灰樹花活性多糖藥理研究綜述

楊海耿傳信周學(xué)鋒

（1青島市中心醫(yī)院藥劑科，山東 青島 266042；2青島市腫瘤醫(yī)院藥劑科）

灰樹花活性多糖藥理研究綜述

楊海1耿傳信2周學(xué)鋒1

（1青島市中心醫(yī)院藥劑科，山東 青島 266042；2青島市腫瘤醫(yī)院藥劑科）

灰樹花是一種名貴的食用、藥用真菌，具有增強(qiáng)機(jī)體免疫、抗腫瘤、調(diào)血脂及保肝等多種生物活性，本文就近年來灰樹花多糖的藥理研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述。

灰樹花；多糖；藥理學(xué)研究

真菌多糖作為多糖研究領(lǐng)域中的一個重要分支，以其獨特的生物活性而引起人們越來越多的關(guān)注?；覙浠?Grifola frondosa)是亞熱帶至溫帶森林中的一種大型藥、食兼用珍稀真菌。灰樹花隸屬擔(dān)子菌亞門，層菌綱，無隔擔(dān)子菌亞綱，非褶菌目，多孔菌科，樹花菌屬，又名貝葉多孔菌、栗子蘑、蓮花菌，日本俗名舞蘑。其口味鮮美，具有獨特的芳香氣味，且營養(yǎng)豐富。

1 灰樹花活性多糖組成

灰樹花中含有豐富的生物活性物質(zhì)，其中灰樹花多糖就是最主要的一類活性成分，結(jié)構(gòu)多為帶有 β-1,6側(cè)鏈的 β-1,3-葡聚糖，還有少量α-1，4、α-1，6葡聚糖。構(gòu)型不同的葡聚糖其活性也不一樣。目前認(rèn)為，抗癌活性主要來自β-葡聚糖。通過13C-NMR分析灰樹花子實體中β-1，3-D-葡聚糖的結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)其在固體狀態(tài)下表現(xiàn)為兩種構(gòu)象，即天然型和螺旋型，在子實體中為天然型，且這兩種構(gòu)象均有抗癌活性。在熱水或堿提取過程中，糖肽鍵可能斷裂，分子量或結(jié)構(gòu)改變，因而影響其生物活性。自20世紀(jì)80年代始，國內(nèi)外學(xué)者對其進(jìn)行了大量研究，從灰樹花子實體和菌絲體中提取了幾十種活性多糖，其中包括D-組分、MD-組分、X-組分、Grifolan、MT-2和 LELFD等具有顯著生理活性的組分[1-4]。其中Nanba分別從灰樹花菌絲體及子實體中均分離到了灰樹花多糖D-組分，是一種經(jīng)熱水提取的酸不溶組分，結(jié)合有一定量的蛋白，分子量約為100萬道爾頓。其含有 β-1，6-Glc主 鏈 ， 大 量 β-1，3-Glc支 鏈 及β-1，3-Glc主鏈，β-1，6-Glc為分支的復(fù)雜 β-葡聚糖，它們長短程度不均一。MD-組分在D-組分的基礎(chǔ)上進(jìn)一步純化得到，且具有比D-組分更強(qiáng)的抗腫瘤及免疫增強(qiáng)作用[5]。

