中藥抗流感病毒作用及機(jī)制的研究概況

王雪 楊巧麗 史玉柱 劉燕 王林林 姚華 黃華

新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所，新疆烏魯木齊 830004

中藥抗流感病毒作用及機(jī)制的研究概況

王雪 楊巧麗 史玉柱 劉燕 王林林 姚華 黃華

新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所，新疆烏魯木齊 830004

本文采用文獻(xiàn)查閱法綜述了近幾年抗流感病毒中藥的研究進(jìn)展，主要針對(duì)具有抗流感病毒作用的單味藥及臨床常用復(fù)方制劑，對(duì)其體內(nèi)、外抗流感病毒作用及其作用機(jī)制進(jìn)行綜述。目前，抗流感病毒中藥在我國(guó)臨床已有廣泛應(yīng)用，中藥在抗流感病毒方面具有得天獨(dú)厚的的優(yōu)勢(shì)和廣闊的發(fā)展前景。

單味藥；復(fù)方制劑；抗流感病毒

中藥抗流感病毒的基本原理在于“祛邪”與“扶正”。從現(xiàn)代藥理學(xué)角度分析，中藥抗病毒的途徑主要包括直接抑制病毒和間接抑制病毒。直接抑制病毒是藥物直接作用于病毒，阻斷病毒繁殖過(guò)程的吸附、穿入、復(fù)制、成熟中的某一環(huán)節(jié)，繼而殺滅病毒或抑制病毒復(fù)制，從而達(dá)到抗病毒的目的。間接抑制病毒是藥物通過(guò)提高機(jī)體的免疫功能，通過(guò)促進(jìn)機(jī)體的特異性和非特異性免疫功能而達(dá)到抑制病毒的目的。再就是通過(guò)誘生、促進(jìn)誘生干擾素（IFN）的作用等達(dá)到抗病毒的目的。本文就近年來(lái)中藥抗流感病毒的實(shí)驗(yàn)及機(jī)理方面的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 單味藥及其有效成分

1.1 板藍(lán)根

據(jù)報(bào)道，板藍(lán)根內(nèi)多個(gè)有效成分具有多靶點(diǎn)抗病毒作用，不但對(duì)病毒、細(xì)菌有抑殺作用，更對(duì)人體免疫有調(diào)節(jié)和保護(hù)作用[1]。程妍等[2]發(fā)現(xiàn)板藍(lán)根由醇提部位制取的總有機(jī)酸部位抗甲型流感病毒A/PR8/34（H1N1）藥效最強(qiáng)，其次為水提部位制取的總苯丙素，由醇提部位制取的總生物堿效果較弱。板藍(lán)根多糖能明顯降低H1N1流感病毒性肺炎小鼠的死亡率，并能明顯提高感染小鼠血清中特異性抗體IgG水平以及脾臟細(xì)胞IFN-γ的水平[3]。楊海霞等[4-5]研究發(fā)現(xiàn)板藍(lán)根提取液對(duì)雞胚內(nèi)流感病毒株FM1具有直接滅活作用，能促進(jìn)流感病毒感染小鼠T、B淋巴細(xì)胞增殖并可提高脾指數(shù)，可顯著提高流感病毒肺炎小鼠血清中IFN-γ、白細(xì)胞介素-2（IL-2）含量，抑制腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的過(guò)度表達(dá)。

1.2 金銀花

宋健等[6]對(duì)金銀花防治流感病毒模型血清蛋白組學(xué)進(jìn)行了初步研究，結(jié)果有3個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)在不同實(shí)驗(yàn)組差異較大，說(shuō)明金銀花對(duì)流感病毒致小鼠流感模型血清中部分功能蛋白的表達(dá)有密切相關(guān)性。潘曌曌等[7]測(cè)定發(fā)現(xiàn)不同濃度的金銀花提取物在體外可使流感病毒血凝效價(jià)降低，在體內(nèi)對(duì)感染流感病毒雞胚具有預(yù)防和保護(hù)治療作用，且均呈一定的量效關(guān)系，并且在100mg/mL時(shí)的預(yù)防作用明顯優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照病毒唑組。季志平等[8]研究發(fā)現(xiàn)金銀花提取物能明顯降低甲型流感病毒（A/PR/8/34）感染小鼠的肺指數(shù)。

