頂空氣相色譜法測(cè)定吡羅昔康原料藥有機(jī)溶劑殘留量

李 育，趙靖霞，楊根金，董 昕，李 玲，蘇 笠,張 薇

(第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院分析測(cè)試中心，上海 200433)

頂空氣相色譜法測(cè)定吡羅昔康原料藥有機(jī)溶劑殘留量

李 育，趙靖霞，楊根金，董 昕，李 玲，蘇 笠,張 薇

(第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院分析測(cè)試中心，上海 200433)

目的建立吡羅昔康原料藥中有機(jī)溶劑殘留量的氣相色譜測(cè)定法。方法采用頂空氣相色譜，使用HP-INNOWAX毛細(xì)管色譜柱(30 m×0．32 mm×0．25 μm)；以高純氮?dú)鉃檩d氣，F(xiàn)ID為檢測(cè)器，測(cè)定吡羅昔康原料藥中甲醇、乙醇、甲苯及二甲苯4種有機(jī)溶劑的殘留量。結(jié)果4種有機(jī)溶劑均達(dá)到了完全分離，在所考察范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。結(jié)論該方法靈敏度、準(zhǔn)確度均達(dá)到有機(jī)溶劑殘留量的檢測(cè)要求，適用于吡羅昔康原料藥中有機(jī)溶劑殘留的檢測(cè)。

頂空氣相色譜；吡羅昔康；有機(jī)溶劑殘留

吡羅昔康(piroxicam)，又名炎痛喜康，是一種非甾體類抗炎藥物，具有明顯的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎作用，為《中國(guó)藥典》1995年版[1]新增品種，用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和急性肌肉骨骼疾患，包括腱鞘炎、肩周炎、扭傷各種勞損和腰痛[2,3]。由于該藥在合成過(guò)程中使用了甲醇、乙醇、甲苯和二甲苯等有機(jī)溶劑，其溶劑殘留量的檢測(cè)方法未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。為控制產(chǎn)品質(zhì)量，本文采用頂空氣相色譜法同時(shí)測(cè)定上述4種有機(jī)溶劑的殘留量。研究結(jié)果表明方法簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確，是控制該藥中有機(jī)溶劑殘留的可靠方法。

1 儀器與試藥

Thermo Trace GC Ultra型氣相色譜儀，配置有FID檢測(cè)器、Triplus頂空進(jìn)樣裝置和Xcalibur色譜處理軟件。甲醇、無(wú)水乙醇、甲苯、二甲苯均為分析純，DMA(N,N-二甲基甲酰胺)為Sigma-Aldrich公司色譜純，原料藥吡羅昔康由本研究組自制。

2 色譜條件及頂空條件

色譜柱為HP-INNOWAX毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.32 mm× 0.25 μm)，進(jìn)樣口溫度250 ℃，檢測(cè)器(FID)溫度250 ℃。柱溫為程序升溫， 40 ℃保持2 min，以2 ℃/min升至70 ℃，再以60 ℃/min升至180 ℃保持3 min。載氣為N2；流速為2 ml/min，分流比10:1。頂空瓶平衡溫度90 ℃，平衡時(shí)間30 min，進(jìn)樣量2 ml。

3 溶液的配制

3.1對(duì)照品溶液 精密量取甲醇0.35 ml、乙醇0.6 ml、甲苯0.1 ml、二甲苯0.25 ml，置于100 ml容量瓶中混合，加DMA稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密移取上述儲(chǔ)備溶液1 ml置于10 ml容量瓶中，用DMA稀釋至刻度，搖勻制成對(duì)照品溶液。

3.2供試品溶液 取吡羅昔康原料藥約1 g，精密稱定，置于10 ml容量瓶中，加DMA稀釋至刻度，搖勻即得供試品溶液。

4 方法與結(jié)果

4.1線性關(guān)系考察 分別精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 ml，分別置于10 ml容量瓶中，加DMA稀釋至刻度，搖勻，配制成不同濃度系列混合對(duì)照品溶液。各取5.0 ml置頂空瓶中，自動(dòng)進(jìn)樣，以各溶液的濃度X (μg/ml)為橫坐標(biāo)，測(cè)定的峰面積Y為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 4種溶劑回歸方程與線性范圍試驗(yàn)結(jié)果

4.2精密度試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液按上述頂空氣相色譜條件，連續(xù)重復(fù)取樣6次，甲醇, 乙醇,甲苯和二甲苯溶劑峰面積的RSD(n=6)分別為4.32%, 5.41%, 4.94%, 5.56%。

4.3方法專屬性試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液按上述頂空氣相色譜條件測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)圖1。在色譜圖中，甲醇、乙醇、甲苯、二甲苯分離度良好，DMA溶劑中的雜質(zhì)不干擾其它殘留溶劑的測(cè)定。

