抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體與狼瘡性腎炎的相關(guān)性研究

張小蓮,鮑 琳,崔江龍,徐 榮，謝 璟

(1、宜春市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科;2、宜春市中心血站,江西 宜春 336000)

抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體與狼瘡性腎炎的相關(guān)性研究

張小蓮1,鮑 琳2,崔江龍1,徐 榮1，謝 璟1

(1、宜春市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科;2、宜春市中心血站,江西 宜春 336000)

目的探討抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(antineutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA)對(duì)狼瘡性腎炎(lupus nephritis,LN)診斷、病理分型和病情評(píng)估等方面的價(jià)值。方法采用間接免疫熒光法對(duì)42例無(wú)LN的SLE患者、36例LN患者和20例健康體檢者的血清ANCA進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)78例SLE患者的腎功能指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。將LN患者分為ANCA陽(yáng)性和陰性組，無(wú)LN的SLE患者為正常對(duì)照，進(jìn)行腎功能指標(biāo)的檢測(cè)與比較。結(jié)果LN患者和無(wú)LN的SLE患者的ANCA陽(yáng)性率分別為55.6%(20/36)和7.1%(3/42)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。ANCA陽(yáng)性和陰性組的腎小球?yàn)V過(guò)率、嚴(yán)重血尿(鏡檢紅細(xì)胞≥++/HP)和管型陽(yáng)性率間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論血清ANCA可作為L(zhǎng)N的輔助診斷指標(biāo)，并與其腎功能損害程度有一定的相關(guān)性。ANCA陽(yáng)性可能更易出現(xiàn)在ClassⅢ和Ⅳ型的LN當(dāng)中。

抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體；狼瘡性腎炎

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種自身免疫性結(jié)締組織病，可累及多個(gè)器官和系統(tǒng)，約50%患者會(huì)繼發(fā)腎臟損害，稱為狼瘡性腎炎(lupus nephritis,LN)[1]。LN的病理機(jī)制非常復(fù)雜，其中免疫復(fù)合物介導(dǎo)的補(bǔ)體激活、白細(xì)胞浸潤(rùn)、炎癥因子釋放、組織增生、壞死以及新月體和腎小球瘢痕形成等過(guò)程極為重要，腎小球的損害程度大多與免疫復(fù)合物的沉積量相關(guān)[2]。一種中性粒細(xì)胞依賴、抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(antineutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA)相關(guān)的壞死性新月體性腎小球腎炎形成機(jī)制則很可能在部分免疫復(fù)合物缺乏(pauci-immune)的LN如ClassⅣ-S型中發(fā)揮著關(guān)鍵作用[2-4]。ANCA檢測(cè)對(duì)于LN的診斷、病理分型和病情評(píng)估等方面的價(jià)值仍有待廣泛深入研究[3-5]。本研究檢測(cè)并分析了36例LN患者和42例無(wú)LN的SLE患者的血清ANCA，并對(duì)ANCA陽(yáng)性和陰性LN患者的腎功能指標(biāo)進(jìn)行了比較，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病例資料 收集2008年1月至2012年3月間宜春市人民醫(yī)院收治的LN患者36例，其中男4例，女32例，年齡34.4±8.5歲。無(wú)LN的SLE患者42例，男6例，女36例，年齡32.8±9.2歲。78例患者均符合國(guó)際臨床協(xié)作組 (SLICC)新修訂的分類診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]。選取健康體檢者20例做正常對(duì)照組，男3例，女17例，年齡35.2±6.7歲。

1.1.2 試劑和儀器 ANCA間接免疫熒光法(indirect immunofluorescence,IIF)檢測(cè)試劑盒購(gòu)自德國(guó)EUROIMMUN公司，包括甲醛固定的粒細(xì)胞、乙醇固定的粒細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞和猴肝細(xì)胞4種基質(zhì)組成的生物薄片，F(xiàn)ITC標(biāo)記羊抗人IgG等。ECLIPSE 80i熒光顯微鏡購(gòu)自日本NIKON公司。

1.2 方法 SLE患者和健康體檢者的ANCA檢測(cè)嚴(yán)格按試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。陽(yáng)性標(biāo)本可能有胞漿型(cytoplasmic pattern,c-ANCA)、核周型(perinuclear pattern,p-ANCA)和非典型(atypical pattern,a-ANCA)三種表型。將LN患者分為ANCA陽(yáng)性和陰性組，無(wú)LN的SLE患者為正常對(duì)照，進(jìn)行腎功能指標(biāo)的檢測(cè)。留取24h尿做尿蛋白定量和腎小球?yàn)V過(guò)率(glomerular filtration rate,GFR)檢測(cè)，留取晨尿做尿沉渣分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)分析，兩組計(jì)量資料采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，兩組計(jì)數(shù)資料采用四格表卡方檢驗(yàn)或Fisher確切概率檢驗(yàn)。P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ANCA檢測(cè) ANCA的檢測(cè)結(jié)果顯示，78例SLE患者中檢出23例ANCA陽(yáng)性，表型均為p-ANCA，未見(jiàn)c-ANCA或a-ANCA，20例健康體檢者的ANCA檢測(cè)均為陰性。兩組樣本陽(yáng)性率間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.01)。36例LN患者中，ANCA陽(yáng)性的有20例，陽(yáng)性率為55.6%，42例無(wú)LN的SLE患者中，ANCA陽(yáng)性的只有3例，陽(yáng)性率為7.1%。兩組樣本ANCA陽(yáng)性率間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

