P53蛋白在胃癌中的表達(dá)分析

何均輝 鄒秀玲 李忠楚 陸忠奎

1.廣東省佛山市順德區(qū)大良醫(yī)院內(nèi)三科，廣東 佛山 528300；2.廣東省佛山市順德區(qū)龍江醫(yī)院腫瘤科，廣東 佛山 528318；3.廣東省佛山市順德區(qū)龍江醫(yī)院內(nèi)三科，廣東 佛山 528318；4.廣東省佛山市順德區(qū)龍江醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 佛山 528318

胃癌是我國(guó)常見(jiàn)多發(fā)惡性腫瘤疾病之一。胃癌的發(fā)生和進(jìn)展受到多種因子的調(diào)控和影響，從基因水平對(duì)其發(fā)病機(jī)制進(jìn)行研究，有助于胃癌高?；颊叩拇笠?guī)模篩查，提高胃癌診斷率，并在治療過(guò)程中提供相對(duì)客觀的觀察指標(biāo)。目前關(guān)于相關(guān)因子的研究較多，如Mdm2基因、P53基因、Cyclin G1基因和HP相關(guān)基因等，其中P53是研究較深入和較早的抑癌基因，而且上述各基因作為P53的下游產(chǎn)物，其表達(dá)和P53表現(xiàn)出不同程度的蛋白依賴(lài)性。因此對(duì)P53基因展開(kāi)研究，有助于更為基礎(chǔ)的研究其發(fā)病機(jī)制。筆者對(duì)健康人群、胃炎患者和胃癌患者分別展開(kāi)P53蛋白表達(dá)率的檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年3～8月前來(lái)我院接受治療的胃癌患者作為A組，共53例，其中高中分化腺癌28例，低分化腺癌25例；男31例，女22例；年齡38～74歲，平均56.3歲。選擇胃炎患者作為B組，共53例，其中淺表性胃炎30例，萎縮性胃炎23例；男32例，女21例；年齡39～73歲，平均56.7歲。選擇健康體檢患者作為C組，共53例，男33例，女22例；年齡39～72歲，平均56.4歲。三組在年齡、性別方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

收集三組患者胃黏膜組織塊標(biāo)本，均采用10%多聚甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋，做厚度為5 μm的均勻切片，進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色和常規(guī)HE染色。免疫組化S-P試劑盒和P53單克隆抗體均購(gòu)自北京中山生物技術(shù)有限公司。采用免疫組織化學(xué)法（S-P）檢測(cè)P53。每例切片觀察10個(gè)高倍視野，陽(yáng)性表達(dá)產(chǎn)物為棕黃色顆粒，記數(shù)1000個(gè)癌細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞所占百分率，百分率≥10%為陽(yáng)性，百分率＜10%為陰性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，采用以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

A組 P53陽(yáng)性率為 64.2%（34例），B組為 32.1%（17例），C組為13.2%（7例），A、B組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=9.674，P ＜ 0.01），A、C 組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=26.888，P<0.01），B、C 組間比較差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=4.363，P<0.05）。A 組高分化癌 P53陽(yáng)性率為 78.6%（22例），低分化癌陽(yáng)性率P53為48.0%（12例），不同分化類(lèi)型比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=4.120，P<0.05）。B組淺表性胃炎P53陽(yáng)性率為40.0%（12例），萎縮性胃炎P53陽(yáng)性率為21.7%（5例），淺表性胃炎P53陽(yáng)性率高于萎縮性胃炎，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.243，P>0.05）。

