清熱解毒扶正顆?？寡譢\退熱及對-反應(yīng)蛋白影響的實驗研究[WTBZ]

　　摘要：目的：觀察清熱解毒扶正顆粒抗炎、退熱及對C-反應(yīng)蛋白的影響。方法：（1）建立二甲苯致小鼠耳廓腫脹模型，用藥后分別計算腫脹度、腫脹率、抑制率。（2）建立內(nèi)毒素所致高熱家兔模型，觀察用藥后體溫變化。（3）了解清熱解毒扶正顆粒對高熱家兔C-反應(yīng)蛋白濃度的影響。結(jié)果：清熱解毒扶正顆粒對二甲苯致小鼠耳廓腫脹有明顯抑制作用；各劑量組均能明顯降低內(nèi)毒素所致家兔的高熱，中劑量組對內(nèi)毒素致高熱家兔的C-反應(yīng)蛋白有降低作用。結(jié)論：清熱解毒扶正顆粒具有抗炎、退熱的作用。
　　關(guān)鍵詞：清熱解毒扶正顆粒；抗炎；退熱；C-反應(yīng)蛋白；實驗研究
　　中圖分類號：R285.5文獻標識碼：A
　　文章編號：1007-2349（2011）03-0047-03
　　近年來中醫(yī)藥在外感發(fā)熱疾病中的作用逐年受到重視，清熱解毒扶正顆粒系云南省中醫(yī)醫(yī)院用于治療外感發(fā)熱的院內(nèi)科研制劑。其處方主要組成為：翼首草、芙蓉葉、魚腥草、麥冬、太子參、丹參、生地、丹皮等，具有清熱解毒，益氣扶正，滋陰涼血之功效，主治外感發(fā)熱療效確切。為進一步分析及明確其藥理作用，筆者通過該藥對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響，觀察藥物的抗炎作用；通過對內(nèi)毒素致家兔高熱模型的影響，觀察該藥的解熱作用，通過檢測內(nèi)毒素致高熱模型家兔C-反應(yīng)蛋白濃度的影響，了解該藥對炎性介質(zhì)的影響，旨在探討中藥清熱解毒扶正顆粒的部分藥效。
　　1實驗材料
　　1.1藥品清熱解毒扶正顆粒：云南省中醫(yī)醫(yī)院制劑室提供，每克顆粒劑含1.26克生藥材，批號：20031013；內(nèi)毒素：天象-邦定試劑公司產(chǎn)品，批號：L2880；二甲苯：成都化學(xué)試劑廠，批號：97424；阿司匹林原料藥：南京制藥廠產(chǎn)品，批號：910324；阿司匹林：昆明云健制藥有限公司生產(chǎn)，批號：20050765；地塞米松：廣東南國藥業(yè)有限公司提供，批號：20050506。
　　1.2實驗動物昆明種小白鼠：Ⅱ級，20～28g，由昆明生物制藥廠動物科提供，動物合格證號：SCXK滇2005-0010；大耳白兔：Ⅰ級，1.8～2.5kg，由昆明生物制藥廠動物科提供，動物合格證號：SCXK滇2005-0007。
　　1.3實驗器材及設(shè)備日本奧林巴斯-604全自動生化分析儀；電子天平：YP3000型電子天平，上海精科天平廠；分析天平：BS110型分析天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；體溫計；0.8cm打孔器。
　　2方法與結(jié)果
　　2.1清熱解毒扶正顆粒對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響取小鼠50只，雄性，體重20～28g，隨機分為5組：①對照組，灌胃給予等體積生理鹽水；②陽性對照組，給予阿司匹林原料藥0.5g/kg，灌胃體積0.3mL/10g；③清熱解毒扶正顆粒高劑量組按43.8g（生藥）/kg劑量以0.4mL/10g體積灌胃；中劑量組按26.4g（生藥）/kg劑量以0.3mL/10g體積灌胃；低劑量組按8.8g（生藥）/kg劑量以0.3mL/10g體積灌胃。連續(xù)給藥3d，末次給藥后1h，于每只小鼠右耳雙面涂勻50uL二甲苯致炎，1h后，處死小鼠，用0.8cm打孔器取下每只小鼠的左右耳片，用分析天平稱重，計算腫脹度、腫脹率、抑制率。結(jié)果見表1。
