保健食品榮骨膠囊中總糖含量的測(cè)定

高 陽(yáng)，潘 志，解朝霞，邸 平，楊獻(xiàn)玲

（1.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)研發(fā)中心，吉林 長(zhǎng)春 130117；2.長(zhǎng)春市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 長(zhǎng)春 130021；3.白城市中醫(yī)院，吉林 白城 137000；4.吉林省食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 長(zhǎng)春 130021）

榮骨膠囊是以鹿茸為原料加工而成的膠囊制劑。鹿茸為雄鹿未骨化密生茸毛的幼角，是我國(guó)傳統(tǒng)名貴中藥，具有壯腎陽(yáng)，益精血，強(qiáng)筋骨，調(diào)沖任，托瘡毒等作用。已有的研究［1-3］表明，鹿茸中含有蛋白質(zhì)、多肽、黏多糖、多胺、磷脂等類成分，其中的膠原蛋白具有治療骨質(zhì)疏松的作用［4-8］。榮骨膠囊主要成分為膠原蛋白，膠原蛋白是以黏多糖作為側(cè)鏈的蛋白質(zhì)之總稱。而作為側(cè)鏈的黏多糖含有大量的氨基己糖。因此，筆者選用苯酚硫酸法［9］測(cè)定總糖含量作為質(zhì)量控制指標(biāo)之一。

1 實(shí)驗(yàn)材料

752紫外光柵分光光度計(jì)；對(duì)照品葡萄糖（批號(hào)50-99-7）購(gòu)自Sigma公司，對(duì)照品純度均為99％。所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取105℃干燥至恒重的葡萄糖對(duì)照品28.5mg，置250mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL中含葡萄糖114μg）。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密吸取對(duì)照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，分別置具塞試管中，各加水至1.0mL，再加5％苯酚水溶液1.0mL，搖勻，快速加入硫酸5.0mL，搖勻，放至室溫，以0管為空白，照分光光度法（《中國(guó)藥典》2005版附錄VA），在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以葡萄糖μg數(shù)對(duì)應(yīng)的吸收度，計(jì)算回歸方程。

2.3 測(cè)定方法 精密稱取供試品0.3g，置100mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，作為供試品溶液，精密吸取供試品溶液0.4、0.8mL加水至1mL，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下自“再加5％苯酚溶液1.0mL”起，依法操作，測(cè)定吸收度，由回歸方程計(jì)算糖含量。

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 線性關(guān)系考察 按照含量測(cè)定的方法制訂了標(biāo)準(zhǔn)曲線，葡萄糖濃度114μg/mL，見表1，圖1。

圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

表1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)

結(jié)果可知，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r=0.996 1，線性范圍為22.8～114μg。

2.4.2 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取樣品按正文含量測(cè)定方法顯色后，每隔30min測(cè)其吸收度，吸收度在顯色后2.5h內(nèi)穩(wěn)定，結(jié)果見表2。

表2 穩(wěn)定性考察結(jié)果

2.4.3 精密度試驗(yàn) 取樣品定容后，連續(xù)測(cè)定5次，計(jì)算其RSD值，結(jié)果見表3。

表3 精密度考察結(jié)果

結(jié)果表明，所用儀器具良好精密性。

2.4.4 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取樣品5分，按含量測(cè)定項(xiàng)下方法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表4。

表4 重現(xiàn)性考察結(jié)果

結(jié)果表明，本法重現(xiàn)性良好。

2.4.5 回收率試驗(yàn) 精密稱取已知總糖含量為4.72％樣品，配成0.1mg/mL，精密吸取5份，每份0.5mL，分別加入對(duì)照品溶液（濃度：100μg/mL）0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL，按含量測(cè)定項(xiàng)下方法操作，以測(cè)得的含量減去樣品中總糖含量，除以已知的對(duì)照品加入量，得回收率，結(jié)果見表5。

表5 回收率試驗(yàn)結(jié)果 μg

結(jié)果表明，本法平均回收率為98.82％，RSD=1.75％，回收率良好，準(zhǔn)確度較高。

3 結(jié)果與討論

3.1 結(jié)果 依照含量測(cè)定方法對(duì)4批樣品進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果見表6。

表6 4批樣品總糖含量測(cè)定結(jié)果

3.2 討論 鹿茸中的多糖類成分是鹿茸中比較大量和特殊的成分，它們做為組織和細(xì)胞的重要組成成分和細(xì)胞間信息傳遞的物質(zhì)，已經(jīng)顯示了多方面的藥理作用。筆者曾對(duì)這些成分進(jìn)行過(guò)研究，發(fā)現(xiàn)它們?cè)谥委熇夏臧V呆（動(dòng)物模型）、貧血和骨質(zhì)疏松等方面都具有一定的活性。這與鹿茸的強(qiáng)筋健骨、補(bǔ)益氣血的傳統(tǒng)作用相一致。此含量測(cè)定方法對(duì)榮骨膠囊制劑含量可控，操作簡(jiǎn)便，適合作為其生產(chǎn)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

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