• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    藥用植物人參的組織培養(yǎng)研究進展

    2012-01-23 16:11:59左北梅高文遠董艷艷劉輝王娟
    中國現(xiàn)代中藥 2012年1期
    關(guān)鍵詞:毛狀不定根皂苷

    左北梅,高文遠,董艷艷,劉輝,王娟

    (1.天津科技大學(xué),天津 300457;2.天津大學(xué) 藥物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,天津 300072;3.天津中醫(yī)藥大學(xué),天津 300193)

    藥用植物人參的組織培養(yǎng)研究進展

    左北梅1,高文遠2*,董艷艷3,劉輝1,王娟2

    (1.天津科技大學(xué),天津 300457;2.天津大學(xué) 藥物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,天津 300072;3.天津中醫(yī)藥大學(xué),天津 300193)

    從人參愈傷組織培養(yǎng)、人參細胞懸浮培養(yǎng)、人參體細胞胚胎培養(yǎng)、人參毛狀根培養(yǎng)、人參不定根培養(yǎng)等方面,綜述了人參組織培養(yǎng)的研究進展,為人參資源的研究提供參考。

    人參;愈傷組織;懸浮細胞;體細胞胚胎;毛狀根;不定根

    人參PanaxginsengC.A.Meyer為五加科人參屬珍貴藥用植物,其根可入藥,被譽為藥中之王。含有多種人參皂苷、人參多糖等多種物質(zhì),可增強機體對各種應(yīng)激刺激的非特異抵抗力,具有抗衰老、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、保肝護肝、抗腫瘤等多種醫(yī)療保健功效[1]。由于人參重要的藥用價值,也成為組織培養(yǎng)的熱點研究植物,本文綜述了人參組織培養(yǎng)的主要研究成果,為人參資源的研究提供參考。

    1 人參愈傷組織培養(yǎng)的研究

    可用于誘導(dǎo)人參愈傷組織采用的外植體主要是人參的根、莖、葉片、葉柄、花藥、花絲、子房、果肉、原生質(zhì)體等,以根和莖作為外植體最為常見。早在1964年,中國科學(xué)院植物生理研究所羅士韋教授首先采用人參根為外植體,培養(yǎng)于改良的Heller培養(yǎng)基中形成了愈傷組織,繼代培養(yǎng)移植4次取得成功[2]。1968年,Butenko等成功從人參葉柄、葉片、花冠柄和根的外植體上誘導(dǎo)出愈傷組織。隨后,美國、日本、印度、朝鮮等國家相繼開展了人參組織培養(yǎng)的研究,促使人參愈傷組織培養(yǎng)的研究在全球開展起來。

    朱蔚華教授等[3]報道不同培養(yǎng)基上人參愈傷組織誘導(dǎo)頻率和生長速度的不同。人參愈傷組織適宜的培養(yǎng)基為附加10 %的Whise、MS、修改FOX,其中以修改FOX培養(yǎng)墓愈傷組織誘導(dǎo)率最高,愈傷組織生長速度以SH培養(yǎng)基最快。而人參愈傷組織誘導(dǎo)和培養(yǎng)用得最多的培養(yǎng)基是MS基本培養(yǎng)基,采用MS、N6、B5、Bla·es、I、FOX和修改MS等培養(yǎng)基均能獲得愈傷組織。

    大量研究集中在植物生長調(diào)節(jié)劑對人參愈傷組織培養(yǎng)各階段調(diào)節(jié)作用。古谷力[4]研究證實,2,4-D的最適濃度為0.5~2 mg·L-1對人參愈傷組織的誘導(dǎo)具有良好的效果。朱蔚華等[5]指出:適當濃度的2,4-D對人參愈傷組織生長有顯著的效果,最適濃度為5 mg·L-1。6-BA對人參愈傷組織的生長也有一定的促進作用,以0.1 mg·L-1生長最快。郭生禎等[6]進一步比較了不同種類激素的濃度對人參愈傷組織誘導(dǎo)的影響。確定了誘導(dǎo)愈傷組織使用的激素,2,4-D起了主導(dǎo)作用,最適濃度為0.5~2 mg·L-1,如過低或過高,誘導(dǎo)頻率呈下降趨勢;NAA對誘導(dǎo)愈傷組織也有一定的作用,以2~6 mg·L-1較適宜,低于此濃度愈傷組織則很少發(fā)生;其他激素如IAA、6-BA、CA等配合使用,也能獲得較好的效果,但作用不顯著。

    另外,田鵬瑋等[7]對草酸促進人參愈傷組織細胞生長和人參多糖與皂苷積累進行了研究,指出光照和培養(yǎng)溫度對草酸的誘導(dǎo)效果有很大影響,其中在12 h·d-1的光照下,0.01~1 mmol·L- 1的草酸對細胞生長和皂苷積累都有促進作用,然而,10 mmol·L- 1的草酸對多糖積累有促進作用;在4個溫度(22,24,26,28 ℃)水平下,隨著培養(yǎng)溫度的升高,添加草酸對細胞生長的抑制作用增強,但有利于多糖和皂苷的積累。張磊等[8]研究了NO供體硝普鈉(SNP)在光照脅迫下對人參愈傷組織細胞生長及次生代謝積累的影響,利用人參愈傷組織培養(yǎng)體系,給予光照5 000 lx,每天8 h光照,通過在不同時間向培養(yǎng)基中添加不同濃度的SNP溶液,結(jié)果表明強光對人參愈傷組織的危害程度降低,酶活性及次生代產(chǎn)物的積累明顯增加。

