人畜共患寄生蟲(chóng)病的研究進(jìn)展

張 漫 李志榮 王 輝

（1天津市獸藥飼料監(jiān)察所，天津市 300402；2天津市畜牧獸醫(yī)局，天津市 300384）

人畜共患寄生蟲(chóng)病的研究進(jìn)展

張 漫1李志榮2王 輝1

（1天津市獸藥飼料監(jiān)察所，天津市 300402；2天津市畜牧獸醫(yī)局，天津市 300384）

人畜共患寄生蟲(chóng)病是危害極大的疾病，其危害主要包括三方面：一是人類(lèi)健康的大敵；二是嚴(yán)重危害公共衛(wèi)生安全；三是給畜牧業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。為此對(duì)人畜共患寄生蟲(chóng)病的研究具有十分重要的意義。本文僅以血吸蟲(chóng)病、弓形蟲(chóng)病、豬帶絳蟲(chóng)病、瘧疾及旋毛蟲(chóng)病等5種重要的人畜共患寄生蟲(chóng)病為例，論述人類(lèi)對(duì)人畜共患寄生蟲(chóng)病的研究進(jìn)展。

人畜共患寄生蟲(chóng)病；血吸蟲(chóng)??；弓形蟲(chóng)?。回i帶絳蟲(chóng)??；瘧疾；旋毛蟲(chóng)病

人畜共患寄生蟲(chóng)病是指由人畜共患寄生蟲(chóng)引起的寄生蟲(chóng)病。包括原蟲(chóng)病、蠕蟲(chóng)?。ň€(xiàn)蟲(chóng)病、吸蟲(chóng)病、絳蟲(chóng)病和棘頭蟲(chóng)病）、蜘蛛昆蟲(chóng)病三種，其中對(duì)人類(lèi)危害比較大、通常意義上被認(rèn)為比較重要的人畜共患寄生蟲(chóng)病有日本血吸蟲(chóng)病、豬囊蟲(chóng)病、棘球蚴病、旋毛蟲(chóng)病、弓形蟲(chóng)病、隱孢子蟲(chóng)病和肉孢子蟲(chóng)病等。

寄生蟲(chóng)是危害人畜健康的3大主要病原生物 （病毒、細(xì)菌和寄生蟲(chóng)）之一。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，在眾多的人畜共患傳染病中，67%的病原是寄生蟲(chóng)。我國(guó)自建國(guó)以來(lái)雖然在寄生蟲(chóng)病防制方面做了大量工作，但仍是世界上寄生蟲(chóng)病流行非常嚴(yán)重的國(guó)家之一。其中的人畜共患寄生蟲(chóng)病危害極大，它是人類(lèi)健康的大敵，嚴(yán)重危害公共衛(wèi)生安全，給畜牧業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失，為此人類(lèi)對(duì)人畜共患寄生蟲(chóng)病的研究從來(lái)沒(méi)有停止過(guò)。下面僅以血吸蟲(chóng)病、弓形蟲(chóng)病、豬帶絳蟲(chóng)病、瘧疾及旋毛蟲(chóng)病等5種重要的人畜共患寄生蟲(chóng)病為例，論述人類(lèi)對(duì)人畜共患寄生蟲(chóng)病的研究進(jìn)展。

1 血吸蟲(chóng)病

血吸蟲(chóng)病在我國(guó)流行范圍達(dá)200萬(wàn)平方公里，感染人群1100多萬(wàn)，受威脅人群1億多。主要流行于湖北、湖南、江西、安徽、浙江、江蘇、云南、福建、廣東、四川、廣西和上海等12個(gè)?。ㄊ校┲械?13個(gè)市縣。

