桑椹質(zhì)量分析方法及其臨床應用研究的進展

耿 旦 甄漢深 馬雯芳，3

1.廣西欽州市第一人民醫(yī)院，廣西 欽州 535000;2.廣西中醫(yī)藥大學，廣西 南寧 530001 3.成都中醫(yī)藥大學，四川 成都 611137

桑椹為?？浦参锷orus alba L.干燥的果穗。又名桑葚、桑實、烏椹、黒椹等。中醫(yī)傳統(tǒng)認為，其味甘、酸，性寒，歸肝、腎經(jīng)。具有滋陰補血，生津潤燥之功效。主治肝腎陰虛，頭暈目眩，腰酸耳鳴，須發(fā)早白，失眠多夢，津傷口渴，消渴，腸燥便秘等證［1］。桑椹的使用歷史悠久，桑椹入藥，始見于唐代《新修本草》，其后《本草綱目》、《本草備要》等本草書籍均有記載，近代《全國中草藥匯編》［2］、《中藥大辭典》［3］等均收錄，并在藏、蒙、侗、苗、傈傈、傣、佤、阿昌、哈尼、水、土家、瑤等多個民族的民間藥書中有記載［4］。桑椹營養(yǎng)成分主要有維生素、礦物質(zhì)、脂肪酸、多糖、蛋白質(zhì)等，與其藥用功效相關的化學成分主要有花色苷、非色素酚類物質(zhì)、多糖和白藜蘆醇等［5］。本文概述桑椹近三年來質(zhì)量分析方法及其臨床應用研究。

1 質(zhì)量分析方法

1.1 分光光度法 楊奕［6］以蘆丁為對照品，采用紫外分光光度法測定黃酮類在桑椹口服液中的含量，為桑椹口服液制劑提供了質(zhì)量控制依據(jù)。張錦衛(wèi)等［7］以分光光度法測定浙江不同產(chǎn)地桑椹中原花色素的含量，結果表明，不同產(chǎn)地的桑椹中所含的原花色素含量有差異。伍春等［8］利用紫外分光光度法對4個果桑品種桑椹中的總多酚、總黃酮等抗氧化物質(zhì)進行含量測定和總還原活力的測定、比較，測定結果為桑椹制品的原料藥選擇提供了參考依據(jù)。王振江等［9］研究桑椹成熟過程中酚類物質(zhì)、總黃酮及花色苷含量的動態(tài)變化。以蘆丁為對照品，采用Al(NO3)3－NaNO2分光光度比色法，測定總黃酮含量;以沒食子酸為對照品，采用福林－肖卡 (Folin－Ciocaltu)法測定總酚類物質(zhì)的含量;采用pH示差法測定總花色苷的含量。結果表明桑椹在幼果期及成熟期的總酚類和總黃酮類含量較高，而花色苷則在白熟期開始大量合成，在紫黑期含量最高。閆祝煒等［10］采用分光光度法，以沒食子酸為對照品測定紅色、黃白色、黑紫色3種顏色桑葚鮮果中的總多酚，實驗結果表明，黑紫色桑葚鮮果中總多酚的含量相對于其他兩種為高?；萸锷车龋?1］采用分光光度法，以葡萄糖為對照品，運用蒽酮－硫酸法對桑葚烏發(fā)粥中水提醇沉所得供試品溶液進行多糖含量的測定。

1.2 薄層層析色譜法 王錦紅等［12］采用薄層鑒別方法，根據(jù)TLC法2005年版《中國藥典 (一部)》附錄ⅥB對長壽長樂口服液中的桑椹進行鑒別試驗。

1.3 HPLC法 耿旦［13］等采用HPLC法測定桑椹中蘆丁的含量，以單因素考察優(yōu)化提取桑椹樣品液，得到最佳提取條件，考察流動相、檢測波長等建立其最佳的HPLC測定方法。趙康等［14］以不同成熟期的鮮果桑椹為研究對象，采用HPLC方法，測定桑椹中白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的含量及在不同品種的桑椹成熟過程中二者的含量差異。結果表明，白藜蘆醇含量較高的最佳采摘期為紅果剛轉紫時。游元元等［15］還采用HPLC法建立了桑椹藥材的指紋圖譜。采收不同基源不同產(chǎn)地的桑椹藥材，對其化學成分組成和數(shù)量進行聚類分析，結果表明桑椹藥材品質(zhì)的好壞與產(chǎn)地無明顯相關性，與藥材加工或貯存有著密切關系。耿旦等［16］對廣西產(chǎn)桑椹進行HPLC指紋圖譜研究，標定了10個共有峰，相似度較高，相似度均大于0.9。李升鋒等［17］利用HPLC發(fā)對不同品種桑椹糖酸組分進行分析，發(fā)現(xiàn)果糖和葡萄糖是桑椹的主要糖類，桑椹不含有蔗糖。各品種桑椹均含有有機酸，如檸檬酸、蘋果酸、琥珀酸、草酸、丙酸和富馬酸等，大部分品種桑椹含有酒石酸，部分桑椹含有丙酮酸。檸檬酸、蘋果酸及琥珀酸含量較高，其中檸檬酸占總酸比例41.30% ～68.80%。