    此外,人胰島素已在人參愈傷組織細胞中成功表達。汪春義等[9]將已構(gòu)建成的植物表達載體PB1 121/( CTB BA )轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌LBA4404,通過農(nóng)桿菌與人參愈傷組織的共培養(yǎng),將人胰島素基因整合到人參愈傷組織細胞中,對其表達產(chǎn)物進行檢測,并用小鼠進行降糖試驗。結(jié)果表明,Western blot檢測顯示,在相對分子質(zhì)量約17000處有特異蛋白反應(yīng)帶。ELISA法檢測人胰島素表達量為5.31 μIU·mL-1。小鼠降糖試驗表明人參愈傷組織細胞有降血糖的作用,而轉(zhuǎn)化的人參愈傷組織細胞降血糖作用更明顯,成功建立了表達人胰島素的人參愈傷組織細胞系。

    許多學(xué)者對影響愈傷組織誘導(dǎo)和生長所添加的外源激素、最適培養(yǎng)基、培養(yǎng)基的天然補充營養(yǎng)物質(zhì)、水質(zhì)等因子進行了考察。然而,人參愈傷組織生長較為緩慢,在固態(tài)培養(yǎng)基中操作起來較為復(fù)雜,培養(yǎng)物中的活性成分含量也一般大大低于天然植株,這些都大大限制了其在大規(guī)模生產(chǎn)中的應(yīng)用。

    2 人參細胞懸浮培養(yǎng)的研究

    植物細胞懸浮培養(yǎng)的研究是植物組織培養(yǎng)走向工業(yè)化生產(chǎn)的重要步驟。與植物愈傷組織的固體靜止培養(yǎng)相比,植物細胞液體懸浮培養(yǎng)的優(yōu)點主要是細胞增殖速度快、能提供大量均勻一致的培養(yǎng)物以及能進行大規(guī)模培養(yǎng)。早在20世紀80年代日本就已經(jīng)實現(xiàn)了人參細胞的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。

    人參細胞懸浮培養(yǎng)的研究主要包括以下幾方面:優(yōu)良細胞株的篩選、影響細胞生長及活性成分含量因素的探討、誘導(dǎo)子的應(yīng)用、活性成分的分離和化學(xué)分析、細胞培養(yǎng)物的藥理藥效學(xué)研究、生物反應(yīng)器的研發(fā)以及發(fā)酵成本的降低等。對藥用植物懸浮細胞培養(yǎng)來說,選擇適宜培養(yǎng)基是植物細胞培養(yǎng)的首要條件,通過培養(yǎng)基中養(yǎng)分的調(diào)節(jié)可改變植物細胞生長及物質(zhì)合成能力。在細胞培養(yǎng)過程中,除了物種本身特性外,還有環(huán)境中的許多物理因素,如光照、溫度、pH值、電磁場等和化學(xué)因素,如培養(yǎng)基中碳氮磷源組成、溶氧、激素以及一些微量的金屬離子等,對細胞生長和次生代謝產(chǎn)物的合成具有很大的影響。

    高日等[10]通過研究人參細胞懸浮培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基蔗糖濃度、MS濃度、氮濃度及硝態(tài)氮與銨態(tài)氮比例對細胞生長及皂苷合成的影響,發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基中添加30 g·L-1蔗糖時,人參細胞合成皂苷能力最強,蔗糖濃度過低(10 g·L-1)或過高(70 g·L-1)均不利于細胞干重增加及皂苷積累。MS培養(yǎng)基濃度減半(0.5MS)或維持原濃度(1.0 MS),總氮濃度為30 mm時,有利于人參細胞皂苷的合成。MS培養(yǎng)基中硝態(tài)氮促進皂苷合成,單獨使用硝態(tài)氮(NO3+/NH4+30∶0)比與銨態(tài)氮混用或單獨使用銨態(tài)氮(NO3+/NH4+為0∶30)更有利于皂苷的合成,皂苷生產(chǎn)量達到最高(158.9 mg·L-1)。有的學(xué)者對人參細胞懸浮培養(yǎng)中的激素調(diào)節(jié)及細胞分裂進行了相關(guān)研究,指出在人參細胞懸浮培養(yǎng)中,單獨使用植物生長調(diào)節(jié)劑時2 mg·L-12,4-D和2 mg·L-1NAA的效果較好。在不同激素組合的試驗中,以2 mg·L-12,4-D+2 mg·L-1NAA+0.5 mg·L-1KT的效果最好[11]。

    1990年,丁家宜等人首次研究了人參培養(yǎng)細胞的多糖類有效成分。袁靜芳等[12]在人參細胞培養(yǎng)物中水溶性多糖的研究中,經(jīng)醋酸纖維素薄膜電泳和瓊脂糖凝膠電泳,證明DPSCG1和DPSCG2均為一性多糖,兩者經(jīng)水解和薄層層析結(jié)果均由L-鼠李糖、D-木糖、D-阿拉伯糖、D-半乳糖和D-半乳糖醛酸等組成,但兩種多糖各有一個Rr值相同的未鑒定組成成分,有待進一步研究。

    胡卓逸等[13]測定了不同培養(yǎng)期的人參細胞培養(yǎng)物(CMGC)中超氧化歧化酶(SOD)的活力,實驗結(jié)果表明,不同培養(yǎng)期CMGC中SOD的活力不同,培養(yǎng)21 d的樣品中單位鮮重酶活力單位和蛋白質(zhì)含量均為最高。這些學(xué)者還測定了不同生長期的人參細胞培養(yǎng)物中過氧化氫酶的活力,結(jié)果表明此酶活力隨人參細胞的培養(yǎng)時間而異,酶的單位鮮重活力從10 d到21 d內(nèi)較快升高,在抽樣測定中以21 d時為最高,約為188 μ·mg-1人參細胞培養(yǎng)物[14]。

