科技進(jìn)展

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巴西圣保羅州感染豬圓環(huán)病毒2型豬群的流產(chǎn)胎豬中檢測(cè)到基因型2a和2b的豬圓環(huán)病毒

豬圓環(huán)病毒2型 （PCV2）與許多復(fù)雜疾病相關(guān)，其中包括繁殖障礙。這個(gè)研究的目的是鑒別巴西圣保羅州繁殖障礙豬的PCV2亞型，調(diào)查與其它傳染性病原共感染的情況。

巴西圣保羅州5個(gè)商品豬飼養(yǎng)場(chǎng)168個(gè)流產(chǎn)胎豬和木乃伊胎用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) （PCR）檢測(cè)出感染了PCV2。陽(yáng)性樣品再用PCR檢測(cè)細(xì)小病毒 （PPV）、鉤端螺旋體和布魯氏菌病。PCV2在18個(gè)樣品中被檢測(cè)到 （檢出率為10.7%）。分別檢測(cè)到2、10、和0個(gè)樣品為豬細(xì)小病毒 （PPV）、布氏桿菌和鉤端螺旋體陽(yáng)性。對(duì)11個(gè)PCV2株測(cè)序判定是2a型 （n= 1）的還是2b型 （n=10）的。

這個(gè)研究結(jié)果表明巴西圣保羅州流產(chǎn)的胎豬中PCV2的感染頻率相當(dāng)?shù)?（10.7%），PCV2與其它病原共感染導(dǎo)致繁殖障礙非常普遍。PCV2衣殼蛋白氨基酸修飾特征與母豬流產(chǎn)相關(guān)。 （王蕾 編譯，譯自 《斯堪的納維亞獸醫(yī)學(xué)報(bào)》）

譯自：Castro AM，Cruz TF，Salgado VR，et al.Detection of porcine circovirus genotypes 2a and 2b in aborted foetuses from infected swine herds in the State of Sao Paulo,Brazil.Acta Vet Scand，2012 May 3.[Epub ahead of print]

在中國(guó)分離的豬流行性腹瀉病毒的膜蛋白基因多樣性

2010年年底，豬流行性腹瀉病毒 （PEDV）重新出現(xiàn)在免疫豬群，給中國(guó)河北省的養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。七株豬流行性腹瀉病毒從患有嚴(yán)重腹瀉病的仔豬糞便中分離出來(lái)。

七株豬流行性腹瀉病毒的M基因包含681個(gè)核苷酸的開放閱讀框，編碼含226個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。分離的七株流行性腹瀉病毒株核苷酸序列一致性達(dá)到99.4%～99.9%，氨基酸序列一致性達(dá)到98.2%～99.1%。當(dāng)與其它中國(guó)和國(guó)外分離的毒株比較，這七株病毒與泰國(guó)分離株M-NIAH1005具有很高的核苷酸一致性 （99.6%～99.9%），與韓國(guó)分離株P(guān)FF188的核苷酸具有99.7%～100%一致性，但是與其它中國(guó)分離的毒株的核苷酸具有較低一致性 （96.6%～99.1%），與中國(guó)所用的疫苗株CV777的核苷酸一致性有97.8%～98.2%。系統(tǒng)發(fā)育分析表明所有七株病毒可分到同一群。雖然CV777也被分在相同的群中，但是它們屬于不同的亞群。這些結(jié)果表明，這七株病毒在系統(tǒng)發(fā)育上是密切聯(lián)系的，與韓國(guó)株P(guān)FF188和泰國(guó)株M_NIAH1005關(guān)系更近。這七株病毒與其它中國(guó)株和疫苗株CV777基因是不同的。因此，中國(guó)有待于篩選更有效的疫苗株，以防控豬流行性腹瀉病。 （王蕾 編譯，譯自 《病毒基因》雜志）

譯自：Fan JH，Zuo YZ，Li JH，et al.Heterogeneity in membrane protein genes of porcine epidemic diarrhea viruses isolated in China.Virus Genes，2012 May 15.[Epub ahead of print]

美國(guó)北部地區(qū)豬弓形蟲病高發(fā)

食入未煮熟的含有弓形蟲的豬肉是弓形蟲傳播的重要途徑。在過(guò)去的20年，美國(guó)采用封閉飼養(yǎng)模式生產(chǎn)的豬肉弓形蟲的感染率降低了，然而戶外養(yǎng)殖豬的感染率比較高。消費(fèi)者需求 “有機(jī)產(chǎn)品”、 “人道主義”和 “自由”已導(dǎo)致越來(lái)越多的豬飼養(yǎng)在戶外。為了確定這些有機(jī)方式飼養(yǎng)的豬的弓形蟲感染率，本研究對(duì)密歇根州兩個(gè)豬場(chǎng)用有機(jī)方式飼養(yǎng)的豬的弓形蟲的流行情況進(jìn)行調(diào)查 （豬場(chǎng)1和豬場(chǎng)2）。上述兩個(gè)豬場(chǎng)的33只豬在屠宰時(shí)采集血清和組織樣品用于弓形蟲檢測(cè)。

