藜葉蛋白質(zhì)提取方法比較試驗(yàn)

王康英

（西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院，蘭州 730030）

藜（Chenopodium album L.）為藜科藜屬一年生草本植物，分布于世界各地。在自然環(huán)境中，藜具有種子萌發(fā)早，繁殖力強(qiáng)，喜光、耐鹽堿、耐熱、耐旱、耐澇等特點(diǎn)，能適應(yīng)典型的大陸性氣候，是撂荒地植被恢復(fù)的先鋒植物。但由于藜常出現(xiàn)在作物栽培地中，一直被人們作為雜草防治，耗費(fèi)大量人力、物力，還因農(nóng)藥的使用造成對(duì)環(huán)境的污染[1]。各種維生素，在黎中含量之高是一般蔬菜少見(jiàn)的，黎的維生素C含量分別是芹菜的11.57倍，是大白菜的4.87倍，是與它同屬菠菜的6.17倍；維生素B1分別是芹菜、大白菜和菠菜的5、7.5倍和7.5倍，維生素B2分別是芹菜、大白菜和波菜的0.9、9倍和5.14倍；維生素D分別是芹菜和大白菜的48和51倍；β-胡蘿卜素雖小于菠菜，但遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于芹菜和大白菜，分別是芹菜和大白菜的6.3和159倍。據(jù)分析，在各類灰菜的干物質(zhì)中，平均每千克含消化能9.19 MJ、代謝能8.40 MJ、可消化蛋白160g；含粗蛋白22.4%，鈣1.86%，磷0.38%，粗纖維15.8%[2]。生物資源的合理開(kāi)發(fā)利用及降低環(huán)境污染是低碳減排的重要內(nèi)容之一。就地采收利用各種野生雜草作飼料，既可擴(kuò)大飼料資源，節(jié)省更多的糧食，又能提高養(yǎng)殖效益，促進(jìn)畜牧業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展，也可降低農(nóng)藥的使用量，減少環(huán)境污染。本試驗(yàn)采用直接加熱法、酸提法、酸化加熱法、絮凝劑加熱法4種方法從藜枝條提取葉蛋白，并對(duì)提取率進(jìn)行比較，對(duì)藜的利用方式進(jìn)行了一些探討，以期能夠?qū)σ恍┺r(nóng)田雜草的合理利用尋找出可行的途徑。

1 試驗(yàn)方法及設(shè)計(jì)

1.1 試驗(yàn)材料

2010年10月4日在西北民族大學(xué)榆中校區(qū)（E104°09.93′，N 35°51.18′，蘭州市榆中縣夏官營(yíng)鎮(zhèn)）收獲的藜地上部分，植株高15～80㎝不等。按試驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行樣品處理。

1.2 葉蛋白提取程序和試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 提取程序如下[3]

材料→剪短→打漿→去渣→絮凝→過(guò)濾→干燥稱重→計(jì)算提取率

1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.2.1 直接加熱法 70 ℃水浴加熱至出現(xiàn)沉淀，取出靜置30 min，過(guò)濾，沉淀干燥稱重，計(jì)算提取率。重復(fù)3次。

1.2.2.2 酸提法 用1 mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)汁液pH為4.0，靜置30 min，出現(xiàn)沉淀，過(guò)濾，干燥稱重，重復(fù)3次。

1.2.2.3 酸化加熱法 逐滴滴入1 mol/L 鹽酸溶液，混勻，調(diào)節(jié)汁液pH為4.0，放入70 ℃水浴加熱至有沉淀出現(xiàn)，取出靜置30 min，過(guò)濾，干燥稱重，重復(fù)3次。

