鹽酸可樂定的含量測定方法研究進(jìn)展

張榮發(fā)，楊宗發(fā)，江尚飛

(重慶醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，重慶 400030)

鹽酸可樂定又名氯壓定，具有降壓、鎮(zhèn)痛、止瀉等藥理作用，臨床上用于治療高血壓急癥、偏頭痛、絕經(jīng)期潮熱、痛經(jīng)、戒絕阿片癮毒癥狀以及糖尿病腹瀉等疾病。為了便于更深入地系統(tǒng)研究，現(xiàn)將鹽酸可樂定含量測定方法的研究進(jìn)展作一綜述。

1 高效液相色譜(HPLC)法

HPLC法具有簡便、靈敏、快速、準(zhǔn)確和重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，已廣泛用于鹽酸可樂定復(fù)方制劑含量的測定和質(zhì)量控制。

陳新善[1]采用HPLC法測定復(fù)方鹽酸多塞平膠囊中鹽酸可樂定的含量，結(jié)果鹽酸可樂定質(zhì)量濃度在2～12 μg/mL(r=0.999 9)范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系，平均回收率為100.34%(RSD=1.63%)。鮑立曾等[2]采用 Kromasil ODS C18柱(250 mm × 4.6 mm， 5 μm)、流動相為乙腈 － 0.2% 磷酸溶液(8∶92)檢測波長為210 nm、流速為1.0 mL/min等色譜條件對鹽酸可樂定進(jìn)行含量測定，結(jié)果鹽酸可樂定質(zhì)量濃度在1.0～10 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系(r=0.999，n=5)，平均回收率為 97.8% ， RSD 為 1.0%(n=9)。楊繼斌等[3]采用 Zorbax Extend C18分析柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)為色譜柱，乙腈 －磷酸鹽緩沖液(15∶85)為流動相，流速為 1.0 mL/min，檢測波長為 210 nm，進(jìn)樣量為20 μL，結(jié)果鹽酸可樂定的質(zhì)量濃度線性范圍為2.0～12.0 μg/mL(r=0.999 9)，平均回收率為 99.2% 。許伯慧等[4]采用 Phenom enex fusion－RP 色譜柱(250 mm ×4.6 mm，4 μm)，流動相為甲醇 －水 －磷酸(25∶75∶0.08)，檢測波長為 220 nm，柱溫為25℃，流速為1 mL/min，結(jié)果鹽酸可樂定的質(zhì)量濃度線性范圍為 75 ～1 500 ng/mL(r=0.999 9)，平均回收率為 99.2%。馬永貴等[5]采用 Hypersil C18色譜柱(250 mm × 4.6 mm，5 μm)，流動相為0.22%辛烷磺酸鈉 －甲醇 －磷酸(400∶600∶1，用 1 mol/L氫氧化鈉溶液或磷酸調(diào) pH至3.0)，流速為 0.9 mL/min，檢測波長為220 nm，結(jié)果鹽酸可樂定的質(zhì)量濃度線性范圍為1.37 ～ 6.85 μg/mL(r=1.000 0)，平均回收率為 100.5%(RSD=0.76%)。魯敏等[6]采用 C18柱(250 mm × 4.6 mm，5 μm)，流動相為乙腈 －0.2%磷酸(5∶95)，檢測波長為210 nm，結(jié)果鹽酸可樂定的質(zhì)量濃度線性范圍為 7.132 ～142.64 ng(r2=1.000 0)，平均加樣回收率為 99.5% ，RSD 為 2.7%(n=9)。于文靜等[7]采用Kromonsil C18色譜柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，流動相為 0.22%辛烷磺酸鈉溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.7)－乙腈－甲醇(65∶19∶16)，檢測波長為215 nm，結(jié)果鹽酸可樂定線性范圍為0.016 4～0.328 μg(r=0.999 9，n=5)，平均加樣回收率為 99.0% ，RSD=1.38%。張建國等[8]采用 DiamonsilTMC18色譜柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，以0.01 mol/L磷酸二氫鈉溶液(pH=3)－甲醇 －乙腈(90∶2 ∶8)作為流動相，流速為 1.0 mL/min，檢測波長為 216 nm，結(jié)果鹽酸可樂定進(jìn)樣量在0.03～0.15 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系，r=0.999 8，平均加樣回收率為 98.38% ，RSD=1.19%。許諳等[9]選用C18固相萃取小柱對樣品進(jìn)行純化，十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相為0.22%辛烷磺酸鈉－甲醇－磷酸(450∶500∶1，用1 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào) pH至3.0)，檢測波長為220 nm，結(jié)果鹽酸可樂定質(zhì)量濃度在1.03～6.18 mg/L范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好(r=0.999 2)，平均回收率為98.8%。

