虎杖根莖中蒽醌類(lèi)成分的體外抗氧化活性

王桂芹,鄭玉華,錢(qián)進(jìn)芳

衰老的自由基學(xué)說(shuō)是 1956年提出的,此后,人們逐步認(rèn)識(shí)到人體的衰老以及許多疾病都與體內(nèi)氧化過(guò)程中產(chǎn)生的自由基有關(guān)[1]。過(guò)剩的自由基可作用于血液、細(xì)胞、組織等,產(chǎn)生脂質(zhì)過(guò)氧化物,這些過(guò)氧化物可以使細(xì)胞膜喪失功能,造成細(xì)胞活力下降、組織器官功能衰退。細(xì)胞內(nèi)自由基產(chǎn)生的損傷可以導(dǎo)致癌癥、心血管疾病和免疫系統(tǒng)衰退等多種退變性疾病[2]。因此,補(bǔ)充外源性抗氧化物對(duì)人體健康非常重要,其中以天然抗氧化物為佳[3]。

虎杖 (ReynoutriajaponicaHoutt.)隸屬于蓼科(Polygonaceae)虎杖屬 (ReynoutriaHoutt.),為多年生草本植物,其根莖可藥用,具有活血、散瘀、通經(jīng)及鎮(zhèn)咳等功效[4]?；⒄润w內(nèi)含有多種生物活性物質(zhì),蒽醌類(lèi)化合物是其主要成分之一[5]。目前,關(guān)于虎杖的研究多集中于總醌和白藜蘆醇的提取及分布規(guī)律方面[6],有關(guān)虎杖體內(nèi)蒽醌類(lèi)成分抗氧化活性方面的研究鮮見(jiàn)報(bào)道。

鑒于此,作者通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)體系對(duì)虎杖根莖中蒽醌類(lèi)成分的抗氧化活性進(jìn)行了研究,以期為虎杖資源的深度開(kāi)發(fā)和利用提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

供試新鮮虎杖根莖取自安徽科技學(xué)院藥用植物園；所用小白鼠 (MusmusculusA lbus)由安徽科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院提供。

所用儀器有：GL-20G-11型高速冷凍離心機(jī)(上海安亭儀器廠生產(chǎn))、FA 2004型電子天平 (上海天平儀器廠生產(chǎn))和 7230G可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海分析儀器廠生產(chǎn))。

主要試劑有：1,1-二苯基苦基苯肼 (DPPH·) (Sigm a公司產(chǎn)品)、菲咯嗪 (Ferrozine)(Fluka公司產(chǎn)品)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-px)試劑盒及丙二醛 (MDA)試劑盒(南京建成生物工程研究所生產(chǎn))、1,8-二羥基蒽醌 (批號(hào)：0829-9702,由中國(guó)藥品生物制品鑒定所提供),其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 方法

1.2.1 蒽醌類(lèi)成分的提取、純化和含量測(cè)定方法

1.2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 準(zhǔn)確稱(chēng)量 1,8-二羥基蒽醌 5.00m g,用乙醚溶解并定容至50mL,配成質(zhì)量濃度為 0.1m g·mL-1的對(duì)照品溶液。精密吸取對(duì)照品溶液 0.00(CK)、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00和 1.20mL,于 60℃水浴中蒸除乙醚,用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5％乙酸鎂 -甲醇溶液溶解并定容至 10 mL。搖勻,于波長(zhǎng)510 nm處測(cè)定溶液的吸光值。以對(duì)照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)x、吸光值為縱坐標(biāo)y繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.1.2 蒽醌類(lèi)成分的提取與純化 將虎杖的新鮮根莖用自來(lái)水洗凈、切片,于55℃電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中干燥至恒質(zhì)量,粉碎并過(guò) 40目篩。共取 10 g干粉,按照 1 g干粉加45mL的比例加入體積分?jǐn)?shù)80％乙醇,混合后置于 40℃條件下超聲提取 30 m in, 4 500 r·m in-1離心 10 m in,上清液即為蒽醌類(lèi)成分的粗提液。