2.2 腎功能指標(biāo)檢測(cè) 將36例LN患者分為ANCA陽(yáng)性和陰性組。ANCA陽(yáng)性LN患者和ANCA陰性LN患者及無(wú)LN的SLE患者的尿蛋白和GFR檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1，尿沉渣分析結(jié)果見(jiàn)表2。表1兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)結(jié)果顯示，與無(wú)LN的SLE患者相比，LN患者的尿蛋白水平顯著升高，GFR顯著降低(P<0.01)。ANCA陽(yáng)性和陰性LN患者比較，尿蛋白水平間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但GFR間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.01)。表2四格表Fisher確切概率檢驗(yàn)結(jié)果顯示，與無(wú)LN的SLE患者相比，LN患者的鏡下血尿、嚴(yán)重血尿 (紅細(xì)胞≥++/HP)和管型陽(yáng)性率顯著升高(P<0.01)。ANCA陽(yáng)性和陰性LN患者比較，鏡下血尿陽(yáng)性率間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但嚴(yán)重血尿(紅細(xì)胞≥++/HP)和管型陽(yáng)性率間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.05)。ANCA陽(yáng)性LN患者的6例管型包括2例紅細(xì)胞管型和4例顆粒管型。

表1 SLE患者的尿蛋白和GFR檢測(cè)結(jié)果

表2 SLE患者的尿沉渣分析結(jié)果

3 討論

SLE相關(guān)的自身抗體有很多，如抗核抗體(antinuclear antibodies,ANA)、ANCA和抗磷脂抗體等，大概約20%的SLE患者血清中可檢出ANCA陽(yáng)性，ANA的陽(yáng)性率則超過(guò)90%，IIF中ANA很容易造成ANCA檢測(cè)的假陽(yáng)性[8]。EUROIMMUN公司的生物薄片使用HEp-2細(xì)胞和猴肝細(xì)胞作為對(duì)照，可以在很大程度上降低ANA可能造成的干擾。本研究中SLE的ANCA總陽(yáng)性率為29.5%(23/78)，與葉荻慶等[7]報(bào)道的27.1%的陽(yáng)性率較為接近。

ANCA檢測(cè)對(duì)于LN的診斷價(jià)值仍存在一定的爭(zhēng)議，Sen等認(rèn)為ANCA陽(yáng)性與SLE的器官損害間沒(méi)有明顯聯(lián)系，而楊玉芹等認(rèn)為血清ANCA檢測(cè)可以作為L(zhǎng)N診斷的參考指標(biāo)[5,8]。本研究發(fā)現(xiàn)，36例LN患者的ANCA陽(yáng)性率為55.6%，顯著高于42例無(wú)LN的SLE患者7.1%的陽(yáng)性率(P<0.01)，支持ANCA作為一種血清標(biāo)記物用于輔助診斷LN。

本研究對(duì)無(wú)LN的SLE患者、ANCA陽(yáng)性LN患者和ANCA陰性LN患者的腎功能指標(biāo)進(jìn)行了比較，結(jié)果顯示，與ANCA陰性組相比，ANCA陽(yáng)性組的GFR降低幅度更大，出現(xiàn)鏡下嚴(yán)重血尿(鏡檢紅細(xì)胞≥++/HP)和管型的比例也更高(P<0.05)。病理上，LN通常表現(xiàn)為系膜內(nèi)(mesangial)、毛細(xì)血管內(nèi)(endocapillary)和膜內(nèi)(membranous)病變3種，其中以急性GFR降低和血尿?yàn)轱@著特征的主要是毛細(xì)血管內(nèi)病變型，而依據(jù)LN分型標(biāo)準(zhǔn)，牽涉到毛細(xì)胞血管內(nèi)病變的主要有ClassⅢ和Ⅳ型[2]。綜上說(shuō)明，ANCA與LN的腎功能損害程度有一定相關(guān)性，同時(shí)ANCA陽(yáng)性可能更易出現(xiàn)在ClassⅢ和Ⅳ型的LN當(dāng)中。

[1]Frutos MA,Praga M,Quereda C,et al.Lupus nephritis:in search of a better future[J].Nefrologia,2012,32(2):136-138.

[2]Weening JJ,D'Agati VD,Schwartz MM,et al.The classification of glomerulonephritis in systemic lupus erythematosus revisited [J].J Am Soc Nephrol,2004,15(2):241-250.

[3]Nasr SH,D'Agati VD,Park HR,et al.Necrotizing and crescentic lupus nephritis with antineutrophil cytoplasmic antibody seropositivity[J].Clin J Am Soc Nephrol,2008,3(3):682-690.

[4]Nasr SH,Said SM,Valeri AM,et al.Membranous glomerulonephritis with ANCA-associated necrotizing and crescentic glomerulonephritis[J].Clin J Am Soc Nephrol,2009,4(2):299-308.

[5]楊玉芹,張迎梅,王 兵.狼瘡性腎炎患者抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體的檢測(cè)及臨床意義[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2009,24(5):130-131.

[6]Petri M.Systemic Lupus International Collaborating Clinic(SLICC),SLICC Revision of the ACR Classification Criteria for SLE[J].Arthritis Rheum 2009,60(Suppl 10):895.

[7]葉荻慶,向 瑜,張莉萍.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體的臨床相關(guān)性及其意義[J].重慶醫(yī)學(xué),2011,40(3):246-247.

[8]Sen D，Isenberg DA.Antineutrophil cytoplasmic autoantibodies in systemic lupus erythematosus[J].Lupus,2003,12(9):651-658.

R446.62，R593.24+2

A

1674-1129(2012)05-0439-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2012.05.007

宜春市科技局計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):JXYC2012KSA013)

張小蓮,女,1977年生,主要從事臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)研究。