2 灰樹花活性多糖藥理作用

2.1 抗腫瘤活性

近年來灰樹花活性多糖對于惡性腫瘤的治療已經(jīng)有廣泛研究，動物實驗已經(jīng)證實灰樹花活性提取物能夠刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)，提高機(jī)體抗腫瘤能力[6-8]。動物及人體內(nèi)實驗均證實灰樹花多糖通過多種抗腫瘤機(jī)制抑制腫瘤生長[9]。1項動物實驗表明灰樹花多糖D-組分不僅能夠抑制已經(jīng)生成的腫瘤組織，而且對血運(yùn)腫瘤細(xì)胞同樣有抑制作用[10]。Nanba等[11]通過 1項人體試驗，給予 165名晚期惡性腫瘤患者單獨口服灰樹花多糖D-組分粗粉或聯(lián)合化療，實驗證實，多糖組分對肺癌、乳腺癌、肝癌有效，對胃癌、骨癌療效差。杜景衛(wèi)[12]等研究灰樹花多糖對小鼠S180肉瘤生長的抑制作用，實驗給予灰樹花多糖組150 mg/kg·d與環(huán)磷酰胺組30 mg/kg·d，比較發(fā)現(xiàn)兩者抑瘤率分別是47.92%，41.55%，多糖組荷瘤小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)明顯高于環(huán)磷酰胺組。灰樹花多糖抗腫瘤作用可能是與該多糖能促進(jìn)荷瘤小鼠大量分泌腫瘤壞死因子-α有關(guān)。劉安等[13]采用隨機(jī)分組方法，臨床研究觀察發(fā)現(xiàn)灰樹花多糖具有直接、迅速改善晚期惡性腫瘤患者臨床癥狀和體征的作用。

2.2 免疫調(diào)節(jié)

一般認(rèn)為真菌多糖調(diào)節(jié)機(jī)體免疫主要通過激活宿主免疫系統(tǒng),依靠機(jī)體自身的免疫力提高來發(fā)揮作用。李?；ǖ萚14]研究發(fā)現(xiàn)給予小鼠灰樹花多糖120和180 mg/kg劑量下，可明顯增強(qiáng)小鼠吞噬細(xì)胞的吞噬功能，增強(qiáng)體液的免疫能力，并能提高小鼠免疫器官的重量。一項研究表明灰樹花多糖能增加小鼠免疫器官脾臟的重量，增加小鼠腹腔巨噬細(xì)胞數(shù)量和吞噬功能，提高機(jī)體免疫力[15]。張立霞等[16]通過腹腔注射不同濃度的灰樹花多糖，觀察其對甲醛中毒小鼠淋巴細(xì)胞的干預(yù)作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)給予灰樹花50、100 mg/kg劑量組的小鼠使用10天后，淋巴細(xì)胞數(shù)目及凋亡率與對照組相比明顯升高，對甲醛中毒的小鼠淋巴細(xì)胞有保護(hù)作用。Spelman[17]、Yang[18]等通過動物實驗及體內(nèi)實驗均表明灰樹花子實體能夠改變免疫系統(tǒng)，提高機(jī)體免疫力。一組傾向性研究已經(jīng)證實D-組分能夠激活細(xì)胞免疫，降低 B細(xì)胞的活性[19]。在目前灰樹花多糖動物實驗研究較多，并且顯示了較好的多種生物活性，相對人體試驗數(shù)據(jù)較少。

2.3 降血糖作用

多項動物實驗表明[20-22]，口服灰樹花多糖能夠迅速降低體內(nèi)血糖。Konno等[23]通過1項人體實驗同樣證實灰樹花多糖能夠降低體內(nèi)血糖，但對降血糖的程度缺乏足夠證據(jù)。Manohar等[24]對水溶性的灰樹花提取物X-組分降血糖機(jī)制進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，X-組分能夠提高機(jī)體對胰島素的敏感性，從而起到降血糖作用。周偉等[25]研究發(fā)現(xiàn)灰樹花多糖對正常小鼠的空腹血糖和體重均無明顯影響，對四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病小鼠具有降低空腹血糖及提高糖耐量的作用，但是大劑量組（750 mg/kg）反而降糖作用不明顯。馬迅等[26]從灰樹花子實體中分離純化得到1種α-葡聚糖，并證明這種多糖可以有效降低KKAy小鼠體內(nèi)血糖含量，能夠較長期地控制小鼠血糖水平。葛健康等[27]采用水提醇沉法得到的灰樹花子實體多糖具有較好的降血糖作用。