圖1對(duì)照品溶液色譜圖

1-甲醇，2-乙醇，3-甲苯，4、5、6、7-二甲苯(為鄰二甲苯、間二甲苯、對(duì)二甲苯和乙苯的混合物)，8- DMA

4.4最低檢測(cè)限試驗(yàn) 取對(duì)照品溶液不同比例稀釋后按上述頂空氣相色譜條件測(cè)定，依據(jù)信噪比3:1測(cè)得甲醇、乙醇、甲苯、二甲苯最低檢測(cè)限分別為：2.77，4.73，0.87，2.15 μg/ml。

4.5回收率試驗(yàn) 精密稱取吡羅昔康原料藥0．5 g，共3份，分別精密加入對(duì)照品儲(chǔ)備液1 ml，置10 ml量瓶中，加DMA溶解并稀釋至刻度，搖勻，按上述頂空氣相色譜條件測(cè)定，計(jì)算得甲醇, 乙醇, 甲苯, 二甲苯的回收率(n=3)分別100.7%,101.3%, 96.3%, 93.6%,RSD分別為0.43%, 1.31%, 0.99%, 0.17%。

4.6樣品測(cè)定 分別取批號(hào)為011225、020108、020124的供試品溶液, 按上述頂空氣相色譜條件測(cè)定(圖2)。結(jié)果顯示，3批樣品中均未檢出殘留溶劑。表明3批原料藥有機(jī)溶劑殘留量均符合中國(guó)藥典的規(guī)定。

圖2吡羅昔康原料藥色譜圖

5 討論

考察了DMF(N,N -二甲基甲酰胺)和DMA作2種基質(zhì)溶劑， DMF與二甲苯色譜峰有干擾， 而DMA和4種殘留溶劑分離度能達(dá)到要求，并且在響應(yīng)的位置上沒(méi)有雜質(zhì)峰干擾，故選擇DMA作為溶劑。通過(guò)實(shí)驗(yàn)選擇了對(duì)色譜峰的穩(wěn)定性，分離度，響應(yīng)值最佳的頂空平衡溫度90 ℃及平衡時(shí)間30 min。

二甲苯為一混合溶劑，為鄰二甲苯、間二甲苯、對(duì)二甲苯和乙苯的混合物，在色譜圖中顯示4個(gè)色譜峰，與藥典描述相一致。

頂空氣相色譜法具有操作簡(jiǎn)便，污染少，重現(xiàn)性良好[4]等優(yōu)點(diǎn)。筆者采用頂空氣相色譜法測(cè)定了4種殘留溶劑，科學(xué)驗(yàn)證了本法本儀器在準(zhǔn)確度，精密度，線性及范圍，專屬性，最低檢測(cè)限上均能達(dá)到藥典規(guī)定的要求。甲醇、乙醇、甲苯以及二甲苯等4種有機(jī)溶劑均為生產(chǎn)過(guò)程中引入的對(duì)人體有害的有機(jī)溶劑，本法的建立進(jìn)一步地為吡羅昔康的質(zhì)量控制和安全使用提供了科學(xué)依據(jù)，具有十分重要的意義。

[1] 《中國(guó)藥典》2005年版.二部[S]. 2005: 247.

[2] 曹 玲，唐樹(shù)榮，萬(wàn) 嶸. HPLC法測(cè)定吡羅昔康注射液的含量[J]. 藥物分析雜志，2001, 21(1): 47.

[3] 郭 萌，高愛(ài)軍. 吡羅昔康片中吡羅昔康的含量測(cè)定及含量均勻度檢查[J].中華實(shí)用中西醫(yī)雜志, 2007, 20(10): 919.

[4] 李英華,呂秀陽(yáng),呂麗麗,等. 頂空氣相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用[J]. 藥物分析雜志, 2005, 25(11): 1404.

2009-09-18

[修回日期] 2009-11-26

Determinationofresidualbyheadspacegaschromatographyorganicsolventsinpiroxicam

LI Yu, ZHAO Jing-xia, YANG Gen-jin，DONG Xin, LI Ling, SU Li，ZHANG Wei

(Center of Pharmaceutical Analysis, College of Pharmacy, Second Military Medical University, Shanghai 200433，China)

ObjectiveTo establish a headspace capillary gas chromatgraphy for determination the residual organic solvents in piroxicam.MethodsThe residual solvents in piroxicam which are methanol , ethanol, toluene and dimethybenzene were determined by headspace GC on HP-INNOWax column(30 m×0．32 mm×0．25 μm)，with FID detector，high purity nitrogen as the carry gas.ResultsFour residual organic solvents consisting of methanol, ethanol, toluene and dimethybenzene in piroxicam were completely separated and the samples coincided with the requirements.ConclusionThe method is sensitive and accurate. It is suitable to the determination of residual organic solvents in piroxicam.

headspace gas chromatgraphy；piroxicam；residual organic solvents

李 育(1984-)，女，學(xué)士.Tel：(021)81871337.

張 薇.Tel：(021)81871336，E-mail：smmuzhangwei@gmail.com.

R917

A

1006-0111(2011)01-0031-02