基因診斷先天性耳聾的臨床應(yīng)用現(xiàn)狀與展望

劉莉揚(yáng)

清華信息國(guó)家實(shí)驗(yàn)室生物信息學(xué)研究部/合成與系統(tǒng)生物學(xué)研究中心、清華大學(xué)自動(dòng)化系，北京 100084

先天性耳聾是由于患者在母體內(nèi)由于母體在妊娠或分娩過程中發(fā)生異?；蛘哂捎谶z傳基因造成的一種不可逆的耳聾[1-2]。在我國(guó)每年新增的聽力及語(yǔ)言障礙患者將近八萬(wàn)人，其中新增聾兒有近3萬(wàn)人，先天性耳聾在新生兒中的發(fā)病率高達(dá)1/1800～1/2000，其中超過百分之五十的新生兒是由于遺傳基因缺陷導(dǎo)致的先天性耳聾，其他造成先天性耳聾的原因包括母親懷孕期間感染過病毒或細(xì)菌、使用過造成耳毒性的藥物、接觸過噪音等等[3]。因此，遺傳因素是造成先天性耳聾的主要原因。

1 基因診斷先天性耳聾的臨床應(yīng)用現(xiàn)狀

1．1 綜合征性耳聾

通過對(duì)基因進(jìn)行針對(duì)性檢測(cè)，可得出與綜合征性耳聾有關(guān)的基因，如USHIC基因發(fā)生突變可導(dǎo)致Usher Syndrome type 1。

1．2 非綜合征性耳聾

①若患者為單個(gè)病例，即家庭中無(wú)其他人患有非綜合征性耳聾患者，可對(duì)其進(jìn)行巨細(xì)胞病毒抗體檢測(cè)，以排除由于巨細(xì)胞病毒引起患者先天性耳聾。進(jìn)行GJB2基因檢測(cè)其序列。以判斷GJB2基因是否發(fā)生突變。②若患者為非綜合征性耳聾，且家庭中出現(xiàn)多個(gè)此類患者，并在患者上一代家屬中有此類耳聾患者，應(yīng)首先進(jìn)行GJB2基因序列檢測(cè)。③若患者為非綜合征性耳聾，且通過家族基因分析為顯性遺傳，進(jìn)行Connexin檢測(cè)相關(guān)基因并不能排除，則可進(jìn)行其他位點(diǎn)的特異性基因檢測(cè)。④若非綜合征性耳聾患者，通過其家族基因分析顯示為線粒體內(nèi)DNA遺傳所致，則可進(jìn)行A1555G突變檢測(cè)或A7445G突變檢測(cè)。⑤若初步診斷為非綜合征性耳聾且患者父母均為耳聾患者，則首先懷疑為Connexin相關(guān)基因致病，經(jīng)過綜合檢測(cè)分析后，大多數(shù)患者可確定致病基因，可由此預(yù)測(cè)其下一代出現(xiàn)耳聾患者的幾率。

1．3 在進(jìn)行先天性耳聾患者的基因檢測(cè)時(shí)，應(yīng)首先進(jìn)行患者家族史的全面調(diào)查研究，內(nèi)容為有血緣關(guān)系的至少三代親戚，包括父母及兄弟姐妹的聽力狀況；患者的民族和籍貫；患者的聽覺具體情況，如產(chǎn)生聽力下降或消失的具體時(shí)間，是否為漸進(jìn)性聽力下降等；患者是否伴有前庭功能低下等情況；患者自身是否有其他病史，如腦膜炎、缺氧病史等；母親在妊娠期是否有吸毒史等。

2 基因診斷先天性耳聾的展望

基因診斷（gene diagnosis）即是通過分子生物學(xué)和的技術(shù)對(duì)患者的基因或者是基因組直接進(jìn)行分析來(lái)診斷疾病的一種方式。在做基因檢測(cè)時(shí)有兩個(gè)必須的條件：①要特制的DNA探針；②要基因組DNA。只有當(dāng)這兩個(gè)必要的條件變性成為單鏈狀態(tài)的時(shí)侯，才能行分子的雜交，既互補(bǔ)的兩條DNA單鏈在一定的條件下結(jié)合并成為雙鏈，從而對(duì)基因進(jìn)行研究作出診斷。而先天性遺傳耳聾的基因檢測(cè)作為近幾年才開始起步進(jìn)行研究的關(guān)于耳聾疾病的新項(xiàng)目，所以方法并不十分完善，其敏感性及準(zhǔn)確性均未能達(dá)到100%的程度，對(duì)某些患者而言，已知的基因突變檢測(cè)方法顯示為陰性并不能表示該類患者沒有發(fā)生此類基因突變，對(duì)該基因突變是如何引起耳聾的了解也十分有限，這就需要醫(yī)務(wù)工作者在今后的工作研究中，不斷的開闊思路，將基因診斷先天性耳聾的應(yīng)用不斷完善，以達(dá)到理想成熟的效果。

3 討論

GJB2基因突變的檢出率在我國(guó)為13.6%～21.5%，其中299～300del AT與233～235delC為我國(guó)非綜合征性耳聾患者GJB2基因最常見的突變。通過進(jìn)行GJB2基因檢測(cè)可以對(duì)常規(guī)的先天性耳聾臨床檢測(cè)法無(wú)法明確病因的患者做出明確診斷，而且此法可以對(duì)耳聾患者提供遺傳信息及婚育幫助。在藥物性耳聾發(fā)病中遺傳因素起著至關(guān)重要的作用，其分子病理機(jī)制為線粒體內(nèi)DNA A1555G突變利于12S rRNA與氨基糖苷類抗生素的結(jié)合，使得細(xì)胞膜對(duì)Ca2+通透性增加，從而引起毛細(xì)胞的死亡或者凋亡。氨基酸苷類抗生素通過抑制線粒體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成，從而對(duì)呼吸鏈造成缺陷或氧化磷酸化效率降低，導(dǎo)致體內(nèi)ATP量產(chǎn)生不足。線粒體能量的下降，小劑量的使用也會(huì)導(dǎo)致耳聾。

除上述兩種基因產(chǎn)生突變外，SL C26A4在感音神經(jīng)性耳聾中約占1%～12%的比例。最常見的SL C26A4基因突變?yōu)镮V S7-2>G。通過進(jìn)行檢測(cè)SL C26A4基因能夠?yàn)槎@病情提供確診依據(jù)，幫助醫(yī)生為患者早期耳聾病情進(jìn)行干預(yù)治療，對(duì)致病基因攜帶者的早期發(fā)現(xiàn)及有效的遺傳咨詢有利于保護(hù)患者僅存的部分聽力，不至于使患者完全喪失聽力能力，造成生活上的不便以及心理上的負(fù)面影響，避免加重耳聾患者誘因以及隨時(shí)注意患者是否發(fā)生甲狀腺腫。

[1]夏爽，劉慶先，宋天彬，等.震動(dòng)觸覺刺激fMRI評(píng)價(jià)先天性耳聾嬰幼兒聽覺及語(yǔ)言中樞功能的可行性[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù)，2011，27(3):500-504.

[2]劉巍巍，鄧惠紅.先天性耳聾與三種致病基因有關(guān)-柳州市婦幼保健院該項(xiàng)科研成果達(dá)國(guó)內(nèi)先進(jìn)水平[J].柳州醫(yī)學(xué)，2010(3).