隨著基因測(cè)序技術(shù)在人畜共患寄生蟲(chóng)病研究中的應(yīng)用，依據(jù)對(duì)血吸蟲(chóng)線(xiàn)粒體NADH脫氫酶和細(xì)胞色素氧化酶的基因測(cè)序，將我國(guó)血吸蟲(chóng)分離株分為山地型（云南、 四川等地）、 湖泊型（湖南、江西等地）和其他型（湖北等地）。近年的研究顯示，30%～40%的血吸蟲(chóng)基因在進(jìn)化上呈保守性，1/3的基因可能僅為血吸蟲(chóng)所特有。血吸蟲(chóng)還含有與宿主體內(nèi)高度同源的激素受體，如性激素受體、胰島素受體、神經(jīng)肽受體及細(xì)胞因子受體等，存在著利用宿主體內(nèi)激素等物質(zhì)促進(jìn)自身生長(zhǎng)發(fā)育。

1.1 血吸蟲(chóng)病的診斷

血吸蟲(chóng)病診斷方面已取得一定研究成果，目前血吸蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)室診斷常用ELISA、PCR擴(kuò)增技術(shù)及銀增強(qiáng)膠體金免疫分析技術(shù)等檢測(cè)。其中全血ELISA診斷血吸蟲(chóng)病，具有快速、簡(jiǎn)單、價(jià)廉的特點(diǎn)，主要用于流行病學(xué)調(diào)查和臨床的快速診斷；PCR擴(kuò)增技術(shù)用血吸蟲(chóng)線(xiàn)粒體DNA為標(biāo)志物，檢測(cè)血吸蟲(chóng)感染；銀增強(qiáng)膠體金免疫分析技術(shù)是將銀染與膠體金免疫分析技術(shù)相結(jié)合。以上幾種診斷技術(shù)的應(yīng)用可滿(mǎn)足臨床需求。

1.2 血吸蟲(chóng)病的防治

血吸蟲(chóng)病防制方面的大量研究顯示，將從檳榔中提取的生物堿與氯硝柳胺等化學(xué)滅螺藥一起使用，能起到降低化學(xué)滅螺藥使用劑量的目的，從而減輕滅螺藥對(duì)魚(yú)苗的傷害，并能抑制釘螺上爬，滅螺效果也不錯(cuò)。

為阻斷血吸蟲(chóng)病的傳播與流行，有效避免滅螺藥對(duì)環(huán)境造成的不良影響，人們?cè)谘x(chóng)病疫苗研究方面做了大量工作，主要經(jīng)歷了全蟲(chóng)疫苗到分子疫苗的發(fā)展過(guò)程，其中全蟲(chóng)疫苗主要包括死疫苗、活疫苗、同種致弱活疫苗和異種活疫苗，分子疫苗主要包括基因工程亞單位疫苗、合成肽疫苗和核酸疫苗。隨著生物高新技術(shù)的發(fā)展，血吸蟲(chóng)疫苗候選抗原分子或抗原基因不斷被發(fā)現(xiàn)和鑒定，分子疫苗已成為主要研究方向。合成肽疫苗方面的研究成果顯示，根據(jù)谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶基因（Sm28GST）序列，已合成了（P26）4-MAP 和（P116）4-MAP兩種多肽， 免疫后能顯著降低蟲(chóng)體負(fù)荷和蟲(chóng)卵數(shù)。核酸疫苗方面的研究成果顯示，免疫刺激序列（CpG）、IL-12與膜蛋白Sj23基因構(gòu)建的核酸疫苗，增強(qiáng)免疫效果明顯。其他分子疫苗方面的研究成果包括：用表達(dá)曼氏血吸蟲(chóng)抗原Sm14的減毒沙門(mén)氏菌口服免疫小鼠，可使特異性IgG水平升高；已研究出抗血吸蟲(chóng)雌蟲(chóng)產(chǎn)卵、抗蟲(chóng)卵發(fā)育的分子疫苗，應(yīng)用結(jié)果顯示，可顯著降低宿主糞便中的成熟蟲(chóng)卵的數(shù)量，有效切斷傳播途徑。

2 弓形蟲(chóng)病

弓形蟲(chóng)病是由剛地弓形蟲(chóng)引起的一種人畜共患寄生蟲(chóng)病。弓形蟲(chóng)的卵囊、包囊或假包囊被貓科動(dòng)物吞食后發(fā)育成卵囊，隨糞便排出后感染中間宿主。臨床上表現(xiàn)為呼吸困難、發(fā)熱、貧血、流產(chǎn)，胎兒畸形等癥狀。