　　試驗結(jié)果表明，阿司匹林組與對照組比較，差異有非常顯著性意義（P<0.01），說明阿司匹林有非常明顯的抑制小鼠耳廓腫脹作用；清熱解毒扶正顆粒高、中劑量組與對照組比較，差異有顯著性意義（P<0.05），說明高、中劑量組均有抑制小鼠耳廓腫脹作用；低劑量組與對照組比較，差異無顯著性意義。
　　2.2清熱解毒扶正顆粒對內(nèi)毒素所致高熱家兔肛溫的影響取大耳白兔30只，雌雄兼用，每日測肛溫1次，連續(xù)2d，使家兔適應(yīng)此測量方法并選取合格動物，隨機分為5組，即模型組，陽性對照組，清熱解毒扶正顆粒高劑量組、中劑量組、低劑量組。經(jīng)預(yù)試驗測定后，將內(nèi)毒素致熱量定為250ng/kg，取4mg內(nèi)毒素，用氯化鈉注射液稀釋至250ng/mL。試驗前1h測每只家兔的肛溫，記為基礎(chǔ)肛溫T，然后灌胃給藥，模型組灌胃給予等體積的生理鹽水；陽性對照組灌胃給予阿司匹林原料藥0.3g/kg，灌胃體積10mL/kg；清熱解毒扶正顆粒高、中、低劑量組分別灌服21.6g（生藥）/kg、14.4g（生藥）/kg、7.2g（生藥）/kg，灌胃體積為10mL/kg。1h后每兔均從耳緣靜脈注射內(nèi)毒素250ng/kg致熱，分別測定內(nèi)毒素致熱后30、60、120、180、240、300min時的肛溫，將不同時間所測肛溫減去基礎(chǔ)肛溫t的差值△t作為體溫變化的指標。結(jié)果見表2。
　　試驗結(jié)果表明，阿司匹林組與模型組比較，差異有非常顯著性意義（P<0.01），說明阿司匹林有非常明顯的解熱作用，且解熱時間從給藥后30min開始持續(xù)到300min；清熱解毒扶正顆粒高劑量組與模型組比較，差異有顯著性意義（P<0.05），說明高劑量有解熱作用，解熱時間從給藥后60min持續(xù)到300min；清熱解毒扶正顆粒中劑量組與模型組比較，在180min時間段，差異有顯著性意義（P<0.05）；清熱解毒扶正顆粒低劑量組與模型組比較，差異有顯著性意義（P<0.05），解熱時間從給藥后60min持續(xù)到240min。
　　2.3對高熱家兔C-反應(yīng)蛋白濃度的影響取家兔36只，隨機分為對照組、模型組、陽性對照組、清熱解毒扶正顆粒高、中、低劑量組，每組6只。空白組和模型組灌胃給予等體積生理鹽水；清熱解毒扶正顆粒高、中、低劑量組分別灌胃給予21.6、14.4、7.2g（生藥）/kg，灌胃體積為10mL/kg；陽性對照組灌胃給予地塞米松1.5mg/kg，體積為10mL/kg。給藥1h后，每兔（空白組除外）均從耳緣靜脈注射內(nèi)毒素250ng/kg致熱，致熱30min后測肛溫，肛溫升高者于1h后靜脈采血，取靜脈血放置于抗凝試管保存，用全自動生化分析儀檢測C-反應(yīng)蛋白濃度。試驗結(jié)果見表3。
　　試驗結(jié)果表明：地塞米松組與對照組比較，差異無顯著性意義（P>0.05），但對C-反應(yīng)蛋白濃度有一定降低趨勢，可能是樣本數(shù)較少，有待進一步研究；清熱解毒扶正顆粒高劑量組與對照組比較，差異無顯著性意義（P>0.05），但有一定降低趨勢；清熱解毒扶正顆粒中劑量組與對照組比較，差異有非常顯著性意義（P>0.01），說明中劑量有非常明顯的降低C-反應(yīng)蛋白濃度的作用；清熱解毒扶正顆粒低劑量組與對照組比較，差異無顯著性意義（P>0.05）。
　　3小結(jié)
