盧 瓏,沈 麗,王雪妮,王元元,劉 芳,孫士真,張德芹
紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠鎮(zhèn)痛作用比較研究*
盧 瓏,沈 麗,王雪妮,王元元,劉 芳,孫士真,張德芹
[目的]觀察紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠外用的鎮(zhèn)痛作用,為指導(dǎo)臨床合理用藥和開發(fā)新藥提供科學(xué)依據(jù)。[方法]采用小鼠醋酸扭體法、小鼠熱板法和大鼠熱輻射法比較3種藥物外用的鎮(zhèn)痛效果。[結(jié)果]紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠均能延長熱板法小鼠舔足時(shí)間。顯著減少醋酸所致的小鼠扭體次數(shù),鎮(zhèn)痛率可達(dá)30%以上,顯著提高大鼠痛閾值。[結(jié)論]紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠均具有明顯的鎮(zhèn)痛作用,其中以昆明山海棠效果最佳。
紫荊皮;紫金皮;昆明山海棠;鎮(zhèn)痛
紫荊皮,為豆科植物紫荊(Cercis chinensis Bunge.)的干燥樹皮,首載于《日華子本草》,具有清熱解毒、活血通經(jīng)、消腫止痛之功,為中醫(yī)外科的常用藥。紫金皮,為木蘭科植物南五味子(Kadsura longipedulata Finet et Gagn.)的干燥根皮,首載于《本草綱目拾遺》,具有活血行氣、消腫解毒之功,為中醫(yī)骨傷科常用藥,《衛(wèi)生部部頒藥品標(biāo)準(zhǔn)》、《山東藥品標(biāo)準(zhǔn)》、《內(nèi)蒙藥品標(biāo)準(zhǔn)》均載其為紫荊皮正品。昆明山海棠,為衛(wèi)矛科昆明山海棠(Tripterygium hypoglaucum Hutch.)的干燥根皮,《滇南本草》載其為紫荊皮,具有祛風(fēng)除濕、祛瘀通絡(luò)、續(xù)筋接骨之功,為中醫(yī)風(fēng)濕痹痛、跌打損傷的常用藥,主產(chǎn)于云南,在云南做紫荊皮使用。
由于歷史及各地用藥習(xí)慣等原因,歷代本草文獻(xiàn)對紫荊皮的原植物記載各有不同,使得全國各地使用的紫荊皮品種標(biāo)準(zhǔn)不一致。本文以紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠3種不同來源的藥材為研究對象,對3藥的鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究,以期為科學(xué)、合理地利用中藥紫荊皮資源提供參考依據(jù)。
1.1 儀器與試劑 HSS-1(B)恒溫浴槽(成都儀器廠);YLS-12A鼠尾光照測痛儀(濟(jì)南益延科技發(fā)展有限公司);冰醋酸(天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司,批號:20110917)。
1.2 藥物 紫荊皮提取物凝膏、紫金皮提取物凝膏、昆明山海棠提取物凝膏(由天津中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院中藥制劑學(xué)實(shí)驗(yàn)室按一定的提取工藝制成,生產(chǎn)批號:20111114),扶他林乳膏(北京諾華制藥有限公司,批號:X2355)。
1.3 動物 健康Wistar大鼠90只,雄性,體質(zhì)量(170±10)g,由北京華阜康生物科技股份有限公司提供,動物合格證號為 SCXK(京)2009-0004(No:0240854),昆明種雌性小鼠 90 只,體質(zhì)量(20±2)g。
2.1 小鼠熱板法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn) 用HSS-1(B)恒溫浴槽溫度為(55±0.5)℃,記錄小鼠足底接觸熱板至出現(xiàn)舔后足的時(shí)間,即熱板反應(yīng)潛伏期做為痛閾指標(biāo),選用預(yù)篩基礎(chǔ)痛閾值在5~30秒的小鼠90只,按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分成9組,即正常組、基質(zhì)組、扶他林對照組、紫荊皮凝膏組、紫金皮凝膏組,昆明山海棠凝膏組,每組10只。小鼠背部剃毛,連續(xù)給藥3 d,末次給藥后0.5、1、1.5、2 h測痛閾值。觀察小鼠舔足后的潛伏期,記錄各組小鼠舔足時(shí)間,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理[1-2]。
2.2 小鼠扭體法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn) 取昆明小鼠90只,按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分成9組,每組10只。分組及給藥劑量同2.1,各組每日涂藥1次,連續(xù)7 d。末次給藥1 h后,腹腔注射0.6%醋酸溶液0.02 mL/g,觀察小鼠扭體反應(yīng)(腹部內(nèi)凹、軀干與后肢伸張、臀部高起等[3]),記錄出現(xiàn)扭體反應(yīng)的時(shí)間及15 min內(nèi)小鼠扭體次數(shù),進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
2.3 大鼠熱輻射法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn) 取體質(zhì)量(170±10)g雄性Wistar大鼠90只,用熱輻射法測定大鼠基礎(chǔ)痛閾值[3-4],選擇在38W功率照射下,痛閾值在3~6秒的Wistar大鼠90只,照射時(shí)間最長不超過16秒,按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)區(qū)組法分成9組(同2.1),每組 10只。末次給藥0.5、1、2、3、4 h后,將大鼠放在鼠尾光照測痛儀的測定臺上,待動物安靜后測定大鼠痛閾值,每只大鼠測定2次,取其平均值作為給藥后痛閾值,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