弓形蟲(chóng)病在我國(guó)各省（區(qū)、市）均有感染報(bào)導(dǎo)，20世紀(jì)末在我國(guó)弓形蟲(chóng)感染人群達(dá)5%～10%，到2000年全國(guó)有6000萬(wàn)人感染弓形蟲(chóng)病，其中新生兒童中每1萬(wàn)名中就有13名先天感染者。

大量文獻(xiàn)均顯示，IFN-γ是宿主抗弓形蟲(chóng)的重要細(xì)胞因子，可從多種途徑參與對(duì)抗弓形蟲(chóng)感染。弓形蟲(chóng)通過(guò)蟲(chóng)體表面的黏附素MIC2與細(xì)胞內(nèi)的黏附分子1（ICAM-1）相互作用，由細(xì)胞旁路穿過(guò)宿主的生物屏障，不改變宿主細(xì)胞生物屏障的完整性?；畹南x(chóng)體能誘導(dǎo)STAT3磷酸化和抑制LPS激發(fā)的TNF和IL-12的產(chǎn)生，而死亡的細(xì)胞則可以限制細(xì)胞內(nèi)蟲(chóng)體的復(fù)制和調(diào)整宿主免疫應(yīng)答。

2.1 弓形蟲(chóng)病的診斷

目前弓形蟲(chóng)病診斷方法主要包括血清學(xué)診斷方法和PCR診斷方法。

2.1.1 血清學(xué)診斷方法

血清學(xué)診斷方法包括以下內(nèi)容：弓形蟲(chóng)特異IgG和IgM化學(xué)發(fā)光免疫診斷技術(shù)、免疫磁性分離技術(shù)、檢測(cè)IgG和IgM抗體的血吸蟲(chóng)病快速診斷試紙條（DDIA） 技術(shù)。

弓形蟲(chóng)特異IgG和IgM化學(xué)發(fā)光免疫診斷技術(shù)：該技術(shù)是以化學(xué)發(fā)光和結(jié)合到磁性微粒上的抗原為基礎(chǔ)，能快速準(zhǔn)確檢測(cè)弓形蟲(chóng)的特異抗體。

免疫磁性分離技術(shù)，它是用針對(duì)卵囊壁的單克隆抗體（3G4和 4B6）建立起的診斷技術(shù)，該技術(shù)能有效回收弓形蟲(chóng)卵囊，可用于水生樣品的弓形蟲(chóng)檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)弓形蟲(chóng)循環(huán)抗原具有早期診斷價(jià)值。

檢測(cè)IgG和IgM抗體的DDIA技術(shù)：該技術(shù)是使用一種膠體染料D-1標(biāo)記羊抗人IgG和兔抗人IgM作為可肉眼觀察的試劑，用弓形蟲(chóng)速殖子可溶性抗原作為檢測(cè)抗原，染料標(biāo)記的抗人抗體通過(guò)免疫層析被俘獲到硝酸纖維素膜上，該方法僅需15分鐘即可完成，使用該方法簡(jiǎn)單、廉價(jià)，不需任何儀器，尤其適于野外應(yīng)用。

2.1.2 PCR 診斷方法

當(dāng)臨床癥狀不明顯或血清學(xué)診斷失敗時(shí)，PCR方法優(yōu)勢(shì)明顯，它能有效避免血清學(xué)診斷造成的漏診或誤診，高敏感度的實(shí)時(shí)定量PCR診斷技術(shù)能定量檢測(cè)血清單核細(xì)胞中的弓形蟲(chóng)B1基因和慢殖子特異性基因（SAG-1，MAG-1）。

2.2 弓形蟲(chóng)病的防治

2.2.1 弓形蟲(chóng)病的預(yù)防

在弓形蟲(chóng)病預(yù)防方面，重點(diǎn)是搞好環(huán)境衛(wèi)生，加強(qiáng)人畜糞便管理，防止水源及食物污染，對(duì)于特殊人群應(yīng)避免接觸貓、狗等動(dòng)物，并定期采血進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)。

