腫瘤病理組織庫的建設(shè)及發(fā)展現(xiàn)狀

李巖 沈雄虎 張松男 金鐵峰，3 林貞花，3

（1.延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室，吉林 延吉 133002； 2.延邊大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤科，吉林 延吉 133000；3.延邊大學(xué)腫瘤研究中心，吉林 延吉 133002）

組織庫（tissue bank）包含的內(nèi)容廣泛，主要是指組織和器官移植以及各種疾病的大體和體液標(biāo)本的儲存、臨床應(yīng)用、科學(xué)研究和管理。本文所討論的“腫瘤病理組織庫”是指由病理醫(yī)師和外科醫(yī)師組織建立的組織庫，主要目的是為了保證在腫瘤的分級、分期、腫瘤的分子標(biāo)記物篩查以及藥物靶向治療的臨床工作及研究工作中有足量的腫瘤標(biāo)本，從而提高臨床腫瘤診斷的準(zhǔn)確性和治療的有效性并為后續(xù)科學(xué)研究提供標(biāo)本資源［1］。目前隨著科研手段的更新和技術(shù)的發(fā)展，對于腫瘤的研究已經(jīng)從形態(tài)學(xué)發(fā)展到了遺傳學(xué)領(lǐng)域，腫瘤的相關(guān)基因和蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能研究已經(jīng)成為腫瘤研究的熱點(diǎn)并為腫瘤的病理診斷和臨床治療提供了堅(jiān)實(shí)的理論依據(jù)。因此，作為這些重要信息資源載體的腫瘤組織就顯得非常珍貴。它們不但可以用于腫瘤的診斷、分類、治療、療效評估等，更重要的是可以作為具體的研究對象來探索腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中各種生物因子的作用機(jī)制，從而進(jìn)一步揭示腫瘤的生物學(xué)特性，更好地為臨床患者服務(wù)［2－3］。

1 國內(nèi)外病理組織庫的發(fā)展現(xiàn)狀

在國際上，美國癌癥研究所在1987年建立了美國國家級的腫瘤組織庫。該組織庫包含有6個(gè)分散在全美各地的大型教學(xué)醫(yī)院。這6個(gè)醫(yī)院統(tǒng)一執(zhí)行一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化的標(biāo)本采集、存儲和數(shù)據(jù)信息化及管理。截止到2004年，他們已經(jīng)擁有70萬個(gè)病例標(biāo)本［4］。1993年，美國MD Anderson癌癥中心首先建立頭頸部腫瘤組織庫，經(jīng)過15年的發(fā)展，到2008年，其收集的腫瘤樣本已經(jīng)超過2.5萬例［5］。在2000年，該中心又建立了胰腺癌組織庫，同時(shí)又下設(shè)了25個(gè)分支組織庫，并實(shí)現(xiàn)了區(qū)域內(nèi)資源共享［6］。在全美，到2004年為止，經(jīng)過美國組織庫協(xié)會（American association of tissue bank，AATB）認(rèn)證的組織庫已經(jīng)達(dá)到了70家以上［7］。與此同時(shí)，歐洲也建立了以歐洲癌癥研究所為中心，分散于整個(gè)歐洲的腫瘤組織庫體系。這些分散在歐洲各個(gè)國家和地區(qū)的大型醫(yī)院負(fù)責(zé)腫瘤及相關(guān)組織的采集、儲存以及臨床資料信息的錄入，而歐洲癌癥研究所則主要負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)的加工和管理［8－9］。在亞洲，日本、韓國等國家也都紛紛開展了自己的病理組織庫項(xiàng)目，例如韓國高麗大學(xué)醫(yī)科大學(xué)自2003年起建立的肺癌組織庫、韓國延世大學(xué)醫(yī)科大學(xué)自2006年起建立的消化道腫瘤組織庫等。

