連參通淋片中三種成分的蒲層色譜鑒別△

鄭國(guó)成，陳浩達(dá)，李菲，張綱，2

（1.神威藥業(yè)有限公司，河北 石家莊 051430；2.河北省中藥注射劑工程技術(shù)研究中心，河北 石家莊 051430）

連參通淋片中三種成分的蒲層色譜鑒別△

鄭國(guó)成1*，陳浩達(dá)1，李菲1，張綱1，2

（1.神威藥業(yè)有限公司，河北 石家莊 051430；2.河北省中藥注射劑工程技術(shù)研究中心，河北 石家莊 051430）

目的：研究連參通淋片中鹽酸小檗堿、原兒茶醛和大黃素的鑒別方法。方法：采用薄層色譜鑒別方法。結(jié)果：鑒別方法重現(xiàn)性好、專屬性強(qiáng)。結(jié)論：方法簡(jiǎn)單可靠，可用于連參通淋片中鹽酸小檗堿、原兒茶醛和大黃素的鑒別。

連參通淋片；鹽酸小檗堿；原兒茶醛；大黃素；薄層色譜

連參通淋片由黃連、苦參、梔子、大黃、丹參等10余味中藥組成，具有清熱解毒，燥濕殺蟲，利尿通淋，健脾化濁的功能，用于臨床診斷為非淋菌性尿道炎，辯證屬濕熱下注者，臨床表現(xiàn)為尿頻、尿急、尿痛，排尿困難，尿道刺癢，尿道口有分泌物。方中黃連清熱解毒、燥濕殺蟲，大黃泄熱降火而通淋，丹參清腐化瘀而通淋。本文對(duì)黃連中鹽酸小檗堿、丹參中原兒茶醛和大黃中大黃素進(jìn)行了鑒別研究，方法操作簡(jiǎn)便，重復(fù)性好，空白無干擾。

1 儀器與試藥

G型薄層層析硅膠板、GF254型薄層層析硅膠板（青島海洋化工廠），ZF-2型三用紫外儀 （上海市安亭電子儀器廠）。

連參通淋片 （神威藥業(yè)有限公司，批號(hào)1004001，1004002，1004003），鹽酸小檗堿、原兒茶醛、大黃素對(duì)照品 （中國(guó)藥品生物制品檢定所），所用化學(xué)試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 鹽酸小檗堿的鑒別

2.1.1 溶液制備 取連參通淋片1片，研細(xì)，加乙醇30 mL，超聲處理5 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?.5 mL使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品，加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。取缺黃連的陰性樣品0.8 g，同供試品溶液制法得缺黃連的陰性對(duì)照溶液。

2.1.2 鑒別試驗(yàn) 照薄層色譜法試驗(yàn)[1]，吸取上述3種溶液各1μL，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以苯 －醋酸乙酯 －甲醇-異丙醇 －水（3.5∶3∶1.5∶1.5∶0.4）為展開劑，置氨蒸氣飽和的層析缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無干擾，結(jié)果見圖1。

圖1 鹽酸小檗堿薄層鑒別圖

2.2 原兒茶醛的鑒別

2.2.1 溶液制備 取連參通淋片5片，研細(xì)，加乙醇30 mL，研磨提取5 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0 mL使溶解，加水飽和的正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)右掖? mL使溶解，作為供試品溶液。取原兒茶醛對(duì)照品，加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。取缺丹參的陰性樣品4 g，同供試品溶液制法得缺丹參的陰性對(duì)照溶液。

2.2.2 鑒別試驗(yàn) 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液4μL、對(duì)照品溶液2μL、陰性對(duì)照溶液4μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－丙酮－甲酸（8∶1∶1）為展開劑[2]，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵稀乙醇溶液－2%鐵氰化鉀稀乙醇溶液（1∶1），靜置至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無干擾，結(jié)果見圖2。