    人參細胞懸浮培養(yǎng)較固體培養(yǎng)周期短、生長速度快、皂苷含量比固體培養(yǎng)高都己得到了證實,這些特點也決定了其在工廠化生產(chǎn)上的潛力要大于固體培養(yǎng)。適合植物細胞培養(yǎng)的生物反應(yīng)器的研發(fā)是實現(xiàn)植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)的前提。目前應(yīng)用于人參細胞培養(yǎng)生產(chǎn)人參皂苷的生物反應(yīng)器主要有機械攪拌式生物反應(yīng)器、氣升式生物反應(yīng)器、固體床生物反應(yīng)器以及流化床生物反應(yīng)器等[15]。為了更有利于人參細胞的培養(yǎng),人們對現(xiàn)有反應(yīng)器的攪拌形式、葉輪結(jié)構(gòu)以及空氣分布器進行了改進,力求在滿足供氧、混合的要求的同時減小剪切力。

    3 人參體細胞胚胎的研究

    體細胞胚胎發(fā)生是單細胞或一群細胞被誘導(dǎo)不斷再生非合子胚,并萌發(fā)形成完整植株的發(fā)育過程。在自然條件下,這個發(fā)育過程一般不可能發(fā)生,但通過組織培養(yǎng),體細胞胚胎發(fā)育非常頻繁,成為除器官發(fā)生以外再生完整植株的又一條途徑。體細胞胚胎發(fā)生技術(shù)不僅是植物快繁的重要體細胞胚胎發(fā)生技術(shù),而且也已發(fā)展成為研究植物胚胎發(fā)生機理遺傳轉(zhuǎn)化的重要方法,它在研究植物形態(tài)建成的分子和細胞機制等基礎(chǔ)研究方面還是一個重要工具,在藥用植物上的應(yīng)用日益受到重視。

    Monteiro M[16]在2001年的研究表明亞精氨在人參體細胞胚胎發(fā)生的起始階段起到了特殊作用;Choi Y E等[17]的研究表明,在高濃度NH4NO3存在的條件下,可以通過從人參胎盤母面絨毛小葉誘導(dǎo)而來的人參愈傷組織來誘導(dǎo)形成非激素依賴型體細胞胚胎;Langhsová L等[18]的研究表明聚乙二酸和脫落酸能夠促進人參體細胞胚胎的成熟和再生;Kim O T等[19]則對人參體細胞胚的培養(yǎng)條件進行了優(yōu)化。人參體細胞胚胎的研究為人參再生植株的形成以及人參快速繁殖體系的建立提供了基礎(chǔ)。我國學(xué)者比較了不同外植體、植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)種類及配比對人參體細胞胚發(fā)生的影響,建立人參胚狀體培養(yǎng)方法并獲得再生植株[20-22]。

    4 人參毛狀根培養(yǎng)的研究

    Inomata等[23]報道人參的毛狀根培養(yǎng)沒有一點延遲期,在培養(yǎng)的前兩周生長很快,因此通過每七天更換一次培養(yǎng)基來保持毛狀根的快速生長,培養(yǎng)32 d增長倍數(shù)達到31倍,是所有報道的人參培養(yǎng)物中增長倍數(shù)最高的,在此過程中,人參皂苷的含量呈現(xiàn)一定的變化,始終高于對照(不更換培養(yǎng)基的毛狀根),特別是第14天,總?cè)藚⒃碥?Rg組,Rb組,Ro)含量達到1.7 %~2.2 %,相當于田間栽培5年生人參根中的皂苷含量水平。進一步在葉輪片式生物反應(yīng)器(turbine-blade type bioreactor)中采用每7 d更換1次培養(yǎng)基的方法獲得了與搖瓶中類似的結(jié)果,培養(yǎng)36 d,收獲毛狀根干重15.8 g·L-1,人參皂苷的含量1.7 %,這一結(jié)果表明該毛狀根株系具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。Jeong G T等[24]研究了SA(salicylic acid)、ASA(acetylsalicylic acid)、酵母、細菌、鞣酸、硒、硫酸鎳以及氯化鈉等誘導(dǎo)子對人參毛狀根培養(yǎng)體系中人參皂苷產(chǎn)率的影響。研究表明絕大多數(shù)誘導(dǎo)子能夠促進人參皂苷的積累但同時會在一定程度上抑制人參毛狀根的生長。

    近幾年來,我國對人參毛狀根的培養(yǎng)也有了一定進展。徐立新等[25]通過向人參毛狀根培養(yǎng)基中添加2,4-D、NAA、IBA、誘導(dǎo)子MJA和SA,研究了5種外源物質(zhì)對人參毛狀根的生長量、總皂苷及單體皂苷Rb1的影響。結(jié)果表明,0.5 mg·L-1的IBA能顯著促進人參毛狀根的生長(月增長量為50.73 g·L-1)和總皂苷(質(zhì)量分數(shù)為3.31 %)的積累,單體皂苷Rb1(質(zhì)量分數(shù)為2.293 %)的含量明顯增大,使其在總皂苷中所占的比例增大。并且兩種誘導(dǎo)子對人參皂苷含量的增加有明顯的協(xié)調(diào)作用,當MJA與SA濃度均為0.001 mmol·L-1時,其對總皂苷和單體皂苷的積累比二者單獨作用要大。陳欣等[26]對人參毛狀根糖基轉(zhuǎn)移酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)進行了相關(guān)研究,人參毛狀根中提取分離了糖基轉(zhuǎn)移酶,用SDS-PAGE測定其相對分子質(zhì)量為56.6k,該酶以對羥基苯甲酸為底物時的Km= 0.399 nmol· L-1,Vmax= 2.74 nmol·min-1,反應(yīng)的最適溫度為45 ℃,最適pH值為8.0。

