各組小鼠卵巢指數(shù)、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)比較（n=10，）

表2 各組小鼠卵巢指數(shù)、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)比較（n=10，）

注：與空白組比較**P<0.01；與模型組比較★★P<0.01。

組 別 藥物劑量（g/kg） 卵巢指數(shù) 胸腺指數(shù) 脾臟指數(shù)空 白 組 — 0.082 5±0.012 7 0.034 0±0.007 4 0.072 2±0.012 3模 型 組 — 0.055 8±0.009 3**0.022 2±0.009 9**0.111 9±0.019 7**低劑量組 8.1 0.058 4±0.008 0 0.025 0±0.003 5 0.097 6±0.016 2中劑量組 16.2 0.059 9±0.007 5 0.025 5±0.005 4 0.097 5±0.013 6高劑量組 32.4 0.077 6±0.012 6★★ 0.032 9±0.007 7★★ 0.089 2±0.015 6★★倍 美 力 3×10-5 0.073 5±0.012 6★★ 0.032 3±0.008 3★★ 0.089 4±0.020 7★★

2.4 免疫組化檢測(cè)卵巢組織bcl-2和Bax蛋白表達(dá)的影響

免疫組化染色結(jié)果顯示：各組小鼠卵泡均表達(dá)bcl-2和Bax蛋白，陽(yáng)性區(qū)域呈棕黃色反應(yīng)?？瞻捉M、補(bǔ)腎活血方各劑量組、倍美力組與模型組比較，bcl-2表達(dá)明顯增加，Bax表達(dá)顯著下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），說(shuō)明模型組卵泡顆粒細(xì)胞有異常凋亡趨勢(shì)和條件。補(bǔ)腎活血方和倍美力抑制凋亡的作用，可能是通過(guò)上調(diào)bcl-2表達(dá)，下調(diào)Bax表達(dá)而實(shí)現(xiàn)。結(jié)果見(jiàn)表3，圖1、2。

表3 各組小鼠卵泡顆粒細(xì)胞bcl-2、Bax蛋白表達(dá)比較（n=10，）

表3 各組小鼠卵泡顆粒細(xì)胞bcl-2、Bax蛋白表達(dá)比較（n=10，）

注：與空白組比較**P<0.01；與模型組比較★★P<0.01。

組 別 藥物劑量（g/kg） bcl-2 Bax空白組 — 18.75±2.99 6.03±2.13模型組 — 1.78±0.88** 32.36±6.01**低劑量組 8.1 10.12±2.14★★ 6.77±1.78★★中劑量組 16.2 15.32±2.19★★ 6.24±1.85★★高劑量組 32.4 15.68±2.16★★ 5.53±1.20★★倍美力組 3×10-5mg/kg 16.21±2.01★★ 4.82±1.39★★

圖1 卵巢組織bcl-2蛋白免疫組化染色圖(×400)

圖2 卵巢蛻膜組織Bax蛋白免疫組化染色圖(×400)

