復(fù)方歸芍婦康膠囊的制備與質(zhì)量控制

張霞，江延輝

（哈爾濱星火藥物研究院，黑龍江 哈爾濱 150060）

復(fù)方歸芍婦康膠囊的制備與質(zhì)量控制

張霞*，江延輝

（哈爾濱星火藥物研究院，黑龍江 哈爾濱 150060）

目的：制備復(fù)方歸芍婦康膠囊，建立其質(zhì)量控制方法。方法：采用薄層色譜法對(duì)當(dāng)歸和益母草進(jìn)行定性鑒別，采用HPLC對(duì)復(fù)方歸芍婦康膠囊中的芍藥苷進(jìn)行含量測(cè)定。結(jié)果：芍藥苷在0.303～1.515μg與峰面積呈良好的線(xiàn)性關(guān)系（r＝0.999 8）；平均回收率為99.66%，RSD＝0.27%（n＝6）。結(jié)論：該制劑制備工藝穩(wěn)定，含量測(cè)定方法準(zhǔn)確可靠，重現(xiàn)性好，可用于復(fù)方歸芍婦康膠囊的質(zhì)量控制。

復(fù)方歸芍婦康膠囊；制備；芍藥苷；HPLC

復(fù)方歸芍婦康膠囊由當(dāng)歸、白芍、益母草、熟地黃、白術(shù)、甘草等中藥組成，具有活血化瘀、通經(jīng)止痛之功效，用于月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)期疼痛等癥。為了更好地控制其內(nèi)在質(zhì)量，對(duì)處方中的當(dāng)歸、益母草進(jìn)行了定性鑒別分析，采用高效液相色譜法測(cè)定君藥白芍中芍藥苷的含量。

1 儀器及試藥

1.1 儀器

TN-200多功能中藥提取濃縮機(jī)組；日本島津LC-10AT液相色譜儀；SPD-10AVP紫外檢測(cè)器；硅膠G薄層板（自制）。

1.2 試藥

芍藥苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110736-200912）；當(dāng)歸對(duì)照藥材（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：120927-201014）；鹽酸水蘇堿對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110712-201010），乙腈為色譜純；正己烷、醋酸乙酯、正丁醇、鹽酸、乙醇等試劑均為分析純。

2 處方與制備

2.1 處方組成

當(dāng)歸、白芍、益母草、熟地黃、白術(shù)、甘草6味中藥。

2.2 制備

取當(dāng)歸、白芍、益母草、熟地黃、白術(shù)、甘草6味中藥加水煎煮3次，每次2 h，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至清膏，60℃干燥，粉碎，加淀粉、羧甲淀粉鈉適量，混勻，以50%乙醇為黏合劑制軟材，搖擺制粒機(jī)制粒，干燥，整粒，灌入硬膠囊，即得。批號(hào)：20101201，20101202，20101203。

3 質(zhì)量控制

3.1 性狀

本品為硬膠囊，內(nèi)容物為棕黃色顆?；蚍勰?，微苦。

3.2 鑒別

3.2.1 當(dāng)歸的薄層鑒別[1]取本品內(nèi)容物3 g，研細(xì)，加乙醚30 mL，加熱回流40 min，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)哟姿嵋阴? mL使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對(duì)照藥材0.2 g，加乙醚10 mL，同法制成對(duì)照藥材溶液。再按處方量及制備工藝要求制成不含當(dāng)歸的陰性對(duì)照樣品，同法制成陰性對(duì)照溶液。吸取上述3種溶液各2μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-醋酸乙酯（9∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，見(jiàn)圖1。

圖1 當(dāng)歸薄層色譜圖

3.2.2 益母草的薄層鑒別[2]取本品內(nèi)容物5 g，加乙醇50mL，超聲15min，濾過(guò)，濾液置水浴上濃縮至約5 mL，加無(wú)水乙醇50 mL，攪拌，濾過(guò)，濾液置水浴上濃縮至約1mL，作為供試品溶液。另取鹽酸水蘇堿對(duì)照品加無(wú)水乙醇制成含lmg·mL－1的溶液，作為對(duì)照品溶液。按處方量及制備工藝要求制成不含益母草的陰性對(duì)照樣品，同法制成陰性對(duì)照溶液。吸取上述3種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-鹽酸-醋酸乙酯（8∶3∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，結(jié)果供試品色譜中在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上顯相同的橙紅色斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)干擾，見(jiàn)圖2。

圖2 益母草薄層色譜圖

3.3 含量測(cè)定

3.3.1 色譜條件[3]色譜柱：Inertsil ODS-3不銹鋼色譜柱（4.6 mm×250 mm，5μm），流動(dòng)相：磷酸0.1%溶液-乙腈（82∶18），流速：1.0 mL·min－1，柱溫：30℃，測(cè)定波長(zhǎng)：230 nm，理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3 000。