    5 人參不定根培養(yǎng)的研究

    不定根由于沒有外源基因,在產(chǎn)品的開發(fā)方面更有優(yōu)勢,幾年來越來越受到組織培養(yǎng)研究者的重視。人參不定根可以從體細胞胚胎進一步發(fā)育而形成的再生小植株上分離得到,也可以直接由人參愈傷組織誘導(dǎo)而來。由人參愈傷組織誘導(dǎo)不定根一般在MS培養(yǎng)基中添加適當種類和適當濃度的外源激素即可。常用來誘導(dǎo)人參不定根的激素為IBA(indole-3-butyric acid,IBA)。韓國在人參不定根培養(yǎng)的研究方面取得了重大突破,已經(jīng)達到了工業(yè)化程度。Paek等[27]在大規(guī)模培養(yǎng)人參不定根生產(chǎn)皂苷的研究中,從人參不定根的誘導(dǎo)到懸浮細胞的建立,再進一步從培養(yǎng)條件,植物生長調(diào)節(jié)劑、誘導(dǎo)子、不同接種量和通氣量等方面考察氣升式生物反應(yīng)器小規(guī)模培養(yǎng)到擴大培養(yǎng)的研究,然后中式規(guī)模生產(chǎn),最后,人參不定根反應(yīng)器培養(yǎng)的規(guī)模達到了10 t。Choi等[28]報道了利用5~500 L生物反應(yīng)器規(guī)模化培養(yǎng)人參不定根的中試研究結(jié)果。

    我國近年來也開始了人參不定根的組織培養(yǎng)研究。樸炫春等[29]報道了利用5 L氣升式生物反應(yīng)器培養(yǎng)人參不定根的生長周期,考察蔗糖濃度、接種量對人參不定根培養(yǎng)的影響,但未測定其皂苷的累積。黃滔等[30]對搖瓶培養(yǎng)人參不定根系統(tǒng)進行了優(yōu)化。由香玲等[31]對小型生物反應(yīng)器(3~10 L)培養(yǎng)人參不定根的生長和人參皂苷(Rg1、Re、Rb1)的累積規(guī)律,以及蔗糖濃度、初始接種量對其生長和人參皂苷累積的影響進行研究。

    6 展望

    人參組織培養(yǎng)在細胞培養(yǎng)和不定根培養(yǎng)方面分別在日本和韓國實現(xiàn)了產(chǎn)業(yè)化,我國作為一個資源使用和出口大國,在注重人參大田栽培的同時,也應(yīng)當在人參組織培養(yǎng)方面早日實現(xiàn)工業(yè)化,我們不能長久地靠砍伐山林來為世界提供廉價的人參資源,而應(yīng)當在新技術(shù)的應(yīng)用方面走在全國的前列。

    [1] 黎陽,張鐵軍,劉素香,等.人參化學(xué)成分和藥理研究進展[J].中草藥,2009,40(1):164-附 2.

    [2] 羅士韋,黃文徽,曹國儀,等.人參組織培養(yǎng)[J].植物生理學(xué)通訊,1964,(2):26.

    [3] 朱蔚華,張萌麟,李新蘭,等.人參組織培養(yǎng)的研究Ⅰ.愈傷組織的誘導(dǎo)和初步培養(yǎng)[J].中草藥通訊,1978,(4):39.

    [4] 古谷力.出國考察報告—日本生物學(xué)發(fā)展概況[M].北京:科學(xué)文獻出版社,1974.

    [5] 朱蔚華,張萌麟,李新蘭,等.人參愈傷組織培養(yǎng)的初步研究[J].藥學(xué)學(xué)報,1979,14(9):541.

    [6] 郭生禎,李惠芝,潘景麗,等.人參愈傷組織的誘導(dǎo)[J].西北植物研究,1952,(2):116-124.

    [7] 田鵬瑋,劉同祥,楊芳,等.草酸促進人參愈傷組織細胞生長和人參多糖與皂苷積累的研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2009,20(9):2197-2198.

    [8] 張磊,楊世海.外源 NO對人參愈傷組織次生代謝產(chǎn)物的影響[J].人參研究,2010,(1):5-9.

    [9] 汪春義,戚鳳春,陳桂玲,等.表達人胰島素的人參愈傷組織細胞系的建立[J].中國生物制品學(xué)雜志,2007,20,(11):818-820.

    [10] 高日,樸炫春,于曉坤,等.人參細胞懸浮培養(yǎng)中蔗糖和無機鹽對皂苷生產(chǎn)的影響[J].延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)學(xué)報,2011,33(2):90-92.

    [11] 唐巍,吳絳云.人參細胞懸浮培養(yǎng)中的激素調(diào)節(jié)及細胞分裂的研究[J].生物技術(shù),1992,2(1):32-36.

    [12] 袁靜芳,朱瑾.人參細胞培養(yǎng)物中水溶性多糖的研究[J].江蘇藥學(xué)與臨床研究,2000,8(4):33-34.