采用 D 101大孔吸附樹(shù)脂對(duì)粗提液進(jìn)行純化。參照文獻(xiàn)[7]的方法對(duì)大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行預(yù)處理,然后加入 15倍樹(shù)脂床體積的粗提液,參照文獻(xiàn)[8]的方法洗脫,洗脫液流速 2mL·m in-1。此過(guò)程中使用0.01mo l·L-1NaOH溶液進(jìn)行跟蹤檢測(cè),收集所有活性洗脫液,混合均勻后作為待測(cè)液。按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定方法測(cè)定待測(cè)液的吸光值并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的回歸方程計(jì)算出待測(cè)液中蒽醌類(lèi)成分的質(zhì)量濃度。

1.2.2 體外抗氧化活性測(cè)定方法

1.2.2.1 肝組織勻漿中 GSH-px活力的測(cè)定 按照文獻(xiàn)[9]的方法制備小白鼠肝組織勻漿,取上清液, -20℃保存、備用。分別取肝組織勻漿上清液 280μL,各加入質(zhì)量濃度 10、20、30和 40μg·mL-1待測(cè)液 40μL(用蒸餾水配制),陽(yáng)性對(duì)照則各加入質(zhì)量濃度 10、20、30和 40μg·mL-1VC溶液 40μL。參照文獻(xiàn)[9]的實(shí)驗(yàn)流程及試劑盒說(shuō)明書(shū)上的操作方法及計(jì)算公式測(cè)定和計(jì)算 GSH-px活力。實(shí)驗(yàn)重復(fù) 3次。

1.2.2.2 H2O2誘導(dǎo)的MDA含量的測(cè)定 分別取小白鼠肝組織勻漿上清液 1.2 mL,各加入質(zhì)量濃度為10、20、30和 40μg·mL-1的待測(cè)液 0.2mL(用雙蒸水配制),陽(yáng)性對(duì)照則各加入質(zhì)量濃度 10、20、30和40μg·mL-1的VC溶液 0.2mL,參照文獻(xiàn)[9]的實(shí)驗(yàn)流程及試劑盒說(shuō)明書(shū)上的操作方法和計(jì)算公式測(cè)定并計(jì)算MDA含量。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。

1.2.2.3 對(duì) H2O2誘導(dǎo)的紅細(xì)胞 (RBC)氧化溶血抑制率的測(cè)定 按照文獻(xiàn)[10]的方法制備體積分?jǐn)?shù)為0.5％的紅細(xì)胞懸液。取 0.5％紅細(xì)胞懸液 1 mL和100mmo l·L-1H2O2溶液 0.1m L,分別加入 0.05mL質(zhì)量濃度 10、20、30和 40μg·mL-1的待測(cè)液 (用生理鹽水配制),陽(yáng)性對(duì)照則分別加入 0.05 mL質(zhì)量濃度 10、20、30和 40μg·mL-1的 VC溶液,陰性對(duì)照僅加入 0.05mL生理鹽水,參照文獻(xiàn)[10]的實(shí)驗(yàn)流程進(jìn)行操作并測(cè)定溶液在波長(zhǎng) 415 nm處的吸光值,計(jì)算溶血抑制率。抑制率 =〔(A0-A)/A0〕×100％,式中：A0為陰性對(duì)照的吸光值；A為待測(cè)液或陽(yáng)性對(duì)照的吸光值。實(shí)驗(yàn)重復(fù) 3次。

1.2.2.4 對(duì) DPPH·自由基清除能力的測(cè)定 取 1mL 0.2mmo l·L-1DPPH·,分別加入 0.1mL質(zhì)量濃度 2、4、6和 8μg·mL-1待測(cè)液(用體積分?jǐn)?shù) 70％乙醇配制),陽(yáng)性對(duì)照則分別加入 2、4、6和 8μg·mL-1的VC溶液 0.1m L,以 0.1m L體積分?jǐn)?shù) 70％乙醇為陰性對(duì)照,參照文獻(xiàn)[11]的實(shí)驗(yàn)流程操作并于波長(zhǎng)517 nm處測(cè)定吸光值,根據(jù)吸光值計(jì)算 DPPH·自由基的清除率。清除率 =〔(A0-A)/A0〕×100％,式中：A0為陰性對(duì)照的吸光值；A為待測(cè)液或陽(yáng)性對(duì)照的吸光值。實(shí)驗(yàn)重復(fù) 3次。