1.4 氣相色譜－質(zhì)譜法 陳娟等［18］用二氯甲烷對桑椹汁進行萃取、離心、脫水、濃縮后得到樣品，再運用GC－MS的方法對其進行香氣成分分析。結果發(fā)現(xiàn)不同品種的桑椹中含有四十到五十種揮發(fā)性成分，其中高脂脂肪酸的相對含量最高，是重要的香氣前體物質(zhì)。還表明了不同品種的桑椹有著其獨特的香氣成分。張莉等［19］也采用文獻［18］的樣品處理方法得到樣品，在運用GC－MS的方法對桑椹汽酒中的揮發(fā)性成分進行分析，檢出69個峰，鑒定了63種化合物，以醇類和酯類化合物為主。

1.5 氨基酸自動分析法 劉峻池等［20］采用氨基酸自動分析儀，對新育成的桑椹品種中的氨基酸成分進行檢測與比較。結果表明桑椹中含有十多種氨基酸，其中也包括部分人體必需的氨基酸，而培育過程中受基因劑量的影響，染色體加倍會影響到桑樹是否豐產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的問題。

1.6 火焰原子吸收光譜法 梁多［21］采用火焰原子吸收光譜法測定桑椹中鉀 (K)、鈉 (Na)、鈣 (Ca)、鎂 (Mg)、鐵 (Fe)、鋅 (Zn)、錳 (Mn)、銅 (Cu)八種微量元素含量，桑椹中質(zhì)量分數(shù)較高的依次是鉀 (K)，鈣 (Ca)，鎂(Mg)，鈉 (Na)，鐵 (Fe)，上述各種元素質(zhì)量分數(shù)均大于100 mg/kg，呈現(xiàn)出高鉀低鈉的特點。

2 臨床應用

2.1 治療血枯閉經(jīng)及婦女更年期綜合癥 更年期綜合癥是由雌激素水平下降而引起的一系列癥狀。中醫(yī)認為更年期綜合征是腎氣不足，天癸衰少，以至陰陽平衡失調(diào)造成。因此在治療時，以補腎氣、調(diào)整陰陽為主要方法。盧吉良等［22］采用女貞桑椹飲治療婦女更年期綜合癥80例，臨床結果:治愈70例，較好8例，無效2例，有效率達到97.5%。

2.2 治療慢性原發(fā)性血小板減少性紫癜 原發(fā)性血小板減少性紫癜是一種免疫性綜合病征，是常見的出血性疾病。特點是血循環(huán)中存在抗血小板抗體，使血小板破壞過多，引起紫癜;而骨髓中巨核細胞正?；蛟龆啵字苫?。臨床上可分為急性及慢性兩種，二者發(fā)病機理及表現(xiàn)有顯著不同。趙華等［23］用桑椹三仙膠治療30例慢性原發(fā)性血小板減少性紫癜，以6個月為療程，并觀察其療前療后癥狀變化。臨床結果表明，治療有效率達到89.99%，桑椹三仙膠對此病癥有較好的臨床療效。

2.3 治斑禿 斑禿俗稱“鬼剃頭”，是一種驟然發(fā)生的局限性斑片狀的脫發(fā)性毛發(fā)病。中醫(yī)認為一般是肝腎不足，精血虧虛等引起。李清平等［24］采用梅花針，并結合首烏桑椹生發(fā)湯內(nèi)服治療42例斑禿患者，總有效率達83.33%。

3 結語

3.1 桑椹質(zhì)量分析方法，有分光光度法、薄層色譜法、HPLC法、氣相色譜－質(zhì)譜法、氨基酸自動分析法等。但在《中國藥典》一部2010年版中［25］，桑椹的鑒別方法只收載有性狀和顯微鑒別項，無薄層色譜法;在定量分析中，只收載有浸出物測定，而無有效成分的含量測定項。筆者建議應當加強上述方面的研究，盡快完善其質(zhì)量標準，以保證其用藥的質(zhì)量。

3.2 桑椹補血滋陰，生津潤燥等，為健體美顏，抗衰老的佳果與良藥。不僅在臨床上有較多應用，在民間也用于多種疾病治療，如慢性咽炎、減肥和通便、糖尿病、耳鳴、老年花眼等等。在現(xiàn)代臨床應用中，可以利用桑椹治療血枯閉經(jīng)、治療婦女更年期綜合癥、治療慢性原發(fā)性血小板減少性紫癜、治斑禿等。今后應當加強這些方面的研究，以使桑椹能進一步開發(fā)與應用。

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