UPA與VEGF在乳腺癌中的表達(dá)及意義

胡曉峰 邢靜 王曉寅 聶雙發(fā) 郭飛 梁峰

近年來，乳腺癌在女性中的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，侵襲和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患者死亡主要原因，而腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移有賴于細(xì)胞外基質(zhì)的降解及腫瘤血管形成。研究表明，尿激酶型纖溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen cultivator，uPA)介導(dǎo)的纖維蛋白溶解作用及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)介導(dǎo)的血管形成作用，都能促進(jìn)乳腺癌的發(fā)生，發(fā)展及播散［1］。故本研究通過檢測乳腺癌組織中uPA和VEGF蛋白的表達(dá)狀況，以探討二者在乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 收集張家口市三所市級醫(yī)院2006至2009年間經(jīng)病理確診的乳腺癌手術(shù)切除標(biāo)本70例均為女性患者，年齡25～75歲，平均年齡48歲，均未接受術(shù)前化療。

1.2 主要試劑 免疫組化試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司，DAB顯色試劑盒，鼠抗人uPA單克隆抗體，鼠抗人VEGF單克隆抗體均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.3 方法 將存檔的石蠟標(biāo)本重新制備5 μm厚度切片進(jìn)行免疫組化SP染色，操作步驟嚴(yán)格按照說明進(jìn)行，陽性對照采用已知乳腺癌陽性組織切片，陰性對照用PBS代替Ⅰ抗。

1.4 結(jié)果判定 在光鏡(×400)取10個視野平均陽性細(xì)胞數(shù)＞10%為陽性病例，＜10%為陰性病例。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析 計數(shù)資料采用χ2檢驗和四格列聯(lián)表法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

VEGF和uPA在乳腺癌中的陽性率分別為68.57%(48/70)和60%(42/70)二者在乳腺癌中的陽性表達(dá)與年齡、病理類型及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的關(guān)系見表1。UPA與VEGF表達(dá)的關(guān)系見表2。

3 討論

腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移是一個多步驟，多環(huán)節(jié)過程，其中細(xì)胞外基質(zhì)及基底膜的破壞是腫瘤轉(zhuǎn)移的重要前提［1］。UPA是一種絲氨酸蛋白水解酶，基因定位于 10q24，長度 6.5 kB［2］。UPA通過與uPAR特異性結(jié)合，而與受體結(jié)合的uPA又對纖溶酶原有很強(qiáng)的催化能力，使纖溶酶原活化成纖溶酶，從而非特異性地溶解基質(zhì)中的多種成分如纖維蛋白，纖維連接蛋白，蛋白多糖，板層素等，促進(jìn)腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移［3］。血管生成是腫瘤生長轉(zhuǎn)移的又一種重要因素，VEGF是一種能特異性地作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長因子，具有促進(jìn)新生血管形成和增強(qiáng)血管通透性的功能［4］。Mandriota 等［5，6］研究認(rèn)為 VEGF-C 還可能介導(dǎo)淋巴管的形成。因此，uPA與VEGF的水平高低，可能直接影響著乳腺癌的預(yù)后。

表1 UPA和VEGF在乳腺癌組織中的表達(dá)與乳腺癌生物學(xué)特性的關(guān)系 例(%)

表2 UPA與VEGF表達(dá)的關(guān)系 例

本實驗結(jié)果顯示uPA和VEGF均與乳腺癌組織病理類型和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況有關(guān)，但均與年齡及腫瘤發(fā)生位置無關(guān)，其中uPA和VEGF在浸潤性癌中的陽性率分別為61.02%和62.71%明顯高于非浸潤癌中的陽性率18.18%和27.27%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，并且他們在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽性率也明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，提示uPA和VEGF均可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移，與前人報道一致。另外提示對于uPA和/或VEGF陽性的乳腺癌患者即使無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移也應(yīng)擴(kuò)大切除，并做好術(shù)后放化療和定期檢查工作。

另外，實驗結(jié)果還顯示40例VEGF陽性患者中uPA陽性者27例，陽性一致率為67.5%，30例VEGF陰性患者中uPA陰性者19例，陰性一致率為63.3%，總一致率為65.7%，提示uPA與VEGF表達(dá)有關(guān)，與本實驗結(jié)果(r=0.3063)相一致。

UPA和VEGF是影響無病生存期和總生存期的獨立預(yù)后因子，有報告認(rèn)為高水平的EGFR、uPA等基因可能通過上調(diào)VEGF水平，在細(xì)胞外基質(zhì)降解同時，促進(jìn)腫瘤新生血管形成和癌細(xì)胞血管侵襲作用，這樣通過兩者各自的作用以及相互促進(jìn)作用，最終可引起腫瘤進(jìn)展和出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移［7］。因此檢測uPA和VEGF水平對于乳腺癌患者的預(yù)后及制定治療方案有重大意義，另外近年國內(nèi)外許多學(xué)者都在研制以uPA和VEGF為靶點的合成抑制劑［8－10］。相信不久會為人類的抗癌治療開辟一條令人鼓舞的新途徑。

1 程偉華，黎才海.uPA系統(tǒng)與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系.實用癌癥雜志，2008，23:310-315.

2 Giannopoulou I，Mylona E，Kapranou A，et al.The prognostic value of the topographic distribution of uPAR expression in inva-sive breast carcinomas.Cancer Lett，2007，246:262-267.

3 沈倩雯，金冶寧.UPA系統(tǒng)在腫瘤患者中的檢測意義及研究進(jìn)展.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2008，12:2207-2209.

4 張瑞鵬，郭平凡.血管內(nèi)皮生長因子最新研究進(jìn)展.醫(yī)學(xué)綜述，2008，14:2258-2260.

5 Mandriota SJ，Jussila L，Jeltsch M，et al.Vascular endothelial growth factor C-mediated lymphaugiogensis prmotes tumor metastasis.EMBO J，2001，20:672-682.

6 Jussila L，Alitalc K.Vascular growth factors and lymphangiogenesis.Physial Rev，2002，82:673-700.

7 丁佩劍，楊陽，王波，等.脂氧合酶-5及血管內(nèi)皮生長因子在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義.疑難病雜志，2011，10:278-281.

8 Gerber HP，F(xiàn)errara N.Phanuacology and pharmacodynamics of beacizumab as monotherapy or in ambination with cytotoxic therapy in preclinical studies.Cancer Res，2005，65:671-680.

9 黃金鳳，何志明，李煒霞.乳腺癌組織uPA和nm23表達(dá)及其臨床意義的研究.中華腫瘤防治雜志，2008，11:829-831.

10 丁友成，朱正綱.uPA合成抑制劑及其在腫瘤治療中的研究進(jìn)展.國外醫(yī)學(xué)外科學(xué)分冊，2004，31:8-11.