1.2.2.5 對(duì) Fe3+還原能力的測(cè)定 采用普魯士藍(lán)法[12]進(jìn)行測(cè)定。分別取 1 m L質(zhì)量濃度為 6、8、12和 16μg·mL-1的待測(cè)液 (用體積分?jǐn)?shù) 70％乙醇配制),陽(yáng)性對(duì)照則分別取 1 mL 6、8、12和 16μg· mL-1的VC溶液,參照文獻(xiàn)[12]的實(shí)驗(yàn)流程操作并于波長(zhǎng) 700 nm處測(cè)定溶液的吸光值。實(shí)驗(yàn)重復(fù) 3次。

1.2.2.6 與 Fe2+的螯合能力測(cè)定 采用 Decker等的方法[13]進(jìn)行測(cè)定。在各試管中加入 2 m L質(zhì)量濃度為 5、10、15和 20μg·mL-1的待測(cè)液(用體積分?jǐn)?shù)70％乙醇配制),陽(yáng)性對(duì)照分別加入 2m L 5、10、15和20μg·m L-1的 VC溶液,陰性對(duì)照則加入 2m L體積分?jǐn)?shù) 70％乙醇,參照文獻(xiàn)[13]的實(shí)驗(yàn)流程進(jìn)行操作并于波長(zhǎng) 562 nm處測(cè)定吸光值,根據(jù)吸光值計(jì)算螯合率。螯合率 =〔(A0-A)/A0〕×100％,式中：A0為陰性對(duì)照的吸光值；A為待測(cè)液或陽(yáng)性對(duì)照的吸光值。實(shí)驗(yàn)重復(fù) 3次。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

采用 SPSS軟件進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果和分析

2.1 虎杖根莖中蒽醌類(lèi)成分的含量

測(cè)定結(jié)果顯示：1,8-二羥基蒽醌標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為y=0.930 7x+0.102(R2=0.998 7),根據(jù)該回歸方程計(jì)算得到的虎杖根莖中蒽醌類(lèi)成分粗提物的含量為 55.86m g·g-1,經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂分離純化后其含量為 44.77 m g·g-1。與含蒽醌類(lèi)成分的唐古特大黃 (RheumtanguticumM axim.ex Balf.)、決明 (CassiatoraL.)、蘆薈〔Aloevera(L.)N.L.Burm an var.chinensis(Haw.)Berg.〕等植物相比[14-16],虎杖根莖中蒽醌類(lèi)成分含量較高。方法學(xué)考察結(jié)果顯示：本研究采用的標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定方法精密度良好、重復(fù)性高,在 2 h內(nèi)基本保持穩(wěn)定,適用于虎杖根莖中蒽醌類(lèi)成分的測(cè)定。

2.2 虎杖根莖中蒽醌類(lèi)成分的體外抗氧化活性分析

2.2.1 對(duì) GSH-px活力的增加作用 GSH-px是動(dòng)物體內(nèi)存在的一種含硒的清除自由基和抑制自由基反應(yīng)的酶系,如果機(jī)體內(nèi) GSH-px等酶的含量不足,體內(nèi)就會(huì)產(chǎn)生過(guò)多的羥自由基[17],因此,GSH-px含量是衡量機(jī)體抗氧化能力大小的重要指標(biāo)之一。來(lái)源于虎杖根莖的蒽醌類(lèi)成分對(duì)小白鼠肝組織勻漿中 GSH-px活力的影響結(jié)果見(jiàn)圖 1。

由圖 1可知：與陽(yáng)性對(duì)照(VC)相比,不同質(zhì)量濃度的蒽醌類(lèi)成分均可顯著增強(qiáng)小白鼠肝組織勻漿中GSH-px的活力；在質(zhì)量濃度相同的條件下,蒽醌類(lèi)成分對(duì) GSH-px活力的增強(qiáng)效果均明顯高于VC,且低質(zhì)量濃度 (10μg·m L-1)的蒽醌類(lèi)成分對(duì) GSH-px活力的增強(qiáng)效果已經(jīng)十分明顯；隨質(zhì)量濃度的提高,蒽醌類(lèi)成分和VC各處理組的 GSH-px活力均逐漸升高,但蒽醌類(lèi)成分處理組的 GSH-px活力增加幅度大于VC。當(dāng)質(zhì)量濃度為 40μg·m L-1時(shí),蒽醌類(lèi)成分處理組 GSH-px活力最高,是VC的 3.3倍。

