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    猴頭菇多糖對小鼠血清抗氧化能力的影響

    2011-12-18 05:00:48杜志強(qiáng)楊晨晨王建英
    食品研究與開發(fā) 2011年9期
    關(guān)鍵詞:猴頭菇多糖機(jī)體

    杜志強(qiáng),楊晨晨,王建英

    (內(nèi)蒙古科技大學(xué) 數(shù)理與生物工程學(xué)院,內(nèi)蒙古 包頭 014010)

    猴頭菇(Hericium erinaceus)是一種重要的藥食兩用真菌,它具有“性平、味甘,益五臟,助消化,滋補(bǔ)身體等功效”,而且,在歷代的中醫(yī)典籍中都有廣泛記載[1]。隨著現(xiàn)代生物化學(xué)以及醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展,針對于微生物多糖功能方面的研究,越來越廣泛而且深入;目前,根據(jù)現(xiàn)有的關(guān)于多種微生物多糖(靈芝多糖,香菇多糖,茯苓多糖,銀耳多糖等)的研究結(jié)果可以確定:真菌多糖一般都具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗病毒、消炎、降血糖、降血脂、抗輻射、耐缺氧等方面的功能[2];同時,猴頭菇又是一種容易培養(yǎng)、分布廣泛的真菌,因此,針對于猴頭菇多糖的開發(fā)價值、應(yīng)用潛力、市場前景良好,也可以為臨床多糖類藥品、保健品的開發(fā)應(yīng)用提供實(shí)驗支持。本文旨在通過分離純化獲得猴頭菇多糖,并且研究多糖對小鼠血清抗氧化能力的影響。

    1 材料與方法

    1.1 材料與動物

    猴頭菇:購自包頭市農(nóng)貿(mào)市場。

    小白鼠(體重18 g~22 g,雌雄兼有):屬包頭醫(yī)學(xué)院實(shí)驗動物中心提供的清潔級實(shí)驗動物。

    1.2 實(shí)驗藥品與試劑

    SOD(超氧化物歧化酶)試劑盒、CAT(過氧化氫酶)試劑盒、MDA(丙二醛)試劑盒:南京建成生物工程有限公司生產(chǎn);其他試劑均為國產(chǎn)分析純試劑。

    1.3 方法

    1.3.1 粗多糖的分離提取

    將買來的猴頭菇剪碎,在干燥箱中50℃過夜干燥,并且粉碎后充分研磨;稱取干粉適量,加30倍體積的蒸餾水,在80℃下充分提取3 h,之后將提取液經(jīng)過3000 r/min離心15 min后取上清液,將上清液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮到原體積的1/3,再用3倍體積的無水乙醇沉淀粗多糖[3],并且靜置過夜;次日經(jīng)4000 r/min離心10 min后取沉淀,將沉淀進(jìn)行真空冷凍干燥,即為猴頭菇粗多糖。

    1.3.2 粗多糖的純化

    取干燥后的粗多糖適量(5 g~10 g),用100 mL蒸餾水充分溶解,進(jìn)行抽濾除雜質(zhì),濾液用Sevage法除去蛋白質(zhì);除去蛋白質(zhì)雜質(zhì)的透析液用3倍體積的無水乙醇進(jìn)行多糖沉淀,并且將離心后的沉淀進(jìn)行真空冷凍干燥,即為猴頭菇多糖[4],命名為HeP,將HeP用蒸餾水溶解,按要求配成不同劑量的溶液,即可進(jìn)行體內(nèi)試驗。

    1.3.3 動物分組與多糖劑量的設(shè)定

    小鼠按照體重隨機(jī)分為猴頭菇多糖的高劑量組(HeP 400 mg/kg)、中劑量組(HeP 200 mg/kg)、低劑量組(HeP 50 mg/kg)、正常對照組4組,每組設(shè)置多于12只數(shù)目的小白鼠,以保證實(shí)驗結(jié)束時有足夠的采樣點(diǎn);而且,要求雌雄各半,試驗期間按照性別一組兩籠,自由飲食飲水[5]。之后,根據(jù)體重將猴頭多糖組按照設(shè)定的劑量每天定時灌胃一次,正常對照組以蒸餾水灌胃,試驗持續(xù)4周。

    1.4 猴頭菇多糖對小鼠血清抗氧化能力的影響作用

    動物連續(xù)給藥4周后,于末次給藥12 h之后,將4組小鼠采用摘除眼球的方法取血,經(jīng)過3000 r/min低溫低速離心15 min,獲得血清[6]。之后馬上按照試劑盒的要求測定4組小鼠血清中SOD、CAT、MDA的含量,各項試驗均利用統(tǒng)計分析軟件SPSS(版本12.0)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,要求結(jié)果以的形式表示。