    [13] 胡卓逸,史建勛.人參細胞培養(yǎng)物中超氧化物歧化酶的活力測定[J].中國藥科大學(xué)學(xué)報,1996,27(11):687-689.

    [14] 胡卓逸,史建勛,丁家宜,等.人參細胞培養(yǎng)物中過氧化氫酶活力的測定[J].中草藥,1997,28(6):335-337.

    [15] Sivakumar G,Yu K W,Paek K Y,et al.Production of biomass and ginsenosides from adventitious roots ofPanaxginsengin bioreactor cultures[J].Engneering in Life Sciences,2005,5 (4):333-342.

    [16] Monteiro M,Kevers C,Dommes J,et al.A special role for spermidine in the initiation phase of somatic embryogenesis inPanaxginsengC.A.Meyer[J].Plant Cell,Tissue and Organ Culture,2002,68: 225-232.

    [17] Choi Y E,Jeong J H,Shin C K.Hormone-independent embryogenic callus production from ginseng cotyledons using high concentrations of NH4NO3and progress towards bioreactor production[J].Plant Cell,Tissue and Organ Culture, 2003,72:229-235.

    [18] Langhsová L,Msr?ík P,Vaněk T.Production of saponins fromPanaxginsengsuspension and adventitious root cultures[J].Biologia plantrum,2005,49(3):463-465.

    [19] Kim O T,Kim T S,In D S,et al.Optimization of direct somatic embryogenesis from mature zygotic embryos ofPanaxginsengC.A.Meyer[J].Journal of Plant Biology,2006,49 (5):348-352.

    [20] 王義,趙文君,楊忠,等.人參體細胞胚胎發(fā)生及植株再生研究[J].藥用生物技術(shù),2008,15(4) :278-281.

    [21] 王義,趙文君,孫春玉,等.2,4 - D、B A對人參體細胞胚胎發(fā)生過程的影響研究[J].中國生物工程雜志,2008,28(10):106-112.

    [22] 王義,趙文君,孫春玉,等.人參體細胞胚胎發(fā)生過程中內(nèi)源激素變化和基因表達研究[J].中草藥,2008,39(7):1085-1089.

    [23] Inomata S,Yokoyama M,Gozu Y,et al.Growth pattern and ginsenoside production ofAgrobacterium-transformedPanaxginsengroots[J].Plant Cell Reports,1993,12 (12): 681-686.

    [24] Jeong G T,Paek D H, Ryu H W,et al.Production of antioxidant compounds by culture ofPanaxginsengC.A.Meyer hairy roots[M]//Brian HD,Barbara RE,Mark F,et al,Twenty-sixth symposium on biotechnology for fuels and chemicals, Totowa:humana press, 2005:1147-1157.

    [25] 徐立新,趙壽經(jīng),梁彥龍,等.外源調(diào)節(jié)物質(zhì)對人參毛狀根生長及皂苷合成的影響[J].吉林大學(xué)學(xué)報(工學(xué)版),2010,40(6):1620-1623.

    [26] 陳欣,薛軼,劉吉華,等.人參毛狀根糖基轉(zhuǎn)移酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)研究[J].藥物生物技術(shù),2009,16(1):50-54.

    [27] Kee-Yoeup Paek, Hosakatte Niranjana Murthy, Eun-Joo Hahn, et al.Large Scale Culture of Ginseng Adventitious Roots for Production of Ginsenosides[J].Biochem Engin/Biotechnol,2009,113:151-176.

    [28] CHOI S E,SON S H,YUN S R,et al.Pilot-scale culture of adventitious roots of ginseng in a bioreactor system [J].Plant Cell Tissue Organ Cult,2000,62:187-193.

    [29] 樸炫春,廉美蘭,王守明,等.利用生物反應(yīng)器大量生產(chǎn)人參不定根[J].林業(yè)科技,2007,32(6):54-56.

    [30] 黃滔,高文遠,王娟,等.離體培養(yǎng)條件對人參不定根生長及其活性成分合成的影響[J].中國中藥雜志,2010,35(1):13-17.

    [31] 由香玲,譚嘯,賈洪柏,等.小型生物反應(yīng)器內(nèi)人參不定根的人參皂苷累積[J].西北植物學(xué)報,2011,31(8):1700-1705.

    *高文遠,E-mail: pharmgao@tju.edu.cn

    2011-12-06)