圖2 原兒茶醛薄層鑒別圖

2.3 大黃素的鑒別

2.3.1 溶液制備 取連參通淋片5片，研細(xì)，加三氯甲烷20 mL、鹽酸1 mL，加熱回流提取45 min，濾過，收集續(xù)濾液5 mL，蒸干，加乙醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取大黃素對(duì)照品，加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。取缺大黃的陰性樣品4 g，同供試品溶液制法得缺大黃的陰性對(duì)照溶液。

2.3.2 鑒別試驗(yàn) 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μL、對(duì)照品溶液2μL、陰性對(duì)照溶液5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯－醋酸乙酯（10∶3）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%氫氧化鉀乙醇溶液。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無干擾，結(jié)果見圖3。

圖3 大黃素薄層鑒別圖

3 討論

鹽酸小檗堿鑒別試驗(yàn)中，供試品溶液的制備最初選用甲醇提取，點(diǎn)樣量為5μL時(shí)鹽酸小檗堿斑點(diǎn)才清晰可見，經(jīng)探索改提取溶劑為乙醇后[3-5]，點(diǎn)樣量為1 μL時(shí)鹽酸小檗堿斑點(diǎn)即清晰可見，表明乙醇對(duì)鹽酸小檗堿的提取率比甲醇高，故采用乙醇提取。曾采用苯－醋酸乙酯 －甲醇 －異丙醇 －水（6∶3∶1.5∶1.5∶0.3）為展開劑[3]，展開后主斑點(diǎn) Rf值較小，只有0.2左右，故調(diào)整了展開劑配比。

原兒茶醛的鑒別試驗(yàn)中，曾采用70%乙醇超聲提取30 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀谷芙?，用稀鹽酸調(diào)pH值為2，用醋酸乙酯萃取2次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液[6-7]，此種提取方法實(shí)驗(yàn)效果不理想，斑點(diǎn)都不很清晰。因?yàn)樵瓋翰枞┤苡诶湟掖?，故使用乙醇提取的方法，?duì)比了乙醇回流提取、乙醇超聲提取和乙醇研磨提取，經(jīng)試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)乙醇回流和超聲提取出來的雜質(zhì)較多，雜質(zhì)斑點(diǎn)對(duì)原兒茶醛斑點(diǎn)有干擾，研磨提取則提取的雜質(zhì)較少，對(duì)原兒茶醛斑點(diǎn)無干擾，薄層色譜斑點(diǎn)清晰。

大黃素的鑒別試驗(yàn)中，曾采用甲醇回流提取1 h，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?%氫氧化鈉溶液使溶解，濾過，濾液加鹽酸調(diào)至pH 2～3，置水浴回流加熱30 min，冷卻，用三氯甲烷萃取2次，合并三氯甲烷液，蒸干，殘?jiān)哟姿嵋阴? mL使溶解，作為供試品溶液，此方法鑒別效果明顯，但處理過程復(fù)雜，處理時(shí)間較長(zhǎng)，采用上文方法可以節(jié)省一半以上的供試品處理時(shí)間，大大提高了效率，故最后采用上文的方法[8-10]。

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Identification of Berberine hydrochloride，Protocatechuic aldehyde and Emodin in the Lianshentonglin Tablets by TLC

ZHENG Guo-cheng1，CHEN Hao-da1，LIFei1，ZHANG Gang1，2
（1.Shineway Pharmaceutical Co ltd，Shijiazhuang051430，China；2.Hebei Province Engineering Research Center for Traditional Chinese drug Injections，Shijiazhuang051430，China）

Objective：To study the identification of berberine hydrochloride，protocatechuic aldehyde and emodin in Lianshentonglin tablets.Methods：The thin-layer chromatography was used.Results：The identification method is repeatable and has a strong specificity.Conclusion：The method we founded can be used for the identification of berberine hydrochloride、protocatechuic aldehyde and emodin in Lianshentonglin rablets.

Lianshentonglin Tablets；Berberine hydrochloride；Protocatechuic aldehyde；Emodin；TLC

石家莊科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃課題（03120023A）

*鄭國(guó)成，E-mail：lifei08170923＠126.com

2011-06-13）