2.4 保肝作用

在目前已研究灰樹花多糖保肝治療主要涉及到活性多糖X-組分。曹小紅等[28]研究發(fā)現(xiàn)灰樹花胞外多糖對四氯化碳致小鼠肝損傷能顯著減輕肝組織病理變化程度，對小鼠急性肝損傷具有保護(hù)作用。王玉卓等[29]研究發(fā)現(xiàn)灰樹花多糖對四氯化碳誘導(dǎo)的肝L-02細(xì)胞損傷有明顯的保護(hù)作用，其機(jī)制可能是與清除自由基、抑制肝細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的升高以及減少細(xì)胞凋亡等有關(guān)。李小定等[30]通過檢測小鼠肝勻漿丙二醛含量、肝線粒體丙二醛含量等發(fā)現(xiàn)灰樹花多糖具有明顯抑制羥基自由基作用，可明顯降低羥基自由基所致丙二醛的產(chǎn)生，抑制小鼠肝線粒體的腫脹。

2.5 其他活性研究

袁德云等[31-32]從灰樹花發(fā)酵液提取的胞內(nèi)多糖純化物在給予高血脂小鼠模型40、20、10 mg/kg時，具有較顯著的調(diào)節(jié)血脂作用。有研究報道[33]小鼠持續(xù)口服灰樹花子實體8～10周，能夠降低血壓。近年來對灰樹花降血壓的研究較少。一種新型的抗病毒蛋白已經(jīng)從D-組分中分離純化，并且證實D-組分對乙肝病毒具有抑制作用[34]。汪維云[35]通過給予小鼠不同劑量灰樹花多糖研究對射線照射的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)受輻射的小鼠在200 mg/kg·d劑量以上，可以提高小鼠平均存活時間，增加骨髓的DNA含量，具有很好的輻射保護(hù)作用。Kodama等[36]通過研究證明抗菌藥物聯(lián)合D-組分使用能夠減少抗菌藥物的用量。

2.6 毒性、安全性

灰樹花是一種食用菌，安全無毒，從其中提取純化的活性多糖毒副反應(yīng)低，安全性較高。王寶琴[37]等對灰樹花菌株 GF-932發(fā)酵菌絲體提取的葡聚糖的食用安全性、急性毒性進(jìn)行研究及評價，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該多糖為無毒物質(zhì)，對小鼠無遺傳毒性作用，對生長發(fā)育無不良影響。王寶琴[38]等另一項研究證明灰樹花β-葡聚糖對小鼠無致突變作用，對雄性小鼠的生殖細(xì)胞無毒性作用。在1項隨機(jī)試驗中，28名受試者服用灰樹花多糖無明顯的身體不適及不良反應(yīng)[39]，證明其具有較高的安全性。目前對灰樹花多糖的生物活性研究主要集中在動物實驗及體外實驗，臨床試驗?zāi)壳把芯枯^少。對于該多糖的抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)及控制血糖等證據(jù)僅作為C級臨床證據(jù)[40]應(yīng)用。

3 展望

大量的研究已經(jīng)證實灰樹花活性多糖抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)作用，并對其抗腫瘤的機(jī)制進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。但是，目前對于人體內(nèi)的研究還缺乏詳細(xì)資料，這也限制了臨床應(yīng)用。多糖類活性產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)特點一定程度上影響了構(gòu)效關(guān)系的研究。隨著灰樹花活性多糖的分離純化、藥理作用及機(jī)制的研究進(jìn)一步展開，灰樹花多糖將作為一種高效的生物活性物質(zhì)在食品醫(yī)藥領(lǐng)域中得到廣泛的應(yīng)用。

[1] Jones K.Maitake：a potent medicinal food[J].Alt Comp Ther.1998，4（6）：420-429.

[2] Mizuno T，Zhuang C.Maitake，Grifola frondosa：pharmacologicaleffects[J].FoodRevInt，1995，11（1）：135-149.

[3] Chang R.Functional properties of edible mushrooms[J]. Nutr Rev，1996，54（11 Pt 2）：S91-93.

[4] Borchers AT，Stern JS，Hackman RM，et al.Mushrooms，tumors，and immunity[J].Proc Soc Exp Biol Med，1999，221（4）：281-293.

[5] Hidhifs I，Nanba H，Kuroda H.Antitumor activity exhibited by orally administered extract from fruit body of Grifola frondosa（maitake）[J].Chem Pharm Bull，1988，36（5）：1819-1827.