1.3 黃芩

黃芩苷可能是黃芩抗流感病毒作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。黃芩苷187.5、375 mg/mL劑量均能明顯降低肺組織細(xì)胞凋亡率，明顯降低肺組織Fas、FasL及Caspase-3 mRNA和蛋白的表達(dá)[9]，表明黃芩苷能夠明顯抑制FM1肺炎小鼠肺組織細(xì)胞的凋亡，其可能通過(guò)影響細(xì)胞凋亡受體途徑Fas/FasL系統(tǒng)而發(fā)揮抗流感病毒感染作用[9]。據(jù)報(bào)道，黃芩苷對(duì)3種亞型流感病毒（H1N1、H5N1、H9N2）NA活性都有明顯抑制作用，其半數(shù)活性抑制濃度（IC50）分別為0.29，0.49和0.47mmol/L，黃芩苷與利巴韋林在體外聯(lián)用對(duì)不同亞型流感病毒的抑制表現(xiàn)為相加或協(xié)同作用，二者聯(lián)用對(duì)感染流感小鼠的保護(hù)效果明顯優(yōu)于單用[10]。黃芩苷可拮抗甲型流感病毒H1N1細(xì)胞病變，調(diào)控細(xì)胞周期分布，并通過(guò)抑制Caspase-8的激活，進(jìn)一步抑制Caspase-3的活性，從而發(fā)揮抗病毒作用[11]。黃芩素也是黃芩抗流感病毒作用的主要藥效成分。漢黃芩素可顯著抑制流感病毒感染NR8383細(xì)胞后TNF-α、MCP-1的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，降低前列腺素2（PGE2）、聚乳酸2（PLA2）、白細(xì)胞三烯B4（LTB4）和丙二醛（MDA）的含量，減少NO和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）的產(chǎn)生，增強(qiáng)超氧化物歧化酶（SOD）的活性，漢黃芩素在流感的治療中發(fā)揮了抗炎作用[12]。

1.4 黃芪

舒莉萍[13]體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，黃芪黃酮類組分在6.25～100 g/L范圍內(nèi)能直接抑制流感病毒，也可以發(fā)揮預(yù)防和治療流感病毒的作用，且呈現(xiàn)一定的劑量依賴性。此外，黃芪多糖有明顯的抗流感作用。張傳杰等[14]報(bào)道黃芪和秦艽混合提取物具有明顯的抗甲型流感病毒作用，效果優(yōu)于單獨(dú)的黃芪和秦艽。

1.5 魚腥草

魚腥草是目前用于防治流感的有效中藥之一。體外實(shí)驗(yàn)表明，魚腥草顆粒對(duì)甲型流感病毒有直接滅活作用，并且能抑制病毒在雞胚內(nèi)的增殖[15]，可抑制甲1型流感病毒核蛋白基因的表達(dá)[16]。2.0～4.0 g/kg魚腥草注射液能明顯降低甲型流感病毒H1N1感染小鼠死亡率，降低肺指數(shù)和抑制肺內(nèi)流感病毒增殖，對(duì)抗病毒感染所致動(dòng)物體重降低[17]。王穎等[18]研究發(fā)現(xiàn)魚腥草、病毒唑和金剛烷胺三者聯(lián)用時(shí)，抑制流感病毒致犬腎細(xì)胞（MDCK）病變所需的濃度比單獨(dú)使用時(shí)分別下降1 024、512、256倍，同時(shí)在體內(nèi)抗流感病毒實(shí)驗(yàn)中，可使小鼠流感病毒性肺炎治療效果大為提高。

1.6 貫葉連翹（貫葉金絲桃）

楊子峰等[19]研究表明，貫葉金絲桃醇提物50 g/L濃度組在體外細(xì)胞水平有抑制流感病毒的作用，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)也證明其可抗小鼠流感病毒性肺炎，并可延長(zhǎng)流感病毒感染小鼠的存活時(shí)間。王學(xué)紅等[20]研究報(bào)道貫葉連翹提取物可顯著降低流感病毒感染小鼠肺組織中TNF-α水平，顯著升高IFN-γ水平。

2 復(fù)方或中成藥

2.1 麻杏石甘湯

麻杏石甘湯由麻黃、杏仁、炙甘草、石膏四味藥組成。麻杏石甘湯可通過(guò)調(diào)節(jié)一些IL-2、IL-4的蛋白表達(dá)水平，對(duì)機(jī)體抗感染免疫發(fā)揮一定調(diào)節(jié)作用[21]，可調(diào)整流感病毒感染的MDCK細(xì)胞的細(xì)胞周期，降低細(xì)胞凋亡百分率而發(fā)揮抗流感病毒作用[22]。該方在預(yù)防給藥和治療給藥方式中均能通過(guò)抑制病毒增殖的方式而保護(hù)流感病毒感染的MDCK細(xì)胞活性與超微結(jié)構(gòu)[23]。該方還可通過(guò)提高小鼠免疫器官重量指數(shù)、調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的蛋白表達(dá)水平而對(duì)流感病毒感染小鼠起保護(hù)作用[24]。張薇等[25]研究報(bào)道麻杏石甘湯能通過(guò)抑制病毒增殖和保護(hù)宿主細(xì)胞而發(fā)揮較強(qiáng)的抗流感病毒作用。

