松針黃酮類物質藥理作用研究進展

陳良勝 方應權

1.河南新縣人民醫(yī)院，河南新縣 465550；2.重慶三峽醫(yī)藥高等?？茖W校，重慶萬州 404020

松針（pinenecdie）為松科（pinaceac）松屬（pinas）植物的葉，別名豬鬃松葉、松毛、山松須，松針用藥歷史悠久，《本草綱目》記載“松針，氣味苦，溫，無毒，久服令人不老，輕身益氣，主治風濕瘡，生發(fā)，要五臟，守中，治超年”?！秳e錄》謂其“主治濕瘡，要五臟，守中，治超年”。 現(xiàn)代研究表明松針具有鎮(zhèn)痛，抗炎，鎮(zhèn)咳，祛痰，抗突變降血酯，降血壓，抑菌等作用[4]，其利用價值日益受到重視。

1 松針黃酮主要化學成分

1.1 松針黃酮提取分離

水浴中取松針若干，加適量60%乙醇于80℃回流提取2～4h，收集提取液，減壓濃縮，用石油醚萃取2～3 次，除掉葉綠素，取棄醚相，水相用乙酸乙酯反復萃取2～3 次，棄水相，乙酸乙酯濃縮干燥后得粗品黃酮，用MPCC 分離，得到三種單體。

2 藥理作用

2.1 消除自由基作用，抗氧化作用

吉林大學基礎醫(yī)學院藥理教研室采用水揚酸法研究松針黃酮（pinececdie, flaronoid, PF）清除OH，用硫化巴比妥法測定大鼠組織肝線粒體，微粘體中丙二醛含量（MDA），用分光光度測定山鼠紅細胞溶血和肝線粒體膨脹程度，研究PF 抗氧化效果，結果發(fā)現(xiàn)PF 可消除OH，抑制OH 所致MDA 產(chǎn)生，減少紅細胞溶血，減輕肝線粒體，微程體膨脹程度，PF 具有明顯清除氧自由基作用。由于其最基本化學結構屬于黃酮類物質，因此，具有很強抗氧化和清除O2自由基作用，松針黃酮由苯羥基酸衍生物、多聚體和由一個或多個芳香環(huán)所組成，具有多個OH 基團O2-和OHNO 以及ONOO-，它們都是最重要自由基，對生物環(huán)境和人類健康和疾病有著重要的影響。 已經(jīng)被證明無論是在體內、體外、培養(yǎng)細胞或離體器官，都有重要作用。 Blaxso 通過ESR 證實抗氧化作用。用SephadexLH 分離得到三個部分，用薄層分離，NMR 證實：①是單體黃酮（taxifolin.Catechin,epicatechin）和苯羥基酸（Caffeic,ferulic, Vonillic），②二聚體（B1、B3、B6、B7等）；③多聚體。他們都有消除O2和HO 自由基作用。 Macride 用各種模型研究OH 消除作用，他們報道了松樹提取物對氧自由基引進物種有著治療作用。Nelson 對保護LOL（低密度脂蛋白）一些其它研究也說明這些作用。

2.2 心臟作用

2.2.1 動脈血管擴張和收縮作用 松針黃酮除了有很強抗氧化作用以外，已經(jīng)被報道有其它藥理活性。 如心臟功能方面，抑制ACEI 酶和改善微循環(huán)方面。松針黃酮在治療循環(huán)系統(tǒng)疾病可分部分松馳動脈血管平滑肌和增強毛細管抵抗力，這個復合作用結果是改善了微循環(huán)，增加了血流量。 松針黃酮可以降低犯心臟病的風險，這和松針黃酮能夠清除自由基有關。 除了其強大的抗氧化作用外，松針黃酮還被報道和心臟功能有關的活性，像擴張血管，抑制ACEI 酶，改善微循環(huán)等。最近的研究結果表明松針黃酮可能是通過誘導松弛血管平滑肌而產(chǎn)生作用的。 將分離出的大鼠動脈血管放到含有松針黃酮的溶液里，大鼠動脈血管擴張與松針黃酮的劑量有關。 當去除大鼠動脈血管的內皮組織，松針黃酮大鼠動脈血管擴張作用消失。 從而說明松針黃酮作用靶點在動脈的內皮細胞。 松針黃酮對NO 的水平的影響不是太大。 因為預先用含氮氧化酶處理過的動脈完全能夠防止松針黃酮血管擴張作用。 但是，由于松針黃酮的強大的清除自由基作用，它可能影響NOO-的結構從而使NO 保持在一個較高的水平。

2.2.2 抑制血小板的凝集 研究發(fā)現(xiàn)對一些吸煙引起的血小板的凝集用100mg 的松針黃酮和500mg 的阿司匹林（asprin）能達到同等的效果。 如使用200mg 松針黃酮可以抑制血小板凝集3d。 研究指出松針黃酮抑制血小板的凝集作用可能與它調節(jié)內皮細胞產(chǎn)生NO 的水平有關。 另據(jù)報道松針黃酮是通過抑制環(huán)氧化酶從而減少凝血惡烷，椐報道通過抑制鈣離子通道從而抑制血小板的凝集。 另外在60 例冠心病人服用松針黃酮四周后，血小板凝集和粘附明顯降低，血管直徑擴張、微循環(huán)改善。