[6] 李小定，榮建華，吳謀成，等.灰樹花多糖的抗腫瘤活性及對免疫功能的影響[J].中藥材，2003，26（1）：31-32.

[7] Konno S.Potential growth inhibitory effect of maitake D-fraction on canine cancer cells[J].Vet Ther，2004，5（4）：263-271.

[8] Lin H，Chueng SW，Nesin M，et al.Enhancement of umbilical cord blood cell hematopoiesis by maitake beta-glucan is mediated by granulocyte colony-stimulating factor production[J].Clin Vaccine Immunol，2007，14（1）：21-27.

[9] Wu MJ，Cheng TL，Cheng SY，et al.Immunomodulatory properties of Grifola frondosa in submerged culture[J]. Agric Food Chem，2006，54（8）：2906-2914.

[10] Matsui K，Kodama N，Nanba H.Effects of maitake（grifola frondosa）D-fraction on the carcinoma angiogenesisn[J].Cancer Lett，2001，172（2）：193-198.

[11] Kodama N，Komuta K，Nanba H.Can maitake MD-fraction aid cancer patients?[J].Altern Med Rev，2002，7（3）：236-239.

[12] 杜景衛(wèi)，夏作理，李清初，等.灰樹花多糖抗S180肉瘤的實驗研究[J].泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2005，126（12）：95-98.

[13] 劉安，臧立華，孫慶濟(jì).灰樹花多糖抗腫瘤作用的臨床觀察[J].山東輕工業(yè)學(xué)院學(xué)報，2008，22（2）:43-45.

[14] 李?；?灰樹花多糖的免疫作用實驗研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2007，25（3）：365-366.

[15] 孫震，陳石良，谷文英，等.灰樹花多糖體內(nèi)抗腫瘤作用的實驗研究[J].藥物生物技術(shù)，2001，8（5）：279-283.

[16] 張立霞，邵一葉，高永，等.灰樹花多糖對甲醛中毒小鼠淋巴細(xì)胞的干預(yù)作用[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（3）：1254-1255.

[17] Spelman K，Burns J，Nichols D，et al.Modulation of cytokine expression by traditional medicines：a review of herbal immunomodulators[J].Altern Med Rev，2006，11（1）：128-150.

[18] Yang BK，Gu YA，Jeong YT，et al.Chemical characteristics and immuno-modulating activities ofexobiopolymers produced by grifola frondosa during submerged fermentation process[J].Int J Biol Macromol，2007，41（3）：227-233.

[19] Ohno N，Egawa Y，Hashimoto T，et al.Effect of beta-glucans on the nitric oxide synthesis by peritoneal macrophage in mice[J].Biol Pharm Bull，1996，19（4）：608-612.

[20] Horio H，Ohtsuru M.Maitake（grifola frondosa）improve glucose tolerance of experimental diabetic rats[J]. Nutr Sci Vitaminol，2001，47（1）：57-63.

[21] Hong L，Xun M，Wutong W.Anti-diabetic effect of an alpha-glucan from fruit body of maitake （grifola frondosa）on KK-Ay mice[J].Pharm Pharmacol 2007，59（4）：575-582.

[22] Preuss HG，Echard B，Bagchi D，et al.Enhanced insulin-hypoglycemic activity in rats consuming a specific glycoprotein extracted from maitake mushroom[J].Mol Cell Biochem，2007，306（1-2）：105-113.

[23] Konno S，Tortorelis DG，F(xiàn)ullerton SA，et al.A possible hypoglycaemic effect of maitake mushroom on type 2 diabetic patients[J].Diabet Med，2001，18（12）：1010.

[24] Manohar V，Talpur NA，Echard BW，et al.Effects of a water-soluble extract of maitake mushroom on circulating glucose/insulin concentrations in KK mice[J].Diabetes Obes Metab，2002，4（1）：43-48.

[25] 周偉，奚清麗，石根勇.灰樹花多糖對糖尿病小鼠的降血糖作用[J].2009，20（4）：17-20.