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) （ELISA）和改良凝集試驗(yàn)（MAT）進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)。33個(gè)樣品中30個(gè)樣品的弓形蟲的抗體通過(guò)MAT滴度檢測(cè)出，3個(gè)1︰25、6個(gè)1︰50、7個(gè)1︰100、13個(gè)1︰200、1個(gè)1︰400。所有這33只豬的心臟組織接種小鼠進(jìn)行弓形蟲的生物檢測(cè)。從17只豬中分離出弓形蟲，其中包括一個(gè)血清學(xué)檢測(cè)陰性豬 （ELISA和MAT檢測(cè)均為陰性）。對(duì)17株弓形蟲中的16株進(jìn)行了基因分型，用SAG1、SAG2、SAG3、 BTUB、GRA6、c22-8、 c29-2、L358、PK1和Apico位點(diǎn)發(fā)現(xiàn)豬場(chǎng)1的弓形蟲為克?、蛐?，豬場(chǎng)2的弓形蟲為克隆Ⅲ型。

這個(gè)結(jié)果第一次揭示了在美國(guó)，用有機(jī)方式飼養(yǎng)的豬弓形蟲的流行率很高，表明消費(fèi)有機(jī)豬肉產(chǎn)品會(huì)增加患弓形蟲病的風(fēng)險(xiǎn)。 （王蕾 編譯，譯自 《獸醫(yī)寄生蟲學(xué)》雜志）

譯自：Dubey JP，Hill DE，Rozeboom DW，et al.High prevalence and genotypes of Toxoplasma gondii isolated from organic pigs in northern USA.Vet Parasitol，2012 Mar 15.[Epub ahead of print]

評(píng)估一個(gè)反向遺傳學(xué)方法構(gòu)建的轉(zhuǎn)基因口蹄疫病毒疫苗

口蹄疫 （FMD）是一種高度接觸性傳染病?？刂埔卟≈饕看笠?guī)模的滅活苗免疫。近幾年，一系列的O型口蹄疫在中國(guó)暴發(fā) （包括中國(guó)臺(tái)北和中國(guó)香港），給中國(guó)畜牧業(yè)構(gòu)成了巨大威脅。其病原體——0型口蹄疫病毒，已演變成三個(gè)拓?fù)湫?[東-南亞拓?fù)湫?（ME-SA）、東南亞拓?fù)湫?（SEA）、中國(guó)拓?fù)湫?（CHY）]。中國(guó)的FMD疫苗對(duì)ME-SA和SEA型的病毒可起到很好的免疫保護(hù)作用，但是對(duì)一些變異的CHY型病毒不能產(chǎn)生足夠的保護(hù)作用。

本研究構(gòu)建了一個(gè)FMDV疫苗株全長(zhǎng)cDNA感染性克隆，轉(zhuǎn)基因病毒是在已經(jīng)建立的感染性克隆的基礎(chǔ)上在抗原位點(diǎn)1、3和4進(jìn)行了一些氨基酸替換。重組病毒具有與野生病毒O/HN/CHA/93相似的生長(zhǎng)特性。 所有免疫滅活苗（O/HN/CHA/93毒株）的豬28天后，用ME-SA和SEA型病毒攻毒，全部得到保護(hù)，而對(duì)于CHA型病毒的攻毒只有部分保護(hù)作用。而用轉(zhuǎn)基因疫苗免疫豬可以產(chǎn)生對(duì)這三種病毒的保護(hù)作用。

FMDV疫苗毒株一些氨基酸替換對(duì)于體外病毒復(fù)制沒有影響。用反向遺傳學(xué)構(gòu)建的轉(zhuǎn)基因口蹄疫病毒與野生毒株O/HN/CHA/93相比大大提高了對(duì)CHA型變異病毒的保護(hù)效果。FMDV全長(zhǎng)cDNA克隆可用于開發(fā)口蹄疫病毒基因工程疫苗。 （王蕾 編譯，譯自《英國(guó)醫(yī)學(xué)委員會(huì)獸醫(yī)研究》雜志）

譯自：Li P，Bai X，Sun P，Li D，et al.Evaluation of a geneticallymodified foot-and-mouth disease virus vaccine candidate generated by reverse genetics.BMC Vet Res，8（1）：57. [Epub ahead of print]

法國(guó)林業(yè)工人和野豬具有很高的戊型肝炎病毒血清流行率

戊型肝炎病毒 （HEV）是經(jīng)糞口傳播的病原。在工業(yè)發(fā)達(dá)國(guó)家，HEV感染的地方案例越來(lái)越多。更多的事實(shí)揭示了HEV是一個(gè)動(dòng)物傳染病，接觸豬的人是HEV感染的高危人群。這個(gè)實(shí)驗(yàn)的目的是檢測(cè)法國(guó)野豬HEV流行率以及林業(yè)工人是否具有更高的HEV感染率。