2.2 銀翹散

該方由連翹、金銀花、苦桔梗、薄荷、竹葉、生甘草、荊芥穗、淡豆豉、牛蒡子9味中藥組成。銀翹散可以減輕甲1型流感病毒金剛烷胺耐藥株感染小鼠引起的全身癥狀，降低肺指數(shù)，減少鼠肺病變范圍及肺泡滲出物，降低鼠肺病毒滴度[26]。時(shí)宇靜等[27]報(bào)道銀翹散可能通過(guò)上調(diào)流感病毒感染小鼠肺組織內(nèi)IFN-γmRNA相對(duì)表達(dá)量來(lái)發(fā)揮抗流感病毒的作用。潘曌曌等[28-29]研究發(fā)現(xiàn)金銀花、連翹、牛蒡子及其配伍提取物可直接抑制甲型流感病毒FM1株的活性，作用時(shí)間從1 h可持續(xù)到24 h；各時(shí)間點(diǎn)各中藥提取物在最大不凝血濃度均能完全抑制病毒的增殖，且呈現(xiàn)一定的劑量依賴性。銀翹散還可以降低流感病毒感染胸腺缺陷小鼠血清中的炎性因子IFN-γ的表達(dá)，從而減少炎性損傷[30]。吳振起[31]報(bào)道銀翹散及其性味分組提取物對(duì)流感病毒感染MDCK細(xì)胞具有預(yù)防、治療和直接滅殺作用；對(duì)流感病毒誘導(dǎo)MDCK細(xì)胞凋亡以及小鼠肺組織細(xì)胞凋亡有明顯的抑制作用，其作用機(jī)制可能是通過(guò)Fas/FasL途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)，其中清熱解毒組起了主要作用；銀翹散還具有直接抑制流感病毒、減少肺病理?yè)p傷和誘生干擾素作用。

2.3 痰熱清注射液

痰熱清注射液是由黃芩、熊膽粉、山羊角粉、金銀花、連翹等5味藥物組成的中藥制劑，具有清熱解毒、化痰解痙的功效。痰熱清注射液可直接刺激T、B淋巴細(xì)胞的增殖，并通過(guò)細(xì)胞因子IL-2，IFN-γ，TNF-α等作用調(diào)控Th1與Th2細(xì)胞的平衡，增強(qiáng)機(jī)體的抗病毒免疫功能[32]。鄭金粟等[33]研究發(fā)現(xiàn)痰熱清注射液（4mL/kg）對(duì)流感病毒FM1感染小鼠具有明顯的保護(hù)作用。痰熱清注射液可使流感病毒FM1感染小鼠肺組織勻漿病毒血凝滴度及肺指數(shù)明顯降低[34-35]，不僅對(duì)病毒感染小鼠T、B細(xì)胞的增殖和T細(xì)胞產(chǎn)生IL-2的能力具有明顯的上調(diào)作用，而且對(duì)感染小鼠肺組織勻漿中炎性細(xì)胞因子TNF-α含量具有明顯的下調(diào)作用[34]。

2.4 毒熱平注射液

毒熱平注射液具有清熱涼血、解毒通絡(luò)之功效。毒熱平注射液能保護(hù)FM1感染的小鼠脾細(xì)胞，并抑制其產(chǎn)生Th2型細(xì)胞因子IL-10，而使Th1型細(xì)胞因子IFN-γ水平保持在一定的范圍內(nèi)；還能直接增強(qiáng)T細(xì)胞對(duì)FM1感染的靶細(xì)胞（Ana-1）的殺傷能力[36]。毒熱平注射液可劑量依賴性地顯著下調(diào)流感病毒感染巨噬細(xì)胞NO的分泌水平及IL-6、MIP-1a和T細(xì)胞激活性低分泌因子（RANTES）分泌水平，該藥可明顯下調(diào)病毒感染巨噬細(xì)胞NF-tcB p65 mRNA及其蛋白表達(dá)水平，抑制病毒感染巨噬細(xì)胞NO的分泌，從而發(fā)揮抗病毒感染作用[36-38]。毒熱平注射液還可通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能發(fā)揮抗病毒作用，能明顯上調(diào)流感病毒感染小鼠的T細(xì)胞增殖能力、腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力和INF-γ活性，顯著下調(diào)小鼠肺勻漿的IL-4和IL-10的活性[39]，通過(guò)降低流感病毒感染小鼠肺組織炎癥因子表達(dá)而發(fā)揮保護(hù)作用[40]。景姍等[41]報(bào)道毒熱平注射液體內(nèi)能增強(qiáng)肺組織IFN-γmRNA基因轉(zhuǎn)錄，抑制IL-4 mRNA基因轉(zhuǎn)錄，抑制流感病毒FM1感染小鼠肺組織CD40L蛋白的表達(dá)。

