溶劑法提取青蒿素的工藝

周凌云

安徽省皖南醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系，安徽 蕪湖 241002

青蒿素(Artennuin)是從菊科植物青蒿 (Artemisia annua L.)中提取而得，對(duì)腦型及抗氯喹惡性瘧疾有特殊療效，引起國(guó)內(nèi)外的重視。［1］目前，青蒿素的提取方法及純化方法有很多種，筆者也曾經(jīng)報(bào)道過(guò)通過(guò)多次柱層析來(lái)降低成本的研究工藝，［2］但同樣存在回收率低，不易工藝化，生產(chǎn)周期長(zhǎng)的缺點(diǎn)。

本實(shí)驗(yàn)僅采用溶劑法處理，簡(jiǎn)化了生產(chǎn)步驟，生產(chǎn)周期短;且對(duì)濾餅中夾帶的少量青蒿素也用溶劑反復(fù)處理得到結(jié)晶，回收率高。

1 原料及試劑

黃花蒿購(gòu)自安徽亳州中藥基地;青蒿素對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所;所涉試劑除120號(hào)汽油外其余均為國(guó)產(chǎn)化學(xué)純;Agilent公司1100系列HPLC。

2 HPLC檢測(cè)方法

ZORBAX-C18色譜柱 (4.6mmх150mm，5um);流動(dòng)相：乙腈：水 (44：56);檢測(cè)波長(zhǎng)：210nm;柱溫：30℃;流速：1mL/min，進(jìn)樣體積：10uL。本方法精密稱取青蒿素對(duì)照品20mg于10mL棕色容量瓶，用流動(dòng)相溶解，取對(duì)照品溶液10uL注入，按上述色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，按外標(biāo)法測(cè)定，以峰面積計(jì)算。測(cè)得青蒿素平均回收率100.1%(n=3)，RSD=0.3。

3 實(shí)驗(yàn)步驟

3.1 精制過(guò)程 將青蒿原料粉碎至60目，然后倒入5倍青蒿總量的120號(hào)溶劑油 (價(jià)格為石油醚的1/2，提取率相似，達(dá)到90%以上)。通過(guò)均勻設(shè)計(jì)的現(xiàn)代試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，確定了分三次提取，時(shí)間分別為4-3-3小時(shí)，每次溶劑量均為5倍量，第一次的前2個(gè)小時(shí)冷浸，后2小時(shí)加熱，后面均直接加熱，加熱溫度為50～55度，每次提取均應(yīng)攪拌。提取結(jié)束后60度下回收溶劑，大約每10Kg青蒿原材料的提取液可濃縮至600mL膏狀物。在其中加入自配的混合溶劑，經(jīng)過(guò)濾，得到黃色濾餅，其中夾雜有白色針狀結(jié)晶，該濾餅中含有大量的青蒿素 (提取率約90%，HPLC檢測(cè)含量約40%)，濾液中還有約10%青蒿素，留待合并處理。在黃色濾餅中加入固體物20倍量的80～85%乙醇，和固體重量10%的粉狀活性炭，加熱至沸騰2min，放出過(guò)濾，濾液自然冷卻結(jié)晶12小時(shí)，過(guò)濾出結(jié)晶體，加熱乙醇重結(jié)晶，可得白色針狀結(jié)晶物 (純度為99.0%)。

3.2 濾液中剩余10%青蒿素的處理 合并多次濾液，濃縮成浸膏，取2倍量的無(wú)水乙醇與濃縮剩余物充分混合，然后緩緩加入水，加水量約為無(wú)水乙醇量的30%，上層油狀物濾去，下層液體回收為浸膏，采用3.1方法處理即可得到結(jié)晶。濾餅中經(jīng)HPLC檢測(cè)僅含約1%青蒿素。

4 小結(jié)

本工藝的精制部分，取消了繁瑣的柱層析方法，改用溶劑法，首先使用混合溶劑除去提取物中大部分的雜質(zhì)，得到粗品，再用乙醇進(jìn)行結(jié)晶-重結(jié)晶，得到純度很高的精品。方法簡(jiǎn)單易行，溶劑消耗量少，毒性相對(duì)較小，且60度下回收率高，生產(chǎn)周期短 (約為60小時(shí))，易進(jìn)行工藝生產(chǎn)。

［1］李國(guó)棟，周全.青蒿素類藥物的研究現(xiàn)狀［J］.中國(guó)藥學(xué)雜志，1998，33(7)：385-389.

［2］周凌云.青蒿素純化工藝的研究［J］.中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2010，19(11)：49.