    猜你喜歡
    毛狀不定根皂苷
    煙草不定根發(fā)生研究進展
    作物研究(2022年1期)2022-11-27 23:34:38
    HvLBD19基因?qū)Υ篼湶欢ǜl(fā)育的調(diào)控
    生長調(diào)節(jié)劑及莖表面機械損傷對烤煙莖不定根發(fā)生影響
    HPLC-MS/MS法同時測定三七花總皂苷中2種成分
    中成藥(2018年9期)2018-10-09 07:19:04
    紫錐菊不定根懸浮共培養(yǎng)中咖啡酸衍生物積累研究
    HPLC法測定大鼠皮膚中三七皂苷R1和人參皂苷Rb1
    中成藥(2017年9期)2017-12-19 13:34:40
    HPLC法同時測定熟三七散中13種皂苷
    中成藥(2017年6期)2017-06-13 07:30:34
    金鐵鎖多倍體毛狀根的誘導(dǎo)及性質(zhì)
    6-芐氨基腺嘌呤和萘乙酸對三裂葉野葛毛狀根生長和異黃酮含量的影響
    高效液相色譜梯度洗脫法同時測定三七總皂苷中人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1和三七皂苷R1含量
    夜夜看夜夜爽夜夜摸 | 99国产精品一区二区三区| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 深夜精品福利| 麻豆av在线久日| 国产精品亚洲av一区麻豆| 欧美久久黑人一区二区| 午夜激情av网站| 久久国产乱子伦精品免费另类| 欧美日本中文国产一区发布| 波多野结衣一区麻豆| av网站在线播放免费| 色播在线永久视频| www.自偷自拍.com| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲人成电影观看| 成人三级做爰电影| av电影中文网址| 亚洲专区中文字幕在线| 五月开心婷婷网| 在线观看免费日韩欧美大片| xxx96com| 亚洲精品在线美女| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产精品 国内视频| 国产成人欧美在线观看| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 精品久久久久久,| 成人免费观看视频高清| 热99re8久久精品国产| 丰满迷人的少妇在线观看| 黄色成人免费大全| 欧美午夜高清在线| 嫁个100分男人电影在线观看| 校园春色视频在线观看| 9热在线视频观看99| 无遮挡黄片免费观看| 久久久久久大精品| 亚洲欧美激情综合另类| 中文字幕精品免费在线观看视频| 99re在线观看精品视频| 交换朋友夫妻互换小说| 日韩欧美在线二视频| 欧美精品啪啪一区二区三区| 成人三级黄色视频| 亚洲av熟女| 亚洲免费av在线视频| 久久久久久久久中文| 国产高清视频在线播放一区| 91精品三级在线观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 日日夜夜操网爽| 亚洲精品在线美女| 五月开心婷婷网| 亚洲人成电影免费在线| 午夜日韩欧美国产| 新久久久久国产一级毛片| 淫秽高清视频在线观看| e午夜精品久久久久久久| 中文字幕高清在线视频| 日本五十路高清| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产亚洲欧美98| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 亚洲成a人片在线一区二区| 国产精品 国内视频| 69av精品久久久久久| 亚洲国产欧美一区二区综合| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲av熟女| 波多野结衣一区麻豆| 亚洲男人的天堂狠狠| 精品卡一卡二卡四卡免费| 欧美乱色亚洲激情| 国产成人欧美| 不卡一级毛片| 日韩欧美在线二视频| 日韩欧美在线二视频| 麻豆一二三区av精品| 国产亚洲精品一区二区www| 超碰成人久久| 又紧又爽又黄一区二区| 久久人人97超碰香蕉20202| 丁香欧美五月| 日韩欧美三级三区| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 一夜夜www| 成人精品一区二区免费| 午夜激情av网站| 午夜福利一区二区在线看| 日日干狠狠操夜夜爽| 最近最新免费中文字幕在线| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| av天堂久久9| 可以在线观看毛片的网站| 美国免费a级毛片| av免费在线观看网站| 在线观看www视频免费| 亚洲专区中文字幕在线| avwww免费| 国产精品一区二区三区四区久久 | 日本wwww免费看| 99久久综合精品五月天人人| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 一进一出好大好爽视频| www国产在线视频色| 欧美激情高清一区二区三区| 国产精品成人在线| 高清av免费在线| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 水蜜桃什么品种好| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 这个男人来自地球电影免费观看| 91老司机精品| 乱人伦中国视频| 亚洲九九香蕉| 国产片内射在线| 日本黄色视频三级网站网址| 一个人免费在线观看的高清视频| 一级片'在线观看视频| 激情在线观看视频在线高清| 亚洲久久久国产精品| 国产成人av教育| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 久久精品91无色码中文字幕| 中文字幕av电影在线播放| 神马国产精品三级电影在线观看 | 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲精品成人av观看孕妇| 少妇粗大呻吟视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 成年女人毛片免费观看观看9| 99国产极品粉嫩在线观看| 日本欧美视频一区| 亚洲专区字幕在线| 高清在线国产一区| 国产区一区二久久| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲成人免费av在线播放| 亚洲熟女毛片儿| 亚洲av五月六月丁香网| 国产高清国产精品国产三级| 丰满饥渴人妻一区二区三| 18禁国产床啪视频网站| 午夜精品久久久久久毛片777| 日日爽夜夜爽网站| 日韩成人在线观看一区二区三区| 久久99一区二区三区| 亚洲avbb在线观看| 一级a爱视频在线免费观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 丝袜人妻中文字幕| 麻豆一二三区av精品| 久久久久亚洲av毛片大全| 久久久精品欧美日韩精品| 夜夜夜夜夜久久久久| 热99国产精品久久久久久7| 午夜a级毛片| 视频在线观看一区二区三区| 中文字幕av电影在线播放| 波多野结衣高清无吗| 日本免费a在线| 亚洲avbb在线观看| 亚洲成人久久性| 国产精品日韩av在线免费观看 | 亚洲男人的天堂狠狠| 亚洲专区国产一区二区| 五月开心婷婷网| 亚洲免费av在线视频| 岛国在线观看网站| 十八禁网站免费在线| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 韩国av一区二区三区四区| 精品一区二区三卡| 欧美色视频一区免费| 色播在线永久视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 精品一区二区三区四区五区乱码| 97人妻天天添夜夜摸| 午夜免费观看网址| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 日韩国内少妇激情av| 久热这里只有精品99| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产亚洲精品一区二区www| 精品国产一区二区三区四区第35| 99在线视频只有这里精品首页| 国产精品野战在线观看 | 多毛熟女@视频| 在线观看www视频免费| 啦啦啦 在线观看视频| 色婷婷av一区二区三区视频| 精品国产亚洲在线| 欧美成人性av电影在线观看| 99精品在免费线老司机午夜| 婷婷六月久久综合丁香| 一进一出抽搐动态| 久久香蕉精品热| 国产一区二区激情短视频| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 搡老乐熟女国产| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 免费搜索国产男女视频| 一级毛片高清免费大全| 在线永久观看黄色视频| 色婷婷av一区二区三区视频| 亚洲精品国产区一区二| 欧美激情高清一区二区三区| 久久伊人香网站| 亚洲成人久久性| 性色av乱码一区二区三区2| www.