    2 結(jié)果

    2.1 多糖的提取得率與多糖含量

    按照設(shè)計的提取方法,從500 g猴頭菇干粉(平均分成10份,每份提取3次)中提取粗多糖,共收集到粗多糖50.45 g,平均得率為10.09%;之后將50.45 g粗多糖全部進(jìn)行純化,共收集到多糖8.33g,平均得率為16.51%。

    2.2 血清SOD含量的測定結(jié)果

    血清SOD含量的測定結(jié)果如表1所示。

    表1 SOD含量的測定結(jié)果Table 1 Detection result of the SOD content

    從表1血清SOD含量的測定結(jié)果可見:猴頭菇多糖可以明顯提高小鼠血清中SOD的含量;其中,猴頭菇多糖高劑量對血清SOD含量的提高作用與對照組相比,差異極顯著;中劑量多糖對SOD含量的提高作用與對照組相比,存在顯著差異。

    小鼠血清SOD含量的變化趨勢表明:與正常對照組相比較,高劑量猴頭多糖使小鼠血清的SOD含量提高了57.5%,中劑量多糖使小鼠血清的SOD含量提高了39.9%。

    表2 CAT含量的測定結(jié)果Table 2 Detection result of the CAT content

    2.3 血清CAT含量的測定結(jié)果

    血清CAT含量的測定結(jié)果如表2所示。

    如表2血清CAT含量的測定結(jié)果所示:猴頭菇多糖可以明顯提高小鼠血清中CAT的含量;其中,猴頭菇多糖高劑量對血清CAT含量的提高作用與對照組相比,差異極顯著。小鼠血清CAT含量的變化趨勢表明:與正常對照組相比較,高劑量猴頭多糖使小鼠血清的CAT含量提高了53.3%。

    表3 MDA含量的測定結(jié)果Table 3 Detection result of the MDA content

    2.4 血清MDA含量的測定結(jié)果

    血清MDA含量的測定結(jié)果見表3。

    如表3血清MDA含量的測定結(jié)果所示:猴頭菇多糖可以明顯降低小鼠血清中CAT的含量;其中,猴頭菇多糖高劑量對血清MDA含量的降低作用與對照組相比,差異顯著。小鼠血清MDA含量的變化趨勢表明:與正常對照組相比較,高劑量猴頭多糖使小鼠血清的MDA含量降低了33.9%。

    3 結(jié)論

    SOD是機(jī)體清除各類氧自由基的重要酶類,能夠催化氧自由基的歧化反應(yīng),對需氧生物體起到保護(hù)作用;CAT是機(jī)體清除過氧化氫的重要酶類,可以使機(jī)體細(xì)胞避免遭受過氧化氫的毒害,是機(jī)體防御體系的關(guān)鍵酶之一[7];MDA是機(jī)體膜脂發(fā)生過氧化的直接產(chǎn)物,因此,測定機(jī)體SOD、CAT活性以及MDA的含量可以間接反映機(jī)體清除自由基、清除過氧化氫、抗脂質(zhì)過氧化的能力,從而可以衡量機(jī)體的組織、細(xì)胞的抗氧化能力[8]。

    本試驗通過利用分離純化得到的猴頭菇多糖,進(jìn)行了對小鼠血清抗氧化能力的影響作用的研究,根據(jù)實(shí)驗結(jié)果可以得出如下結(jié)論:猴頭菇多糖可以明顯提高小鼠血清的SOD和CAT的含量,具有良好的抗氧化能力;同時,猴頭菇多糖可以明顯降低小鼠血清MDA的含量,其具有較強(qiáng)的抗脂質(zhì)過氧化的能力。因此,針對于猴頭菇多糖的開發(fā)潛力和市場前景極佳。

    [1]楊炎,周昌艷,王晨光,等.猴頭多糖調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的研究[J].食用菌學(xué)報,2000,7(1):19-22

    [2]傅明輝,林總?cè)A.沙棘果水溶性多糖的分離純化、組分分析及抗氧化學(xué)性的研究[J].食品科學(xué),2002,23(3):73-75

    [3]周林珠,楊祥良,周井炎,等.多糖抗氧化作用研究進(jìn)展[J].中國生化藥物雜志,2002,23(4):210-212

    [4]崔榮軍,曹穎莉,趙璇.螺旋藻多糖對老齡小鼠腦中SOD、MDA的影響[J].中國初級衛(wèi)生保健,2003,17(4):68-69

    [5]段玉峰,韓果萍.馬齒莧多糖組分的分離純化及抗氧化活性研究[J].食品科學(xué),2005,26(3):225-228

    [6]丁利君,吳倩萍.黃芪多糖的提取及其對自由基的清除作用[J].食品與機(jī)械,2003(4):7-9

    [7]楊瑞欣.枸杞多糖提取工藝及抗氧化活性的研究與探討[J].化學(xué)工程與裝備,2010(9):42-43

    [8]程仕偉,于曉明,張玉香.紫貽貝多糖提取及其體外抗氧化活性研究[J].食品工業(yè)科技,2010,31(9):132-134

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