疫苗預(yù)防方面，人們研制出了弓形蟲(chóng)疫苗。其中英特威公司研制的弓形蟲(chóng)DNA疫苗，通過(guò)滴鼻方式免疫，可達(dá)到預(yù)防綿羊弓形蟲(chóng)病的效果。有關(guān)弓形蟲(chóng)核酸疫苗的研究還在進(jìn)行當(dāng)中，還有報(bào)道稱(chēng)，用粗制弓形蟲(chóng)棒狀體蛋白結(jié)合免疫刺激復(fù)合物作為疫苗免疫豬，可部分保護(hù)豬形成組織包囊；用減毒的沙門(mén)氏菌載體表達(dá)霍亂毒素亞基A2B上的SAG1和SAG2，作為弓形蟲(chóng)疫苗，口服能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生對(duì)抗弓形蟲(chóng)感染的保護(hù)反應(yīng)。

2.2.2 弓形蟲(chóng)病的治療

在弓形蟲(chóng)病治療方面，目前有效的藥物包括：乙胺嘧啶、磺胺嘧啶或磺胺二甲基嘧啶、螺旋霉素、氯林可霉素等。

3 豬帶絳蟲(chóng)病

豬帶絳蟲(chóng)病是一種在世界范圍內(nèi)廣泛分布的人畜共患寄生蟲(chóng)病，其中主要流行于亞、非、拉美等洲的一些國(guó)家和地區(qū)。

豬帶絳蟲(chóng)成蟲(chóng)寄生于人體小腸中，當(dāng)孕節(jié)隨糞便排出后，經(jīng)2～3天發(fā)育，蟲(chóng)卵的成熟率顯著提升。當(dāng)中間宿主經(jīng)口感染蟲(chóng)卵后，在肌肉等組織發(fā)育為幼蟲(chóng)即囊尾蚴。囊尾蚴及其分泌/代謝產(chǎn)物還有抑制、降低宿主免疫應(yīng)答的作用，后期幼蟲(chóng)能通過(guò)分泌某些物質(zhì)來(lái)逃避補(bǔ)體對(duì)它的破壞。

3.1 豬帶絳蟲(chóng)病的診斷

對(duì)囊尾蚴病的診斷和流行病學(xué)調(diào)查通常應(yīng)用ELISA法。試驗(yàn)證明，以硝酸纖維素薄膜（NC）代替聚苯乙烯反應(yīng)板，能顯著提高免疫診斷的靈敏性和特異性，具有快速、靈敏、特異和簡(jiǎn)便的特點(diǎn)。

我國(guó)研制開(kāi)發(fā)出的囊蟲(chóng)IgG膠體金診斷試劑盒（層析法），其敏感性和特異性均達(dá)到很高要求。快速免疫金滲濾法（dot-immuogold filtration assay， DIGFA）用于檢測(cè)患者循環(huán)抗原，具有簡(jiǎn)便、快速、無(wú)交叉反應(yīng)的特點(diǎn)。目前基于重組抗原的ELISA試劑盒和金標(biāo)試紙條正在研制中。

3.2 豬帶絳蟲(chóng)病的治療

對(duì)囊尾蚴病的治療方案通常為:對(duì)高發(fā)區(qū)的豬進(jìn)行疫苗免疫，對(duì)絳蟲(chóng)患者進(jìn)行藥物驅(qū)蟲(chóng)。傳統(tǒng)疫苗所用抗原有全囊尾蚴抗原、分泌/代謝（E/S）抗原、異源抗原以及六鉤蚴抗原，但這些抗原的來(lái)源非常有限。

隨著基因工程技術(shù)的不斷發(fā)展，誕生了羊帶絳蟲(chóng)45W基因工程重組抗原疫苗，掀開(kāi)了豬囊尾蚴病免疫預(yù)防的新篇章。試驗(yàn)證明，豬囊尾蚴DNA疫苗能有效降低蟲(chóng)體負(fù)荷、降低囊尾蚴數(shù)量。目前用于預(yù)防囊尾蚴病的基因工程重組疫苗研究已獲成功，能起到很好的免疫保護(hù)作用，同時(shí)具有跨種保護(hù)的重要特性。