2.4 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,組間比較采用單因方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3.1 對小鼠熱板法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)影響 見表1。
表1 紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠用熱板法測定對小鼠鎮(zhèn)痛的影響(n=10,±s) 秒
表1 紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠用熱板法測定對小鼠鎮(zhèn)痛的影響(n=10,±s) 秒
注:與基質(zhì)組比較,**P<0.01。
給藥后0.5 h 1 h 1.5 h 2 h正常組 - 19.63±4.340 20.00±3.295 18.13±3.227 16.13±2.416 17.30±3.368基質(zhì)組 7.80 21.25±4.559 17.88±5.027 17.25±3.059 19.13±4.155 17.88±7.972扶他林對照組 0.67 21.50±4.309 19.63±3.021 20.88±2.949 27.00±5.707**17.50±2.828紫荊皮凝膏組 7.80 21.00±4.190 23.63±7.249 33.13±5.831 27.75±3.701 26.88±4.838 1.95 21.38±4.138 24.25±4.301 23.00±3.162 25.88±5.502 22.88±3.420紫金皮凝膏組 7.80 21.13±4.062 21.63±5.344 22.75±14.942 37.25±9.603**21.38±14.147 1.95 21.38±4.504 24.00±5.043 25.50±6.188 26.75±6.621**23.88±5.249昆明山海棠凝膏組 7.80 21.25±3.703 19.88±2.800 24.50±4.652 22.38±9.067**20.38±4.138 1.95 21.50±4.565 18.25±2.605 22.50±3.117**22.63±4.590**16.38±4.970組別 劑量(g/kg) 給藥前
由表1可見,相比于基質(zhì)組,給藥后0.5、1、1.5 h給藥組的痛閾值均有提高,給藥后2 h后除扶他林和昆明山海棠低劑量組痛閾值沒有提高外,其余各組均有提高。其中給藥1 h后昆明山海棠1.95 g/kg劑量組小鼠的舔足時(shí)間顯著延長,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),給藥1.5 h后扶他林組、紫金皮劑量組、昆明山海棠劑量組小鼠的舔足時(shí)間顯著延長,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
3.2 對小鼠醋酸扭體實(shí)驗(yàn)影響 見表2。
表2 紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠對冰醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響(n=10,±s)
表2 紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠對冰醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響(n=10,±s)
注:與基質(zhì)組比較,**P<0.01。
抑制率(%)基質(zhì)組 7.80 4.20±1.21 37.50± 7.31 -組別 劑量(g/kg)潛伏時(shí)間(min)扭體次數(shù)(次)扶他林對照組 0.67 5.83±1.09** 15.10±5.69** 59.73紫荊皮凝膏組 7.80 5.21±0.53 24.90±8.39** 33.60 1.95 4.58±0.47 21.80± 4.95** 41.87紫金皮凝膏組 7.80 5.85±1.81** 20.40±10.95** 45.60 1.95 4.71±0.65 18.50± 9.40** 50.67昆明山海棠凝膏組 7.80 3.69±1.14 21.40±13.71** 42.93 1.95 4.58±0.72 21.10±12.86** 43.73
由表2可見,與模型組相比,扶他林對照組和紫金皮高劑量組的潛伏時(shí)間明顯延長,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與基質(zhì)組相比,扶他林對照組、紫荊皮凝膏組、紫金皮凝膏組、昆明山海棠凝膏組的扭體次數(shù)明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
3.3 對大鼠熱輻射實(shí)驗(yàn)影響 見表3。
如表3可見,與基質(zhì)組相比,給藥后4 h之內(nèi)扶他林和昆明山海棠組痛閾值均顯著提高,其中昆明山海棠 5.4 g/kg劑量組在 0.5、2、3、4 h差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),昆明山海棠1.35 g/kg劑量組在0.5、2、3 h 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);紫金皮、紫荊皮在給藥后2 h之內(nèi)痛閾值提高,其中紫金皮5.4 g/kg劑量組在0.5 h和1 h差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),2 h差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),紫荊皮5.4 g/kg劑量組在0.5 h差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),2 h差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
表3 紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠對熱輻射法大鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(n=10,±s) 秒
