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    紫外分光光度法測(cè)定刺五加總苷總黃酮軟膠囊1中總苷含量

    2011-12-30 22:29:57魏淑梅武桂萍崔玉海李紹銘
    關(guān)鍵詞:總苷紫丁香刺五加

    魏淑梅 武桂萍 王 莉 崔玉海 李紹銘

    (哈爾濱仁皇藥業(yè)有限公司 黑龍江省中藥提取物及中藥創(chuàng)新藥物研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 黑龍江省刺五加研究所 哈爾濱 150300)

    中藥5類新藥刺五加總苷總黃酮軟膠囊是以刺五加總苷總黃酮提取物,加定量植物油和賦形劑經(jīng)加工而制成軟膠囊劑型。產(chǎn)品具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、緩解體力疲勞、抗抑郁的功效。其中所含的刺五加總苷為主要功效性成分,經(jīng)現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明刺五加總苷具有增強(qiáng)機(jī)體非特異性防御能力,除具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗衰老、抗輻射損傷及抗疲勞等作用外,還可治療心腦血管疾病、糖尿病、神經(jīng)衰弱等癥。

    1 儀器、試藥與試劑

    TU1901紫外分光光度儀(上海棱譜儀器儀表有限公司);刺五加總苷總黃酮軟膠囊(哈爾濱仁皇藥業(yè)股份有限公司,批號(hào):20110101,20110102,20110103);紫丁香苷對(duì)照品 (中國(guó)生物制品檢定所,批號(hào):111574-200502,含量測(cè)定用);甲醇為分析純,水為純化水,其他試劑均為分析純。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 溶液的制備

    2.1.1 對(duì)照品溶液的制備

    精密稱取紫丁香苷對(duì)照品5.14mg,置25ml量瓶中,加50%甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為對(duì)照品貯備液。精密吸取3ml,置10ml量瓶中,用50%甲醇定容至刻度,搖勻,作為對(duì)照品溶液。

    2.1.2 供試品溶液的制備

    取本品6粒,剪開,置100ml錐形瓶中少量正己烷洗盡油分,加甲醇50ml,超聲30min,放冷,抽濾,濾液回收至干,殘?jiān)?mol/L H2SO430ml,沸水浴回流2h,稍冷,加氯仿20ml回流30min,再用氯仿萃取3次,每次20ml,水洗兩次,每次30ml,氯仿液回收至干,加甲醇約8ml溶解,加水定容至10ml,-2℃冷藏2h,微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。

    2.2 測(cè)定法

    取樣品適量,配制成與標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度適中的濃度,與標(biāo)準(zhǔn)曲線同法處理,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液的濃度,計(jì)算,即得。

    2.3 方法學(xué)考察

    2.3.1 線性試驗(yàn)

    精密吸取紫丁香苷濃度為0.2056mg/ml的對(duì)照品貯備液 1、2、3、4、5 ml, 分別置于10ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,以吸收度為縱坐標(biāo),取樣量為橫坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸,方程為Y=0.0087X+0.0035,r=0.9995。結(jié)果表明,紫丁香苷在20.56~102.8μg/ml線性良好。

    2.3.2 精密度試驗(yàn)

    取同一樣品溶液連續(xù)進(jìn)樣6次,測(cè)得紫丁香苷的峰面積RSD=1.3%。

    2.3.3 穩(wěn)定性考察

    同一樣品溶液和對(duì)照分別在0,2,4,6,8 h進(jìn)樣,測(cè)得紫丁香苷濃度RSD=1.4%。表明樣品溶液及對(duì)照溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

    2.3.4 重現(xiàn)性試驗(yàn)

    取同一批號(hào)樣品6份(201101),按2.1.2項(xiàng)下方法操作,分別測(cè)定總苷的含量,RSD=1.1%。表明方法重復(fù)性較好。

    2.3.5 回收率試驗(yàn)

    采用加樣回收率測(cè)定方法。取刺五加軟膠囊3粒,添加一定量(61.68μg)的紫丁香苷對(duì)照品溶液,按2.2.2項(xiàng)下方法操作,制備成加樣回收供試液,并依法測(cè)定。結(jié)果紫丁香苷的平均加樣回收率為98.92%,RSD=1.5%(n=5)。

    2.4 樣品測(cè)定結(jié)果

    取3批樣品依法操作,測(cè)定計(jì)算樣品含量。

    3 討論

    刺五加總苷是刺五加總苷總黃酮軟膠囊中主要功效成分,紫外分光光度法是最常見的測(cè)定總苷含量的方法。本試驗(yàn)建立的紫外分光光度法測(cè)定刺五加總苷總黃酮軟膠囊中總苷的含量,方法簡(jiǎn)便、快速、重現(xiàn)性好、準(zhǔn)確度高,可作為該制劑的定量控制指標(biāo)。

    [1]張萍,周旭,王伽伯等.紫外分光光度法測(cè)定不同產(chǎn)地蒺藜中總皂苷的含量.解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào),2010,6(22),533-534

    [2]李艷芬,毛 羽,許婧等.紫外分光光度法測(cè)定復(fù)方KGY中總皂苷的含量.西南民族大學(xué)學(xué)報(bào),自然科學(xué),2001,2(36)

    [3]黃敏珠,王 棟,尹忠臣等.紫外分光光度法測(cè)絞股藍(lán)片中絞股藍(lán)總苷的含量,中國(guó)中藥雜志,2010,18(35)

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