精华液| 久久婷婷成人综合色麻豆| 91av网站免费观看| 亚洲色图综合在线观看| 一区二区日韩欧美中文字幕| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 757午夜福利合集在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲av成人av| 久久久国产精品麻豆| 国产黄色免费在线视频| 国产免费现黄频在线看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产精品野战在线观看 | 精品久久蜜臀av无| ponron亚洲| 日日干狠狠操夜夜爽| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲片人在线观看| 热99re8久久精品国产| 色老头精品视频在线观看| www.999成人在线观看| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 老汉色∧v一级毛片| 免费观看人在逋| 国产精品永久免费网站| 12—13女人毛片做爰片一| 91av网站免费观看| 可以在线观看毛片的网站| 久久久国产欧美日韩av| 一级作爱视频免费观看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产午夜精品久久久久久| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产激情久久老熟女| 久久国产精品影院| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲欧美精品综合久久99| 色哟哟哟哟哟哟| 一夜夜www| 人人澡人人妻人| 波多野结衣av一区二区av| 国产精品成人在线| 在线观看66精品国产| 丝袜美腿诱惑在线| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 在线观看免费视频网站a站| 在线观看日韩欧美| 欧美成人午夜精品| 满18在线观看网站| 无限看片的www在线观看| 啦啦啦 在线观看视频| 国产高清videossex| 国产精品影院久久| bbb黄色大片| 女同久久另类99精品国产91| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲专区字幕在线| 国产精品av久久久久免费| 人人澡人人妻人| 国产主播在线观看一区二区| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 99国产极品粉嫩在线观看| 制服诱惑二区| 黄色成人免费大全| 亚洲一码二码三码区别大吗| 欧美性长视频在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| xxxhd国产人妻xxx| 91精品三级在线观看| 亚洲男人的天堂狠狠| 男女午夜视频在线观看| 国产麻豆69| 妹子高潮喷水视频| 99riav亚洲国产免费| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 欧美激情高清一区二区三区| 美国免费a级毛片| 欧美激情极品国产一区二区三区| 脱女人内裤的视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 夫妻午夜视频| 久久狼人影院| 老司机午夜福利在线观看视频| 韩国精品一区二区三区| 一级作爱视频免费观看| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 丝袜人妻中文字幕| 一边摸一边做爽爽视频免费| 丝袜人妻中文字幕| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 最近最新中文字幕大全免费视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产三级黄色录像| 99精品在免费线老司机午夜| 久久久水蜜桃国产精品网| 国产人伦9x9x在线观看| 午夜福利一区二区在线看| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 中文字幕人妻熟女乱码| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 在线观看免费日韩欧美大片| 激情视频va一区二区三区| 老鸭窝网址在线观看| 无限看片的www在线观看| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 18禁黄网站禁片午夜丰满| 欧美亚洲日本最大视频资源| 久9热在线精品视频| 一区二区三区激情视频| 高清毛片免费观看视频网站 | 久久中文字幕一级| 一本综合久久免费| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 久久久久久久久中文| 亚洲熟妇中文字幕五十中出 | 午夜福利免费观看在线| 国产成人免费无遮挡视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 色尼玛亚洲综合影院| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 操美女的视频在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国产成人av教育| 老司机靠b影院| 丝袜人妻中文字幕| 精品国产亚洲在线| 国产欧美日韩一区二区精品| 丝袜在线中文字幕| 操出白浆在线播放| 18禁观看日本| 亚洲欧美激情综合另类| 精品人妻1区二区| bbb黄色大片| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 日韩有码中文字幕| 日韩免费av在线播放| 中文字幕人妻熟女乱码| 嫩草影视91久久| 视频区图区小说| 亚洲 国产 在线| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 动漫黄色视频在线观看| 桃红色精品国产亚洲av| 丰满饥渴人妻一区二区三| 1024视频免费在线观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 亚洲人成电影观看| 一区二区三区激情视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 夜夜看夜夜爽夜夜摸 | 国产成人精品久久二区二区免费| 亚洲全国av大片| 成人永久免费在线观看视频| 在线观看一区二区三区| 视频在线观看一区二区三区| 久久久久久久久中文| 黄色女人牲交| aaaaa片日本免费| 国产精品98久久久久久宅男小说| 欧美激情极品国产一区二区三区| 黄色丝袜av网址大全| 新久久久久国产一级毛片| 久久精品亚洲av国产电影网| 日韩国内少妇激情av| 亚洲精品美女久久av网站| 成人三级做爰电影| 亚洲精品国产区一区二| 人成视频在线观看免费观看| 一级毛片高清免费大全| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 国产亚洲av高清不卡| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | www日本在线高清视频| 国产一区二区在线av高清观看| 成人亚洲精品av一区二区 | 真人一进一出gif抽搐免费| 久久国产亚洲av麻豆专区| 亚洲少妇的诱惑av| 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲色图综合在线观看| 午夜福利欧美成人| 日韩高清综合在线| 国产99久久九九免费精品| 亚洲第一av免费看| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 黄色视频不卡| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| www.