3 討論

中醫(yī)學(xué)無(wú)卵巢早衰的專門(mén)記載，可歸屬中醫(yī)的“血枯”、“血隔”、“閉經(jīng)”、“月經(jīng)后期”、“臟燥”、“不寐”、“不孕”等。本病的病因病機(jī)主要為腎虛胞阻，治療原則主要是補(bǔ)腎通絡(luò)。尤昭玲教授經(jīng)長(zhǎng)期臨證觀察[3-4]，自擬補(bǔ)腎活血方，該方由補(bǔ)骨脂、紫石英、菟絲子、生地黃、熟地黃、桑寄生、覆盆子、山萸肉、土鱉蟲(chóng)、水蛭、生雞內(nèi)金、路路通、澤瀉、澤蘭、烏藥、桔梗、甘草等十八味藥組成，主治腎虛胞阻型卵巢早衰。該方配伍嚴(yán)謹(jǐn)，用藥精當(dāng)，既符合中醫(yī)組方特色，又依據(jù)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)方法，切中病機(jī)，共奏補(bǔ)腎通絡(luò)之功效[5]。本病是腎陰腎陽(yáng)同時(shí)虛損所致，故方中重用紫石英溫補(bǔ)腎陽(yáng)，熟地黃平補(bǔ)腎陰，兩藥合為君藥；補(bǔ)骨脂、菟絲子、生地、桑寄生、山萸肉、覆盆子合用為臣藥，使腎陰得養(yǎng)，腎陽(yáng)得化；澤瀉、澤蘭、生雞內(nèi)金、路路通、土鱉蟲(chóng)、水蛭走沖任而活血利水通胞絡(luò)，祛瘀通滯；桔梗、烏藥條暢氣機(jī)，使氣血調(diào)達(dá)，沖任通暢，月經(jīng)順時(shí)而下，利于卵子排出，二者合用為佐藥；甘草調(diào)和諸藥為使?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，紫石英、補(bǔ)骨脂等補(bǔ)腎藥有類激素樣作用，能改善POF引起的雌激素分泌不足，提高子宮內(nèi)膜的容受性，改善宮頸粘液的分泌，利于精子通過(guò)[6]。補(bǔ)腎陽(yáng)藥具有增加黃體功能，利于早期妊娠?；钛鏊幙墒寡軘U(kuò)張，改善器官的血流量和高凝狀態(tài)，穩(wěn)定子宮和輸卵管的內(nèi)環(huán)境。因此，補(bǔ)腎藥與活血化瘀通絡(luò)藥配伍有利于調(diào)經(jīng)和助孕，而其正是將中西病理、病機(jī)、藥理融會(huì)貫通，也正是該方的靈魂所在[7]。

補(bǔ)腎活血方可增加卵巢體積，使卵巢指數(shù)升高，增加發(fā)育成熟卵泡數(shù)量，使卵泡顆粒細(xì)胞層增多，卵巢間質(zhì)淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞浸潤(rùn)減少。研究發(fā)現(xiàn)，顆粒細(xì)胞能合成雌激素和孕酮[8]，并通過(guò)芳香化途徑將雄激素轉(zhuǎn)化為雌激素，是卵巢性激素合成的主要場(chǎng)所。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推斷，補(bǔ)腎活血方的作用機(jī)制可能是通過(guò)促進(jìn)顆粒細(xì)胞合成，并分泌E2釋放入血，發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，同時(shí)可促進(jìn)卵泡、子宮發(fā)育，使子宮、卵巢指數(shù)增加。胸腺是中樞免疫器官[9]，實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，胸腺缺如者易發(fā)生POF，而本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示補(bǔ)腎活血方能使胸腺指數(shù)增加至正常水平，從而可以推測(cè)該方調(diào)節(jié)免疫作用是通過(guò)增加胸腺細(xì)胞的數(shù)量，使胸腺細(xì)胞在胸腺內(nèi)發(fā)育的過(guò)程中，對(duì)自身抗體產(chǎn)生應(yīng)答的細(xì)胞被消除或抑制，從而形成對(duì)自身抗原耐受性。表2結(jié)果顯示：各用藥組脾臟指數(shù)較模型組減輕，中藥各組和陽(yáng)性對(duì)照組組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。由此可見(jiàn)，中西藥物均有恢復(fù)脾臟功能，使之趨于正常的作用。補(bǔ)腎活血方能雙向調(diào)節(jié)脾臟功能，既可使亢進(jìn)的脾臟功能下降，又可使降低的脾臟功能增強(qiáng)，故能使脾臟功能恢復(fù)正常，調(diào)節(jié)和改善免疫功能，但其雙向調(diào)節(jié)的作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