今后，多抗原、多抗原表位、多基因間組合將是豬囊蟲(chóng)高效疫苗的發(fā)展方向。

4 瘧疾

瘧疾俗名 “冷熱病”、 “打擺子”，是由瘧原蟲(chóng)引起的、主要通過(guò)瘧蚊傳播的人畜共患寄生蟲(chóng)病，該病遍及世界90多個(gè)國(guó)家和地區(qū)。2002年全球約有5億多瘧疾感染者，在非洲每年超過(guò)100萬(wàn)兒童死于瘧疾，是當(dāng)?shù)貎和念^號(hào)殺手。寄生于人體的瘧原蟲(chóng)有間日瘧、三日瘧、惡性瘧和卵形瘧4種?；颊叱霈F(xiàn)間歇性發(fā)作的寒戰(zhàn)、高熱，繼而大汗等癥狀，嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命，一般人感染瘧疾的潛伏期為14天左右。在我國(guó)，2004年報(bào)告病例37000例，死亡30余例；2005年報(bào)告39000例，死亡40余例。其中惡性瘧主要分布于云南和海南等地，間日瘧主要分布于安徽、河南和湖北等淮河流域。

4.1 瘧疾的診斷

對(duì)瘧疾的診斷主要包括顯微鏡檢查法、ELISA法和PCR法。

4.1.1 顯微鏡檢查法

顯微鏡檢時(shí)，采用熒光染色顯微鏡檢查可提高瘧原蟲(chóng)的檢出率。

4.1.2 免疫診斷法

在應(yīng)用ELISA法診斷時(shí)，利用單克隆抗體作包被抗體的ELISA診斷試劑盒，不僅對(duì)惡性瘧的敏感性和特異性很高，還具有鑒別蟲(chóng)體死活、評(píng)價(jià)藥效及預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)等優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用惡性瘧原蟲(chóng)富組蛋白Ⅱ單克隆抗體制作的試紙條，具有敏感性高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，應(yīng)用前景很好。

4.1.3 PCR 法

在應(yīng)用PCR法診斷時(shí)，由于該診斷方法具有極高的檢測(cè)敏感性和特異性，特別適用于大規(guī)模流行病學(xué)研究以及用于評(píng)價(jià)藥物效果、疫苗免疫效果和混合感染程度等。對(duì)于PCR檢測(cè)濾紙的使用，能更方便快捷地實(shí)施診斷，特別適用于邊遠(yuǎn)地區(qū)的瘧疾診斷。對(duì)于能同時(shí)診斷4種瘧原蟲(chóng)感染的PCR診斷技術(shù)更拓寬了檢測(cè)范圍，該診斷技術(shù)已研發(fā)成功，并已達(dá)到一定的診斷水平。

4.2 瘧疾的防治

4.2.1 藥物治療和預(yù)防

在瘧疾的治療和預(yù)防方面，抗瘧藥是十分重要的手段。其中氯喹啉、奎寧、甲氟喹、青蒿素、蒿甲醚、新藥馬拉隆均有治療和預(yù)防瘧疾的作用，但長(zhǎng)期、大量甚至過(guò)量地使用抗瘧藥可以使瘧原蟲(chóng)產(chǎn)生耐藥性，嚴(yán)重影響防治效果。在眾多抗瘧藥中，目前還沒(méi)有一種能對(duì)瘧原蟲(chóng)各生活環(huán)節(jié)都具有殺滅作用的藥物。

目前的研究顯示，用瘧原蟲(chóng)半胱氨酸蛋白酶的特異性抑制劑可以阻止瘧原蟲(chóng)入侵宿主紅細(xì)胞，該特性為研制開(kāi)發(fā)新抗瘧藥指明了方向。

有最新研究報(bào)道應(yīng)用維生素B6的合成途徑，有望為新藥開(kāi)發(fā)提供作用靶位，實(shí)現(xiàn)應(yīng)用生化的方法治療瘧疾的目的。

