碎米果鎮(zhèn)痛抗炎的實(shí)驗(yàn)研究

　　摘 要：目的：觀察碎米果水煎液的鎮(zhèn)痛、抗炎作用。方法：鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)采用小鼠熱板法、光熱刺激法、醋酸致痛扭體法等實(shí)驗(yàn)方法；抗炎實(shí)驗(yàn)采用二甲苯所致小鼠耳腫脹方法及二甲苯所致小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性增高的方法。結(jié)果：碎米果水煎液對(duì)小鼠熱刺激致痛、光熱刺激致痛及注入醋酸致痛均有抑制作用，還能降低二甲苯所致小鼠耳腫脹度及皮膚毛細(xì)血管通透性。結(jié)論：碎米果水煎液有一定鎮(zhèn)痛、抗炎作用。
　　關(guān)鍵詞：碎米果；鎮(zhèn)痛；抗炎；實(shí)驗(yàn)研究
　　中圖分類號(hào)：R285.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
　　文章編號(hào)：1007-2349（2011）05-0063-02
　　
　　碎米果又名牙痛草、碎米棵、大紅袍、小鐵子，為紫金?？浦参镄¤F仔（Myrsine africana L.）的全株。生于海拔1100~3600 m的山間、林下、路邊、山坡、灌木叢中。全年可采挖，洗凈切片曬干^［1］。本品甘、淡，涼^［2］。具有祛風(fēng)止痛、清熱利濕、收斂止血的功效。主治風(fēng)濕疼痛、牙痛、泄瀉、痢疾、血崩、便血、肺結(jié)核咳血等^［3］?！顿F州民間藥物》記載：“驅(qū)風(fēng)濕，活血，治痢疾?！薄对颇现胁菟帯酚涊d：消炎，止痛，止痢。治牙痛，腸炎，痢疾。內(nèi)服：煎湯，0.3～1兩，燉肉或浸酒。治痢疾：大紅袍、仙鶴草根各一兩，煎水服。治風(fēng)濕：大紅袍五錢(qián)，大風(fēng)藤、追風(fēng)散各三錢(qián)，紅禾麻二錢(qián)，泡酒一斤。日服二次，每次五錢(qián)至一兩。治紅淋：大紅袍三至五錢(qián)。煎水服。（選方出《貴州民間藥物》）。閉經(jīng)：大紅袍1～2兩，紅糖適量，水煎分3次服。痛經(jīng)：大紅袍、丹參、香附各3錢(qián)，小茴香根1錢(qián)，水煎服。外用治黃水瘡，燒燙傷，鮮根烤出汁搽患處。經(jīng)文獻(xiàn)查閱，對(duì)碎米果的現(xiàn)代研究較少。根據(jù)其功效和主治，擬進(jìn)行碎米果水煎液鎮(zhèn)痛、抗炎方面的初步研究，為其臨床應(yīng)用提供藥效學(xué)依據(jù)。
　　1 實(shí)驗(yàn)材料
　　1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小白鼠，體重18~22 g，雌雄兼有，由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（川）2004-16。
　　1.2 藥物 碎米果采自昆明小墨雨一帶山上，由云南中醫(yī)學(xué)院錢(qián)子剛教授鑒定。碎米果藥材先浸泡30 min，再煎煮3次，每次30 min，過(guò)濾合并3次藥液，水浴濃縮至2 g生藥/ mL的藥液。元胡止痛片（廣西半宇天龍制藥有限公司，產(chǎn)品批號(hào)060801）；阿司匹林（昆明云健制藥有限公司，生產(chǎn)批號(hào)20051195）。各藥給藥劑量均按臨床等效劑量換算。
　　1.3 試劑及主要儀器
　　1.3.1 試劑 所用試劑按實(shí)驗(yàn)要求均為市售化學(xué)純或分析純?cè)噭?br/>　　1.3.2 主要儀器 RB-200智能熱板儀（成都泰盟科技有限公司）；SW-200光熱尾痛測(cè)試儀（成都泰盟科技有限公司）；756型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海光譜儀器有限公司）。
　　1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以（Ax-G ±s ）表示，計(jì)量資料用方差分析，非計(jì)量資料用非參數(shù)檢驗(yàn)。
　　2 方法
　　2.1 鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)
　　2.1.1 熱板法^［4］ 取18~22 g雌性小鼠，將熱板測(cè)痛儀預(yù)熱至55 ℃，測(cè)定小鼠的痛閾值（即痛反應(yīng)潛伏期，指小鼠接觸熱板至舔后足的時(shí)間）。痛反應(yīng)在5~30 s內(nèi)為合格鼠，取2次正常痛閾平均值，作為該鼠給藥前痛閾值。將合格小鼠隨機(jī)分為4組，分組及給藥劑量如表1所示，連續(xù)灌胃6 d，于末次給藥后30、60、90、120、180min分別測(cè)量小鼠痛閾值，以60 s為限，以免燙傷小鼠。
　　2.1.2 甩尾法^［4］ 取18~22 g小鼠56只，雌雄各半，將小鼠置鼠筒中，尾自然下垂于筒外，以啟動(dòng)光熱至鼠尾急速擺動(dòng)的時(shí)間為鼠尾潛伏期痛閾值，調(diào)整刺激強(qiáng)度使基礎(chǔ)痛閾值（給藥前痛閾值）為5 s左右，記錄其給藥前痛閾值，按表2所示分組及給藥，小鼠連續(xù)灌胃7 d，于末次給藥后30 min測(cè)其痛閾，照射時(shí)間以10 s為限，以免燙傷小鼠。記錄各組動(dòng)物給藥后痛閾值，并與給藥前作比較。
