國產(chǎn)細(xì)菌鑒定藥敏分析儀對臨床常見細(xì)菌鑒定能力的研究

姚 慶，楊瓊?cè)荩Y 博（四川省遂寧市第三人民醫(yī)院 629000）

臨床上對細(xì)菌鑒定和藥敏分析的要求也越來越高，目前對細(xì)菌鑒定的方法和技術(shù)很多，但手工操作過于繁瑣［1］。隨著臨床微生物的發(fā)展，國內(nèi)外相繼出現(xiàn)了一些商品化的鑒定系統(tǒng)，雖然國外的儀器各方面相對比較成熟，但由于價格昂貴，不適用于標(biāo)本量較少的基層醫(yī)院［2］。本文選用了國內(nèi)比較有代表性的HX－21的國產(chǎn)細(xì)菌鑒定藥敏分析儀，與法國梅里埃公司Vitek－32全自動微生物分析儀對常見的50例菌株的鑒定結(jié)果進(jìn)行分析比較，并對其影響因素作簡要探討，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 由四川省人民醫(yī)院提供的50株微生物標(biāo)本，包括腸桿菌科16株，非發(fā)酵菌9株，葡萄球菌9株，腸／鏈球菌6株，酵母樣真菌5株，弧菌科細(xì)菌3株，流感嗜血桿菌2株。

1.2 質(zhì)控菌株 大腸埃希菌（ATCC25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、銅綠假單胞菌（ATCC27853）、均購自四川省臨床檢驗(yàn)中心。

1.3 儀器與試劑 HX－21細(xì)菌鑒定藥敏分析儀及其配套使用的各種鑒定試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)0.5麥?zhǔn)媳葷峁堋⒀a(bǔ)充試劑等由合肥恒星科技開發(fā)公司提供。Vitek－32全自動微生物分析儀及其配套使用的各種鑒定卡由法國梅里埃公司提供。Vitek－32測定結(jié)果由四川省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物室提供（已通過ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可）。

1.4 方法

1.4.1 細(xì)菌鑒別 按《全國檢驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程》要求接種標(biāo)本，取純培養(yǎng)的待鑒定菌株，根據(jù)菌落、菌體形態(tài)、革蘭染色結(jié)果、氧化酶、觸酶等試驗(yàn)選用相應(yīng)的板條［3］。

1.4.2 菌液制備和接種菌液 無菌挑取分離純培養(yǎng)教的待鑒定菌株，嚴(yán)格按鑒定儀的說明書調(diào)菌液并與標(biāo)準(zhǔn)比濁管比較。最后向鑒定板每孔加入菌液進(jìn)行培養(yǎng)。同時對板條進(jìn)行質(zhì)控。質(zhì)控菌株：大腸埃希菌（ATCC25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、銅綠假單胞菌（ATCC27853）。

1.4.3 結(jié)果判讀 HX－21細(xì)菌鑒定藥敏儀按操作說明書人工判讀。Vitek－32全自動微生物分析儀的鑒定結(jié)果自動判讀。

1.4.4 操作方法 以Vitek－32測定結(jié)果作為比較方法，因其已通過ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可。以本院的HX－21細(xì)菌鑒定藥敏儀作為試驗(yàn)方法。

2 結(jié) 果

2.1 質(zhì)控菌株 大腸埃希菌（ATCC25922）、金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、銅綠假單胞菌經(jīng) HX－21 與 Vitek－32均鑒 定正確。

2.2 HX－21與Vitek－32對50株細(xì)菌的鑒定結(jié)果 鑒定結(jié)果完全符合（菌種一致）的48株，占96.00%，菌屬符合率為99.99%，部分符合（菌屬一致）的2株，占4.00%，見表1。

表1 HX－21與Vitek－32對細(xì)菌鑒定結(jié)果不符合的菌株

3 討 論

隨著檢驗(yàn)技術(shù)的飛速發(fā)展，微生物檢驗(yàn)也得到了迅速的發(fā)展，以前長期手工操作不僅是鑒定時間長，而且比較繁瑣，滿足不了臨床對細(xì)菌檢驗(yàn)的要求。本文選用HX－21細(xì)菌鑒定藥敏儀是以細(xì)菌的各種特性同等重要為基礎(chǔ)，經(jīng)每種生化反應(yīng)特性在不同細(xì)菌中出現(xiàn)的概率進(jìn)行全面分析，通過比較運(yùn)用數(shù)值分類法，識別待檢菌的種、型及亞型。根據(jù)結(jié)果可以看出，兩種儀器比較鑒定結(jié)果完全符合（菌種一致）的48株占96.0%，菌屬符合率為99.99%，部分符合（菌屬一致）的2株占4%。