2.5 連花清瘟膠囊

連花清瘟膠囊具有廣譜抗病毒作用，可顯著抑制流感、副流感病毒、SARS病毒、禽流感病毒、單純皰疹病毒等多種病毒；抑制甲型流感H1N1病毒[42]。郭海等[43-44]研究發(fā)現(xiàn)連花清瘟膠囊對(duì)流感病毒感染引起的細(xì)胞免疫功能降低有一定的抑制作用，對(duì)小鼠感染流感病毒FM1后血中CD4+和CD4+/ CD8+明顯下降有一定的抑制作用，能提高流感病毒感染小鼠肺中IFN-γ的水平。

2.6 雙黃連制劑

雙黃連注射液由金銀花、黃芩和連翹3種中藥組成，用于防治流感，臨床效果十分理想。孫堅(jiān)等[45-46]研究發(fā)現(xiàn)雙黃連注射液可抑制流感病毒甲1基因，并可抑制甲1型流感病毒誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡。沈斯瑤等[47]研究發(fā)現(xiàn)雙黃連片可明顯降低流感病毒和腺病毒感染小鼠的死亡率，延長(zhǎng)肺炎小鼠的存活時(shí)間，降低肺炎小鼠的肺指數(shù)，同時(shí)，雙黃連片還能降低肺組織中流感病毒的滴度。鄔洪波等[48]報(bào)道雙黃連分散片對(duì)流感病毒（A3）、副流感病毒（HVJ）、呼吸道合胞病毒（RSV）、單純皰疹病毒（HSV-Ⅰ、HSV-Ⅱ）等4種病毒均有不同程度的抑制作用，對(duì)流感病毒感染小鼠引起肺內(nèi)流感病毒增殖量和病毒性肺炎均有明顯的抑制作用。

3 展望

流感的防治主要依賴于藥物。我國(guó)中草藥資源豐富，中草藥治療流感效果肯定、毒副作用小、價(jià)格低廉，廣泛地用于臨床。但目前大量的實(shí)驗(yàn)研究集中在藥物篩選，對(duì)藥物有效成分、作用機(jī)制方面的研究不多，學(xué)科間的交叉合作較為欠缺，故在加強(qiáng)中藥抗流感病毒作用機(jī)制以及抗流感病毒有效成分的研究的同時(shí)，運(yùn)用高科技手段和技術(shù)，在藥理學(xué)、分子生物學(xué)、植物學(xué)、天然藥物化學(xué)等多學(xué)科的協(xié)同配合下，從機(jī)體水平、細(xì)胞水平、分子生物學(xué)水平著手，將三者有機(jī)地結(jié)合起來(lái)，開(kāi)展廣泛而深入的實(shí)驗(yàn)研究和臨床觀察，闡明其活性成分、作用機(jī)制，從根本上體現(xiàn)抗流感病毒中藥藥理作用的新化學(xué)實(shí)體，使中草藥的應(yīng)用更加準(zhǔn)確有效，安全，進(jìn)一步促進(jìn)中醫(yī)藥更好地應(yīng)用于流感防治。

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Research progresses of Chinese herbs on anti-influenza virus

WANG Xue YANGQiaoli SHIYuzhu LIU Yan WANG Linlin YAO Hua HUANG Hua
Institute of Materia Medic,Xinjiang Uygur Autonomous Region,Urumqi 830004,China

With literaturemethod,this article summarizes research progress of traditional Chinesemedicine(TCM)on anti-influenza virus in recent years,mainly with single herb and compound prescription used in clinical commonly,the effect and mechanism of anti-influenza virus in vivo and in vitro are reviewed.TCM on anti-influenza virus have been widely used in the clinic in China,TCM have advantages and broad prospects for development on anti-influenza virus.

Single herb;Compound prescription;Anti-influenza virus

R285

A

1673-7210（2012）11（c）-0027-03

新疆烏魯木齊市天山區(qū)科學(xué)技術(shù)計(jì)劃項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：tsqkjjh20110711）。

王雪（1979-），女，漢族，助理研究員，碩士，主要從事中藥藥理學(xué)研究。

黃華（1965-），女，漢族，研究員，碩士，主要從事中藥藥理學(xué)研究。

2012-07-19 本文編輯：李繼翔）