2.2.3 ACEI 抑制作用 ACEI 維持機體內內正常血壓，ACEI 抑制血管緊張素Ⅰ轉換為血管緊張素Ⅱ，不滅活緩激肽，產(chǎn)生降壓效應。 松針黃酮活性部分在體外對ACEI 酶抑制作用被Blaszo 證實。Blaszo 報道將松針黃酮活性部分通過分子篩得到不同的活性部位都有ACEI 酶抑制作用。松針黃酮部分酶活性受到50%抑制時藥物的濃度（IC50）是高含量聚合物部分IC50值3 陪，明顯高于IC50比值為0.005g 抗高血壓卡托譜利。松針黃酮活性部分在人體內代謝很快，注射30min 后大約40%被代謝，直到在人體累積量達到32mg/kg才表現(xiàn)出明顯的降壓作用。 因此松針黃酮對人類血壓的影響是溫和的。

2.2.4 改善微循環(huán)作用 松針提取物最有益處之處是能夠改善微循環(huán)和增加毛細血管抵抗力，Gabor 報道可降低血管阻力， 大鼠在正常血壓情況下，在使用松針黃酮后，在增強毛細管抵抗力方面強而持久，松針提取物提高毛細血管抵抗力方面比單體蘆丁要強并且持續(xù)時間要長。 單體蘆丁提高毛細血管抵抗力與其劑量并不成線性關系，當超過100mg/kg的劑量時毛細血管抵抗力反而下降，這可能是由于組織胺的釋放和水腫引起的。但在使用了松針提取物這種情況并沒有觀察到。

人類的眼部疾病往往與糖的代謝有關，當人體的糖代謝失掉平衡往往會引發(fā)一些靜脈疾病如靜脈炎、眼睛失明、痔瘡等。相關報道松針提取物對塘尿病引起的視網(wǎng)膜失明有一定的效果。

2.3 在正常活性條件下抗炎作用

炎癥反應是機體對病毒感染、刺激性氣體、急性損傷所做出的應急反應。 這時人體的白細胞、淋巴細胞、單核細胞數(shù)量將上升并向炎癥部位積聚，在理想的情況下，炎癥導致受損的組織完全恢復。 如果對觸發(fā)的反應的刺激過于強烈炎癥周圍的細胞組織將會受到損傷，誘發(fā)慢性炎癥。30%的癌癥是由慢性炎癥引發(fā)。因此如何定位炎癥反應是非常重要的，一方面它可以提高人體的免疫機制而抵制外來入侵；另一方面它又可以有效的防御自身誘發(fā)的損害。在這方面，松針黃酮被報道在抗炎方面有重要的作用。 Cheshier 用動物模型模仿兩種條件下，松針黃酮增加了免疫力的活性。

3 進展情況

松針黃酮是由一些黃酮和黃酮苷及其多聚合體酚化合物前花青素組成，有著廣泛藥用價值和很強的、很廣泛的生理活性。松針黃酮已經(jīng)被證實對循環(huán)系統(tǒng)、 炎癥和免疫系統(tǒng)有著重要作用。 松針黃酮活性的藥學基礎是多方面，但是主要是表現(xiàn)在清除O2和N2自由基方面。 其它主要生理作用，可能是對蛋白質有特殊保護作用，影響其結構和功能性質，松針黃酮已被證明參于細胞抗氧化方面有協(xié)同作用，并能夠通過細胞氧化還原反應，影響到基因的表達，對于黃酮的研究下一個挑戰(zhàn)是從分子水平上尋求其不同生理活性的機制。

令人感興趣是松針黃酮的混合物的相似重量純凈物表現(xiàn)于出更強的生理活性，這清楚提出應該加強對酶抑制和抗氧能力，這也就證明松針黃酮并不是“魔力子彈”，整個提取物具有很強生理活性，這可能是各組織之間協(xié)同作用結果，松針黃酮一些生物作用有著更遠的前影。

早期研究松針黃酮有很強改善微循作用，這些已經(jīng)被更新，更可能從不同途徑而得到證實，例如：松針黃酮可抑制引導粘附分子ICAM-1 在人類上皮細胞上的粘附。

松針黃酮的活性N2消除基或作為誘導合成調節(jié)者，可能通過生理NO 分子分裂打開了新的通道，根據(jù)松針黃酮對NO 作用，要么作為自由基消除劑，要么作為新陳代謝的誘導劑，我們能夠預見通過NO 新陳代謝可能解釋很多松針黃酮作用，例如慢性炎癥和早期風濕病NO 對中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)作用使松針黃酮可用于腦部疾病可能。（記憶、學習、調節(jié)）NO 注意重要的作用在正常大腦功能方面，如記憶、學習、調節(jié)腎上腺和多巴胺釋放吸收，實際上很多報道已經(jīng)證明了在神經(jīng)細胞里NO 可能在信息貯存、回收機制扮演著重要的角色。

總之，松針黃酮應用越來越引起人們重視，已引進人們對松針黃酮研究越來越深入細化， 逐步由器官到細胞以及分子水平來研究松針黃酮，這勢必對松針利用帶來更多的活性依據(jù)。

[1] LIping. The pine needle research progresses[J].Chengdu traditional Chinese medicine is a college journal.2005，24（3）：492-495.