從以上結(jié)果分析，HX－21細(xì)菌鑒定藥敏儀對非發(fā)酵菌、葡萄球菌、酵母樣真菌的鑒定完全符合，對腸桿菌的鑒定和弧菌科細(xì)菌還分別有1例雖然鑒定到屬，但還沒鑒定到種，分析其原因可能是在鑒定過程中有兩項(xiàng)生化反應(yīng)出現(xiàn)弱陽性的不典型顯色，還有部分鑒定性試驗(yàn)板條上沒有，或者是有些細(xì)菌有可能經(jīng)過幾次轉(zhuǎn)種后，失去了原來典型的生化特性［4］。肉眼判讀與機(jī)器也可能存在一定差異。在工作中還發(fā)現(xiàn)在有些細(xì)菌鑒定時，還需要補(bǔ)做某些鑒定試驗(yàn)，耗費(fèi)時間與試劑，不能一步到位，光靠氧化酶試驗(yàn)結(jié)果就選腸桿菌科或非發(fā)酵菌板條有一定的局限性，比如氧化酶陽性弧菌科細(xì)菌，氧化酶陰性的鮑曼不動桿菌，這點(diǎn)還需要我國專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)一步改進(jìn)工作。相信在不久的將來，微生物檢驗(yàn)技術(shù)將愈加完善，對臨床用藥的指導(dǎo)將日益顯現(xiàn)出來［5］。

總結(jié)這次比較試驗(yàn)和平時參加四川省室間質(zhì)評的回報，要做好HX－21細(xì)菌鑒定藥敏儀的臨床檢驗(yàn)，還需要從事這項(xiàng)工作的技術(shù)人員要有豐富的微生物基礎(chǔ)知識和全面的技術(shù)，要有一定的從業(yè)經(jīng)驗(yàn)，以免出現(xiàn)鑒定的方向性錯誤。在臨床工作中，為提高鑒定率和達(dá)到快捷、簡便，價格相對低廉的HX－21國產(chǎn)細(xì)菌鑒定藥敏儀成為中小型醫(yī)院不錯的選擇，測定結(jié)果的誤差臨床均可以接受。完全能夠滿足中小型醫(yī)院對常見細(xì)菌的鑒定，并配合藥敏試驗(yàn)為臨床合理使用抗生素提供依據(jù)。對減少耐藥細(xì)菌傳播、提高醫(yī)療質(zhì)量、引導(dǎo)新型抗生素的研究與開發(fā)等有重要意義［6-7］。

［1］張莉，吳炯，郭瑋，等.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)檢測系統(tǒng)應(yīng)用前的性能評價［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，11（21）：561－562.

［2］毛彩萍，周國明.兩種儀器在微生物室間質(zhì)評中的應(yīng)用與比較［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2006，16（10）：1195－1197.

［3］馮仁豐.臨床檢驗(yàn)管理技術(shù)基礎(chǔ)［M］.上海：科學(xué)文獻(xiàn)出版社，2003：5－136.

［4］龐超，劉瑋，郭愛芹，等.XK型微生物鑒定儀的評價［J］.生命科學(xué)儀器，2009，7（3）：50－51.

［5］胡靜，姚云清.2005～2007年醫(yī)院病原菌分布和耐藥性分析［J］.重慶醫(yī)學(xué)，2009，38（7）：811－814.

［6］方毅，龐立峰.老年住院患者臨床分離細(xì)菌的分布及耐藥性［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，26（6）：398－401.

［7］吳松武，陳珮瑤，范喜城，等.2010年某院分離細(xì)菌的分布及其耐藥性分析［J］.中國實(shí)用醫(yī)藥，2012，7（3）：150－151.