IGF-1R基因在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)

熊劍華

(南昌市第一醫(yī)院泌尿外科，南昌 330008)

膀胱移行細(xì)胞癌（BTCC）是泌尿系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤，易發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。目前有關(guān)膀胱移行細(xì)胞癌發(fā)生侵襲及轉(zhuǎn)移的具體機(jī)制仍不十分清楚，制約了臨床醫(yī)生對(duì)其早期診斷、治療和預(yù)后的評(píng)估。本文旨在研究IGF-1R mRNA在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)與意義，從而探討其與膀胱癌的發(fā)生、侵襲及轉(zhuǎn)移的關(guān)系，可望為膀胱癌的分子診斷和判斷預(yù)后提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 組織標(biāo)本

40例膀胱移行細(xì)胞癌標(biāo)本取自2009年7月至2010年7月在南昌市第一醫(yī)院手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)為BTCC的腫瘤標(biāo)本。正常對(duì)照組15例為良性前列腺增生癥合并膀胱結(jié)石（12例）、輸尿管囊腫（2例）、膀胱陰道瘺（1例）患者經(jīng)膀胱手術(shù)時(shí)所取膀胱壁組織，均經(jīng)病理證實(shí)為正常膀胱黏膜組織。標(biāo)本為石蠟包埋處理后的組織切片:標(biāo)本組織用4%多聚甲醛固定，石蠟包埋，實(shí)驗(yàn)時(shí)連續(xù)切取厚5～6 μm的切片。40例膀胱移行細(xì)胞癌患者中男31例，女9例。 年齡 38～76（平均 60.5）歲。 40例膀胱移行細(xì)胞癌患者中行TUR－Bt術(shù)22例，膀胱部分切除術(shù)12例，膀胱全切術(shù)6例。腫瘤臨床分期按TNM標(biāo)準(zhǔn)，Tis－T117例，T2－T423例。腫瘤病理分級(jí)按WHO分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，I級(jí)9例，II級(jí)14例，III級(jí)17例。術(shù)后證實(shí)有淋巴結(jié)或局部轉(zhuǎn)移者9例。

1.2 試劑與方法

IGF－1R mRNA 采用原位雜交檢測(cè)，IGF－1R mRNA原位雜交探針（5'端標(biāo)記地高辛）由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。IGF－1R mRNA探針序列為:5'－TCTTCAAGTGCGGCTCCCT－3'。

1.3 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

判斷標(biāo)準(zhǔn):隨機(jī)選擇5個(gè)高倍鏡視野 （400倍）進(jìn)行判斷，IGF－1R mRNA陽(yáng)性表達(dá)時(shí)細(xì)胞漿著色呈淺黃色－黃褐色為陽(yáng)性表現(xiàn)。最后表達(dá)以染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞率的得分之和進(jìn)行判斷:無(wú)染色記0分，弱染色（淺黃色）記1分，中等染色（棕黃色）記2分，強(qiáng)染色（黃褐色）記3分；陽(yáng)性細(xì)胞率≤10%記0分，10%～45%記 1分，46%～65%記 2分，＞65%記 3分。上述兩項(xiàng)積分相加，0分為陰性（－），1～2分為弱陽(yáng)性（＋），3～4 分為中等陽(yáng)性（?），5～6 分為強(qiáng)陽(yáng)性（?）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

分類變量間比較采用NPar Tests檢驗(yàn)，如某一格期望值＜5，則用Fishers精確概率法，率的比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。所有結(jié)果均在統(tǒng)計(jì)軟件SPSS10.0上運(yùn)行。

2 結(jié)果

2.1 IGF-1R mRNA在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)

對(duì)照組15例正常膀胱黏膜組織中未見(jiàn)IGF－1R mRNA陽(yáng)性表達(dá)，而40例膀胱移行細(xì)胞癌組織中IGF－1R mRNA 陽(yáng)性表達(dá) 31例，陽(yáng)性率 77.5%，與正常組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IGF－1R mRNA陽(yáng)性染色主要位于癌（巢）細(xì)胞胞漿，呈棕黃色，陽(yáng)性細(xì)胞多位于腫瘤邊緣，癌組織的邊緣染色強(qiáng)于中心部位。

2.2 IGF-1R mRNA表達(dá)與膀胱移行細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系

IGF－1R mRNA陽(yáng)性表達(dá)率隨膀胱移行細(xì)胞癌臨床分期和病理分級(jí)的升高而增加（P＜0.05），腫瘤轉(zhuǎn)移者高于未轉(zhuǎn)移者（P＜0.05）,見(jiàn)表 1。

3 討論

膀胱移行細(xì)胞癌是泌尿系統(tǒng)最常見(jiàn)惡性腫瘤，具有易發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移、術(shù)后易復(fù)發(fā)等生物學(xué)特性[1]，約有70%的患者雖經(jīng)系統(tǒng)和正規(guī)治療，但仍然復(fù)發(fā)，約有30%的腫瘤發(fā)生侵襲或（和）遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[2]。而侵襲和轉(zhuǎn)移又是惡性腫瘤威脅患者健康乃至生命的最主要因素。

胰島素樣生長(zhǎng)因子（insulin－like growth factors,IGFs）是一類十分重要的生長(zhǎng)因子，具有促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化等多種生物學(xué)活性，參與多種惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程，如結(jié)直腸癌、腎癌[3]。IGFs系統(tǒng)是一個(gè)龐大的家族，包括IGF－1和IGF－2兩類多肽類生長(zhǎng)因子，以及其相應(yīng)受體 IGF－1R（IGF－1 receptor）、IGF－2R（IGF－2receptor）和至少 6 種胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白（IGF－binding protein,IGFBP）[4]。 研究發(fā)現(xiàn)IGF－1與腫瘤的浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移有關(guān)，IGF－1能促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[5]。

本研究通過(guò)原位雜交技術(shù)在膀胱移行細(xì)胞癌組織中對(duì)IGF－1RmRNA表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)對(duì)照組15例正常膀胱黏膜組織中未見(jiàn)一例IGF－1R mRNA陽(yáng)性表達(dá)，而實(shí)驗(yàn)組中IGF－1R mRNA陽(yáng)性表達(dá)31例（陽(yáng)性率77.5%），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而且IGF－1R mRNA陽(yáng)性表達(dá)率隨BTCC臨床分期和病理分級(jí)的升高而增加（P＜0.05），腫瘤轉(zhuǎn)移者高于未轉(zhuǎn)移者（P＜0.05）。 可見(jiàn) IGF－1R 基因與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展存在著密切的關(guān)系。

表1 IGF-1R mRNA表達(dá)與膀胱移行細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系

［1］Simms M S,Mann Q，Kockelbergh R C,et al.The management of lymph node metastasis from bladder cancer［J］.Eur J Surg Oncol，2005，31（4）:348－356.

［2］Santen R J，F(xiàn)an P,Zhang Z,et al.Estrogen signals via an extra －nuclear pathway involving IGF －1R ［J］.Steroids，2009，74（7）:586－594.

［3］Fagan D H,Yee D J.Crosstalk between IGF－1R and estrogen receptor signaling in breast cancer［J］.Mammary Gland Biol Neoplasia,2008,13(4):423－429.

［4］Freude S,Schilbach K,Schubert M.The role of IGF－1R receptor and insulin receptor signaling for the disease［J］.Curr Alzheimer Res,2009,6(3):213－223.

［5］Baserga R.Customizing the targeting of IGF－1R receptor［J］.Future Oncol，2009，5(1):43－50.