[26] 馬迅，雷紅，李謙，等.灰樹花子實體多糖的分子組成與降血糖作用[J].藥物生物技術(shù)，2007，14（5）：328-333.

[27] 葛健康，張佰鵬，吳梧桐，等.灰樹花子實體多糖提取物對2型糖尿病小鼠的治療作用[J].西北藥學(xué)雜志，2008，23（9）：372-374.

[28] 曹小紅，朱慧，王春玲，等.灰樹花胞外多糖對四氯化碳致小鼠肝損傷的保護(hù)作用[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2010，22（5）：777-780

[29] 王玉卓，謝珊珊，孫濤，等.灰樹花多糖對四氯化碳肝L-02細(xì)胞損傷的保護(hù)作用[J].山東大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2010，48（8）：32-38.

[30] 李小定，榮建華，吳謀成.灰樹花多糖PGF-1體外對羥基自由基的抑制作用[J].食品科學(xué)，2003，24（7）：126-130

[31] 袁德云，章克昌.灰樹花發(fā)酵液及其胞內(nèi)純化物的降血酯作用[J].中國藥學(xué)雜志，2003，38（7）：507-508.

[32] Fukushima M，Ohashi T，F(xiàn)ujiwara Y，et al.Cholesterol-lowering effects of maitake （grifola frondosa）fiber，shiitake（lentinus edodes）fiber，and enoditake（flammulina velutipes）fiber in rats[J].Exp Biol Med（Maywood），2001，226（8）：758-765.

[33] Kabir Y，Kimura S，Dietary mushrooms reduce blood pressure in spontaneously hypertensive rats[J].Nutr Sci Vitaminol，1989，35（1）：91-94.

[34] Gu CQ，Li J，Chao FH.Inhibition of hepatitis B virus by D-fraction from Grifola frondosa：synergistic effect of combination with interferon-alpha in HepG2.2.15[J]. Antivial Res，2006，72（2）：162-165.

[35] 汪維云.灰樹花多糖的抗輻射作用研究[J].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2003，30（2）：210-212.

[36] Kodama N，Yamada M，Nanba H.Addition of maitake D-fraction reduces the effective dosage of vancomycin for the treatment of listeria-infected mice[J].Jpn J Pharmacol，2001，87（4）：327-332.

[37] 王寶琴，徐澤平，楊傳倫.灰樹花菌絲體β-葡聚糖的毒理學(xué)實驗[J].食品科學(xué)，2010，31（17）：368-372.

[38] 王寶琴，張彬彬，徐澤平，等.灰樹花β-葡聚糖的遺傳毒性試驗[J].毒理學(xué)雜志，2008，22（5）：407-408.

[39] Glauco S，Jano F，Paolo G，et al.Safety of maitake D-fraction in healthy patients：assessment of common hematologic parameters[J].Altern Compl Ther，2004，10（4）：228-230.

[40] Ulbricht C，Weissner W，et al.Maitake mushroom（Grifola frondosa）：systematic review by the natural standard reseach collaboration[J].J Soc Integr Oncol，2009，7（2）：66-72.

Review on the Pharmacological Study of Active Polysaccharide of Grifola Frondosa

Yang Hai1，Geng Chuanxin2，Zhou Xuefeng1(1 Pharmacy Deptartment of Qingdao Central Hospital,Shandong Qingdao 266042,China；2 Pharmacy Deptartment of Qingdao Tumor Hospital)

Grifola frondosa,regarded as a rare edible and medicinal fungus,has various biological activities including anticancer effects,enhancing immunity of human body,adjusting blood lipid and antihypertension.The polysaccharide purified from Grifola frondosa was the main effective component.In this paper,the recent pharmacological study on the active polysaccharide of Grifola frondosa was reviewed.

Grifola Frondosa；Polysaccharide；Pharmacological Study

10.3969/j.issn.1672-5433.2012.03.008

2011-11-28）

楊海，男，碩士。研究方向：藥物制劑研究。E-mail：qdzx08@163.com