　　清熱解毒扶正顆粒高劑量和中劑量組對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有顯著抑制作用，其腫脹抑制率分別達到35.34%和38.91%，說明該藥有較好的抗炎作用；清熱解毒扶正顆粒高劑量、中劑量和低劑量組對內(nèi)毒素所致家兔高熱有解熱作用，各劑量組起效時間和持續(xù)時間不同，高劑量在給藥60min后開始起效，藥效持續(xù)到300min；中劑量組在給藥后180min時間段有一定的解熱作用；低劑量組在給藥60min后起效，藥效持續(xù)到240min。C-反應(yīng)蛋白是炎癥、感染、組織損傷、壞死和惡性腫瘤的一個重要標志。C-反應(yīng)蛋白在正常機體中濃度很低，其濃度的升高提示炎癥，感染事件的發(fā)生，清熱解毒扶正顆粒中劑量對內(nèi)毒素所致高熱家兔的C-反應(yīng)蛋白濃度的降低有非常明顯的作用，但其他劑量組和地塞米松組對C-反應(yīng)蛋白濃度只有一定的降低趨勢，可能與樣本數(shù)較少有關(guān)，有待于進一步研究。
　　
　　4討論
　　外感高熱是內(nèi)科急癥常見多發(fā)病證之一，具有起病急、變[SD1，1][FQ（28*2。175mm，X，DY-W][CD=175mm]化快、傳變迅速的特點，多屬西醫(yī)的各種感染性疾病?！傲被颉傲啊?，是它主要致病因素。其病理特點初時多屬邪盛而正氣抗御力亦強形成高熱，其后熱盛使津液耗損，劫妁營陰，直至動血、耗血，終至陰傷氣耗［1］。中醫(yī)學(xué)認為正氣虛是發(fā)病和遷延的內(nèi)在原因。正氣虛，則邪乘虛而入，正氣實，則邪無自入之理，正氣實，則正能敵邪病能自愈，而正氣決定于體質(zhì)，體質(zhì)的強弱決定著正氣的虛實。所以疾病的發(fā)生和發(fā)展雖然與病邪的質(zhì)與量有關(guān)，更取決于患者的體質(zhì)，即正氣的虛實［2］。據(jù)此本院研制了清熱解毒扶正顆粒，其處方主要組成為：翼首草、芙蓉葉、魚腥草、麥冬、太子參、丹參、生地、丹皮等。清熱解毒扶正顆粒治療外感高熱之所以能取得較好療效，從中醫(yī)角度來說，它不僅具有清熱解毒功效，更有益氣扶正，滋陰涼血之功能?，F(xiàn)代中藥學(xué)研究其能清除，中和、降解內(nèi)毒素，調(diào)整炎性介質(zhì)的失控性釋放，提高和保護機體的免疫功能有關(guān)。藏藥翼首草具有清熱解毒，祛風濕，止痛等作用，有研究表明對急性炎癥的滲出和水腫有明顯的抑制作用，因此具有顯著的抗炎活性［3］。麥冬中的麥冬皂苷及麥冬多糖可顯著增加小鼠器官胸腺、脾臟重量，并激活小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能，提高血清溶血素抗體水平，增加機體的免疫力［4］。太子參多糖具有抗疲勞、抗應(yīng)激和增強機體免疫功能的作用［5］。丹參有效成分丹參酮、丹酚酸類化合物有改善血液循環(huán)、抗菌和抗炎、抗氧化、抗凝血和細胞保護等作用［6］。另外魚腥草、芙蓉葉等不僅具有抗病毒、抗菌、抗炎等功效，且均有調(diào)節(jié)免疫功能的作用。清熱解毒扶正顆粒在藥效學(xué)試驗[LL]中證實其具有明顯的退熱抗炎作用且作用持久，并有一定的降低C-反應(yīng)蛋白的作用。
　　通過本次動物實驗結(jié)果表明：清熱解毒扶正顆粒高、中劑量組均有抑制小鼠耳廓腫脹作用，有效率較對照組更加顯著；清熱解毒扶正顆粒高，中，低劑量的解熱作用較對照組均有顯著效果；對于C-反應(yīng)蛋白濃度的趨勢來說，清熱解毒扶正顆粒中劑量組與對照組比較，差異有非常顯著性意義，說明中劑量有降低C-反應(yīng)蛋白濃度的作用，但高，低劑量與對照組比較，差異均無顯著性意義。綜上所論，清熱解毒扶正顆粒藥效學(xué)作用確切，值得推廣應(yīng)用。
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