bcl-2是凋亡抑制基因，與Bax共同形成異源二聚體，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡。bcl-2基因是細(xì)胞凋亡潛在的抑制基因，可調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，Bax與bcl-2基因有45%同源性，二者能夠形成異源或同源二聚體，細(xì)胞存活或是凋亡由bcl-2/Bax比例所決定[10-11]。免疫性卵巢早衰模型小鼠卵泡顆粒細(xì)胞bcl-2基因表達(dá)明顯減少，Bax表達(dá)顯著增多，bcl-2/Bax系統(tǒng)平衡失調(diào)，細(xì)胞毒性T細(xì)胞水平下降，使Tc通過(guò)bcl-2/Bax途徑殺傷活化的同種異體特征性B細(xì)胞，使其功能下降，從而抑制免疫應(yīng)答的效應(yīng)減弱，難以有效去除過(guò)度激活的免疫活性細(xì)胞，B細(xì)胞凋亡減少，使AzpAb等抗卵巢抗體集聚，導(dǎo)致卵巢免疫性損傷，引起卵巢功能下降，甚至衰竭[12]。補(bǔ)腎活血方可以通過(guò)調(diào)節(jié)bcl-2/Bax系統(tǒng)平衡，協(xié)調(diào)免疫反應(yīng)及細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞功能，改善B細(xì)胞功能，抑制AzpAb等抗卵巢抗體集聚，使卵巢免疫炎性反應(yīng)減輕，從而改善卵巢功能[13]。

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（本文編輯 彭芝配）

Effects of Bushen Huoxue decoction on follicle apoptosis-related protein of immune premature ovarian failure in mice

LIU Hui-ping1， YOU Zhao-lin1， ZHANG Guo-min1， LIU Chun-yan1， WANG Hong-bao1，XIAO Yi1， WU Xia1， ZHUANG Qiao2， HUANG Zhen-qi2， LEI Lei1
（TCM University of Hunan,Changsha,Hunan 410208,China）

Objective To study the efffects of Bushen Huoxue decoction on premature ovarian failure(POF)of follicle apoptosis-related protein expression in mice and provide ideas for clinical prevention and treatment of POF with Chinese medicine.Methods The zona pellucida 3 as the antigen,the BALB/c female mice,were given multi-point injectionin subcutaneous immunization to induce the models of autoimmune POF.Then the mice were treated with Bushen Huoxue decoction in low-dose,medium-dose,high-dose and Premarin(as control),respectively.Ovarian index,thymus index,spleen index and the morphology of ovary tissue were studied.The follicle apoptosis-relatedregulatory protein(Bcl-2/Bax)expression was detected by immunohis to chemistry SABC and serum AzpAb content was measured by ELISA.Results Compared with model group,the ovarian index and thymus index were increased(P<0.01,P<0.05),and spleen index was decreased(P<0.05)in Bushen Huoxue decoction high-dose group and Premarin group;the ovarian index and thymus index were increased and spleen index was decreased in Bushen Huoxue prescription median-dose group and low-dose group,but there were no significant differences.Bcl-2 protein expression in the control group,Bushen Huoxue prescription all dose groups,Premarin group were significantly higher than that of modeling group(all P<0.05).While Bax protein and AzpAb expressions in the control group,Bushen huoxue decoction in all dose groups,Premarin group were significantly lower than that in model group(P<0.05).Conclusion Bushen Huoxue decoction may influence the apoptosis-related regulatory protein(such as Bcl-2 and Bax)expressions,decrease AzpAb expression to improve ovarian function.

premature ovarian failure；Bushen Huoxue decoction；autoimmunity；apoptosis；AzpAb；mice;Psoralea corylifolia;Taxillus chinensis Danser;Cuscuta chinensis Lam

R285.5

A

10.3969/j.issn.1674－070X.2012.05.006.028.04

2011－10－25

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30973771)；中國(guó)博士后科研基金（2012M511382）；湖南省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(11JJ4075)；國(guó)家教育部高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金(20114323120007)；湖南省大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)和創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目(2011-480)。

劉慧萍(1979-)，女，湖南會(huì)同人，醫(yī)學(xué)博士，副教授，主要從事女性內(nèi)分泌病癥機(jī)制研究。

*雷 磊，男，教授，博士研究生導(dǎo)師，Tel：0731-88458252。