　　2.1.3 扭體法^［4］ 選用體重18~22 g的小鼠56只，按表3所示分組及給藥，連續(xù)灌胃6 d后，于末次給藥后1 h，每鼠腹腔注射0.5%冰醋酸0.2 mL/只，記錄注射醋酸后15 min內(nèi)各鼠扭體出現(xiàn)的時(shí)間和扭體次數(shù)。
　　2.2 抗炎實(shí)驗(yàn)
　　2.2.1 對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹及免疫器官重量的影響^［4］ 取18~22 g小鼠，隨機(jī)分為4組，每組14只，給藥劑量如表4所示。連續(xù)灌胃7 d，于末次給藥后30 min，各小鼠右耳涂二甲苯30 μL，1 h后將小鼠頸椎脫臼處死，剪下左右耳廓，用打孔器打下直徑7 mm的耳片，稱重，計(jì)算腫脹率；將取耳后的小鼠迅速打開(kāi)胸腔、腹腔，取出胸腺、脾臟，用電子天平稱其鮮重并計(jì)算胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。
　　腫脹率=右耳重-左耳重左耳重×100%胸腺（脾臟）指數(shù)=胸腺（脾臟）重量/g體重/g×10
　　2.2.2 對(duì)二甲苯所致小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性的影響^［4］ 取18~22 g小鼠56只，隨機(jī)分為4組，分組及給藥劑量如表5所示。連續(xù)灌胃7 d，于第6 d將小鼠腹部正中位去毛，第7 d末次給藥后60 min，各小鼠尾靜脈注射0.5%伊文思蘭生理鹽水溶液0.2 mL/只，隨即于小鼠腹部去毛皮膚上滴二甲苯30 μL/只，30 min后小鼠頸椎脫臼處死，剝下染藍(lán)腹部皮膚，用打孔器打下兩塊直徑7㎜的染藍(lán)皮膚，放入有塞玻璃試管內(nèi)。在每個(gè)試管內(nèi)加入丙酮：生理鹽水＝7：3的混合溶液5 mL，置37 ℃的恒溫箱中孵化36 h。2000 r/min離心10 min，取上清液，于610 nm處比色測(cè)定吸光度，以空白丙酮生理鹽水校零。
　　3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　3.1 鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)
　　3.1.1 熱板法對(duì)小鼠熱刺激致痛的影響 見(jiàn)表1。
　　結(jié)果表明：與空白對(duì)照組比較，高劑量組在90 min和120 min時(shí)能提高小鼠熱刺激致痛反應(yīng)的痛域值，差異有非常顯著性意義（P<0.01）；低劑量?jī)H在90 min提高小鼠熱刺激致痛反應(yīng)的痛域值，差異有非常顯著性意義（P<0.01），但2組均不如元胡止痛對(duì)照組。
　　3.1.2 甩尾法對(duì)小鼠光熱刺激致痛的影響 見(jiàn)表2。
　　結(jié)果表明：與空白對(duì)照組比較，各給藥組均能提高小鼠光熱刺激致痛反應(yīng)痛域值，差異有非常顯著性意義（P<0.01）。
　　3.1.3 扭體法對(duì)小鼠醋酸致痛的影響 見(jiàn)表3。
　　結(jié)果表明：與空白對(duì)照組比較，元胡止痛組與碎米果水煎液高劑量組均能減少醋酸所致小鼠扭體次數(shù)，并延長(zhǎng)扭體反應(yīng)出現(xiàn)時(shí)間，差異有非常顯著性意義（P<0.01）；低劑量組能減少小鼠扭體次數(shù)，差異有顯著性意義（P<0.05）。
　　3.2 抗炎實(shí)驗(yàn)
　　3.2.1 對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹及免疫器官重量的影響 見(jiàn)表4。
　　結(jié)果表明：與空白對(duì)照組比較，各給藥組均能降低二甲苯所致小鼠耳廓腫脹率和脾臟指數(shù)，差異有非常顯著性意義（P<0.01）。對(duì)胸腺指數(shù)有下降趨勢(shì)，但無(wú)顯著性差異。
　　3.2.2 對(duì)二甲苯所致小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性的影響 見(jiàn)表5。
　　結(jié)果表明：與空白對(duì)照組比較，各給藥組均能降低小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性，差異有非常顯著性意義（P<0.01）。
　　4 討論
　　碎米果主產(chǎn)于云南、四川、貴州等省，具有祛風(fēng)止痛、清熱利濕、收斂止血的功效，主治風(fēng)濕疼痛、牙痛、泄瀉、痢疾、血崩、便血、肺結(jié)核咳血等癥。本實(shí)驗(yàn)對(duì)其進(jìn)行了抗炎、鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，碎米果能提高小鼠熱刺激致痛反應(yīng)及小鼠光熱刺激致痛反應(yīng)的痛域值，并減少醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的扭體次數(shù)；對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有明顯的抑制作用，降低小鼠皮膚毛細(xì)血管通透性。說(shuō)明碎米果有較好的鎮(zhèn)痛、抗炎作用，為其臨床應(yīng)用提供了理論依據(jù)。
　　
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