3 討論

腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展是環(huán)境和遺傳多因素共同作用的結(jié)果。抑癌基因的失活、癌基因的激活、以及一些相關(guān)的調(diào)節(jié)蛋白活性和細(xì)胞周期基因的異常表達(dá)等，均可能導(dǎo)致腫瘤。P53基因分為野生型和突變型，定位于17號(hào)染色體短臂。野生型P53基因是腫瘤抑制基因，P53蛋白的表達(dá)對(duì)細(xì)胞主要有兩種潛在影響：一是誘發(fā)細(xì)胞凋亡，去除變異細(xì)胞；二是使細(xì)胞停止在G1期或G2期，修復(fù)損傷的細(xì)胞，抑制細(xì)胞癌變。幾乎在不同類(lèi)型的細(xì)胞內(nèi)均檢測(cè)到P53基因的蛋白產(chǎn)物，有研究表明，P53基因是胃癌中突變率非常高的抑癌基因[1-2]。

突變型P53基因是多種因素共同作用的結(jié)果，一般單基因的突變并不足以導(dǎo)致癌變，癌變是多基因共同突變的結(jié)果，由于細(xì)胞內(nèi)生活環(huán)境發(fā)生改變，P53基因有突變的趨向，導(dǎo)致抑癌功能消失，細(xì)胞無(wú)限分裂增殖而發(fā)生癌變。而P53基因突變產(chǎn)生的后果是非常嚴(yán)重的。陳藝丹等[3]的研究顯示，突變型P53基因的下游轉(zhuǎn)錄靶基因cyclin G1和mdm2可迅速被激活。野生型P53基因的過(guò)度滅活，Mdm2的過(guò)度表達(dá)，可產(chǎn)生類(lèi)似基因突變失活的結(jié)局，使細(xì)胞失去正常的負(fù)性調(diào)節(jié)，從而促進(jìn)癌變細(xì)胞的繁殖。王宏波等[4]參考了大量文獻(xiàn)后認(rèn)為，有50%以上的腫瘤與P53基因有關(guān)，包括胃癌、軟組織肉瘤、膀胱癌、結(jié)直腸癌、前列腺癌和淋巴造血系統(tǒng)腫瘤等，尤其在乳腺癌、結(jié)腸癌、和胰腺癌的突變更為多見(jiàn)。

從筆者的研究結(jié)果來(lái)看，健康人群、胃炎患者和胃癌患者P53陽(yáng)性率逐漸增高，且組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。杜舟等[5]、范惠珍等[6]的研究顯示，P53基因突變存在于各期胃癌，但較多地發(fā)生在晚期胃癌及轉(zhuǎn)移患者，而且可發(fā)生于癌變前的不同階段，在不完全性腸化生和異型增生階段也顯示出較高的檢出率。本次研究中P53陽(yáng)性率高分化癌率高于低分化癌，萎縮性胃炎高于淺表性胃炎，與上述學(xué)者的結(jié)論基本相符，提示P53陽(yáng)性率隨病情進(jìn)展而逐漸增高。筆者認(rèn)為，對(duì)胃病患者進(jìn)行P53早期檢測(cè)，對(duì)于監(jiān)測(cè)病情和改善預(yù)后具有重要意義，值得臨床考慮。

[1]陳志新，張波.胃癌綜合治療現(xiàn)狀及展望[J].中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志，2008，15（1）：71-73.

[2]楊晶，劉麗娜，呂申.TCF-B1、PTEN、p53在胃癌組織中的表達(dá)及意義[J].中國(guó)自然醫(yī)學(xué)雜志，2009，11（3）：199-201.

[3]陳藝丹，楊玉珍，宋娟.Cyclin GI、Mdm2和P53在胃癌組織中的表達(dá)及相關(guān)性研究[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2007，16（2）：127-129.

[4]王宏波，紀(jì)常生，張軍.p53和c-erbB-2與胃癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J].中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志，2010，17（8）：880-883.

[5]杜舟，黃萍，程駿，等.P53和Rb與胃癌組織學(xué)分型的關(guān)系[J].溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，40（6）：542-544.

[6]范惠珍，盛建文，鐘谷平.Hp感染及p53蛋白表達(dá)與江西宜春地區(qū)胃炎、胃癌的相關(guān)性[J].山東醫(yī)藥，2010，50（25）：45-46.