1.2.2.4 絮凝劑加熱法

按100 ml原液，加入0.1g聚乙二醇，混勻，70 ℃水浴加熱至出現(xiàn)沉淀。取出靜置30 min，過(guò)濾，干燥稱重，重復(fù)3次。

1.3 結(jié)果計(jì)算及統(tǒng)計(jì)分析

3次重復(fù)取均值，作為結(jié)果。提取率按以下公式計(jì)算[4]：

數(shù)據(jù)處理用SRS法統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

不同方法藜葉蛋白提取率見(jiàn)表1。由表1可以看出，不同提取方法蛋白提取率不同，直接加熱法21.727%，酸提法22.664%，酸化加熱法23.711%，絮凝劑加熱法19.203%，并進(jìn)行比較，提取率的高低為：酸化加熱法＞酸提法＞直接加熱法＞絮凝劑加熱法。對(duì)表1數(shù)據(jù)進(jìn)行處理并進(jìn)行方差分析，檢驗(yàn)處理間差異的顯著性。結(jié)果見(jiàn)表2。從表2可以看出，酸化加熱法與絮凝劑加熱法之間有顯著性差異（P＜0.05），與其他方法之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

表1 不同方法葉蛋白提取率

表2 多重比較

3 討論

藜是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高的植物性蛋白質(zhì)飼料，但長(zhǎng)期被作為有害生物為人們所厭惡。蛋白質(zhì)資源緊缺已成為世界性的問(wèn)題，由于我國(guó)人口多，資源有限，蛋白質(zhì)缺乏尤為嚴(yán)重，每年都要進(jìn)口大量的魚粉和豆粕等蛋白質(zhì)飼料原料。有關(guān)對(duì)藜資源利用，科技人員作了相關(guān)研究。孫存華等（2005）對(duì)藜作為新型蔬菜資源進(jìn)行了評(píng)價(jià)，認(rèn)為具有較好的利用前景，對(duì)于葉蛋白提取用作飼料蛋白則無(wú)相關(guān)報(bào)導(dǎo)。本研究結(jié)果表明，不同凝聚方法對(duì)藜葉蛋白提取率影響較大，提取率大小順序?yàn)樗峄訜岱ǎ舅崽岱ǎ局苯蛹訜岱ǎ拘跄齽┘訜岱ǎY(jié)果與草坪草屑葉蛋白提取率加酸加熱法較高結(jié)果一致[5]，絮凝劑法提取草坪草屑葉蛋白研究[6]結(jié)果不同，有關(guān)這一問(wèn)題有待進(jìn)一步探討研究。葉蛋白的凝聚是整個(gè)葉蛋白生產(chǎn)工藝中關(guān)鍵的一環(huán)，對(duì)不同植物葉蛋白質(zhì)的凝聚條件不同，即使是同種植物，在不同的生育期，其葉蛋白質(zhì)的凝聚條件也有差異。因此，必須根據(jù)不同植物在不同生育期的葉蛋白質(zhì)的特性通過(guò)試驗(yàn)來(lái)確定最佳的凝聚條件。

[1] 惠文森.藜水分與光合特性研究[J]. 西北民族大學(xué)學(xué)報(bào)自然科學(xué)版，2011，32（1）：34～38

[2] 孫存華，李揚(yáng)，賀鴻雁，等.黎的營(yíng)養(yǎng)成分及作為新型蔬菜資源的評(píng)價(jià)[J]. 廣西植物，2005，（6）：598～601

[3] 惠文森，王康英，周軍.收獲后存放時(shí)間對(duì)三葉草葉蛋白提取率的影響[J].西北民族大學(xué)學(xué)報(bào)自然科學(xué)版，2009，30（4）：37～38,83

[4] 鄒文輝，惠文森，王康英. 草坪草屑葉蛋白質(zhì)提取方法比較試驗(yàn)[J].2009，（2）：20～22

[5] 惠文森，穆曉峰，王康英.草坪草屑葉蛋白質(zhì)提取方法研究[J].草業(yè)科學(xué)，2009，26（3）：108～110

[6] 惠文森，王康英.絮凝劑法提取草坪草屑葉蛋白研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（32）：13926，13986