2.2.2 對(duì) H2O2誘導(dǎo)的MDA含量的降低作用 作為氧自由基與生物膜不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的產(chǎn)物,MDA含量的變化可間接反映機(jī)體組織中氧化自由基含量的變化[18],因此,MDA含量的高低能夠反映機(jī)體細(xì)胞受到氧化自由基攻擊的嚴(yán)重程度。虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分對(duì) H2O2誘導(dǎo)的MDA含量的影響結(jié)果見(jiàn)圖2。

由圖 2可知：隨著蒽醌類(lèi)成分質(zhì)量濃度的提高, MDA含量逐漸減少,表明蒽醌類(lèi)成分的抗氧化活性逐漸增強(qiáng),機(jī)體細(xì)胞受到的損傷程度逐漸減小,陽(yáng)性對(duì)照(VC)組的MDA含量也表現(xiàn)出相同的變化趨勢(shì)。在質(zhì)量濃度相同的條件下,VC組的MDA含量均明顯高于相應(yīng)質(zhì)量濃度的蒽醌類(lèi)成分處理組,其中當(dāng)質(zhì)量濃度為 40μg·mL-1時(shí),VC組的MDA含量與蒽醌類(lèi)成分處理組差異最大,是后者的 2.1倍。說(shuō)明虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分對(duì)MDA含量的抑制作用大于VC,也說(shuō)明其抗氧化活性高于VC。

圖1 虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分和 VC對(duì)肝組織勻漿中 GSH-px活力的影響F ig.1 Effectof an thraqu inones from rh izom e of Reynou tria japon ica Hou tt.and VC on GSH-px activ ity in liver tissue hom ogena te

圖2 虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分和 VC對(duì) H2O 2誘導(dǎo)的M DA含量的影響F ig.2 Effectof an thraqu inones from rh izom e of Reynou tria japon ica Hou tt.and VC on M DA con ten t induced by H2O 2

2.2.3 對(duì) H2O2誘導(dǎo)的紅細(xì)胞 (RBC)氧化溶血的抑制作用 過(guò)多的氧自由基會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞膜破裂,使其內(nèi)的血紅蛋白釋放出來(lái),從而損傷紅細(xì)胞,引起某些疾病或衰老[19]?；⒄雀o中的蒽醌類(lèi)成分對(duì) H2O2誘導(dǎo)的紅細(xì)胞(RBC)氧化溶血的影響見(jiàn)圖 3。

由圖 3可知：與陽(yáng)性對(duì)照 (VC)組相比,虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分能明顯抑制 H2O2誘導(dǎo)的紅細(xì)胞氧化溶血,且這種作用呈明顯的量效關(guān)系,即隨質(zhì)量濃度的提高,蒽醌類(lèi)成分對(duì) H2O2誘導(dǎo)的紅細(xì)胞氧化溶血的抑制率均逐漸增加。隨質(zhì)量濃度的提高,VC組的抑制率也逐漸增加,但增加幅度明顯小于蒽醌類(lèi)成分；且在質(zhì)量濃度相同的條件下,蒽醌類(lèi)成分對(duì) H2O2誘導(dǎo)的紅細(xì)胞氧化溶血的抑制效果明顯優(yōu)于 VC,當(dāng)質(zhì)量濃度為 40μg·m L-1時(shí),蒽醌類(lèi)成分處理組的抑制率最高,是 VC的 1.8倍。說(shuō)明虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分對(duì) H2O2導(dǎo)致的紅細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷有較明顯的保護(hù)作用,且這種保護(hù)效應(yīng)大于VC。