自偷自拍.com| 亚洲,欧美精品.| 老司机福利观看| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 亚洲av熟女| 日日夜夜操网爽| 天堂√8在线中文| 99国产精品99久久久久| 中文字幕人妻丝袜制服| 曰老女人黄片| 久久九九热精品免费| 午夜视频精品福利| 老司机午夜十八禁免费视频| 亚洲国产精品999在线| 高清av免费在线| 国产主播在线观看一区二区| 天堂影院成人在线观看| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 色播在线永久视频| 最近最新中文字幕大全免费视频| 精品福利观看| 91国产中文字幕| 国产精品综合久久久久久久免费 | 亚洲精品国产一区二区精华液| av视频免费观看在线观看| 欧美久久黑人一区二区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 99国产精品99久久久久| 亚洲七黄色美女视频| 9热在线视频观看99| www.www免费av| 亚洲三区欧美一区| 国产国语露脸激情在线看| 自线自在国产av| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 亚洲第一av免费看| 91大片在线观看| 一二三四社区在线视频社区8| 丁香六月欧美| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 桃色一区二区三区在线观看| 男女下面进入的视频免费午夜 | 大香蕉久久成人网| 午夜精品国产一区二区电影| x7x7x7水蜜桃| 一级a爱片免费观看的视频| 国产精品永久免费网站| 亚洲av成人av| 欧美乱色亚洲激情| 又大又爽又粗| 97碰自拍视频| 成人三级做爰电影| 欧美黑人欧美精品刺激| 国产熟女xx| 大型av网站在线播放| 亚洲成人免费电影在线观看| 久久久国产成人免费| 国产精品影院久久| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 日日爽夜夜爽网站| 久久久国产精品麻豆| 色婷婷久久久亚洲欧美| 高清毛片免费观看视频网站 | 欧美精品一区二区免费开放| 神马国产精品三级电影在线观看 | 在线天堂中文资源库| 国产亚洲精品一区二区www| 免费搜索国产男女视频| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 两人在一起打扑克的视频| 国产高清激情床上av| 怎么达到女性高潮| 日韩欧美免费精品| 国产乱人伦免费视频| 久久九九热精品免费| 亚洲少妇的诱惑av| 国产片内射在线| 久久精品影院6| 亚洲专区字幕在线| 亚洲五月婷婷丁香| 涩涩av久久男人的天堂| 中文字幕最新亚洲高清| 精品久久久久久久毛片微露脸| 美女国产高潮福利片在线看| 香蕉国产在线看| 日韩精品青青久久久久久| www国产在线视频色| 亚洲第一青青草原| 亚洲av成人一区二区三| 久久精品91无色码中文字幕| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲avbb在线观看| 欧美激情极品国产一区二区三区| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 中文欧美无线码| 午夜影院日韩av| 国产片内射在线| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 老司机亚洲免费影院| 午夜精品在线福利| 在线视频色国产色| 国产精品一区二区在线不卡| 国产av精品麻豆| 欧美日韩精品网址| bbb黄色大片| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产激情欧美一区二区| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产99白浆流出| 操美女的视频在线观看| 久久中文看片网| 亚洲欧美一区二区三区久久| 1024视频免费在线观看| av天堂在线播放| 成人影院久久| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲精品成人av观看孕妇| 日本一区二区免费在线视频| 在线观看一区二区三区| 国产1区2区3区精品| cao死你这个sao货| 男人舔女人的私密视频| 欧美中文综合在线视频| 午夜福利免费观看在线| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲成a人片在线一区二区| 宅男免费午夜| 91九色精品人成在线观看| 十八禁人妻一区二区| 99久久人妻综合| 免费av中文字幕在线| 亚洲av电影在线进入| 女同久久另类99精品国产91| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 国产免费av片在线观看野外av| 亚洲 欧美一区二区三区| 久久精品国产亚洲av高清一级| 悠悠久久av| 亚洲国产中文字幕在线视频| 久久久久久大精品| 国产亚洲av高清不卡| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 男女床上黄色一级片免费看| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产国语露脸激情在线看| 日本五十路高清| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 久久天堂一区二区三区四区| 一级毛片高清免费大全| 大型av网站在线播放| 亚洲精品成人av观看孕妇| 波多野结衣一区麻豆| 亚洲美女黄片视频| 日韩大尺度精品在线看网址 | 在线播放国产精品三级| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产精品1区2区在线观看.| aaaaa片日本免费| 亚洲av美国av| 日韩精品中文字幕看吧| 三级毛片av免费| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲五月婷婷丁香| 国产xxxxx性猛交| 在线观看免费高清a一片| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产亚洲精品第一综合不卡| xxxhd国产人妻xxx| 亚洲国产欧美一区二区综合| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 18禁美女被吸乳视频| 精品电影一区二区在线| 欧美大码av| 欧美日韩乱码在线| 老司机靠b影院| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 免费高清在线观看日韩| 999久久久精品免费观看国产| 欧美另类亚洲清纯唯美| 嫩草影院精品99| 亚洲一区二区三区色噜噜 | 最好的美女福利视频网| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| av网站免费在线观看视频| av中文乱码字幕在线| 怎么达到女性高潮| 一级,二级,三级黄色视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国产精品一区二区免费欧美| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲少妇的诱惑av| 看免费av毛片| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲美女黄片视频| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲人成电影观看| 99re在线观看精品视频| 99久久99久久久精品蜜桃| 成人黄色视频免费在线看| avwww免费| 91在线观看av| 69精品国产乱码久久久| 一进一出好大好爽视频|