細(xì)胞因子與乙型肝炎肝硬化肝功能分級的相關(guān)性

賴祥紅

杭州市腫瘤醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科 (浙江杭州，310002)

近年來，大量的研究表明，肝硬化患者血清中多種細(xì)胞因子的含量升高，這些細(xì)胞因子升高與肝硬化病情嚴(yán)重程度有關(guān)［1］。我們選擇 3 種細(xì)胞因子 (TGF-β1、PDGF、IFN-γ)進(jìn)行檢測，比較其與肝功能Child-Pugh分級的關(guān)系，從而闡明3種細(xì)胞因子的變化規(guī)律，尋求能夠準(zhǔn)確反應(yīng)肝功能損害程度的新指標(biāo)。

1 資料與方法

1.1 對象 選擇28例本院2010年9月-2011年2月臨床確診的乙型肝炎肝硬化住院患者，男20例，女8例，年齡33～79歲，平均 (42.53±10.67)歲。診斷標(biāo)準(zhǔn):參照2000年全國傳染病與寄生蟲病學(xué)術(shù)會議所修訂的《病毒性肝炎防治方案》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］。乙型肝炎肝硬化的分級采用 Child-Pugh分級標(biāo)準(zhǔn)，A級9例，B級10例，C級9例。排除標(biāo)準(zhǔn):①血清HCV、HDV、HAV、HEV、HIV陽性;②其他類型慢性肝病 (含肝癌、脂肪肝、自身免疫性肝炎、肝豆?fàn)詈俗冃?、淤膽型肝炎?;③酗酒和吸毒史;④有明顯心、腦、腎、神經(jīng)、精神病和不穩(wěn)定糖尿病患者;⑤妊娠和哺乳期;⑥近3個(gè)月應(yīng)用糖皮質(zhì)激素等影響免疫功能藥物者。正常對照組29例為肝、腎、心、肺功能正常，無其他疾病及感染的健康體檢者。其中男26例，女3例，年齡20～35歲，平均 (27.00±4.74)歲。

1.2 方法 清晨空腹抽取兩組人員肘靜脈血5～10m1，不加抗凝劑，2000rpm離心10分鐘，離心后收取血清，標(biāo)號后凍存于-20℃低溫冰箱備檢。避免使用溶血標(biāo)本、脂質(zhì)標(biāo)本或微生物污染的血清。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)，試劑盒由美國ADL公司生產(chǎn)，購自上海朗頓生物科技有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果以表示，各組間數(shù)據(jù)以及兩個(gè)獨(dú)立樣本之間的比較均先采用F檢驗(yàn)判斷總體方差是否齊同，再運(yùn)用方差分析，組間兩兩比較采用q檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 肝硬化患者與正常者血清TGF-β1、PDGF和IFN-γ檢測情況 見表1。

表1 兩組人員血清TGF-β1、PDGF和IFN-γ水平比較)

表1 兩組人員血清TGF-β1、PDGF和IFN-γ水平比較)

與正常組比較，*P＜0.05

2.2 Child-Pugh A、B、C級患者與正常者血清3指標(biāo)結(jié)果見表2。

表2 Child-Pugh A、B、C級患者與正常者血清3指標(biāo)水平比較 ()

表2 Child-Pugh A、B、C級患者與正常者血清3指標(biāo)水平比較 ()

與正常組比較，*P＜0.05;與Child A級比較，#P＜0.05

3 討論

TGF-β1具有抑制肝細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡，激活HSC(肝星狀細(xì)胞)、促進(jìn)其產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì) (ECM)并抑制ECM降解的作用［3］。TGF-β1能通過抑制肝細(xì)胞DNA的合成而誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡［4］，并能通過抑制間質(zhì)細(xì)胞分泌肝細(xì)胞生長因子 (hepatocyte growth factor，HGF)以及抑制HGF對肝細(xì)胞有絲分裂的促進(jìn)作用［5］，間接抑制肝細(xì)胞分裂和增殖。TGF-β1促進(jìn)ECM的合成與沉積作用主要是通過促進(jìn)肝臟間質(zhì)細(xì)胞的激活、增殖作用和增加間質(zhì)細(xì)胞對ECM成分的合成實(shí)現(xiàn)的。本研究顯示，乙型肝炎肝硬化Child-Pugh分級患者血清TGF-β1水平均明顯高于正常對照組 (P＜0.05)，并且Child B級和Child C級患者TGF-β1水平明顯高于Child A級(P＜0.05)，說明肝硬化患者血清TGF-β1水平一定程度上反應(yīng)肝功能損害程度和疾病狀況，與病情呈正相關(guān)，其原因可能是正常肝臟TGF-β1轉(zhuǎn)錄僅見于門靜脈周圍細(xì)胞、導(dǎo)管周圍細(xì)胞、肝小葉中央靜脈周圍細(xì)胞與肝包膜間質(zhì)細(xì)胞，而在肝硬化肝損傷加重時(shí)HSC、枯否細(xì)胞等非實(shí)質(zhì)細(xì)胞增加從而導(dǎo)致TGF-β mRNA轉(zhuǎn)錄明顯增加所致。