2.2.4 對(duì)DPPH·自由基的清除能力 虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分對(duì)DPPH·自由基的清除率見(jiàn)圖4。在一定濃度范圍內(nèi),虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分對(duì)DPPH·自由基具有明顯的清除作用且呈現(xiàn)較好的量效關(guān)系,即蒽醌類(lèi)成分的質(zhì)量濃度與 DPPH·自由基的清除率成正比,而陽(yáng)性對(duì)照(VC)也具有類(lèi)似的趨勢(shì),即隨質(zhì)量濃度的提高,蒽醌類(lèi)成分和 VC對(duì) DPPH·自由基的清除率均逐漸增加,但蒽醌類(lèi)成分處理組清除率的增加幅度大于VC組；且在質(zhì)量濃度相同的條件下,蒽醌類(lèi)成分對(duì)DPPH·自由基的清除率均高于VC。當(dāng)質(zhì)量濃度為 8μg·mL-1時(shí),蒽醌類(lèi)成分對(duì) DPPH·的清除率最高,是 VC的 1.3倍。表明虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分對(duì)DPPH·自由基的清除效果強(qiáng)于VC。

2.2.5 對(duì) Fe3+的還原能力 還原力是反映抗氧化物質(zhì)提供電子能力的重要指標(biāo)之一,物質(zhì)的還原力越強(qiáng),說(shuō)明其抗氧化能力越強(qiáng)[12]。通常情況下,抗氧化劑的吸光值越大表示還原力越強(qiáng)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果(圖5)可知：隨質(zhì)量濃度的提高,虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分和VC對(duì) Fe3+的還原能力均逐漸增加,且在相同質(zhì)量濃度條件下,蒽醌類(lèi)成分反應(yīng)液的吸光值均明顯高于陽(yáng)性對(duì)照VC,當(dāng)質(zhì)量濃度為 16μg·mL-1時(shí),蒽醌類(lèi)成分對(duì) Fe3+的還原能力最強(qiáng),反應(yīng)液吸光值是VC的1.6倍。說(shuō)明虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分對(duì) Fe3+的還原能力高于VC。

2.2.6 與 Fe2+的螯合能力 Fe2+可以催化脂質(zhì)過(guò)氧化并能和活性氧反應(yīng)產(chǎn)生羥基自由基,從而破壞生物體內(nèi)的生物大分子,造成細(xì)胞或組織氧化損傷,因此,與 Fe2+的螯合能力也是評(píng)價(jià)抗氧化劑活性的重要指標(biāo)之一。Ferrozine試劑能夠與 Fe2+反應(yīng)生成紫紅色絡(luò)合物,當(dāng)反應(yīng)體系中存在抗氧化劑時(shí),部分 Fe2+被抗氧化劑螯合,使得絡(luò)合物的顏色變淺,故通過(guò)絡(luò)合物顏色的變化,可以評(píng)價(jià)抗氧化劑與 Fe2+的螯合能力。采用此方法測(cè)定的虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分及陽(yáng)性對(duì)照VC與 Fe2+的螯合能力見(jiàn)圖 6。

圖3 虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分和 VC對(duì) H2O 2誘導(dǎo)的紅細(xì)胞(RBC)氧化溶血的抑制率F ig.3 Inh ib ition ra te ofan thraqu inones from rh izom e of Reynou tria japon ica Hou tt.and VC to ox ida tive hem o lysis of red b lood cells (RBC)induced by H2O 2

圖4 虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分和 VC對(duì)DPPH·自由基的清除率Fig.4 Scaveng ing ra te of an thraqu inones from rh izom e of Reynou tria japon ica Hou tt.and VC to DPPH·free rad ica l

圖 5 虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分和 VC對(duì) Fe3+的還原能力F ig.5 Reduction ab ility of an thraqu inones from rhizom e of Reynou tria japon ica Hou tt.and VC to Fe3+

圖 6 虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分和 VC對(duì) Fe2+的螯合能力Fig.6 Chela ting ab ility of an thraqu inones from rh izom e of Reynou tria japon ica Hou tt.and VC to Fe2+