3.3.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)定芍藥苷對(duì)照品15.15 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每lmL含0.303 mg芍藥苷）。

3.3.3 供試品溶液的制備 取本品10粒，研細(xì)，取約1.0 g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇20 mL，密塞，稱(chēng)定重量，超聲處理30 min，放冷，再稱(chēng)定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

3.3.4 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 按處方比例和制法，制成不含白芍的樣品，并按供試品溶液的制備法制成空白對(duì)照溶液。依法進(jìn)樣測(cè)定，結(jié)果空白對(duì)照溶液在芍藥苷保留時(shí)間處無(wú)吸收峰。表明在此實(shí)驗(yàn)條件下，其他藥材成分對(duì)測(cè)定無(wú)干擾。見(jiàn)圖3。

3.3.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 精密取芍藥苷對(duì)照品溶液，分別吸取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL置10mL量瓶中，分別加甲醇稀釋至刻度，分別吸取10μL進(jìn)樣，測(cè)定芍藥苷峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)進(jìn)行線(xiàn)性回歸，求得回歸方程為Y＝532 654.36X－29 513.24；r＝0.999 8，結(jié)果表明芍藥苷在0.303～1.515μg線(xiàn)性關(guān)系良好。

3.3.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取本品適量，制成供試品溶液，分別于0，2，4，6 h測(cè)定，對(duì)芍藥苷穩(wěn)定性進(jìn)行考察，結(jié)果RSD＝0.37%，表明芍藥苷在6 h內(nèi)基本穩(wěn)定，能夠滿(mǎn)足測(cè)定要求。

3.3.7 重復(fù)性試驗(yàn) 分別取本品各5份，制備供試品溶液，測(cè)定，結(jié)果RSD＝0.41%，表明重現(xiàn)性較好，說(shuō)明測(cè)量方法準(zhǔn)確可靠。

圖3 復(fù)方歸芍婦康膠囊樣品及對(duì)照品HPLC圖

3.3.8 精密度試驗(yàn) 取樣品適量，制備供試品溶液，進(jìn)樣6次，計(jì)算RSD＝0.39%，結(jié)果表明該方法精密度良好。

3.3.9 加樣回收率試驗(yàn) 取已知芍藥苷含量的樣品（批號(hào)：20101201，0.821 mg·g－1），精密稱(chēng)取 6份，分別精密加入芍藥苷對(duì)照品適量，按樣品測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定芍藥苷的量，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 芍藥苷回收率試驗(yàn)

3.3.10 樣品含量測(cè)定 取3批樣品，分別按供試液制備方法制備。注入色譜儀，測(cè)定3批樣品中芍藥苷含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 復(fù)方歸芍婦康膠囊樣品中芍藥苷的含量測(cè)定

4 討論

本文通過(guò)實(shí)驗(yàn)，確定了復(fù)方歸芍婦康膠囊中當(dāng)歸、益母草的薄層色譜鑒別方法，陰性對(duì)照表明其他成分對(duì)本法無(wú)干擾，說(shuō)明該方法專(zhuān)屬性較強(qiáng)，結(jié)果可靠。采用高效液相色譜法測(cè)定樣品中芍藥苷的含量，取得了較好的分離效果，經(jīng)線(xiàn)性考察、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)、方法精密度考察、穩(wěn)定性考察均良好，平均加樣回收率為99.66%，實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)便快速，適用于復(fù)方歸芍婦康膠囊中芍藥苷的含量測(cè)定。

[1]李霽明.TLC法鑒別頸椎活血膠囊中當(dāng)歸、川芎、三七和人工牛黃等成分[J].安徽醫(yī)藥，2007，11（1）：281.

[2]郝立芳.益母草沖劑中益母草的薄層色譜鑒別法[J].海峽藥學(xué)，2004，16（4）：89-90.

[3]雷黎明，王先教，周家茂，等.活絡(luò)健骨膠囊中芍藥苷成分的測(cè)定方法研究[J].湖南環(huán)境生物職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，16（2）：25-28.

Preparation and Quality Control of Compound Guishao Fukang Capsules

ZHANG Xia，JIANG Yan-hui
（HarbinXinghuoPharmaceuticalResearchAcademy，Harbin150060，China）

Objective：To prepare compound Guishao Fukang Capsules and establish its quality controlmethod.Methods：TLCwas used to identifyAngelicasinensisandHerbaleonuri，HPLCwas used to determine the content of paeoniflorin in compound Guishao Fukang Capsules.Results：The linear ranges of paeoniflorin was 0.303～1.515μg（r＝0.999 8），the average recovery was 99.66%，RSD was 0.27%（n＝6）.Conclusion：The preparation was stability，the content determination method was accurate reliable and reproducible and can be used in the quality control of compound Guishao Fukang Capsules.

Compound Guishao Fukang Capsules；Preparation；Paeoniflorin；HPLC

*張霞，（0451）86813688，E-mail：may1016＠126.com

2011-05-03）