對(duì)比三個(gè)不同的HEV抗體檢測(cè)試驗(yàn)的有效性。用最敏感的試驗(yàn)用于調(diào)查593個(gè)林業(yè)工人和421頭野豬的HEV血清流行率。林業(yè)工人的HEV抗體陽(yáng)性率為31%，野豬抗體陽(yáng)性率為14%。人的HEV的抗體陽(yáng)性率與年齡、所處地理位置和職業(yè)的活動(dòng)性相關(guān)，野豬的HEV抗體陽(yáng)性率則與地理位置相關(guān)。 （王蕾 編譯，譯自 《臨床微生物學(xué)》雜志）

譯自：Carpentier A,Chaussade H,Rigaud E,et al.High HEV seroprevalence in forestry workers and in wild boars in France.Clin Microbiol，2012 Jun 20.[Epub ahead of print]

屎腸球菌菌株NCIMB 10415顯示對(duì)感染鼠傷寒沙門氏菌的斷奶仔豬無(wú)益處

在歐洲鼠傷寒沙門氏菌是爆發(fā)沙門氏菌病的主要致病菌。該研究擬研究益生菌屎腸球菌NCIMB 10415能否預(yù)防或緩解沙門氏菌病。32頭仔豬斷奶后10天用鼠傷寒沙門氏菌進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，其中16頭用屎腸球菌進(jìn)行治療，16頭用作對(duì)照。檢測(cè)了糞便和部分器官中的沙門氏菌及免疫應(yīng)答情況。與對(duì)照組相比，用接受屎腸球菌處理豬的體重較輕 （P=0.05）。屎腸球菌對(duì)攻毒后豬糞便中的沙門氏菌無(wú)影響，但增加了扁桃體中致病菌的豐度。仔豬用沙門氏菌攻毒后，淋巴結(jié)、不同腸道片段 （空腸、回盲腸）的腸道集合淋巴結(jié)，回盲乳頭及血液中的特異性 （抗沙門氏菌IgG）和非特異性 （結(jié)合珠蛋白）體液免疫反應(yīng)和細(xì)胞免疫反應(yīng) （T輔助細(xì)胞，細(xì)胞毒性T細(xì)胞，調(diào)控性T細(xì)胞，γδT細(xì)胞和B細(xì)胞）受到了影響 （P＜0.05），但屎腸球菌對(duì)這些指標(biāo)沒有影響。這些結(jié)果表明，屎腸球菌對(duì)感染沙門氏菌仔豬的生產(chǎn)性能無(wú)影響?？梢?，將屎腸球菌用作豬的益生菌有待進(jìn)一步研究。 （彭華 編譯，譯自《應(yīng)用與環(huán)境微生物學(xué)》雜志）

譯自：Kreuzer S,Janczyk P,Aβmus J,et al.Enterococcus faecium NCIMB 10415 shows no beneficiary effects in weaned pigs infected with Salmonella enterica serovar Typhimurium DT 104.Applied and Environmental Microbiology,2012[Published ahead of print].

羅伊乳桿菌NCIMB 30253用作益生菌的體內(nèi)外試驗(yàn)鑒別和安全性評(píng)價(jià)

羅伊乳桿菌NCIMB 30253被證實(shí)具有減少炎性因子IL-8的益生潛能。用體內(nèi)外試驗(yàn)檢測(cè)了其對(duì)人類的安全性。用代謝輪廓分析和16S rRNA基因測(cè)序?qū)@株菌進(jìn)行了鑒別，用分子和代謝技術(shù)進(jìn)行體外試驗(yàn)對(duì)其安全性進(jìn)行了評(píng)價(jià)。通過(guò)估計(jì)其在抗生素平板上的最小抑菌濃度 （MIC）的遺傳分析表明這株菌對(duì)8種檢測(cè)的抗生素敏感。對(duì)這株菌產(chǎn)生的有害物質(zhì)和抗菌成分進(jìn)行分析表明，此菌不會(huì)產(chǎn)生生物胺類物質(zhì)，也不會(huì)產(chǎn)生細(xì)菌素活性。用正常的大鼠進(jìn)行連續(xù)28天的投喂試驗(yàn)支持體外試驗(yàn)結(jié)果，即此菌是安全的。與對(duì)照組相比，口服該菌的大鼠身體狀況無(wú)變化，生化及血液安全指標(biāo)也無(wú)明顯的臨床變化。可見羅伊乳桿菌NCIMB 30253用作益生菌是安全的。 （彭華 編譯，譯自 《加拿大微生物學(xué)雜志》）

譯自：Sulemankhil I,Parent M,Jones ML,et al.In vitro and in vivo characterization and strain safety of Lactobacillus reuteri NCIMB 30253 for probiotic applications.Canadian Journal ofMicrobiology,2012,58：776-787.