由圖 6可見(jiàn)：隨質(zhì)量濃度的提高,虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分及VC與 Fe2+的螯合率均逐漸增加；且在質(zhì)量濃度相同的條件下,蒽醌類(lèi)成分與 Fe2+的螯合率均大于VC與 Fe2+的螯合率；當(dāng)質(zhì)量濃度為 20μg· mL-1時(shí),蒽醌類(lèi)成分對(duì) Fe2+的螯合能力最強(qiáng),螯合率是VC的 1.1倍。表明虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分對(duì)Fe2+具有較強(qiáng)的螯合能力,且這種螯合能力強(qiáng)于VC。

3 討論和結(jié)論

研究結(jié)果表明：虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分具有增強(qiáng)小白鼠肝組織勻漿中 GSH-px活力、抑制 H2O2誘導(dǎo)的MDA含量和紅細(xì)胞氧化溶血、清除DPPH·自由基的作用,同時(shí)還具有較強(qiáng)的對(duì) Fe3+的還原能力以及與Fe2+的螯合能力?；⒄雀o中蒽醌類(lèi)成分對(duì)細(xì)胞膜的保護(hù)作用可能與蒽醌類(lèi)成分和膜上的蛋白質(zhì)結(jié)合有關(guān),這在一定程度上延緩由細(xì)胞膜損傷導(dǎo)致的溶血現(xiàn)象。但由于實(shí)驗(yàn)中使用的血紅細(xì)胞是經(jīng)過(guò)分級(jí)離心獲得的,其環(huán)境與動(dòng)物體內(nèi)已有較大差異,因此,低質(zhì)量濃度時(shí)能夠與細(xì)胞膜蛋白質(zhì)結(jié)合的蒽醌類(lèi)成分較少,故氧化溶血現(xiàn)象較易發(fā)生。由于DPPH·有 1個(gè)游離電子并在波長(zhǎng) 517 nm處有較強(qiáng)的吸收,其乙醇溶液呈深紫色,但是若有其他物質(zhì)提供 1個(gè)電子與DPPH·上的游離電子配對(duì),其色澤將會(huì)消退,褪色程度與其接受的電子呈定量關(guān)系[20],也就表現(xiàn)出對(duì)DPPH·的清除率,由于在較低質(zhì)量濃度條件下蒽醌類(lèi)成分能夠給出的電子數(shù)目有限,因此,只表現(xiàn)出較弱的清除DPPH·自由基的能力。研究結(jié)果還表明：虎杖根莖中蒽醌類(lèi)成分的抗氧化活性與其含量表現(xiàn)出高度的相關(guān)性,均隨其質(zhì)量濃度的提高而增加,且其作用效果均優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照 VC,表明來(lái)源于虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分具有很強(qiáng)的體外抗氧化活性。

生物體內(nèi)的抗氧化作用與提高機(jī)體內(nèi)源性抗氧化酶活性及清除自由基有關(guān)[21]。虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分通過(guò) 2條途徑實(shí)現(xiàn)抗氧化作用。一是具有較強(qiáng)的自由基清除能力,能夠直接清除過(guò)量的自由基,在化學(xué)上具有降低過(guò)氧化自由基的有效濃度以及打斷脂質(zhì)過(guò)氧化鏈反應(yīng)的作用；二是通過(guò)增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)活性以抑制自由基的產(chǎn)生。

虎杖根莖中的蒽醌類(lèi)成分含量十分豐富,粗提物含量為 55.86 m g·g-1。蒽醌類(lèi)成分主要含有大黃素、大黃素甲醚、大黃酚、蒽苷 A和蒽苷 B等多種成分[5],其中的哪些成分在抗氧化活性方面發(fā)揮主要作用還有待進(jìn)一步探討。有文獻(xiàn)報(bào)道：蒽醌類(lèi)成分不僅存在于虎杖的根莖中,在其幼葉內(nèi)含量也很豐富,含量?jī)H次于根莖[5]。因此,作為天然抗氧化劑,虎杖根莖所含的蒽醌類(lèi)成分具有很好的開(kāi)發(fā)潛力,而且從合理利用及保護(hù)野生資源的角度考慮,也應(yīng)對(duì)虎杖地上部分的抗氧化活性加以深入研究,擴(kuò)大和提高虎杖資源的利用率。

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