2 反相高效液相色譜(RP－HPLC)法

采用RP－HPLC法測定鹽酸可樂定的含量，具有簡便、快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。黃東慧[10]采用RP－HPLC法測定珍菊降壓片中鹽酸可樂定含量，色譜柱為Kromasil－C8柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流動相為0.22%辛烷磺酸鈉溶液－甲醇－磷酸(540∶460∶1，用 1 mol/L氫氧化鈉溶液或磷酸調(diào)pH至3.0)，檢測波長為220 nm，外標(biāo)法計(jì)算含量，結(jié)果鹽酸可樂定質(zhì)量濃度在1.5～15.0 μg/mL 范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系(r=0.999 9)，平均加樣回收率為 99.58%，RSD=1.16%(n=6)。Ying－Qinwei等[11]對RP－HPLC法測定鹽酸可樂定含量的方法進(jìn)行改進(jìn)，不用液－液萃取法制備供試品溶液，而改用中性Al2O3層析柱對樣品精制后，再制備供試品溶液，也取得了較好的效果。結(jié)果鹽酸可樂定質(zhì)量濃度在1.1 ～11.0 μg/mL 范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系(r=0.999 9)，平均加樣回收率為96.5% ～99.3%，RSD為2.1% ～4.8%。

3 高效液相色譜－電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC－ESI/MS)法

HPLC－ESI/MS法具有樣品處理簡單、重現(xiàn)性好、選擇性好、抗干擾能力強(qiáng)、分析時(shí)間短、結(jié)果可靠等優(yōu)點(diǎn)。盧亞玲等[12]采用Spherigel C18反相色譜柱，以0.005 mol/L甲酸銨緩沖鹽(pH為3.0)－乙腈－甲醇為流動相，梯度洗脫，質(zhì)譜定性定量，對鹽酸可樂定進(jìn)行測定，取得了較好效果。

4 毛細(xì)管電泳法

毛細(xì)管電泳法具有方法簡便、快速和重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，可用于鹽酸可樂定的含量測定。蘇圣民等建立毛細(xì)管電泳法測定珍菊降壓片中鹽酸可樂定的方法，在未涂層毛細(xì)管中，20℃，20 kV電壓條件下運(yùn)行，壓力進(jìn)樣50 kPa，5 s，檢測波長210 nm;結(jié)果鹽酸可樂定的線性范圍為10～100 μg/mL，日間與日內(nèi)精密度 RSD小于15%，加樣回收率為94.96%[13]。高蘇亞等[14]建立了帶毛細(xì)管電泳法分離測定珍菊降壓片中鹽酸可樂定含量的方法，采用未涂層石英毛細(xì)管柱(75 μm×53 cm，有效柱長45 cm)，以20 mmol/L硼砂－5 mmol/L磷酸二氫鈉(pH=9.0)為運(yùn)行緩沖液，檢測波長210nm，溫度20℃;結(jié)果鹽酸可樂定質(zhì)量濃度在2.70～48.60μg/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，回收率和重復(fù)性良好。

5 毛細(xì)管電泳－安培檢測法

毛細(xì)管電泳－安培檢測法具有選擇性好、操作簡單、儀器價(jià)廉、可同時(shí)實(shí)現(xiàn)包括鹽酸可樂定在內(nèi)多種成分的檢測等優(yōu)點(diǎn)。丁飛等[15]利用毛細(xì)管電泳－安培檢測法實(shí)現(xiàn)了珍菊降壓片中鹽酸可樂定、氫氯噻嗪和蘆丁的同時(shí)檢測。在25 mmol/L Na2B4O7－50 mmol/L NaH2PO4緩沖溶液中，3種電活性物質(zhì)在15 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)完全分離。每片珍菊降壓片中3種有效成分鹽酸可樂定、氫氯噻嗪和蘆丁的含量差別很大，分別為0.03，5，20 mg。通過改變樣品稀釋溶劑，調(diào)整了3種活性物質(zhì)在電極上的電流響應(yīng)，實(shí)現(xiàn)了珍菊降壓片中含量差別百倍以上的3種電活性物質(zhì)的同時(shí)檢測，測定結(jié)果與該藥片的每片標(biāo)示值之間的相對偏差均小于2%。

6 離子對萃取－分光光度法

離子對萃?。止夤舛确ň哂袦y定結(jié)果準(zhǔn)確、抗干擾能力強(qiáng)、重現(xiàn)性較好等優(yōu)點(diǎn)。魏世超等[16]運(yùn)用離子對萃取－分光光度法測定可樂保林片中鹽酸可樂定含量，檢測波長為412 nm，結(jié)果鹽酸可樂定質(zhì)量濃度在10.3～61.8 μg/mL范圍內(nèi)與吸光度呈線性關(guān)系，平均回收率98.6%，RSD=1.78%。

7 氣相色譜法

氣相色譜法具有靈敏、重現(xiàn)性好、分離效果好等特點(diǎn)，可用于鹽酸可樂定的含量測定。楊雪梅等[17]采用氣相色譜－電子捕獲檢測法測定家兔血漿中可樂定的質(zhì)量濃度，以鹽酸普萘洛爾為內(nèi)標(biāo)，在堿性條件下用乙酸乙醋提取，提取物經(jīng)，3，5－二(三氟甲基)苯甲酞氯衍生化后進(jìn)行分析。結(jié)果樣品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液分離較好，保留時(shí)間分別為16.5和21.4 min;測定質(zhì)量濃度線性范圍為 20 ～800 ng/mL(r=0.999 91)，測定下限為 5 ng/mL;平均回收率為(92.8±2.0)%，日內(nèi)和日間 RSD分別為2.3%和3.3%，血漿中內(nèi)源性物質(zhì)對測定未見干擾[17]。

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