4.2.2 疫苗預(yù)防

在瘧疾預(yù)防方面，最有效的辦法就是注射疫苗，目前疫苗研究已取得一定進(jìn)展，我國(guó)科學(xué)家已發(fā)現(xiàn) “傳播阻斷候選瘧疾抗原”，為瘧疾疫苗的研制和生產(chǎn)打下基礎(chǔ)。研究發(fā)現(xiàn)，干擾肝細(xì)胞產(chǎn)生一種肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的干擾因子具有使肝臟免受瘧疾侵襲的特性，因此這種干擾因子的研究也將是預(yù)防瘧疾的一個(gè)研究方向。此外，轉(zhuǎn)基因蚊子也被證明具有降低瘧疾傳播的特性，但對(duì)轉(zhuǎn)基因物種的研究需謹(jǐn)慎。

5 旋毛蟲(chóng)病

旋毛蟲(chóng)病是由旋毛蟲(chóng)寄生于哺乳動(dòng)物而引起的人畜共患寄生蟲(chóng)病，在家畜中以豬的患病率最高。本病在美國(guó)、法國(guó)、西班牙、意大利、加拿大、黎巴嫩以及我國(guó)的15個(gè)?。▍^(qū)、市）均有病例報(bào)告。至2002年，我國(guó)已暴發(fā)流行性人旋毛蟲(chóng)病500余起，發(fā)病2萬(wàn)余人，死亡200余人，主要分布于云南、廣西、河南、湖北、吉林、西藏等具有生食或半生食肉類(lèi)習(xí)慣的地區(qū)。

5.1 旋毛蟲(chóng)病的診斷

對(duì)旋毛蟲(chóng)病的診斷采用目檢和鏡檢方法比較繁瑣，ELISA和IFA法具有敏感性和特異性的優(yōu)勢(shì)。有研究表明，單抗細(xì)胞株能有效減蟲(chóng)。我國(guó)研制成功的快速診斷試紙條，具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確率高的特點(diǎn)。旋毛蟲(chóng)幼蟲(chóng)冷凍切片抗原間接熒光抗體試驗(yàn) （IFAT）法和DNA重組抗原可提高早期旋毛蟲(chóng)的檢出率。隨著對(duì)成蟲(chóng)、肌幼蟲(chóng)和新生幼蟲(chóng)表達(dá)序列標(biāo)簽（ESTs）和各階段 cDNA文庫(kù)的建立，為進(jìn)一步研究旋毛蟲(chóng)病診斷工作奠定了基礎(chǔ)。

5.2 旋毛蟲(chóng)病的防治

目前治療旋毛蟲(chóng)病無(wú)特效藥，因此預(yù)防工作意義重大。隨著研究的深入，豬旋毛蟲(chóng)病重組抗原疫苗和DNA疫苗有望研制成功。

在人類(lèi)歷史上，人畜共患寄生蟲(chóng)病始終與人類(lèi)如影同行。隨著時(shí)代發(fā)展和社會(huì)進(jìn)步，新發(fā)病不斷出現(xiàn)，舊病存在卷土重來(lái)的危險(xiǎn)，因此人類(lèi)同人畜共患寄生蟲(chóng)病的斗爭(zhēng)將長(zhǎng)久地持續(xù)下去。隨著免疫學(xué)、基因組學(xué)和分子生物學(xué)等高新技術(shù)在人畜共患寄生蟲(chóng)病研究領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用，寄生蟲(chóng)疫苗將在人畜共患寄生蟲(chóng)病防制中發(fā)揮更加重要的作用。大量研究結(jié)果表明，接種疫苗能使機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性免疫，但遺憾的是，目前研制的疫苗大多尚未達(dá)到令人滿(mǎn)意的保護(hù)效果。為此，抗原分離篩選、基因克隆重組及高效表達(dá)、提高疫苗免疫保護(hù)率等仍將是今后的研究重點(diǎn)。

R535

C

1673-4645（2012）11-0043-03

2012-08-13