表3 紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠對熱輻射法大鼠鎮(zhèn)痛作用的影響(n=10,±s) 秒
注:與基質(zhì)組比較,*P<0.05,**P<0.01。
組別 劑量(g/kg) 基礎(chǔ)閾值 給藥后0.5 h 1 h 2 h 3 h 4 h正常組 - 4.15±0.61 4.44±0.69 4.18±0.53 3.93±0.41 4.01±0.35 4.10±0.35基質(zhì)組 5.08 4.07±0.57 4.44±0.34 3.97±0.39 3.84±0.45 3.83±0.35 3.89±0.42扶他林對照組 1.00 4.13±0.57 5.08±0.75* 5.00±0.69** 4.22±0.57* 4.20±0.34 4.29±0.54*紫荊皮凝膏組 5.40 4.13±0.50 5.25±0.34** 4.39±0.22 4.21±0.28* 3.84±0.40 3.66±0.33 1.35 4.10±0.53 4.72±0.24 4.24±0.42 4.11±0.21 3.72±0.39 3.47±0.36紫金皮凝膏組 5.40 4.10±0.53 5.50±0.55** 4.70±0.58** 4.31±0.33* 4.16±0.71 3.80±0.34 1.35 4.10±0.52 4.84±0.35 4.29±0.37 4.03±0.31 3.58±0.47 3.32±0.32昆明山海棠凝膏組 5.40 4.07±0.52 6.04±0.90** 4.63±0.68* 4.65±0.39** 4.45±0.43** 4.43±0.36**1.35 4.16±0.56 5.00±0.68* 4.41±0.88 4.31±0.60* 4.37±0.60* 4.25±0.73
紫荊皮品種來源復(fù)雜,紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠3種不同來源的藥材均有被用作紫荊皮的記載,以往文獻(xiàn)學(xué)者們多從本草文獻(xiàn)、性狀鑒別、市場調(diào)研等方面對紫荊皮及其習(xí)用品進(jìn)行考察辨析[5-7]。但由于現(xiàn)行的紫荊皮藥材標(biāo)準(zhǔn)不一致,使人們在應(yīng)用本草文獻(xiàn)所記載的含有紫荊皮的古方時(shí),莫衷一是。本研究采用小鼠熱板法、醋酸扭體法和大鼠熱輻射法對紫荊皮、紫金皮、昆明山海棠進(jìn)行鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)觀察,結(jié)果表明,在止痛作用方面,昆明山海棠、紫金皮、紫荊皮對物理和化學(xué)刺激產(chǎn)生的疼痛具有較好的鎮(zhèn)痛作用,其中以昆明山海棠的鎮(zhèn)痛效果最佳。為臨床選用不同來源的紫荊皮提供了參考依據(jù),以便科學(xué)、合理地利用不同中藥紫荊皮資源。
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Comparative study on analgesic effect of Kadsura Root-bark,glaucousback threewingnut root-bark and Tripterygium hypoglancum
LU Long,SHEN Li,WANG Xue-ni,WANG Yuan-yuan,LIU Fang,SUN Shi-zhen,ZHANG De-qin
(The TCM Research Institute,Tianjin University of TCM,Tianjin 300193,China)
[Objective]To comparatively study the analgesic effects of Kadsura Root-bark,glaucousback threewingnut root-bark and Tripterygium hypoglancum for providing some scientific evidences to guide the rational use of drug clinically and develop new drugs.[Methods]Using body torsion method induced by acetic acid in mice,hot plate method,rats thermal radiation method the analgesic effect by external use of these three drugs were compared.[Results]Kadsura Root-bark,glaucousback threewingnut root-bark and Tripterygium hypoglancum could extend the time of licking foot of mice on hot plate;significantly reduced the number of body torsion caused by acetic acid.The analgesic rate was above 30%and the pain threshold value was improved in these rats.[Conclusion]Kadsura Root-bark,glaucousback threewingnut root-bark and Tripterygium hypoglancum have a obvious effect of analgesia,the effect of ripterygium hypoglancum is the best.
Kadsura Root-bark;glaucousback threewingnut root-bark;Tripterygium hypoglancum;analgesia
R285
A
1673-9043(2012)03-0163-03
天津市高校雙五科技計(jì)劃基金項(xiàng)目(SW20080007)。
300193 天津中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院
盧 瓏(1983-),男,碩士研究生,主要研究專業(yè)為中藥學(xué)。
*通訊作者:張德芹。
2012-03-15)