在我國，北京大學(xué)臨床腫瘤學(xué)院在1996年首先成立了中國第一個(gè)病理組織庫，主要是對本院的腫瘤標(biāo)本進(jìn)行保存和整理。2000年以后，中山大學(xué)、廣州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院、天津醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院和河南省腫瘤醫(yī)院等相繼建立了自己的腫瘤組織庫［10］。但是，總體而言，病理組織庫的建設(shè)在我國目前還處在起步階段。不過可喜的是，我們看到一些地方的病理學(xué)科根據(jù)本地區(qū)的實(shí)際建立了有自己特色的疾病病理組織庫。例如，云南省已經(jīng)建立了遺傳性大腸癌組織庫［11］，中南大學(xué)湘雅醫(yī)院也正在積極組建鼻咽癌組織庫［12］。這都是各地根據(jù)地方多發(fā)疾病建立相應(yīng)病理組織庫的實(shí)例。在延邊地區(qū)，丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）的感染率為4.78%，顯著高于3.2%的全國平均水平［13］。另外，我們的前期研究發(fā)現(xiàn)延邊地區(qū)女性宮頸癌的發(fā)病率有明顯的上升趨勢且發(fā)病年齡在逐漸年輕化。根據(jù)這種現(xiàn)狀，2004年6月我們開始了延邊地區(qū)“腫瘤組織庫”（Tumor Tissue Bank，TTB）的建設(shè)工作。經(jīng)過多年的摸索與實(shí)踐，我們建立了以HPV感染相關(guān)宮頸癌和HCV感染相關(guān)肝癌為特色、以宮頸癌和肝癌為主體同時(shí)包括各器官常見腫瘤的腫瘤病理組織庫。這對保存和研究延邊地區(qū)遺傳性腫瘤家族系、朝漢兩民族的腫瘤易感性對比、多發(fā)性腫瘤資源及腫瘤診斷和治療、完善病理診斷依據(jù)等都有非常重要的意義。

2 病理組織庫在我國發(fā)展的重要意義

我國幅員遼闊，各地區(qū)由于自然、社會環(huán)境的不同，其常見的疾病種類也不盡相同。但是隨著城市化的進(jìn)程，人口流動日益頻繁，原有疾病發(fā)展的自然模式已經(jīng)逐漸被破壞，對于遺傳、自然、社會等因素在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用的研究也日益困難。目前在我國，仍然存在一些極具價(jià)值的疾病遺傳模型和區(qū)域多發(fā)病，但是隨著衛(wèi)生保健工作的深入和城市化進(jìn)程的加快，原有的疾病資源正在逐漸消失。因此，現(xiàn)有的疾病資源和資料，特別是人體組織（疾病組織和非疾病組織）已經(jīng)成為一種不可再生的資源，應(yīng)備受關(guān)注［14－15］。大量的病理組織標(biāo)本，可以為疾病的流行病學(xué)和疾病的發(fā)生、演進(jìn)機(jī)理的研究提供幫助。由于居民生活條件和醫(yī)療資源緊張等的限制，大量的腫瘤患者只能在地方基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)接受治療。因此，絕大多數(shù)常見的腫瘤病理組織在地方基層醫(yī)院更容易獲得。但是，一些地方醫(yī)療機(jī)構(gòu)由于認(rèn)為自身?xiàng)l件有限，一直沒有系統(tǒng)性的開展組織庫的建設(shè)。組織庫的建設(shè)主要取決于疾病數(shù)量和（或）種類。各個(gè)地方基層醫(yī)院可以逐步建立自己的組織庫，同時(shí)也為建立全國統(tǒng)一的組織庫中心做準(zhǔn)備。

3 病理組織庫的建立過程

病理組織庫的建立不僅涉及醫(yī)患雙方，而且還需要護(hù)士、技師及計(jì)算機(jī)輔助人員等多方面協(xié)作參與。

首先，在病理組織庫的建立過程中要遵循一定的程序。借鑒國外的標(biāo)準(zhǔn)化流程結(jié)合我國各地區(qū)的實(shí)際情況，我們總結(jié)如下：（1）經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)；（2）患者簽署知情同意書；（3）向手術(shù)室遞交標(biāo)本收集申請；（4）術(shù)中切除的組織由病理醫(yī)師記錄大體情況并拍照；（5）病理醫(yī)師保留足夠臨床病理診斷的組織并將其固定于常規(guī)的病理組織標(biāo)本固定液中，其余的標(biāo)本按照一定的標(biāo)準(zhǔn)取材并凍存；（6）將組織入庫，并完善記錄患者的臨床信息及臨床病理診斷結(jié)果；（7）將組織與信息編號進(jìn)行數(shù)字化管理；（8）隨診補(bǔ)充和完善臨床資料信息。在整個(gè)操作過程中有幾點(diǎn)問題是需要注意的。組織從取出到快速冷凍所需的時(shí)間越短越好，應(yīng)控制在30 min以內(nèi)。同時(shí)，最好不要把組織浸于任何溶液中，只需簡單地將組織放在無菌的塑料袋中并置于冰上［16］。美國臨床乳腺保護(hù)計(jì)劃（Clinical Breast Care Project，CBCP）經(jīng)過大量的實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，把新鮮大體標(biāo)本放入干冰中速凍的效果優(yōu)于液氮速凍。經(jīng)干冰速凍的標(biāo)本，其后期研究中應(yīng)用激光切割時(shí)，更符合激光切割的最佳切割溫度，從而更好的保護(hù)組織生物信息（DNA、RNA和蛋白質(zhì)）［17］。這種方法可以更加完整和充分地保護(hù)組織樣本，同時(shí)又能最大程度地節(jié)省儲存組織樣本的空間。組織的規(guī)范取材和有效、安全的保存是病理組織庫建立的最基本條件，也是病理組織庫建立的重中之重。