[2] HAO-qiang.pine needle attar[J].analytical chemistry.2006，28（3）：3003-3005.

[3] XING You-quan.Heilongjiang pine needle oil research[J].chemistry and adhesion，1990（4）：2184-2187.

[4] DONG Li-zhun.Korean pine pine needle attar analysis extracting and forming method[J].forest-science，2000，24（2）：2187.

[5] YE Jian-ren, et al, Slash pine needle attar chemistry composition[J].Nanjing forestry college journal，1994，18（2）：606-609.

[6] packer L,Rimbach G, Virgili F. Antioxidant activity and biologic propert’ies of a procganidin-rich extract from pinus (pinus maritima) bark,pyctnogenol[J].Free Radical Biologic ＆ medicine,1999, 27(6)：704-724.

[7] Uchida S, Edamatsu R, Hiramast M. Condensed tannins Scavenge active oxygen radicas[J].Med. Sci. Res，1987，15：831-832.

[8] Benthsath A,Rusznyak S, Szent-Gyorgyi A. Vitamin nature of flavones[J].Nature，1936，138：798.

[9] Uchida S，Edamastu R, M Hiramastu, et al. Comdensed tannis Scavenge active oxygen radicals[J].Med, Se, Re.s，1987，15：831-832.

[10] Blazso G, Gabor M, Sibbe R l,et al. Antiinflammatory and superoxide radical scavenging activities of procyanidins containing extract from the bark of pinus pinaster Sol. And ies fractions[J].pharm. Pharmacol，1994，3：217-220.

[11] Virgili F, Kobuchi H,Packer L.Procyanidins extracted from pinus marieima:Scavengers of free radical Species and modulators of nitrogen monoxide metabolism in activated marine RAW 264.7 macrophages[J].Free Raltic. Biol. Med，1998，24：1120-1129.

[12] Elsener E, Kleber E. Radical Scavenger properties of leucocyanidine.In:Das, N. P. ed. Flavonoids in biology and medicine (III):Current issues in flavonoids research[J].Singapore : Natural of Singapore press，1990：227-235.

[13] Macrides T, Shihata A, N Kalafatis, et al.A Comparison of the hydroxyl radical scavenging properties of life Shark bile steroid 5-β-Seymnol and plant pycnogenols [J].Biochem. Mol.Bid. Int，1977，42：1249-1260.

[14] Nelson A. B, Lau B. H. S, Ide N,et al. Pycnogenol inhibits maerophage oxidative burst, lipoprotein oxidation and hydroxyl radical indicated DNA damage[J].Drug Develop. Int . Med.1998，24：1-6.

[15] Nelson A. B, Lau B. H. S, Ide N, et al.Pycnogenol inhibits maerophage oxidative burst, lipoprotein oxidation and hydroxyl radical indicated DNA damage[J].Drug Develop. Ind . Med，1998，24：1-6.

[16] packer L, Rimbach G, and Virgili F. Antioxidant activity and biologic propert’ies of a procganidin-rich extract from pinus (pinus maritima)bark, pyctnogenol[J].Free Radical Biologic ＆ medicine，1999, 27 (6)：704-724.

[17] Blazso G, Gabor M, Sibbe R l,et al. Antiinflammatory and superoxide radical scavenging activities of procyanidins containing extract from the bark of pinus pinaster Sol. And ies fractions pharm[J].Pharmacol，1994，3：217-220.

[18] Gabor M, Engi Blazso G, Gabor M, et al. Antiinflammatory and superoxide radical scavenging activities of procyanidins containing extract from the bark of pinus pinaster Sol[J].And ies fractions pharm. Pharmacol，1994，3：217-220.

[19] Gabor M, Engi E, Sonkodi S.Die kapillarwacd-resistenz undihre Beeinflussung darch wasserlo sliche Flavonderivate beispontan hypertonischen Ratten[J].Phlebologie，1993，22：178-182.

[20] Node X, Anzai K, Mori A,et al. Hydroxyl and superoxide anion radical scavenging activities of natural Source of antioxidants using tle comparerized JES-FR 30 ESR Spectrometre system. Biochem [J].Md. Biol.Internet，1977，42：35-44.

[21] Cossins E, Lee R, packer L. ESR Studies of vitamin V regeneration,order of reactivity of natural Source .phytochemical preparations.Biochem[J].Mol. Biol. Int 2000，45：583-598.