PDGF主要由肝內(nèi)枯否細(xì)胞和HSC產(chǎn)生，是強(qiáng)烈的有絲分裂原，對HSC的活化和分裂、增殖有明顯的促進(jìn)作用。已證實(shí)靜止期的HSC無PDGF的受體表達(dá)，只有活化的才表達(dá)PDGF受體，PDGF可使HSC合成DNA增加18倍，是很有效的有絲分裂原［6］。乙型肝炎肝硬化Child-Pugh分級患者血清PDGF水平均明顯高于正常對照組 (P＜0.05)，并且Child B級和Child C級患者PDGF水平明顯高于Child A級 (P＜0.05)。說明血清PDGF水平與肝硬化的形成及病情發(fā)展程度有密切關(guān)系。原因可能是PDGF是一種重要的促有絲分裂因子，具有刺激特定細(xì)胞群分裂增殖的能力，體內(nèi)單核、巨噬細(xì)胞是主要合成PDGF的細(xì)胞，在肝受損時(shí)，巨噬細(xì)胞、血小板、浸潤的炎細(xì)胞、受損的內(nèi)皮細(xì)胞及激活的HSC均可分泌PDGF。而大量分泌的PDGF刺激間質(zhì)星狀細(xì)胞增殖，轉(zhuǎn)化為肌纖維樣母細(xì)胞，并促使星狀細(xì)胞遷移，聚集于炎癥受損區(qū)，而肌纖維樣母細(xì)胞合成大量ECM沉積于肝細(xì)胞間質(zhì)，促進(jìn)肝纖維化發(fā)生。因此，PDGF能夠強(qiáng)烈刺激HSC的增殖、遷移，促使膠原的產(chǎn)生和沉積，在肝硬化發(fā)生發(fā)展中起著非常重要的作用。

IFN-γ是目前研究最廣泛的抗纖維化細(xì)胞因子，它參與了多種肝損傷的病理生理過程，可以抑制HSC的增殖和活化，抑制ECM中蛋白的合成，具有促進(jìn)前列腺素E2的釋放以抑制膠原的合成［7］。表明IFN-γ在抑制肝纖維化形成方面具有重要作用。近年來大量的體內(nèi)、體外及人體實(shí)驗(yàn)均表明IFN-γ對HSC的增殖、膠原合成有抑制作用，與肝纖維化程度呈負(fù)相關(guān)［8］，并且對TGF-β1促進(jìn)ECM成分的合成有抑制作用［9］。在CHB發(fā)展到肝硬化的過程中，隨著HBV DNA的始終存在，抗炎性的Th2型細(xì)胞因子含量隨之增加，則使得IFN-γ的含量逐漸降低;另外由于HBV DNA入侵外周血單個(gè)核細(xì)胞，使得后者分泌IFN-γ的含量逐漸減少，以及由于其他細(xì)胞因子的相互作用，最終使得IFN-γ的水平逐漸降低，抗肝纖維化的能力逐漸減弱，肝硬化的程度逐漸加重，進(jìn)一步使得IFN-γ的含量降低。

總之，本研究結(jié)果顯示隨著肝硬化病程延長，病情加重，患者血清TGF-β1和PDGF水平隨之升高，而IFN-γ水平隨之降低。說明它們在乙型肝炎肝硬化的發(fā)生發(fā)展過程中有著重要意義，并反應(yīng)肝硬化患者肝功能損害程度，有利于臨床上對肝硬化患者病情和預(yù)后的判斷。

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