那么，當(dāng)病理組織庫中有了大量的組織標(biāo)本時(shí)，如何合理有效地使用這些標(biāo)本？怎樣才能使病理組織庫發(fā)揮其最大的作用呢？這就需要將臨床資料信息與組織緊密地聯(lián)系在一起。因此，在病理組織庫的建立過程中臨床資料數(shù)據(jù)庫的建立也是十分重要的。疾病的個(gè)體差異較大，同樣的疾病由于環(huán)境因素、診治過程的不同，使疾病的結(jié)局特別是腫瘤組織的特性具有很大差異?；颊咴敿?xì)的初診、治療經(jīng)過、臨床病理診斷、術(shù)后隨訪等各個(gè)方面的完整數(shù)據(jù)對于腫瘤的基礎(chǔ)研究和臨床治療指導(dǎo)都有重要的意義。此過程需要病理組織庫工作人員與臨床醫(yī)師通力合作，同時(shí)也需要醫(yī)院的病歷管理系統(tǒng)在技術(shù)上給予支持，使病歷資料在庫間傳輸成為可能。有了腫瘤的組織樣本和完整的臨床資料信息，我們就可以建立一個(gè)相對完善的腫瘤數(shù)據(jù)庫。腫瘤數(shù)據(jù)庫除了有病理組織、組織大體情況、臨床資料、隨訪資料外還應(yīng)擁有組織庫管理信息、數(shù)據(jù)整合分析、數(shù)據(jù)查詢和數(shù)據(jù)存儲等眾多功能?，F(xiàn)在國外的腫瘤數(shù)據(jù)庫中加入了該組織的病理學(xué)圖像信息，其中既包括收集的組織標(biāo)本的大體照片，也包括該組織已做成的常規(guī)H＆E切片的鏡下采集圖片［14］。總之，沒有完善的腫瘤數(shù)據(jù)庫，不利于標(biāo)本和數(shù)據(jù)的管理，使腫瘤標(biāo)本的應(yīng)用價(jià)值大大降低。有了腫瘤數(shù)據(jù)庫的數(shù)字化管理，使得科研工作變得有效便捷，也使得病理組織庫能發(fā)揮其最大的作用。

目前，我國病理組織庫還處于起步階段，組織庫以小規(guī)模為主且在各地的大醫(yī)院單獨(dú)存在。這樣不但不能充分利用資源，而且難以進(jìn)行多中心合作的科學(xué)研究。在這一點(diǎn)上我們應(yīng)向美國和歐洲學(xué)習(xí)，建立全國性的病理組織庫管理中心，制定統(tǒng)一的組織采集和管理的操作標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)用統(tǒng)一的網(wǎng)絡(luò)數(shù)字化管理系統(tǒng)，使分散在全國各大醫(yī)院的組織庫整合成為龐大的組織庫網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，同時(shí)建立網(wǎng)絡(luò)信息共享平臺，使組織庫內(nèi)的資源和信息得到充分利用。這樣既促進(jìn)了國內(nèi)醫(yī)療研究機(jī)構(gòu)的科研發(fā)展，也有利于國際間科研項(xiàng)目的交流與合作。未來，在國際間交流合作的基礎(chǔ)上，可以建立更加開放的國際組織庫共享平臺。這將為疾病在不同種族和地區(qū)的橫向研究做出巨大貢獻(xiàn)。進(jìn)而在制定疾病的標(biāo)準(zhǔn)化診斷指標(biāo)和治療原則的基礎(chǔ)上研究疾病區(qū)域特異性，然后可以縱向深入，在微觀上對疾病的發(fā)生和演進(jìn)進(jìn)行研究。在以病理學(xué)工作者為基礎(chǔ)，醫(yī)學(xué)各個(gè)學(xué)科通力合作的基礎(chǔ)上，病理組織庫在未來醫(yī)學(xué)研究中一定會發(fā)揮更加重要的作用。

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